上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班課件

1、上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班上海新王牌教育精品小班上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1 1、什么是轉(zhuǎn)化？、什么是轉(zhuǎn)化？ 2 2、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是什么？具體過程是怎樣的？是什么？具體過程是怎樣的？ 3 3、目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法、目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎樣的？是什么？基本操作程序是怎樣的？ 4 4、目的基因?qū)氪竽c桿菌的方法是怎、目的基因?qū)氪竽c桿菌的方法是怎樣的？鈣離子有什么作用？樣的？鈣離子有什么作用？上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)

2、上海高中補(bǔ)習(xí)班轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。的過程。三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班1.1.目的基因?qū)胫参锛?xì)胞目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法常用的方法: : 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉基因槍法、花粉 管通道法管通道法農(nóng)桿菌的特點(diǎn)農(nóng)桿菌的特點(diǎn): :a.a.易感染雙子葉植物和祼子植物。易感染雙子葉植物和祼子植物。b.b.具有趨化性。具有趨化性。c.Tic.Ti質(zhì)粒上的質(zhì)粒上的T-DNAT-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞

3、，并整合到受體細(xì)胞染色體的并整合到受體細(xì)胞染色體的DNADNA上上三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1.1.目的基因?qū)胫参锛?xì)胞目的基因?qū)胫参锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的導(dǎo)入過程農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的導(dǎo)入過程: :構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌植物細(xì)胞植物細(xì)胞導(dǎo)入導(dǎo)入穩(wěn)定維持和表達(dá)穩(wěn)定維持和表達(dá)上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班. .目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法常用的方法: : 顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)操作程序：操作程序：三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目

4、的基因?qū)胧荏w細(xì)胞a.a.先提純含目的基因的表達(dá)載體先提純含目的基因的表達(dá)載體 b.b.從動(dòng)物體內(nèi)取出卵從動(dòng)物體內(nèi)取出卵( (受精卵）受精卵）c.c.顯微注射儀進(jìn)行顯微注射顯微注射儀進(jìn)行顯微注射 d.d.將含目的基因的受精卵移植到輸卵將含目的基因的受精卵移植到輸卵管或子宮中發(fā)育成新個(gè)體管或子宮中發(fā)育成新個(gè)體上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班3.3.目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞原核生物的特點(diǎn)原核生物的特點(diǎn): :繁殖快，多為單細(xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較繁殖快，多為單細(xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。少。大腸桿菌的轉(zhuǎn)化過程大腸桿菌的轉(zhuǎn)化過程: :用用CaCa2+2+處理細(xì)胞處理細(xì)胞 增加細(xì)

5、胞壁的透性，增加細(xì)胞壁的透性，與細(xì)胞膜無關(guān)與細(xì)胞膜無關(guān)三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體重組表達(dá)載體DNADNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合分子與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收感受態(tài)細(xì)胞吸收DNADNA分子分子上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班四、目的基因的檢測(cè)與鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定1 1、導(dǎo)入目的基因后需要檢測(cè)哪些方面？、導(dǎo)入目的基因后需要檢測(cè)哪些方面？各采取什么方法？各采取什么方法？2 2、什么是、什么是DNADNA分子探針？檢測(cè)時(shí)的分子探針？檢測(cè)時(shí)的DNADNA探探針通過什么原理來檢測(cè)目的基因和相針通過什么原理來檢測(cè)目的基因和相應(yīng)的

6、應(yīng)的mRNAmRNA？3 3、利用抗體抗原雜交檢測(cè)的原理是什、利用抗體抗原雜交檢測(cè)的原理是什么？么？上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班1.1.目的基因是否插入受體細(xì)胞染色體的目的基因是否插入受體細(xì)胞染色體的DNADNA上上目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法檢測(cè)方法檢測(cè)方法: :DNADNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)DNADNA探針：探針：用放射性同位素等作標(biāo)記的含有用放射性同位素等作標(biāo)記的含有目的基因的目的基因的DNADNA片段。片段。四、目的基因的檢測(cè)與鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班2.2.目的基因是否轉(zhuǎn)錄出目的基因是否轉(zhuǎn)錄出m

7、RNAmRNA目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法檢測(cè)方法檢測(cè)方法: :分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)用用DNADNA探針與探針與mRNAmRNA雜交。雜交。四、目的基因的檢測(cè)與鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法目的基因的檢測(cè)內(nèi)容和方法檢測(cè)方法檢測(cè)方法: :抗原抗原抗體雜交抗體雜交3.3.目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班4 4、個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定、個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定四、目的基因的檢測(cè)與鑒定上

8、海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分，當(dāng)它的成分異常時(shí)，動(dòng)物可能患成分，當(dāng)它的成分異常時(shí)，動(dòng)物可能患某種疾病，如鐮刀型細(xì)胞貧血癥，假如某種疾病，如鐮刀型細(xì)胞貧血癥，假如讓你用基因工程的方法使大腸桿菌生產(chǎn)讓你用基因工程的方法使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的出鼠的珠蛋白，想一想，應(yīng)該如何珠蛋白，想一想，應(yīng)該如何設(shè)計(jì)？設(shè)計(jì)？ 思考與探究思考與探究上海培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海最好的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)上海高中補(bǔ)習(xí)班思考與探究思考與探究1.1.從小鼠中克隆出從小鼠中克隆出珠蛋白基因的編碼序列珠蛋白基因的編碼序列（CDNACDNA）。）。2.2.將將cDNAcDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。另外加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。3.3.將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)因不含有抗達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)因不含有抗四環(huán)素基因