臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)

1、第1章 血液標(biāo)本采集和血涂片制備1、臨床檢驗(yàn)的意義：為疾病診斷和鑒別診斷提供篩檢或確診斷依據(jù)、為疾病療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷提供動(dòng)態(tài)依據(jù)、為預(yù)防疾病提供依據(jù)、為疾病治療提供依據(jù)和材料、健康咨詢、 為醫(yī)學(xué)科學(xué)研究提供檢驗(yàn)基本方法和數(shù)據(jù)2、血清與血漿相比，缺少纖維蛋白原。3、采血方法： 毛細(xì)血管采血法、靜脈采血法、動(dòng)脈采血法4、常用添加劑的用途和應(yīng)用范圍：5、 抗凝劑：應(yīng)用物理或者化學(xué)方法除去或者抑制血液中某些凝血因子（Ca2+）的活性，以阻止血液凝固的物質(zhì)。乙二胺四乙酸鹽(EDTA)：螯合鈣離子；枸櫞酸鹽：螯合鈣離子；肝素：與抗凝血酶集合，加強(qiáng)抗凝血酶III滅活絲氨酸蛋白酶，從而阻止凝血酶形成，并有阻

2、止血小板聚集等作用。草酸鹽：草酸鈣沉淀6、 溶血原因：注射器和容器不干凈未取下針頭直接用力將血液注入容器抗凝血混合時(shí)用力過猛采血時(shí)注射器和針頭不緊，混入空氣，產(chǎn)生泡沫消毒后未待乙醇揮發(fā)干后再穿刺采血時(shí)，定位不準(zhǔn)，在靜脈中反復(fù)探針7、 瑞氏染色：堿性染料：為陽(yáng)離子染料，染細(xì)胞核、淋巴細(xì)胞胞質(zhì)和嗜堿性顆粒的染料。染成紫色或者蘭色，如亞甲藍(lán)、天青。酸性染料：為陰離子染料，主要有伊紅，能結(jié)合細(xì)胞的堿性成分并染成粉紅色，如血紅蛋白、 嗜酸性顆粒成分等。復(fù)合染料：同時(shí)具有陰、陽(yáng)離子型的染料如瑞氏染料中性顆粒呈等電狀態(tài)與酸堿染料均可結(jié)合，染淡紫紅色，稱為中性物質(zhì)。第2章 外周血液血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查1、 異常形

3、態(tài)紅細(xì)胞大小異常 ：小紅細(xì)胞<6 µm缺鐵性貧血/珠蛋白生成障礙性貧血/鐵粒幼細(xì)胞性貧血/遺傳性球性紅細(xì)胞增多癥大紅細(xì)胞>10 µm溶血性貧血/巨幼細(xì)胞性貧血巨紅細(xì)胞>15 µm肝病大小不均重度增生性貧血形狀異常球形紅細(xì)胞遺傳性球性紅細(xì)胞增多癥, HS橢圓性紅細(xì)胞遺傳性橢圓形細(xì)胞增多癥>25%口形紅細(xì)胞遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥棘形紅細(xì)胞遺傳性脂蛋白缺乏癥靶形紅細(xì)胞珠蛋白生成障礙性貧血鐮形紅細(xì)胞珠蛋白合成異常裂片性紅細(xì)胞DIC淚滴形紅細(xì)胞骨髓纖維化緡錢狀紅細(xì)胞多發(fā)性骨髓瘤Hb含量、結(jié)構(gòu)和排列異常：珠蛋白、亞鐵血紅素結(jié)構(gòu)異常：紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多余的異

4、常結(jié)構(gòu)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞嗜堿藍(lán)黑色顆粒豪-焦小體脾切除、脾功能低下、巨幼細(xì)胞性貧血卡玻環(huán)嗜多色性，點(diǎn)彩紅細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)紫紅色細(xì)線圈狀結(jié)構(gòu)，環(huán)型，8字型有核紅細(xì)胞溶血性貧血、一周內(nèi)嬰幼兒可見少量2、 缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血和珠蛋白生成障礙性貧血紅細(xì)胞特點(diǎn)缺鐵性貧血小細(xì)胞低色素、大小不均巨幼細(xì)胞性貧血大紅細(xì)胞高色素、大小不均溶血性貧血紅細(xì)胞碎片，卡波環(huán)、嗜多色性紅細(xì)胞、球形紅細(xì)胞有核紅細(xì)胞珠蛋白生成障礙性貧血小細(xì)胞低色素、靶形紅細(xì)胞3、 在我國(guó)流行的主要是間日瘧原蟲和惡性瘧原蟲，三日瘧少見，卵形瘧僅發(fā)現(xiàn)幾例。 4、 白細(xì)胞形態(tài)檢查中性粒細(xì)胞分葉：核分25葉，葉之間細(xì)絲相連或者斷開桿狀：核彎曲呈桿狀

5、、帶狀、臘腸樣凹陷超過核假設(shè)直徑一半，但最窄處大于最寬處1/3。嗜酸性粒細(xì)胞核多分2葉，眼鏡狀，橘紅色嗜酸性顆粒嗜堿性粒細(xì)胞紫黑色嗜堿顆粒，覆蓋核上，核可分3-4葉，但形態(tài)看不清淋巴細(xì)胞大淋巴細(xì)胞、小淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞體積最大，胞質(zhì)淡藍(lán)色，毛玻璃半透明，核有腎型、馬蹄形等，折疊感5、 異常白細(xì)胞形態(tài)：中性粒細(xì)胞核象變化、棒狀小體、中性粒細(xì)胞毒性變化、淋巴細(xì)胞形態(tài)異常。6、 核左移：概念：外周血液的中性桿狀粒細(xì)胞增多或（和）出現(xiàn)晚幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞。甚至早幼粒細(xì)胞的現(xiàn)象稱為核左移。臨床意義：1） 再生性核左移：核左移伴白細(xì)胞總數(shù)增高稱為再生性核左移，提示骨髓造血功能和釋放能力旺盛，機(jī)體抵抗力強(qiáng)，

6、多見于急性化膿性感染、急性中毒、急性溶血和急性失血等。2） 退行性核左移：核左移伴白細(xì)胞總數(shù)正?；驕p少稱為退行性核左移，提示骨髓釋放功能受到抑制，機(jī)體抵抗力差，見于再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥、傷寒等。類型： 白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞 中性桿狀核 幼稚細(xì)胞 毒性變化輕度左移略升高>5%無中度左移增高>10% 晚幼粒、中幼粒重度左移明顯增高>25% >中幼粒 中毒顆粒,空泡變性,核變性7、核右移概念：外周血液的中性分葉核粒細(xì)胞增多，并且5葉核以上的中性粒細(xì)胞3%時(shí)稱為核右移。臨床意義：造血功能衰退，造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)，常伴WBC減少。8、 Pelger-Huët an

7、omaly（佩-許異常）：表現(xiàn)為成熟中性粒細(xì)胞核分葉能力減退。常為桿狀和分兩葉，呈腎形或啞鈴形。染色質(zhì)聚集成小塊或條索網(wǎng)狀，其間有空折間隙。9、 中性粒細(xì)胞毒性變化的分類和形態(tài)學(xué)特點(diǎn)：在嚴(yán)重傳染病，化膿性感染，中毒，惡性腫瘤，大面積燒傷等情況下，可一起出現(xiàn)也可單獨(dú)出現(xiàn)?？张葑冃灾咀冃浴伺c胞質(zhì)均可以出現(xiàn)、嚴(yán)重感染、中毒中毒顆粒比中性顆粒大，大小不一，染色深，黑色或者紫色，與空泡同時(shí)出現(xiàn)杜勒小體藍(lán)斑，呈云霧狀、圓形、梨形天藍(lán)色或者藍(lán)黑色棒狀小體一條或者幾條紅色細(xì)桿狀、白血病鑒別Chediak-Higashi異常溶酶體，巨大顆粒，大小不一，直徑可達(dá)25 µm，容易感染，伴白化病10、

8、 異型淋巴細(xì)胞概念：在病毒（如腺病毒、人類皰疹病毒等）、原蟲（如弓形蟲）感染，藥物反應(yīng)、結(jié)締組織疾病、應(yīng)激狀態(tài)或過敏原等因素刺激下，淋巴細(xì)胞增生并發(fā)生形態(tài)上的變化，表現(xiàn)為胞體增大、胞質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng)、細(xì)胞核母細(xì)胞化，稱為異型淋巴細(xì)胞。形態(tài)特點(diǎn)I型：空泡型或者漿細(xì)胞型類似淋巴細(xì)胞大小，胞質(zhì)豐富，嗜堿性深藍(lán)色，有大小不等空泡，無顆粒，核偏位，略固縮。II型：不規(guī)則型，單核細(xì)胞型胞體較大，外形不規(guī)則，呈花邊狀，似單核細(xì)胞，胞質(zhì)量多，呈淺藍(lán)或者藍(lán)色，無空泡，可有少量天青顆粒，胞核圓形或者不規(guī)則，染色質(zhì)疏松。III型：幼稚型，未成熟型胞體較大，胞質(zhì)量多，呈藍(lán)或者深藍(lán)色，偶有空泡，無顆粒，胞核大較規(guī)則，

9、染色質(zhì)細(xì)致均勻。第3章 血液一般檢驗(yàn)1、 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯微鏡計(jì)數(shù)法：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池中（改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板），于顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過換算求得每升血液內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×200×106參考范圍：成人：男性×1012 /L 女性3.5-5.0 ×1012 /L 新生兒×1012 /L2、 血紅蛋白測(cè)定合成：健康人的血紅蛋白合成于有核紅細(xì)胞期，特殊情況下網(wǎng)織紅細(xì)胞也可以合成。受紅細(xì)胞生成素和雄激素的調(diào)節(jié)。測(cè)定：血紅蛋白的測(cè)定通常是指測(cè)定血液中

10、各種血紅蛋白的總濃度,用g/L表示。氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN）參考范圍：成年男性120160g/L；女性110150g/L；新生兒170200g/L；老年（>70Y）男性94122g/L；女性87112g/L3、 RBC和Hb的臨床意義：轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣和二氧化碳4、 紅細(xì)胞壓積：是指紅細(xì)胞容量在全血容量中所占體積的比值。5、 紅細(xì)胞平均指數(shù)：紅細(xì)胞平均容積（MCV）：即每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積，以飛升（fl）為單位。80100 紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（MCH）：即每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量以皮克（pg）為單位，2634。紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）：即平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃

11、度，以克/升（g/l）為單位，320360。6、 冷凝集素：RBC顯著降低，Hb正常，MCV、MCH假性增高。7、 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟的紅細(xì)胞之間的過度型細(xì)胞，因其胞質(zhì)內(nèi)殘存核糖體，核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，經(jīng)新亞甲藍(lán)，煌焦油藍(lán)活體染色后，胞質(zhì)中出現(xiàn)藍(lán)綠或深蘭色網(wǎng)點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)（兩個(gè)或者兩個(gè)以上）而得名。 方法：活體染色：指細(xì)胞未經(jīng)固定，在保持細(xì)胞生物活性的情況下加染料進(jìn)行染色的方法。8、 網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)（RPI）臨床意義：判斷骨髓紅細(xì)胞造血情況（有效無效造血）：增多：表示骨髓生成旺盛。常見于溶貧，放療和化療后造血恢復(fù)時(shí)。減少：見于再障，溶貧危象時(shí)，典型再障網(wǎng)織紅常低于0.

12、05%，絕對(duì)值低于15×109/L觀察貧血療效：缺鐵貧，巨幼貧治療過程中，如果Ret上升，表明治療有效，骨髓增生功能良好，如果Ret不增高，表明治療無效，提示骨髓造血功能障礙。骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)：骨髓移植后第21天,若Ret大于15×109/L，表明無移植并發(fā)癥；若小于15×109/L伴中性粒和血小板增高，提示骨髓移植失敗。9、 紅細(xì)胞沉降率(ESR)血沉：紅細(xì)胞在特制的血沉管中于一定單位時(shí)間內(nèi)下沉的距離稱為紅細(xì)胞沉降率。反映紅細(xì)胞聚集性；魏氏法（Westergren法，WHO推薦）、血沉儀法。參考范圍：男性 0-15 mm/h；女性0-20 mm/h臨床

13、意義：病理性升高：炎癥。組織損傷壞死、貧血、高膽固醇血癥、腎炎和肝硬化等。 良、惡性腫瘤鑒別：炎性高于腫瘤，惡性高于良性。 動(dòng)態(tài)觀察病情：風(fēng)濕免疫疾病。10、 白細(xì)胞計(jì)數(shù)：用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細(xì)胞后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積中的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求得每升血液中的白細(xì)胞總數(shù)。參考值：成人（410）×109 /L；新生兒（1520）×109 /L；6月2歲（1112）×109 /L11、 白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：將血液制成涂片，經(jīng)染色后在油鏡下進(jìn)行分類，求得各種類型白細(xì)胞的比值（百分率）。12、 嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)：每升血液中嗜酸性粒細(xì)胞的濃度。13、白細(xì)胞

14、計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的臨床意義 見書P4514、類白血病反應(yīng)（LKR）：外周白細(xì)胞增多同時(shí)，伴一種或者多種幼稚細(xì)胞出現(xiàn)為主要特征的類似白血病的反應(yīng)。15、血小板變化臨床意義生理變化：新生兒較低，出生3個(gè)月后達(dá)成人水平；婦女月經(jīng)前減低，經(jīng)后增加；妊娠中晚期升高，分娩后12天降低；正常人每天血小板有610的波動(dòng)，午后略高于早晨；運(yùn)動(dòng)、餐后增高，休息后恢復(fù)；靜脈血與毛細(xì)血管血計(jì)數(shù)高約10血小板增多：一過性增多：見于急性大出血、脾切除后、急性溶血之后； 持續(xù)性增多：真性紅細(xì)胞增多癥、慢粒、原發(fā)行血小板增多癥、多發(fā)性骨髓 瘤、某些惡性腫瘤早期。血小板減少：血小板生成減少：見于造血功能受到損害，如再障、急

15、白、某些藥物影響、 急性放射?。?血小板破壞亢進(jìn)：見于ITP（血小板減少性紫癜）、脾亢； 血小板消耗增多：見于DIC、血栓性血小板較少性紫癜第4章 血栓與止血一般檢查1、 血液凝固：是由凝血因子按一定順序相繼激活而生成凝血酶，最終使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白的過程。2、 正常止血過程依賴完整的血管系統(tǒng)，血小板功能，血漿凝血因子和纖維蛋白溶解活性之間的相互協(xié)調(diào)。3、 血管壁止血作用：收縮功能、激活血小板、激活凝血系統(tǒng)、局部粘度增高4、 GPb-復(fù)合物：vWF受體、參與粘附5、 GPb-a復(fù)合物：纖維蛋白原受體、參與聚集6、 血小板止血功能：粘附功能、聚集功能、釋放及促凝反應(yīng)、收縮功能7、 凝血機(jī)制：

16、1.內(nèi)源凝血途徑：從F激活至Fa-a-Ca2+-PF3的形成（內(nèi)源性因子轉(zhuǎn)化復(fù)合物） F的激活：固相激活：由膠原、玻璃、白陶土激活; 液相激活：由激 肽釋放酶( KK)水解激活2.外源凝血途徑：從F釋放至TF-a- Ca2+的形成 （外源性因子轉(zhuǎn)化復(fù)合物） 3.共同凝血途徑：從F激活至纖維蛋白形成。 Fa-a-Ca2+-PF3凝血酶原酶激活凝血酶原（F）, F a使纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白8、 抗凝系統(tǒng)：光滑的血管壁、有效的抗凝血系統(tǒng)（一般的生理或生化抗凝血系統(tǒng)、纖維蛋白溶解系統(tǒng)）9、 纖溶系統(tǒng)：使生理止血過程中所產(chǎn)生的局部或一過性的纖維蛋白凝塊能隨時(shí)溶解，防止血栓形成，保證血流通暢；纖溶系統(tǒng)

17、還參與組織修復(fù)、血管再生等多種功能。過程：1.纖溶酶原的激活2.纖維蛋白（原）降解10、 檢驗(yàn)方法一期止血缺陷篩查試驗(yàn)：血管壁、血小板異常（出血時(shí)間、血小板計(jì)數(shù)、束臂實(shí)驗(yàn)等）二期止血缺陷篩查試驗(yàn)：凝血和纖溶異常（全血凝固時(shí)間、活化部分凝血活酶時(shí)間、血漿凝血酶原時(shí)間、凝血酶時(shí)間、纖維蛋白原等）出血時(shí)間（BT）：皮膚毛細(xì)血管經(jīng)人為刺破后血液自行流出到自然停止需經(jīng)歷一系列止血凝血過程。BT異常與血小板數(shù)量和功能、血管壁完整性、某些凝血因子缺乏等有關(guān)。凝血酶原時(shí)間( PT)：是在體外測(cè)定血漿凝固所需的時(shí)間，用以反映外源性凝血因子是否正常，是篩檢止凝血功能的一種方法，也是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑用量有效的檢測(cè)指標(biāo)

18、。國(guó)際敏感度指數(shù)（ISI）：是用多份不同凝血因子水平的血漿與國(guó)際參考制品（IRP）作嚴(yán)格的校準(zhǔn)，通過回歸分析求得回歸斜率而得到的，代表凝血活酶試劑對(duì)凝血因子缺乏的敏感性，ISI值越低則敏感性越高，進(jìn)口凝血活酶試劑均標(biāo)有ISI值。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比率（INR）：用凝血活酶所測(cè)得的參比血漿與正常血漿的PT比值和所用試劑標(biāo)出的ISI值計(jì)算出INR，使不同的凝血活酶試劑測(cè)得的結(jié)果具有可比性?；罨糠帜蠲笗r(shí)間（APTT）：是在體外測(cè)定血漿凝固所需的時(shí)間，用以反映內(nèi)源性凝血因子是否正常，是篩檢止凝血功能最基本、最常用的方法之一。血漿纖維蛋白原（FIB)：凝血酶時(shí)間(TT)：是測(cè)定凝血共同途徑纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

19、纖維蛋白過程中是否存在異?？鼓F(xiàn)象的試驗(yàn)。纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）：主要反映是否存在血栓形成或纖溶亢進(jìn)的試驗(yàn)。血漿D二聚體DD：是檢測(cè)繼發(fā)性纖溶的特異性試驗(yàn)第5章 血液分析儀檢驗(yàn)1、 電阻抗法：根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì)，以電解質(zhì)溶液懸浮顆粒在通過計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行放大，閾值調(diào)節(jié)，甄別、整形，最后送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)計(jì)數(shù)和體積測(cè)定。脈沖的大小 細(xì)胞體積的大小 脈沖的數(shù)量 細(xì)胞的數(shù)量2、 三分群：WBC數(shù)：>35fL第一群：3590fL 小細(xì)胞區(qū)：淋巴細(xì)胞第二群：90160fL 中間細(xì)胞：?jiǎn)魏思?xì)胞、嗜酸、嗜堿原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞第三群：>160fL 大細(xì)胞區(qū)：中性粒細(xì)胞3、 射頻電導(dǎo)法：區(qū)分電阻抗法所不能區(qū)分的體積一樣的細(xì)胞。如：淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。大小一樣；核質(zhì)比不同；顆粒不同4、 流式細(xì)胞術(shù)（五分類主要檢測(cè)原理）：細(xì)胞懸液（稀釋、染色、