荷移分光光度法測定卡那霉素

1、    荷移分光光度法測定卡那霉素    】 研究了卡那霉素與茜素紅的荷移反應(yīng)，測定了荷移絡(luò)合物在不同條件下的吸光度值，確定了最佳條件和絡(luò)合物的組成。荷移絡(luò)合物的最大吸收波長是516nm，表觀摩爾吸光系數(shù)為9.5×103L/(mol·cm)，卡那霉素濃度在1.020mg/L范圍內(nèi)與其吸光度值呈線性關(guān)系，檢出限為0.7mg/L。此法用于硫酸卡那霉素的測定，得到滿意結(jié)果。 【關(guān)鍵詞】 分光光度法 荷移反應(yīng) 卡那霉素 茜素紅    Spectrophotomet

2、ric determination of kanamycin sulfate based    ABSTRACT The content of kanamycin sulfate was determined by charge tranfer reactions between kanamycin sulfate and alizarin red. The optimum condition and ratio of the complex component were decided. Beers law was obeyed in the rang

3、e of 1.020mg/L of kanamycin sulfate. The apparent molar absorptivity of complex at 516nm was 9.5×103L/(mol·cm). The relative standard deviation was 2.7% (n=5), the recovery was in the range of 95.5%98.1% and the detection limits was 0.7mg/L. The method was applied to the determination of k

4、anamycin sulfate in tablets with satisfactory results.    KEY WORDS Spectrophotometry; Charge transfer reaction; Kanamycin sulfate; Alizarin red    卡那霉素是一種臨床上常用的氨基糖苷類抗生素。目前，此類抗生素的測定方法有分光光度法1、瑞利散射光譜法2和液相色譜法3，4等，利用荷移光度法測定卡那霉素未見報道。本文研究了卡那霉素與茜素紅發(fā)生荷移反應(yīng)的條件，建立了荷移光度法測

5、定卡那霉素的新方法，并用于硫酸卡那霉素的測定，得到滿意結(jié)果。    1 實驗部分    1.1 主儀器與試劑    722型分光光度計為上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；PHS3T(0.01級)數(shù)顯酸度計為上海天達(dá)儀器有限公司產(chǎn)品；AB204N電子分析天平由MettlerToledo Group生產(chǎn)。    卡那霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)由中國藥品生物制品檢定所提供。稱取卡那霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.0584g配制濃度為1.0×10-3mol/L的儲備液

6、，使用時稀釋。茜素紅(AR)由上海化學(xué)試劑采購供應(yīng)站提供，配置茜素紅溶液濃度為2.8×10-4mol/L。    1.2 實驗方法    移取適量(20mg/l)的卡那霉素溶液于10ml比色管中，加茜素紅溶液4.0ml，搖勻后，以試劑空白作參比，用1cm比色管在516nm處測量吸光度。    2 結(jié)果與討論    2.1 吸收光譜    按實驗方法1.2，分別測定茜素紅和卡那霉素茜素紅絡(luò)

7、合物的吸光度值，荷移絡(luò)合物的最大吸收波長為516nm，茜素紅的最大吸收波長為423nm(圖1)。    2.2 反應(yīng)時間的影響    1：茜素紅(2.8×10-4mol/L)；    2：茜素紅 卡那霉素(1.0×10-3mol/L)    圖1    吸收光譜    在7支10ml比色管中分別加入相同體積的茜素紅4.0ml和卡那霉素(C

8、=1.0×10-3mol/L)2.0ml，搖勻，分別放置不同時間，測吸光度值。結(jié)果表明，荷移絡(luò)合物吸光度值基本不隨時間變化，并且可以穩(wěn)定24h以上，因此配制好溶液后可直接測定。    2.3 溫度的影響    在10ml具塞比色管中加入茜素紅與卡那霉素溶液，振蕩搖勻，放置于不同溫度的水浴鍋中，加熱30min。取出后以流水冷卻使反應(yīng)終止，分別測定其吸光度值。結(jié)果表明，吸光度值隨著溫度變化的幅度不大，所以選擇室溫下測定。       

9、60;2.4 溶液酸度的影響    在混合體系分別加入不同量0.1mol/L的氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液，發(fā)現(xiàn)隨著酸堿的加入，吸光度不斷減小。實驗條件下測得絡(luò)合物溶液的pH為6.46時效果最好。    2.5 試劑用量的影響    在11支具塞比色管中分別加入1.0ml的卡那霉素(C=1.0×10-3mol/L)和不同體積的茜素紅C=2.8×10-4mol/L)溶液，另取1支比色管加入2.0ml卡那霉素溶液和1.0ml茜素紅，振蕩搖勻后測絡(luò)合物的吸光度值。結(jié)果

10、表明，隨著茜素紅體積的加大，絡(luò)合程度不斷加強(qiáng)，當(dāng)卡那霉素的量大于茜素紅的體積時，吸光度值降低幅度最大。因此，茜素紅用量必須大于卡那霉素的量才能完全絡(luò)合。本試驗選擇茜素紅用量為4.0ml。    2.6 溶劑的影響    分別用40%的甲醇，75%的乙醇作溶劑配置濃度為C=1.0×10-3mol/L的卡那霉素溶液，比較采用水、甲醇和乙醇三種不同溶劑時絡(luò)合物的吸光度值，結(jié)果表明，甲醇作溶劑不理想，乙醇與水作溶劑時絡(luò)合物的吸光度值變化不大，所以選重蒸水作溶劑。2.7 絡(luò)合物組成的測定  &#

11、160; 茜素紅與卡那霉素發(fā)生荷移反應(yīng)，茜素紅是電子受體，卡那霉素是電子給體，用等摩爾連續(xù)變化法確定其荷移絡(luò)合物的組成比為11。結(jié)果見圖2。    2.8 工作曲線    在最佳條件下繪制工作曲線，卡那霉素濃度在1.020mg/L范圍內(nèi)與吸光度成線性關(guān)系，其線性回歸方程為A=0.62C-0.0036，相關(guān)系數(shù)r=0.9981，表觀摩爾吸光系數(shù)為9.5×103L/(mol·cm)。當(dāng)卡那霉素濃度為20mg/L時，5次測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%。   

12、60;3 樣品測定    取標(biāo)示量為0.1g/ml的硫酸卡那霉素注射液1支(2ml)，在100ml容量瓶中定容，再取該溶液10ml于100ml的容量瓶中，稀釋至刻度備用。    取適量上述試樣溶液于10ml的比色管中，加茜素紅4.0ml，用重蒸水稀釋至刻度，搖勻后以試劑空白為參比測吸光度，同時用標(biāo)準(zhǔn)加入法作回收實驗，測量結(jié)果滿意(表1)。 表1    樣品測定結(jié)果【參考文獻(xiàn)】1 江虹，劉紹璞，胡小莉，等. 依文思藍(lán)氨基糖苷類抗生素的顯色反應(yīng)及其分析應(yīng)用J. 分析化學(xué)，2003，31(9)：10532 胡小莉，劉紹璞，羅紅群，等. 曲利