醫(yī)學(xué)課件人用藥品國(guó)際注冊(cè)的藥學(xué)研究技術(shù)要求

1、分析方法的確證試驗(yàn)分析方法的確證試驗(yàn)（ Q2A ）簡(jiǎn)介：需要確證的分析方法類(lèi)型： 附件A: 術(shù)語(yǔ) a簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介m內(nèi)容內(nèi)容o分析方法確證的參數(shù)分析方法確證的參數(shù)o術(shù)語(yǔ)和定義術(shù)語(yǔ)和定義m分析方法確證的目的分析方法確證的目的 證明該方法適合預(yù)期目的證明該方法適合預(yù)期目的需要確證的分析方法類(lèi)型需要確證的分析方法類(lèi)型m鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)m雜質(zhì)定量試驗(yàn)雜質(zhì)定量試驗(yàn)m雜質(zhì)限度試驗(yàn)雜質(zhì)限度試驗(yàn)m原料或制劑中活性成分以及制劑中選原料或制劑中活性成分以及制劑中選定組分的定量測(cè)試定組分的定量測(cè)試典型的確證參數(shù)典型的確證參數(shù)(Characteristics)m準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性(Accuracy)m精密度精密度(Precisi

2、on)o重復(fù)性重復(fù)性(Repeatablity)o中間精密度中間精密度(Intermediate Precision)m專(zhuān)屬性專(zhuān)屬性(Specificity)m檢測(cè)限度檢測(cè)限度(Detection limit)m定量限度定量限度(Quantitation limit)m線性線性(Linearity)m范圍范圍(Range)m耐用性耐用性(Robustness)表： 分析方法的類(lèi)型 定性鑒別 雜質(zhì)檢查 含量分析；溶出 度(含量測(cè)定)； 項(xiàng)目 定量 限度檢測(cè) 含量效價(jià) 準(zhǔn)確度 - + - + 精密度 重復(fù)性 - + - + 中間精密度 - + - + 專(zhuān)屬性 + + + + 檢測(cè)限度 - - +

3、- 定量限度 - + - - 線性 - + - + 范圍 - + - + 注意：- 表示通常不需確證的項(xiàng)目； + 表示通常需確證的項(xiàng)目； 假如測(cè)定了重現(xiàn)性（見(jiàn)術(shù)語(yǔ)表），中間精密度可不測(cè)定； 缺乏專(zhuān)屬性的分析方法，應(yīng)由其他分析方法來(lái)作補(bǔ)充； 有些情況下需要。a下列情況需重新確證下列情況需重新確證m原料藥合成方法的改變?cè)纤幒铣煞椒ǖ母淖僲制劑組分的改變制劑組分的改變m分析方法的改變分析方法的改變a術(shù)語(yǔ)表術(shù)語(yǔ)表 1 1分析方法（分析方法（Ana1ytica1 procedureAna1ytica1 procedure） 分析方法指的是進(jìn)行分析的方式，應(yīng)詳細(xì)描述進(jìn)行每個(gè)分析試驗(yàn)所必需的步驟。它包括（

4、但不局限于）：樣品、參比物、試劑的制備，儀器的使用，校準(zhǔn)曲線的繪制，計(jì)算公式的運(yùn)用等。2 2專(zhuān)屬性（專(zhuān)屬性（SpecificitySpecificity） 專(zhuān)屬性是指在一些可能存在的組分如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)等的存在下，對(duì)被分析物質(zhì)的準(zhǔn)確可靠的測(cè)定。 一種分析方法缺乏專(zhuān)屬性時(shí)，應(yīng)由其他分析方法作補(bǔ)充。 專(zhuān)屬性有以下含義： 定性鑒別：確保被分析物質(zhì)符合其特性。 純度檢查：確保采用的分析方法可檢測(cè)出雜質(zhì)，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬、溶劑殘留量等。 含量測(cè)定（含量或效價(jià)）：可提供樣品中被分析物的含量或效價(jià)的準(zhǔn)確結(jié)果。3.3.準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性( (AccuracyAccuracy) ) 準(zhǔn)確性指的是真實(shí)值或認(rèn)可的

5、參考值與測(cè)量值之間相近程度。 準(zhǔn)確性有時(shí)也稱(chēng)真實(shí)度。4.4.精密度精密度( (PrecisionPrecision) ) 精密度指的是規(guī)定條件下對(duì)同一勻質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的一致程度（離散程度）。精密度可以從三方面考慮：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。 精密度檢查應(yīng)使用同一勻質(zhì)的、可信的樣品。如果得不到，可用人工制得的樣品或樣品溶液進(jìn)行研究。 分析方法的精密度通常以測(cè)量法的變異性、標(biāo)準(zhǔn)偏差或變異系數(shù)來(lái)表達(dá)。4.14.1重復(fù)性重復(fù)性( (RepeatabilityRepeatability) ) 重復(fù)性是指在同樣的操作條件下較短時(shí)間間隔的精密度：也稱(chēng)為日內(nèi)差(Intra-assay pr

6、ecision)。4.24.2中間精密度中間精密度( (Intermediate PrecisionIntermediate Precision) ) 中間精密度指的是試驗(yàn)室內(nèi)部條件改變（如：不同天、不同分析測(cè)試者、不同儀器等）情況下的精密度。 4.34.3重現(xiàn)性（重現(xiàn)性（ReproducibilityReproducibility） 指不同試驗(yàn)室之間的精密度，常用于合作試驗(yàn)研究 (collaborative studies)中的方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化研究。5 5檢測(cè)限度（檢測(cè)限度（Detection limitDetection limit）檢測(cè)限度指的是樣品中的被分析物質(zhì)能夠被檢測(cè)到的最低量，通常

7、無(wú)需定量。 6 6定量限度（定量限度（Quantitation limitQuantitation limit） 某種分析方法的定量限度是指具有合適準(zhǔn)確性和精密度的條件下，能夠定量測(cè)定分析組分的最低限量。它是樣品中含量低的化合物定量分析的參數(shù)，特別適用于雜質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物的測(cè)定。 7 7線性（線性（LinearityLinearity） 分析方法的線性是指所得檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（含量）成比例關(guān)系的性能。8 8范圍（范圍（RangeRange） 分析方法的范圍是指在樣品中被分析物的較高濃度(量)和較低濃度(量)之間的區(qū)間、已證實(shí)區(qū)間內(nèi)具有合適的準(zhǔn)確性、精密度、線性。9 9耐用性（耐

8、用性（RobustnessRobustness） 分析方法的耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)匕l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測(cè)量能力保持不受影響，可用于說(shuō)明正常使用時(shí)的可靠性。 分析方法的確證：方法學(xué)分析方法的確證：方法學(xué)（ Q2B ） 1：簡(jiǎn)介：簡(jiǎn)介m目的：目的：o對(duì)每一種分析方法中參數(shù)的確證提供指導(dǎo)和建議對(duì)每一種分析方法中參數(shù)的確證提供指導(dǎo)和建議o申報(bào)中建立數(shù)據(jù)的表示方式申報(bào)中建立數(shù)據(jù)的表示方式m注意：注意：o整個(gè)方法學(xué)確證中，必須采用經(jīng)過(guò)完全確認(rèn)的、整個(gè)方法學(xué)確證中，必須采用經(jīng)過(guò)完全確認(rèn)的、純度已知的參比物質(zhì)來(lái)確證。純度已知的參比物質(zhì)來(lái)確證。o參比物質(zhì)的純度要求與使用目的應(yīng)一致參比物質(zhì)的純度要求與使用目的應(yīng)一致

9、 2：專(zhuān)屬性：專(zhuān)屬性m鑒別鑒別o通過(guò)與參比物（結(jié)構(gòu)相同）比較得到正結(jié)果或負(fù)結(jié)果通過(guò)與參比物（結(jié)構(gòu)相同）比較得到正結(jié)果或負(fù)結(jié)果o通過(guò)與被測(cè)物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)物質(zhì)比較得不到正結(jié)果通過(guò)與被測(cè)物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)物質(zhì)比較得不到正結(jié)果m含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查o色譜方法色譜方法 色譜圖色譜圖(標(biāo)出每一成分標(biāo)出每一成分) 分離度分離度專(zhuān)屬性的標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)屬性的標(biāo)準(zhǔn)o非專(zhuān)屬性方法非專(zhuān)屬性方法 用其他支持性的分析方法來(lái)輔助用其他支持性的分析方法來(lái)輔助n可得到雜質(zhì)可得到雜質(zhì) 用加入法用加入法n得不到雜質(zhì)得不到雜質(zhì) 強(qiáng)力破壞后用不同方法比較測(cè)定峰的純度強(qiáng)力破壞后用不同方法比較測(cè)定峰的純度(二級(jí)管陣列、質(zhì)譜二級(jí)管陣

10、列、質(zhì)譜) 3：線性：線性 原料藥（標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液）原料藥（標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液） 至少至少5個(gè)個(gè) 混勻的制劑組方混勻的制劑組方 濃度系列濃度系列 采集信號(hào)采集信號(hào) 測(cè)定測(cè)定 統(tǒng)計(jì)（線性關(guān)系或函數(shù)關(guān)系）統(tǒng)計(jì)（線性關(guān)系或函數(shù)關(guān)系） 4：范圍：范圍m在盡可能大的濃度范圍內(nèi)均能獲得良好的線性、精密度在盡可能大的濃度范圍內(nèi)均能獲得良好的線性、精密度和準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性m最小的規(guī)定范圍：最小的規(guī)定范圍：o對(duì)原料藥或制劑的含量測(cè)定對(duì)原料藥或制劑的含量測(cè)定 80120%o對(duì)含量均勻度對(duì)含量均勻度 70 130%o對(duì)溶出度對(duì)溶出度 規(guī)定值的規(guī)定值的20%o對(duì)雜質(zhì)檢查對(duì)雜質(zhì)檢查 為報(bào)告的雜質(zhì)水平至所訂限度的為報(bào)告的雜質(zhì)水平至所訂

11、限度的120%o對(duì)已知有異常功效或有毒雜質(zhì)對(duì)已知有異常功效或有毒雜質(zhì) 與其與其“水平水平”相當(dāng)相當(dāng)o同法測(cè)含量和雜質(zhì)同法測(cè)含量和雜質(zhì)(且用且用100%標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品) 從雜質(zhì)量到從雜質(zhì)量到120% 5：準(zhǔn)確性：準(zhǔn)確性m含量測(cè)定含量測(cè)定原料藥原料藥o用該方法去測(cè)已知純度的用該方法去測(cè)已知純度的物質(zhì)物質(zhì)o將該法與另一成熟方法比將該法與另一成熟方法比較較o在精密度、線性和專(zhuān)屬性在精密度、線性和專(zhuān)屬性建立后得出建立后得出制劑制劑o用該方法去測(cè)按處方量制用該方法去測(cè)按處方量制成的混合物（加入已知量成的混合物（加入已知量被測(cè)物）被測(cè)物）o在制劑中加入已知量主藥在制劑中加入已知量主藥或與另一成熟方法比較或與另

12、一成熟方法比較o在精密度、線性和專(zhuān)屬性在精密度、線性和專(zhuān)屬性建立后得出建立后得出m雜質(zhì)（定量）雜質(zhì)（定量）o在樣品（原料在樣品（原料/制劑）中加入已知量的雜質(zhì)制劑）中加入已知量的雜質(zhì)o無(wú)法得到雜質(zhì)無(wú)法得到雜質(zhì)/降解物的，與采用其他方法測(cè)得的結(jié)果比降解物的，與采用其他方法測(cè)得的結(jié)果比較，可以使用原料的響應(yīng)值較，可以使用原料的響應(yīng)值m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o在規(guī)定的線性范圍，對(duì)在規(guī)定的線性范圍，對(duì)3個(gè)濃度測(cè)個(gè)濃度測(cè)9個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià)個(gè)數(shù)據(jù)來(lái)評(píng)價(jià)o回收率或平均值與真值的差異及它們的置信區(qū)間來(lái)評(píng)價(jià)回收率或平均值與真值的差異及它們的置信區(qū)間來(lái)評(píng)價(jià) 6：精密度：精密度 含量測(cè)定和雜質(zhì)的定量測(cè)定均應(yīng)作精密度考察含量測(cè)

13、定和雜質(zhì)的定量測(cè)定均應(yīng)作精密度考察m重復(fù)性重復(fù)性o在規(guī)定范圍內(nèi)測(cè)在規(guī)定范圍內(nèi)測(cè)9次（次（3種濃度種濃度/每種重復(fù)每種重復(fù)3次）或次）或o在試驗(yàn)濃度在試驗(yàn)濃度100%時(shí)測(cè)時(shí)測(cè)6次次m中間精密度中間精密度 確定隨機(jī)事件確定隨機(jī)事件(日期、分析者、儀器等日期、分析者、儀器等)對(duì)精密度的影響對(duì)精密度的影響m重現(xiàn)性重現(xiàn)性 試驗(yàn)室之間試驗(yàn)室之間m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù) 均應(yīng)報(bào)標(biāo)準(zhǔn)差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差和置信區(qū)間均應(yīng)報(bào)標(biāo)準(zhǔn)差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差和置信區(qū)間 7：檢測(cè)限度：檢測(cè)限度m根據(jù)直觀評(píng)價(jià)（用于儀器或非儀器）根據(jù)直觀評(píng)價(jià)（用于儀器或非儀器）m根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法） 已知低濃度被測(cè)物

14、的信號(hào)已知低濃度被測(cè)物的信號(hào) 3 2 空白樣品的信號(hào)空白樣品的信號(hào) 1 1m根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率 檢測(cè)限度（檢測(cè)限度（DL）= 3.3/s ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（通過(guò)空白樣品測(cè)背景響應(yīng)值或：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（通過(guò)空白樣品測(cè)背景響應(yīng)值或Y軸截距）軸截距） s ： 校正曲線的斜率（通過(guò)被測(cè)物的校正曲線求得）校正曲線的斜率（通過(guò)被測(cè)物的校正曲線求得）=或m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o檢測(cè)限度檢測(cè)限度 o檢測(cè)限度的測(cè)定方法檢測(cè)限度的測(cè)定方法oDL是由直觀評(píng)價(jià)或信噪比得來(lái)（報(bào)相關(guān)的色譜圖）是由直觀評(píng)價(jià)或信噪比得來(lái)（報(bào)相關(guān)的色譜圖）oDL是由計(jì)算或外推法得來(lái)的估計(jì)值，則應(yīng)專(zhuān)門(mén)對(duì)一些已是

15、由計(jì)算或外推法得來(lái)的估計(jì)值，則應(yīng)專(zhuān)門(mén)對(duì)一些已知接近或就在限度上的樣品進(jìn)行分析知接近或就在限度上的樣品進(jìn)行分析ACs=1 =0.1 DL=0.33 s=1/2 =0.3 DL=1.98 8：定量限度：定量限度m直觀評(píng)價(jià)直觀評(píng)價(jià) 在準(zhǔn)確度和精密度符合要求的前提下，能測(cè)得的最小量在準(zhǔn)確度和精密度符合要求的前提下，能測(cè)得的最小量m根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法） 已知低濃度被測(cè)物的信號(hào)已知低濃度被測(cè)物的信號(hào) 10 空白樣品的信號(hào)空白樣品的信號(hào) 1 m根據(jù)響應(yīng)值和斜率的標(biāo)準(zhǔn)偏差根據(jù)響應(yīng)值和斜率的標(biāo)準(zhǔn)偏差 定量限度（定量限度（QL）= 10/s= ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（通過(guò)一組空白樣品的分析或：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（通過(guò)一組空白樣品的分析或根據(jù)校正曲線）根據(jù)校正曲線） s ： 校正曲線的斜率校正曲線的斜率m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o定量的限度定量的限度 o定量限度的測(cè)定方法定量限度的測(cè)定方法o分析一些已知接近限度或限度上的樣品來(lái)證實(shí)分析一些已知接近限度或限度上的樣品來(lái)證實(shí) 9：耐用性：耐用性 證實(shí)在某些參數(shù)由微小的變異后，分析方法仍可靠證實(shí)在某些參數(shù)由微小的變異后，分析方法仍可靠 典型例子：典