藥養(yǎng)胃散對(duì)大鼠胃腸粘膜中前列腺素生長抑素胃動(dòng)素含量的影響(一)

1、藥養(yǎng)胃散對(duì)大鼠胃腸粘膜中前列腺素生長抑素胃動(dòng)素含量的影響(一)    摘要：目的：從生物分子學(xué)方面探討?zhàn)B胃散的治療機(jī)理，觀察用藥后胃腸粘膜中前列腺素(PG)、生長抑素(SS)、胃動(dòng)素(MTL)的變化規(guī)律。方法：SD大白鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，消炎痛損傷胃粘膜后，再給予中藥養(yǎng)胃散10d，用放射免疫法測(cè)定胃、腸粘膜中的PG、SS、MTL的變化規(guī)律。結(jié)果：養(yǎng)胃散能明顯增加消炎痛損傷后的胃腸粘膜中的PG(249.42±89.35ng·L-1)、SS(2.02±0.83ng·L-1)、MTL(98.82±29.31ng

2、83;L-1)的含量，與消炎痛組相比有顯著性差異(P0.01)。結(jié)論：中藥養(yǎng)胃散能增加胃腸粘膜內(nèi)PG、SS、MTL的分泌，是其增強(qiáng)胃粘膜屏障功能的機(jī)理之一。 Effects of Yangwei Powder on Prostaglandin, Somatostatin and Motilin Content in Rat Gastrointestinal Mucosa Abstract:Yangwei Powder is an effective formula for chronic gastritis and peptic ulcer. To explore its therapeuti

3、c mechanism at the level of molecular biology, the contents of prostaglandin (PG), somatostatin (SS) and motilin (MTL) in rat gastrointestinal mucosa were detected by radioimmunoassay. Thirty SD rats were allocated to three groups: normal control group (n=10), indomethacin group (n=10) and Yangwei P

4、owder group (n=10). Rat model with gastrointestinal mucosal injury was induced by administration of indomethacin for 2 days. Yangwei& nbsp;Powder was given for 10 days after the establishment of rat model. The results showed that Yangwei Powder significantly increased the contents of PG (249.42&

5、#177;89.35?ng·L-1), SS(2.02±0.83?ng·L-1) and MTL (98.82±29.31?ng·L-1), the differences being significant (P0.01) as compared with indomethacin group. It is indicated that increase of PG, SS and MTL secretion may be one of the mechanisms of Yangwei Powder for the improvement

6、of barrier action of gastrointestinal musoca. Key words: GASTRIC MUCOSA/drug effects; YANGWEI POWDER/ther. use;GASTROINTESTINAL HORMONES/analysis；RATS 我們以健脾、益氣、養(yǎng)胃、活血化瘀為原則組成養(yǎng)胃散方，用于治療慢性胃炎、消化性潰瘍等常見的胃腸疾病，臨床用藥已10余年時(shí)間，收到了良好的治療效果。為了從胃腸激素方面闡明養(yǎng)胃散在保護(hù)粘膜屏障方面的作用，從分子生物學(xué)方面論闡述養(yǎng)胃散的治療機(jī)理。我們以大白鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，測(cè)定養(yǎng)胃散灌胃后，胃腸粘膜中前列腺素

7、(PG)、生長抑素(SS)、胃動(dòng)素(MTL)的含量。 1實(shí)驗(yàn)材料 1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用SD大白鼠，由第一軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。共30只，雌雄各半，體重120240g/只。 1.2實(shí)驗(yàn)用藥及劑量實(shí)驗(yàn)用單味中藥購于廣東省藥材公司。養(yǎng)胃散的處方為：干姜2g、丹參10g、黨參10g、石斛10g、炙甘草3g、九里香10g、山楂6g，各藥用水浸泡后，加水煎至50mL。消炎痛的用藥劑量按標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物等效劑量折算法，計(jì)算出大白鼠用量，即每100g體重用中藥養(yǎng)胃散1mL，消炎痛0.02mg。 1.3PG、SS、MTL標(biāo)準(zhǔn)放免藥盒PG、SS、MTL各標(biāo)準(zhǔn)藥盒分別購于：北京東亞放免技術(shù)研究所，海軍放免技術(shù)中心和解放軍

8、總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所。 2實(shí)驗(yàn)方法 2.1動(dòng)物分組及各組處理方法 實(shí)驗(yàn)用30只大鼠禁食12h，按體重隨機(jī)分為3組，分別為養(yǎng)胃散(消炎痛加養(yǎng)胃散組)，消炎痛組(消炎痛損傷組)和空白對(duì)照組。每組10只。 養(yǎng)胃散組：按規(guī)定劑量給予消炎痛灌胃，每日2次，共2d；第3天起給予養(yǎng)胃散灌胃，每日2次，共10d。 消炎痛組：按中藥組相同方法和劑量給予消炎痛，第3天起給予等劑量的生理鹽水灌胃，每日2次，共10d。 空白對(duì)照組：給予相同劑量的生理鹽水灌胃，每日2次，共12d。 2.2標(biāo)本采集 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，禁食12h，處死，立即剖腹，分別留取胃粘膜(胃竇部)、十二指腸末段粘膜各約0.5cm×0.5cm

9、，立即置于液氮內(nèi)凍存?zhèn)溆谩?2.3PG、SS、MTL測(cè)定及計(jì)算方法 PG：取胃竇粘膜稱量后，置于微型勻漿器中，加無水乙醇0.1mL研磨，再加生理鹽水0.9mL，充分研磨制成勻漿，測(cè)前4離心(3500r/min，15min)，取上清液。以B/T(標(biāo)準(zhǔn)管計(jì)數(shù)/總計(jì)數(shù))計(jì)算NSB(非特異性結(jié)合率)、S0(標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照)。結(jié)合百分率，以B/B0即(標(biāo)準(zhǔn)管計(jì)數(shù)-空白管計(jì)數(shù))/(零標(biāo)準(zhǔn)管計(jì)數(shù)-零空白管計(jì)數(shù))計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)及待測(cè)樣品結(jié)合百分率，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線查出樣品值。 SS、MTL標(biāo)本處理方法相同，計(jì)算方法同PG。即取十二指腸粘膜標(biāo)本稱量后，加生理鹽水12mL置于水浴鍋中煮沸3min，冷卻后加1mol/L冰醋酸0.5

10、mL，于勻漿器中制成勻漿，再用1mol/L的NaOH0.5mL中和，離心(3000r/min、30min)取上清液。 2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以(±s)表示，組間均數(shù)差異采用t檢驗(yàn)。 3結(jié)果 各組胃腸激素測(cè)定結(jié)果見表1。消炎痛大幅度地降低了粘膜內(nèi) PG(P0.001)、生長抑素(P0.05)、胃動(dòng)素(P0.01)的含量。中藥養(yǎng)胃散則可對(duì)抗之，使其分泌增多。 表1各組胃腸激素測(cè)定結(jié)果(±s) PG/(ng·L-1) SS/(ng·L-1) MTL/(ng·L-1) 養(yǎng)胃散 249.42±89.35 2.02±0.83 98.82&

11、#177;29.31 消炎痛 28.81±5.63* 1.79±0.23* 37.68±12.5* 空白對(duì)照組 197.2±38.4 2.96±0.87 124.0±45.2 *與空白對(duì)照組比P0.05，*P0.01，*P0.001 4討論 胃粘膜是PG主要合成場(chǎng)所之一，Robert報(bào)告了PG可以抑制胃酸分泌，減輕由消炎痛等刺激物質(zhì)引起的粘膜損傷，并觀察到受損傷的粘膜1h后即有遷移的上皮覆蓋1。因此，前列腺素能削弱攻擊因子對(duì)粘膜的損傷，達(dá)到保護(hù)粘膜屏障的作用。SS存在于胃粘膜的D細(xì)胞中，以胃竇和胃體部分含量最高，可視為胃粘膜的一種局部

12、防御因子，其作用機(jī)理可能是SS與其受體結(jié)合，抑制腺苷酸活化酶的活性，降低了細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度；SS能抑制胃酸分泌和可以致肥大細(xì)胞釋放組織胺2。李鐵等人發(fā)現(xiàn)，SS能防止損傷細(xì)胞內(nèi)基含量的減少和GSH-過氧化酶活性的降低，提高細(xì)胞清除自由基的能力。MTL主要由十二指腸遠(yuǎn)端及空腸粘膜中M細(xì)胞分泌，是一種肽類激素，主要功能是影響胃及腸道的動(dòng)力，與消化間期綜合肌電(interdigestive myoelectric complex,IMC)密切相關(guān)，具有腸道“清道夫”的功效。還能刺激胃蛋白酶、胰液的分泌，有助于食物消化3，4。 養(yǎng)胃散具有健脾、養(yǎng)胃、補(bǔ)中、益氣功效，臨床療效顯著。但從更深入的分子生物學(xué)

13、角度了解甚少，為探討?zhàn)B胃散的治療作用與胃腸激素方面的內(nèi)在聯(lián)系，我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)證實(shí)消炎痛口服后，不同程度地降低了粘膜中PG、SS、MTL的含量，而養(yǎng)胃散能對(duì)抗消炎痛的這種作用，增強(qiáng)了粘膜屏障功能，因此，對(duì)損傷的粘膜起到了重要的保護(hù)作用，這可能是養(yǎng)胃散能明顯改善腹痛、腹脹、增進(jìn)食欲的內(nèi)在機(jī)理之一。 養(yǎng)胃散為復(fù)方制劑，其作用機(jī)理可能是多方面的，除本組觀察到的與胃腸道的激素關(guān)系外，其他方面的作用有待進(jìn)一步研究。 參考文獻(xiàn)： 1潘國宗.現(xiàn)代胃腸病學(xué)M.北京：科學(xué)出版社，1994.34 2Christofides N D. MotilinM.ln:Gut hormones.2nd Edition.London:Churchill Livingstone, 1981.273 3Nillson B I. Relationship betwee