還原糖_脂肪_蛋白質(zhì)的鑒定

1、一、教學(xué)目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)識(shí)記：記住鑒定所用材料，學(xué)會(huì)選材，明白選材的依據(jù)。理解：通過(guò)預(yù)習(xí)，初步理解實(shí)驗(yàn)的目的、原理和方法步驟，進(jìn)一步歸納出生物組織中可溶性還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定原理。能力目標(biāo)1.學(xué)會(huì)制備生物組織試樣。2.能正確選取鑒定試劑，并能進(jìn)行規(guī)范操作。3.明確觀察對(duì)象，能正確說(shuō)出鑒定過(guò)程中試樣的顏色變化，并能用準(zhǔn)確的語(yǔ)言解釋實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，得出結(jié)論，填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告冊(cè)。4.能熟練使用低倍鏡、制作徒手切片、臨時(shí)裝片，學(xué)會(huì)規(guī)范使用高倍鏡。情感目標(biāo)養(yǎng)成科學(xué)的思考和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，研究問(wèn)題和解決問(wèn)題的好習(xí)慣。二、教學(xué)重點(diǎn)掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。教師可事先配制好已知待測(cè)樣品，如葡萄

2、液、植物油滴、雞蛋蛋白稀釋液。讓學(xué)生按要求加入相應(yīng)試劑，觀察顏色變化，從而讓學(xué)生自己歸納出本實(shí)驗(yàn)的簡(jiǎn)單原理。三、教學(xué)難點(diǎn)·實(shí)驗(yàn)內(nèi)容較多，實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)，必須周密安排，才能按時(shí)完成。四、【1】實(shí)驗(yàn)原理1.可溶性還原糖鑒定原理生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多，有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基，因此叫做還原糖；蔗糖分子內(nèi)沒(méi)有，為非還原糖。實(shí)驗(yàn)中所用的斐林試劑，只能鑒定生物組織中可溶性還原糖，而不能鑒定可溶性非還原糖。斐林試劑為一定濃度的氫氧化鈉和硫酸銅配制而成的淡藍(lán)色Cu (OH) 2沉淀的懸濁液，葡萄糖溶液在加入斐林試劑后，在加熱條件下還原為磚

3、紅色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式為：CH2OH（CHOH）4CHO2Cu（OH）2 CH2OH（CHOH）4COOHCu2O2H2O用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)，溶液變化過(guò)程為：淺藍(lán)色 棕色 磚紅色沉淀2.脂肪鑒定原理蘇丹、蘇丹為一種橙黃色脂肪染色劑，蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色，蘇丹染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅色。3.蛋白質(zhì)鑒定原理將尿素加熱，兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。 雙縮脲在堿性環(huán)境中能和硫酸銅結(jié)合成紅紫色的絡(luò)化物。蛋白質(zhì)分子中含有的肽鏈與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)?！?】材料用具實(shí)驗(yàn)材料：葡萄糖液、蘋果組織液，植物油滴、浸泡過(guò)的花生種子或新

4、鮮的花生種子，雞蛋蛋白稀釋液、黃豆組織液。儀器：徒手切片刀，試管架，試管夾，大小燒杯，小量筒，滴管，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，載玻片，蓋玻片，毛筆，吸水紙，顯微鏡。試劑：斐林試劑，蘇丹染液或蘇丹染液，雙縮脲試劑，體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，蒸餾水?！?】實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)“生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實(shí)驗(yàn)，實(shí)際上是三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)中，如注意以下問(wèn)題，效果則更好。1.在做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中，一是選材最好是白色或近于白色的植物組織，這樣可以避免材料自身顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋。經(jīng)實(shí)驗(yàn)比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。二是斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后

5、方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。2.在做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，切取花生子葉薄片，要求實(shí)驗(yàn)技能較高，不妨改成刮取花生子葉泥制作臨時(shí)裝片，易做，效果又好。3.在做糖和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，鑒定之前需要留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色做比較，這樣可增強(qiáng)說(shuō)服力。五、課時(shí)安排1課時(shí)六、教學(xué)過(guò)程新課引入：我們?cè)诨瘜W(xué)中學(xué)習(xí)過(guò)物質(zhì)的鑒定，其原理是被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反應(yīng)，要么產(chǎn)生沉淀，我們生物學(xué)上也采用此原理，在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是：某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。新課教學(xué)：（具體原理）可溶性還原糖+ 斐林試劑磚紅色沉淀。（水浴加熱）脂肪小顆

6、粒 + 蘇丹染液橘黃色小顆粒。（要顯微鏡觀察）蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑紫色反應(yīng)。（要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液）教師提問(wèn)：在我們高中生物中還學(xué)習(xí)過(guò)那些利用顏色反應(yīng)鑒定物質(zhì)的？用到了那些化學(xué)試劑？由產(chǎn)生了那些特定的顏色呢？學(xué)生回答：略。如果回答不全教師補(bǔ)充：染色（質(zhì)）體+ 醋酸洋紅（或龍膽紫） 紅色（或紫色） 淀粉+碘液 藍(lán)色 DNA+二苯胺試劑 藍(lán)色（水浴加熱） 大腸桿菌+伊紅-美藍(lán) 產(chǎn)生紫色，略帶金屬光澤今天，我們學(xué)習(xí)鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。（一）、還原糖的鑒定1、還原糖的鑒定步驟: 選材： 蘋果：洗凈、去皮、切塊，取5g放如研缽中制備組織樣液 研磨成

7、漿：加石英砂，加5 ml水研磨注入組織樣液2ml 過(guò)濾：將玻璃漏斗插入試管中，漏斗上墊一層紗布加斐林試劑：2ml（由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成，不能分別加入）水浴加熱：煮沸2min觀察溶液顏色變化：淺藍(lán)色棕色磚紅色。結(jié)論：還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過(guò)程中生成磚紅色沉淀無(wú)色藍(lán)色磚紅色加熱2min剛配制斐林試劑2ml組織樣液2ml開(kāi)水 2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn)：還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織，以蘋果、梨為最好。斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)配現(xiàn)用。斐林試劑的配制過(guò)程示意：斐林試劑按一定比例混合均勻斐林試劑甲液（ 0.1 g/ml的 NaOH 溶液） 斐林試劑乙液（ 0.

8、05 g/ml的 CuSO4 溶液）在鑒定尿液中是否含有葡萄糖時(shí)還能用其他那些鑒定方法？學(xué)生回答：還可以用斑氏試劑產(chǎn)生磚紅色沉淀；及糖尿試紙據(jù)糖的由少到多產(chǎn)生淺藍(lán)、淺綠、棕或深棕色。（二）、脂肪的鑒定1、脂肪的鑒定步驟: 取材：花生種子（浸泡3-4h）,將子葉削成薄片 取理想薄片制片 在薄片上滴2-3滴蘇丹染液 去浮色 制成臨時(shí)裝片觀察：先在低倍鏡下，找到材料的脂肪滴，然后，轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察。結(jié)論：細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn)：.脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子，以花生種子為最好(實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h)。該試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲得只含有單層細(xì)胞理想薄片。滴蘇丹染液染液染

9、色2-3min，時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，以防細(xì)胞的其他部分被染色。（三）、蛋白質(zhì)的鑒定1、            蛋白質(zhì)的鑒定步驟：呈色反應(yīng)選材：卵清稀釋液或黃豆（浸泡1-2d） 豆?jié){ 濾液 雙縮脲試劑B液4 5滴雙縮脲試劑A液2ml組織樣液 （或蛋白稀釋液）2ml 紫色無(wú)顏色變化結(jié)論：蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn)：蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白稀釋液)。雙縮脲試劑的使用，一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液)，再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。還可設(shè)計(jì)一只加底物的試管，不加雙縮脲試劑，進(jìn)行空白對(duì)照，說(shuō)明顏色反應(yīng)的引起是蛋白質(zhì)的存在與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)，而不是空氣的氧化引起。七、板書設(shè)計(jì)一、操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)1.往試管中加入試劑時(shí)，要使試管