高通量篩選 定量PCR微陣列 人肝細(xì)胞癌 雙向凝膠電泳 基質(zhì)

1、 肝細(xì)胞癌論文：抗肝癌及逆轉(zhuǎn)MDR中藥成分多靶點篩選方法建立的實驗研究【中文摘要】在轉(zhuǎn)錄水平上建立抗肝癌及逆轉(zhuǎn)MDR中藥的多靶點高通量篩選方法。方法采用體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞BEL-7402及其耐5-氟尿嘧啶細(xì)胞Bel-FU,MTT法檢測Bel-FU的多藥耐藥性、5種中藥成分的(槲皮素、EGCG、老鼠簕生物堿A、乙酰老鼠簕生物堿A、龍血素B)細(xì)胞敏感性以及藥物濃度依賴的逆轉(zhuǎn)耐藥性;選擇與肝癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)途徑的42個功能基因,采用實時定量PCR微陣列技術(shù)檢測各中藥成分作用于耐藥細(xì)胞前后的差異表達(dá)基因,實時定量PCR檢測槲皮素、EGCG、乙酰老鼠簕生物堿A分別作用于Bel-FU后H-ras、MDR1基

2、因表達(dá),以驗證微陣列結(jié)果。結(jié)果Bel-FU對5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、長春新堿、阿霉素、柔紅霉素的耐藥指數(shù)分別為:89.6、3.4、37.2、16.5、3.7倍。槲皮素、EGCG、老鼠簕生物堿A、乙酰老鼠簕生物堿A、龍血素B對Bel-FU的IC50值分別為193.9M、1230.8M、507.8M、244.9M、163.7M,對Bel-FU的IC10值分別為58.2M、159.5M、75.3M、64.7M、25.8M。43.6、87.2、130.8M的EGCG對.【英文摘要】To establish a high throughput and multi-target method for sc

3、reening traditional Chinese medicine as to anti-hepatocellular carcinoma and reversing MDR in the course of genetic transcription .Methods Human hepatocellular carcinoma cell line Bel-7402 and 5-FU resistant cell line Bel-FU were cultured in vitro. The multidrug resistance(MDR) of Bel-FU ,drug sensi

4、tivity of 5 kinds of traditional Chinese medicine(quercetin,EGCG,IA , ACO-IA,loureirin B)to Bel-FU and their dose-dependen reversal effec.【關(guān)鍵詞】肝細(xì)胞癌 多藥耐藥 高通量篩選 定量PCR微陣列 人肝細(xì)胞癌 雙向凝膠電泳 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜 蛋白質(zhì)印跡【英文關(guān)鍵詞】hepatocellular carcinoma Multidrug Resistance high throughput screening qPCR microarray HCC MDR 2-DE MALDI-TOF-MS Western blot【目錄】抗肝癌及逆轉(zhuǎn)MDR中藥成分多靶點篩選方法建立的實驗研究主要英文縮寫表及中英文對照表4-6前言6-12第一部分 定量 PCR 微陣列技術(shù)檢測中藥逆轉(zhuǎn)肝癌 MDR 差異基因的實驗研究12-56中文摘要12-14ABSTRACT14-17引言17-19材料與方法19-27結(jié)果27-45討論45-51參考文獻(xiàn)51-56第二部分 基于2-DE 與質(zhì)譜技術(shù)的中藥逆轉(zhuǎn)肝癌MDR 蛋白質(zhì)組研究56-92中文摘要56-57ABSTRACT57-59引言59-60材料與方法60-6