醫(yī)學(xué)課件人用藥品國際注冊的藥學(xué)研究技術(shù)要求

1、分析方法的確證試驗(yàn)分析方法的確證試驗(yàn)（ Q2A ）簡介：需要確證的分析方法類型： 附件A: 術(shù)語 a簡介簡介m內(nèi)容內(nèi)容o分析方法確證的參數(shù)分析方法確證的參數(shù)o術(shù)語和定義術(shù)語和定義m分析方法確證的目的分析方法確證的目的 證明該方法適合預(yù)期目的證明該方法適合預(yù)期目的需要確證的分析方法類型需要確證的分析方法類型m鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)m雜質(zhì)定量試驗(yàn)雜質(zhì)定量試驗(yàn)m雜質(zhì)限度試驗(yàn)雜質(zhì)限度試驗(yàn)m原料或制劑中活性成分以及制劑中選原料或制劑中活性成分以及制劑中選定組分的定量測試定組分的定量測試典型的確證參數(shù)典型的確證參數(shù)(Characteristics)m準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性(Accuracy)m精密度精密度(Precisi

2、on)o重復(fù)性重復(fù)性(Repeatablity)o中間精密度中間精密度(Intermediate Precision)m專屬性專屬性(Specificity)m檢測限度檢測限度(Detection limit)m定量限度定量限度(Quantitation limit)m線性線性(Linearity)m范圍范圍(Range)m耐用性耐用性(Robustness)表： 分析方法的類型 定性鑒別 雜質(zhì)檢查 含量分析；溶出 度(含量測定)； 項(xiàng)目 定量 限度檢測 含量效價(jià) 準(zhǔn)確度 - + - + 精密度 重復(fù)性 - + - + 中間精密度 - + - + 專屬性 + + + + 檢測限度 - - +

3、- 定量限度 - + - - 線性 - + - + 范圍 - + - + 注意：- 表示通常不需確證的項(xiàng)目； + 表示通常需確證的項(xiàng)目； 假如測定了重現(xiàn)性（見術(shù)語表），中間精密度可不測定； 缺乏專屬性的分析方法，應(yīng)由其他分析方法來作補(bǔ)充； 有些情況下需要。a下列情況需重新確證下列情況需重新確證m原料藥合成方法的改變原料藥合成方法的改變m制劑組分的改變制劑組分的改變m分析方法的改變分析方法的改變a術(shù)語表術(shù)語表 1 1分析方法（分析方法（Ana1ytica1 procedureAna1ytica1 procedure） 分析方法指的是進(jìn)行分析的方式，應(yīng)詳細(xì)描述進(jìn)行每個(gè)分析試驗(yàn)所必需的步驟。它包括（

4、但不局限于）：樣品、參比物、試劑的制備，儀器的使用，校準(zhǔn)曲線的繪制，計(jì)算公式的運(yùn)用等。2 2專屬性（專屬性（SpecificitySpecificity） 專屬性是指在一些可能存在的組分如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)等的存在下，對被分析物質(zhì)的準(zhǔn)確可靠的測定。 一種分析方法缺乏專屬性時(shí)，應(yīng)由其他分析方法作補(bǔ)充。 專屬性有以下含義： 定性鑒別：確保被分析物質(zhì)符合其特性。 純度檢查：確保采用的分析方法可檢測出雜質(zhì)，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬、溶劑殘留量等。 含量測定（含量或效價(jià)）：可提供樣品中被分析物的含量或效價(jià)的準(zhǔn)確結(jié)果。3.3.準(zhǔn)確性準(zhǔn)確性( (AccuracyAccuracy) ) 準(zhǔn)確性指的是真實(shí)值或認(rèn)可的

5、參考值與測量值之間相近程度。 準(zhǔn)確性有時(shí)也稱真實(shí)度。4.4.精密度精密度( (PrecisionPrecision) ) 精密度指的是規(guī)定條件下對同一勻質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測結(jié)果的一致程度（離散程度）。精密度可以從三方面考慮：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。 精密度檢查應(yīng)使用同一勻質(zhì)的、可信的樣品。如果得不到，可用人工制得的樣品或樣品溶液進(jìn)行研究。 分析方法的精密度通常以測量法的變異性、標(biāo)準(zhǔn)偏差或變異系數(shù)來表達(dá)。4.14.1重復(fù)性重復(fù)性( (RepeatabilityRepeatability) ) 重復(fù)性是指在同樣的操作條件下較短時(shí)間間隔的精密度：也稱為日內(nèi)差(Intra-assay pr

6、ecision)。4.24.2中間精密度中間精密度( (Intermediate PrecisionIntermediate Precision) ) 中間精密度指的是試驗(yàn)室內(nèi)部條件改變（如：不同天、不同分析測試者、不同儀器等）情況下的精密度。 4.34.3重現(xiàn)性（重現(xiàn)性（ReproducibilityReproducibility） 指不同試驗(yàn)室之間的精密度，常用于合作試驗(yàn)研究 (collaborative studies)中的方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化研究。5 5檢測限度（檢測限度（Detection limitDetection limit）檢測限度指的是樣品中的被分析物質(zhì)能夠被檢測到的最低量，通常

7、無需定量。 6 6定量限度（定量限度（Quantitation limitQuantitation limit） 某種分析方法的定量限度是指具有合適準(zhǔn)確性和精密度的條件下，能夠定量測定分析組分的最低限量。它是樣品中含量低的化合物定量分析的參數(shù)，特別適用于雜質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物的測定。 7 7線性（線性（LinearityLinearity） 分析方法的線性是指所得檢測結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（含量）成比例關(guān)系的性能。8 8范圍（范圍（RangeRange） 分析方法的范圍是指在樣品中被分析物的較高濃度(量)和較低濃度(量)之間的區(qū)間、已證實(shí)區(qū)間內(nèi)具有合適的準(zhǔn)確性、精密度、線性。9 9耐用性（耐

8、用性（RobustnessRobustness） 分析方法的耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)匕l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測量能力保持不受影響，可用于說明正常使用時(shí)的可靠性。 分析方法的確證：方法學(xué)分析方法的確證：方法學(xué)（ Q2B ） 1：簡介：簡介m目的：目的：o對每一種分析方法中參數(shù)的確證提供指導(dǎo)和建議對每一種分析方法中參數(shù)的確證提供指導(dǎo)和建議o申報(bào)中建立數(shù)據(jù)的表示方式申報(bào)中建立數(shù)據(jù)的表示方式m注意：注意：o整個(gè)方法學(xué)確證中，必須采用經(jīng)過完全確認(rèn)的、整個(gè)方法學(xué)確證中，必須采用經(jīng)過完全確認(rèn)的、純度已知的參比物質(zhì)來確證。純度已知的參比物質(zhì)來確證。o參比物質(zhì)的純度要求與使用目的應(yīng)一致參比物質(zhì)的純度要求與使用目的應(yīng)一致

9、 2：專屬性：專屬性m鑒別鑒別o通過與參比物（結(jié)構(gòu)相同）比較得到正結(jié)果或負(fù)結(jié)果通過與參比物（結(jié)構(gòu)相同）比較得到正結(jié)果或負(fù)結(jié)果o通過與被測物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)物質(zhì)比較得不到正結(jié)果通過與被測物結(jié)構(gòu)相似或相關(guān)物質(zhì)比較得不到正結(jié)果m含量測定和雜質(zhì)檢查含量測定和雜質(zhì)檢查o色譜方法色譜方法 色譜圖色譜圖(標(biāo)出每一成分標(biāo)出每一成分) 分離度分離度專屬性的標(biāo)準(zhǔn)專屬性的標(biāo)準(zhǔn)o非專屬性方法非專屬性方法 用其他支持性的分析方法來輔助用其他支持性的分析方法來輔助n可得到雜質(zhì)可得到雜質(zhì) 用加入法用加入法n得不到雜質(zhì)得不到雜質(zhì) 強(qiáng)力破壞后用不同方法比較測定峰的純度強(qiáng)力破壞后用不同方法比較測定峰的純度(二級管陣列、質(zhì)譜二級管陣

10、列、質(zhì)譜) 3：線性：線性 原料藥（標(biāo)準(zhǔn)儲備液）原料藥（標(biāo)準(zhǔn)儲備液） 至少至少5個(gè)個(gè) 混勻的制劑組方混勻的制劑組方 濃度系列濃度系列 采集信號采集信號 測定測定 統(tǒng)計(jì)（線性關(guān)系或函數(shù)關(guān)系）統(tǒng)計(jì)（線性關(guān)系或函數(shù)關(guān)系） 4：范圍：范圍m在盡可能大的濃度范圍內(nèi)均能獲得良好的線性、精密度在盡可能大的濃度范圍內(nèi)均能獲得良好的線性、精密度和準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性m最小的規(guī)定范圍：最小的規(guī)定范圍：o對原料藥或制劑的含量測定對原料藥或制劑的含量測定 80120%o對含量均勻度對含量均勻度 70 130%o對溶出度對溶出度 規(guī)定值的規(guī)定值的20%o對雜質(zhì)檢查對雜質(zhì)檢查 為報(bào)告的雜質(zhì)水平至所訂限度的為報(bào)告的雜質(zhì)水平至所訂

11、限度的120%o對已知有異常功效或有毒雜質(zhì)對已知有異常功效或有毒雜質(zhì) 與其與其“水平水平”相當(dāng)相當(dāng)o同法測含量和雜質(zhì)同法測含量和雜質(zhì)(且用且用100%標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品) 從雜質(zhì)量到從雜質(zhì)量到120% 5：準(zhǔn)確性：準(zhǔn)確性m含量測定含量測定原料藥原料藥o用該方法去測已知純度的用該方法去測已知純度的物質(zhì)物質(zhì)o將該法與另一成熟方法比將該法與另一成熟方法比較較o在精密度、線性和專屬性在精密度、線性和專屬性建立后得出建立后得出制劑制劑o用該方法去測按處方量制用該方法去測按處方量制成的混合物（加入已知量成的混合物（加入已知量被測物）被測物）o在制劑中加入已知量主藥在制劑中加入已知量主藥或與另一成熟方法比較或與另

12、一成熟方法比較o在精密度、線性和專屬性在精密度、線性和專屬性建立后得出建立后得出m雜質(zhì)（定量）雜質(zhì)（定量）o在樣品（原料在樣品（原料/制劑）中加入已知量的雜質(zhì)制劑）中加入已知量的雜質(zhì)o無法得到雜質(zhì)無法得到雜質(zhì)/降解物的，與采用其他方法測得的結(jié)果比降解物的，與采用其他方法測得的結(jié)果比較，可以使用原料的響應(yīng)值較，可以使用原料的響應(yīng)值m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o在規(guī)定的線性范圍，對在規(guī)定的線性范圍，對3個(gè)濃度測個(gè)濃度測9個(gè)數(shù)據(jù)來評價(jià)個(gè)數(shù)據(jù)來評價(jià)o回收率或平均值與真值的差異及它們的置信區(qū)間來評價(jià)回收率或平均值與真值的差異及它們的置信區(qū)間來評價(jià) 6：精密度：精密度 含量測定和雜質(zhì)的定量測定均應(yīng)作精密度考察含量測

13、定和雜質(zhì)的定量測定均應(yīng)作精密度考察m重復(fù)性重復(fù)性o在規(guī)定范圍內(nèi)測在規(guī)定范圍內(nèi)測9次（次（3種濃度種濃度/每種重復(fù)每種重復(fù)3次）或次）或o在試驗(yàn)濃度在試驗(yàn)濃度100%時(shí)測時(shí)測6次次m中間精密度中間精密度 確定隨機(jī)事件確定隨機(jī)事件(日期、分析者、儀器等日期、分析者、儀器等)對精密度的影響對精密度的影響m重現(xiàn)性重現(xiàn)性 試驗(yàn)室之間試驗(yàn)室之間m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù) 均應(yīng)報(bào)標(biāo)準(zhǔn)差、相對標(biāo)準(zhǔn)差和置信區(qū)間均應(yīng)報(bào)標(biāo)準(zhǔn)差、相對標(biāo)準(zhǔn)差和置信區(qū)間 7：檢測限度：檢測限度m根據(jù)直觀評價(jià)（用于儀器或非儀器）根據(jù)直觀評價(jià)（用于儀器或非儀器）m根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法） 已知低濃度被測物

14、的信號已知低濃度被測物的信號 3 2 空白樣品的信號空白樣品的信號 1 1m根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差和斜率 檢測限度（檢測限度（DL）= 3.3/s ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（通過空白樣品測背景響應(yīng)值或：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（通過空白樣品測背景響應(yīng)值或Y軸截距）軸截距） s ： 校正曲線的斜率（通過被測物的校正曲線求得）校正曲線的斜率（通過被測物的校正曲線求得）=或m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o檢測限度檢測限度 o檢測限度的測定方法檢測限度的測定方法oDL是由直觀評價(jià)或信噪比得來（報(bào)相關(guān)的色譜圖）是由直觀評價(jià)或信噪比得來（報(bào)相關(guān)的色譜圖）oDL是由計(jì)算或外推法得來的估計(jì)值，則應(yīng)專門對一些已是

15、由計(jì)算或外推法得來的估計(jì)值，則應(yīng)專門對一些已知接近或就在限度上的樣品進(jìn)行分析知接近或就在限度上的樣品進(jìn)行分析ACs=1 =0.1 DL=0.33 s=1/2 =0.3 DL=1.98 8：定量限度：定量限度m直觀評價(jià)直觀評價(jià) 在準(zhǔn)確度和精密度符合要求的前提下，能測得的最小量在準(zhǔn)確度和精密度符合要求的前提下，能測得的最小量m根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法）根據(jù)信噪比（用于有基線噪音的方法） 已知低濃度被測物的信號已知低濃度被測物的信號 10 空白樣品的信號空白樣品的信號 1 m根據(jù)響應(yīng)值和斜率的標(biāo)準(zhǔn)偏差根據(jù)響應(yīng)值和斜率的標(biāo)準(zhǔn)偏差 定量限度（定量限度（QL）= 10/s= ：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（通過一組空白樣品的分析或：響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差（通過一組空白樣品的分析或根據(jù)校正曲線）根據(jù)校正曲線） s ： 校正曲線的斜率校正曲線的斜率m申報(bào)數(shù)據(jù)申報(bào)數(shù)據(jù)o定量的限度定量的限度 o定量限度的測定方法定量限度的測定方法o分析一些已知接近限度或限度上的樣品來證實(shí)分析一些已知接近限度或限度上的樣品來證實(shí) 9：耐用性：耐用性 證實(shí)在某些參數(shù)由微小的變異后，分析方法仍可靠證實(shí)在某些參數(shù)由微小的變異后，分析方法仍可靠 典型例子：典