衛(wèi)生理化檢驗(yàn)技術(shù)概述

1、衛(wèi)生理化檢驗(yàn)技術(shù)衛(wèi)生理化檢驗(yàn)技術(shù)衛(wèi)生理化檢驗(yàn)衛(wèi)生理化檢驗(yàn) 是什么？為什么學(xué)？學(xué)些什么？是什么？為什么學(xué)？學(xué)些什么？定義內(nèi)容意義是什么？定義衛(wèi)生檢驗(yàn)衛(wèi)生理化檢驗(yàn)微生物學(xué)檢驗(yàn)定義：運(yùn)用物理、化學(xué)的基礎(chǔ)理論和方法，分析與人類生活質(zhì)量、健康因素密切相關(guān)的物質(zhì)種類和數(shù)量的一門技術(shù)性學(xué)科。為什么學(xué)？意義1 用來檢驗(yàn)其監(jiān)測(cè)對(duì)象是否符合相應(yīng)的衛(wèi)生 標(biāo)準(zhǔn)。2 可初步闡明環(huán)境中各種物理、化學(xué)因素對(duì) 人體的影響程度。3 為制定各類衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和采取衛(wèi)生措施提供 科學(xué)依據(jù)。學(xué)什么？?jī)?nèi)容及其分類衛(wèi)生理化檢驗(yàn)檢驗(yàn)性質(zhì)研究領(lǐng)域檢驗(yàn)對(duì)象監(jiān)督檢驗(yàn)鑒定檢驗(yàn)委托檢驗(yàn)營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生檢驗(yàn)環(huán)境衛(wèi)生檢驗(yàn)勞動(dòng)衛(wèi)生檢驗(yàn)水質(zhì)檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、空氣檢驗(yàn)

2、、土壤與底質(zhì)檢驗(yàn)、化妝品檢驗(yàn)衛(wèi)生理化檢驗(yàn)技術(shù)概述衛(wèi)生理化檢驗(yàn)的一般程序樣品采集樣品前處理樣品分析檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告第一節(jié) 樣品采集部分整體樣品從整體中抽出部分的過程，叫做樣品采集樣品采集部分與整體是有差異的，兩者之間的差異稱之為采樣誤差采樣誤差樣品采集原則樣品采集的基本原則：代表性代表性 整體的性質(zhì)：均勻性或隨機(jī)性 eg：從一個(gè)倉(cāng)庫(kù)中，采集部分糧食進(jìn)行分析，來說明該倉(cāng) 庫(kù)存放的糧食是否符合食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。 整體的某一特征：典型性 eg：檢驗(yàn)車間空氣，目的是了解某作業(yè)某有害物質(zhì)的污 染程度以及對(duì)勞動(dòng)者健康的影響。監(jiān)督監(jiān)測(cè)和鑒定監(jiān)測(cè)，采樣時(shí)，衛(wèi)生監(jiān)督或衛(wèi)生監(jiān)測(cè)人員都要親臨采樣現(xiàn)場(chǎng)，進(jìn)行周密調(diào)查，熟悉背景，

3、制定樣品采集方案。樣品采集一般采集檢驗(yàn)所需數(shù)量的三倍，供復(fù)檢和上級(jí)部門鑒定使用。影響因素：生物因素：新陳代謝。如食品、廢水等化學(xué)因素：化學(xué)組分之間發(fā)生反應(yīng)等。物理因素：光照、溫度、振動(dòng)等。樣品采集過程和注意事項(xiàng)樣品采集注意事項(xiàng)合理選擇采樣儀器、設(shè)備和容器；密封、避光、防潮、防污染等；低溫冷藏法，防止樣品腐敗，一般不加入防腐劑。嚴(yán)格認(rèn)真的填寫采樣記錄。第二節(jié) 樣品前處理樣品前處理：又叫樣品分析前的處理。 是在樣品分析前必須采取一定的措施，消除或減少干擾測(cè)定的各種因素。樣品前處理的原則完全分離不受損；不引入被測(cè)組分和干擾組分；不影響后續(xù)分析；不用或少用試劑免雜質(zhì)；安全、簡(jiǎn)便、高效。樣品前處理方法干

4、法有機(jī)質(zhì)分解法提取法揮發(fā)分離法其他方法浸漬法萃取法濕法蒸發(fā)法氣化法蒸餾法升華法頂空法吸附法沉淀法透析法離子交換法固相萃取組分分離有機(jī)質(zhì)破壞有機(jī)質(zhì)分解法干法又稱灰化法 在高溫灼燒下使樣品脫水、炭化，并在空氣中氧的作用下，使有機(jī)物徹底氧化分解，生成的二氧化碳、水和其他氣體揮發(fā)逸去，剩下的無機(jī)物用鹽酸溶解后供測(cè)定用。分三個(gè)步驟：炭化灰化溶解適用于：Pb、Cu、Zn、Cr、Fe等金屬元素不適用：As、Hg干法三個(gè)階段炭化 脫水灰化 除去碳、氫、氧灰化完全標(biāo)志：樣品成為無黑色顆粒的灰 白色粉末狀殘?jiān)?。溶?用稀鹽酸溶解灰白色粉末狀 灼殘?jiān)臒o機(jī)鹽或氧化物 后過濾待用。1.優(yōu)點(diǎn)：是有機(jī)物被破壞徹底，操作簡(jiǎn)

5、單， 使用試劑少，適用于大批量樣品的 分析測(cè)定。2.缺點(diǎn)：是砷、汞、鉛等金屬容易在高溫下 揮發(fā)損失。3.灰化助劑有兩類：乙醇、硝酸、碳酸銨碳酸銨、過氧化氫，灼燒后完全消失，不增加殘灰質(zhì)量，可加速灰化。氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽，與灰分混雜，使碳粒不被覆蓋，所以燃燒完全，應(yīng)同時(shí)做空白試驗(yàn)。坩堝鉗坩堝有機(jī)質(zhì)分解法濕法 在強(qiáng)酸性和加熱沸騰強(qiáng)酸性和加熱沸騰的條件下，使樣品中的有機(jī)化合物被強(qiáng)氧化劑氧化，其化學(xué)結(jié)構(gòu)被破壞，將待測(cè)元素釋放出來。常用消化方法：硫酸高溫催化法硝酸-硫酸法1. 硝酸-高氯酸法硝酸-硫酸法原理：4HNO3 2H2O+4NO2 +2O硝酸浸泡開始消化補(bǔ)加氧化劑終止消化脫硝五個(gè)階段所加試劑

6、現(xiàn)象硝酸硫酸硝酸水&飽和草酸銨無液體黃色液體黃色、棕紅色氣體液體無色或微黃色濃厚白煙產(chǎn)生濃厚白煙產(chǎn)生消化操作技術(shù)敞口消化法回流消化法冷消化法密封管消化法微波消解法敞口消化法回流裝置圖優(yōu)點(diǎn)是加熱溫度較干法低較干法低，減少了金屬揮發(fā)逸散的損失。缺點(diǎn)是會(huì)產(chǎn)生大量有毒氣體，操作需在通風(fēng)柜中進(jìn)行。耗用試劑較多。 消化初期，產(chǎn)生大量泡沫，易沖出瓶頸，造成損失，需操作人員隨時(shí)照管，操作中還應(yīng)控制火力，注意防爆。必須做空白試驗(yàn)。方法方法常用名常用名樣品形態(tài)樣品形態(tài)萃取劑形態(tài)萃取劑形態(tài)固固液萃取液萃取浸漬法固體液體液液液萃取液萃取萃取法液體液體液液固萃取固萃取固相萃取液體固體提取法基本原理是：利用樣品中

7、不同組分在溶劑中 溶解度的不同來實(shí)現(xiàn)分離的。Eg: AB兩種組分，A是待測(cè)組分，B是干擾組分。已知試劑甲，A組分可以溶解于甲試劑，B不能，就可以選用甲試劑，將A組分提取出來。提取法浸漬法原理：利用液體溶劑浸泡固體樣品，將其中要分離 的組分溶解，以達(dá)到提取分離的目的。常用溶劑：水、酸性水溶液、堿性水溶液缺點(diǎn)：1. 樣品組分溶解擴(kuò)散需要有一個(gè)過程才能最終達(dá)到平 衡狀態(tài)，需要重復(fù)幾次。 2. 樣品中的雜質(zhì)也會(huì)同時(shí)被浸出，檢測(cè)前需要凈化。分類：冷浸法、回流提取法。冷浸法冷浸法 固體樣品粉碎，放入溶劑中混勻，振搖30min后靜置，傾出或過濾出溶液，重復(fù)2-3次，合并溶液供后續(xù)測(cè)定操作?；亓魈崛》ɑ亓魈崛?/p>

8、法 采用回流提取裝置 當(dāng)提取過程需要加熱時(shí)，為避免揮發(fā)性組分和溶劑的揮發(fā)損失，采用回流裝置，即利用蒸餾燒瓶和冷凝管作為提取一起，通過水加熱回流，以保證樣品中要分離的組分被溶劑充分溶解提取。提取效率高、不適用于受熱易分解的組分提取法萃取法利用液體萃取劑液體萃取劑來提取與它互不相容或部分相溶的液液體樣品體樣品中的組分。有機(jī)溶劑水溶液萃取操作： 取一定量樣品溶液于分頁(yè)漏斗中，調(diào)節(jié)至適宜的酸度后，加萃取劑，充分震蕩。靜置分層后，打開分液漏斗的玻璃塞，再將旋塞緩緩旋開，下層溶液放入另一容器中，使兩相分離。再取新的萃取劑，反復(fù)萃取3-4次，合并萃取液供分析測(cè)定。基本原理：分配定律分配定律 在恒溫恒壓下，互

9、不相容或部分相容的兩種溶液，在 彼此達(dá)到平衡時(shí)分為兩層，溶質(zhì)以一定的 濃度比溶解分配在兩液層中。溶質(zhì)在兩液 層中分配的濃度比，稱之為分配比（D）。分配系數(shù)：D=C有/C水表示了溶質(zhì)在兩種 不同溶劑中溶解度的大小提取法萃取法有機(jī)溶劑水溶液萃取效率：被萃取物質(zhì)在有機(jī)相中的量E%=被萃取物質(zhì)的總量X100%C有V有E%=C有V有+C水V水X100%E%=1+V水/（V有D）X100%1提取法萃取法Mn=1+V水/（V有D）1提高萃取效果的方法：選擇合適的萃取劑。選擇合適的萃取劑。該溶劑對(duì)被提取的組分的分配比D越大，萃取效率越高。增加使用有機(jī)溶劑的體積。增加使用有機(jī)溶劑的體積。但是由于萃取劑費(fèi)用較高，

10、而且使用次數(shù)較多，因此一般萃取劑的體積為樣品溶液體積的相等或?yàn)槠湟话搿?增加萃取次數(shù)增加萃取次數(shù)。N越大Mn越小，萃取效果也就越高。但過多地增加萃取次數(shù)，是工作量增加，也會(huì)增加操作誤差。MoN1. 溶劑的選擇 與水互溶的有機(jī)溶劑，不適用液液萃取。如低分子量的醇、酮、醛、乙腈。 常用的萃取液：乙醚、苯、甲苯、四氯化碳、二硫化碳、環(huán)己烷、正己烷 2.乳化定義：一種液體以極微小液滴均勻地分散在互不相溶的另一種液體中的作用 。(1)急速振動(dòng)樣品使其在分液漏斗中發(fā)生完全的混合，是一個(gè)非常重要的操作。(2)由于物質(zhì)劇烈振動(dòng)，液液萃取中常發(fā)生乳化現(xiàn)象，尤其是含有表面活性劑和脂肪的樣品，會(huì)影響被測(cè)組分?jǐn)?shù)據(jù)的準(zhǔn)

11、確。避免和破壞乳化的方法有：(1)混合震搖時(shí)，輕緩的固定一個(gè)方向震搖；(2)采用高速離心振蕩或振蕩后再用玻璃棉或?yàn)V紙過濾；(3)加鹽到水相，通常有NaCl固體、2%5%NaCl溶液或Na2SO4溶液。(4)加入少量另一種有機(jī)溶劑，如無水乙醇。 固相萃取法又稱液-固萃取法，是20世紀(jì)70年代才發(fā)展起來的樣品前處理。是利用某些大分子顆粒，通過吸附、分配或離子交換等作用，將待測(cè)的有機(jī)組分截留在柱子上，經(jīng)過洗滌后再用少量溶劑洗脫下來，起到分離和弄濃縮的作用。提取法固相萃取法 揮發(fā)分離法是利用物質(zhì)揮發(fā)性的差別，在常溫或低溫加熱下，使樣品中易揮發(fā)的組分與不揮發(fā)的組分分離的方法。既可以用于被測(cè)組分的分離，也

12、可以用于除去干擾組分。方法有：氣化法、蒸發(fā)法、蒸餾法、升華法、 頂空法等揮發(fā)分離法 氣化法是利用被測(cè)物質(zhì)在常溫常溫下所具有的揮發(fā)性，與不揮發(fā)的干擾組分分離的方法。通常是利用氧化還原反應(yīng)使待測(cè)組分形成低沸點(diǎn)的單質(zhì)或化合物，從樣品溶液中逸出供分析測(cè)定。Eg：SnCL2+HgCL2SnCL2+Hg 低沸點(diǎn)化合物中最常見的是氫化物，因此可以用化學(xué)方法將待測(cè)組分轉(zhuǎn)變成氣態(tài)的氫化物。Eg: S2-+2H+ H2S揮發(fā)分離法氣化法 蒸發(fā)法是在低溫加熱低溫加熱的條件下使揮發(fā)性組分氣化逸出，達(dá)到分離的目的。當(dāng)樣品中含有受熱易分解的組分時(shí)，通過減壓便可以在更低的溫度，甚至室溫下使揮發(fā)性組分氣化。Eg：食品中水分的

13、測(cè)定揮發(fā)分離法蒸發(fā)法 在較高溫度下，利用蒸餾裝置，將樣品中具有揮發(fā)性或經(jīng)處理后具有揮發(fā)性的組分更完全地蒸餾出來。借助蒸餾裝置，將具揮發(fā)性的組分與水或其他溶劑一起釋放出來，然后再冷凝成液體或被吸收液吸收。分：直接蒸餾法、 水蒸氣蒸餾法、 減壓蒸餾法揮發(fā)分離法蒸餾法直接蒸餾法裝置圖將樣品溶液置于燒瓶中，熱源直接加熱燒瓶。適用于沸點(diǎn)在40-150度之間的物質(zhì)。如水中氨氮、氟化物、氰化物等水樣預(yù)處理。水蒸氣蒸餾法裝置圖由于樣品中的某些組分，特別是有些有機(jī)化合物，沸點(diǎn)較高 ，又容易受熱分解的時(shí)候，建議采用水蒸氣蒸餾法。將水蒸氣通入盛有樣品的燒瓶，一方面水蒸氣給樣品加熱，使被測(cè)組分蒸發(fā)；一方面樣品中的可揮

14、發(fā)被測(cè)組分被水蒸氣攜帶出來。加熱溫度不會(huì)超過100度，適用于具有一定蒸汽壓而沸點(diǎn)較高的組分。如水中揮發(fā)酚的測(cè)定。減壓蒸餾裝置圖在低于常壓的條件下進(jìn)行蒸餾，適用于高沸點(diǎn)、及易分解的有機(jī)化合物的預(yù)處理。減壓可降低沸點(diǎn)，因而可以再較低的溫度下蒸餾，防止組分分解。 頂空法是利用待測(cè)組分的揮發(fā)性，而干擾成分不具揮發(fā)性，實(shí)現(xiàn)被測(cè)組分與干擾組分分離。在密閉的容器中，通過適當(dāng)加溫或結(jié)合通入氮?dú)獾姆椒ㄊ蛊鋸臉悠啡芤褐袚]發(fā)出來，在進(jìn)行測(cè)定。分：靜態(tài)頂空法 動(dòng)態(tài)頂空法揮發(fā)分離法頂空法靜態(tài)頂空法動(dòng)態(tài)頂空法將樣品置于密閉容器中，保持恒溫狀態(tài)，經(jīng)過一段時(shí)間后達(dá)到平衡。用住誰器抽出上層的空氣，用于測(cè)定；動(dòng)態(tài)頂空法一般和分析

15、儀器一起配套使用，向樣品中不斷通入氮?dú)?，揮發(fā)性成分隨氮?dú)庖黄鹋懦觯M(jìn)入右邊的檢測(cè)儀器中檢測(cè)。因?yàn)橛玫搅朔治鰞x器，靈敏度高，可以測(cè)定痕量低沸點(diǎn)組分。小結(jié)方法應(yīng)用基本原理有機(jī)質(zhì)破壞干法無機(jī)元素測(cè)定長(zhǎng)時(shí)間高溫或氧化處理，破壞有機(jī)物，以離子的形式釋放出其他元素濕法分離提取法浸取法固體樣品利用待測(cè)組分與干擾組分溶解性不同進(jìn)行分離。萃取法液體樣品固相萃取法液體樣品揮發(fā)法氣化法常溫利用 被測(cè)組分與干擾組分揮發(fā)性不同進(jìn)行分離蒸發(fā)法低溫加熱蒸餾法高溫，蒸餾裝置頂空法密閉容器 在日常的衛(wèi)生理化檢驗(yàn)工作中，采樣、樣品前處理之后，就將開始進(jìn)行分析。由于檢驗(yàn)?zāi)康牟煌瑯悠返姆N類、狀態(tài)、性質(zhì)各異，選用的分析方法就各不相同

16、。 常用的分析方法有：感官檢驗(yàn)、物理檢查、化學(xué)分析和物理化學(xué)分析（儀器分析）等。第三節(jié) 衛(wèi)生理化檢驗(yàn)常用分析方法選用的方法應(yīng)適用于被檢樣品的性狀。測(cè)定方法應(yīng)具有良好的精密度和準(zhǔn)確度。方法的靈敏度或最低檢出濃度應(yīng)滿足衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的最高允許濃度。根據(jù)被測(cè)成分含量范圍選擇分析方法。盡量避免使用危害人體健康或污染環(huán)境的試劑和方法。耗費(fèi)低、節(jié)約人力和事件。選擇檢驗(yàn)方法遵循的原則衛(wèi)生理化檢驗(yàn)常用分析方法感官檢查法物理檢查法化學(xué)分析法理化分析法感官檢測(cè)法Eg：食品衛(wèi)生檢驗(yàn)的技 術(shù)內(nèi)容必須包括： 安全、營(yíng)養(yǎng)、感官聽覺物理檢查法 物理 性質(zhì) 數(shù)據(jù)密度折光率熔點(diǎn)旋光度推算組分含量Eg：水質(zhì)檢驗(yàn)中電導(dǎo)率測(cè)定化學(xué)分析法預(yù)試驗(yàn)確證試驗(yàn)重量分析滴定分析以化學(xué)變化以化學(xué)變化為基礎(chǔ)為基礎(chǔ)識(shí)別反應(yīng)現(xiàn)象，識(shí)別反應(yīng)現(xiàn)象，判斷有無。判斷有無。準(zhǔn)確測(cè)定準(zhǔn)確測(cè)定含量含量利用某一類利用某一類物質(zhì)的通性，物質(zhì)的通性，否定存在。否定存在。靈敏度高、選擇性差測(cè)定某一組測(cè)定某一組分特性。確分特性。確認(rèn)認(rèn)