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1、鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵一、實驗?zāi)康?. 學(xué)習(xí)確定實驗條件的方法,2. 掌握鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵的方法原理;3. 掌握721型分光光度計的使用方法,并了解此儀器的主要構(gòu)造。二、實驗原理1. 本試驗測定鐵含量的原理:根據(jù)朗伯比耳定律:A=bc。當(dāng)入射光波長及光程b一定時,在一定濃度范圍內(nèi),有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。只要繪出以吸光度A為縱坐標(biāo),濃度c為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,測出試液的吸光度,就可以由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得對應(yīng)的濃度值,測出鐵的含量。2.鄰二氮菲法簡介:鄰二氮菲為顯色劑,選擇測定微量鐵的適宜條件和測量條件,并用于水中鐵的測定。在pH=29的范圍內(nèi),鄰二氮菲與二價鐵生成穩(wěn)
2、定的桔紅色配合物(Fe(phen)3)2+)。測定時控制溶液的酸度為pH5較為適宜,用鄰二氮菲可測定試樣中鐵的總量。三、儀器試劑1. 儀器:721型分光光度計;1cm吸收池;10mL 吸量管;50mL 容量瓶(7個)。2. 試劑:20gmL-1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液;0.1%鄰二氮菲水溶液;10%鹽酸羥胺溶液;1molL-1乙酸鈉溶液;1 molL-1NaOH溶液。四、實驗步驟1.吸收曲線的繪制容量瓶(50mL) 20ug/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)5mL, 1.00mL 10%鹽酸羥胺搖勻, 3.00 mL 0.15%鄰二氮菲溶液 5.0 mLNaAc溶液 定容以水參比在440560 nm間,每隔10 nm測量一次吸光
3、度 以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制吸收曲線,選擇測量的適宜波長。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作在6支50mL比色管中,分別加入0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL 20g/mL鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液,再加入1.00mL 10%鹽酸羥胺溶液,經(jīng)2min后,再各加入3.0mL 0.1%鄰二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液,以水稀釋至刻度,搖勻。在510nm處,以試劑空白為參比,測吸光度A。3未知液中鐵含量測定吸取5mL未知液代替標(biāo)準(zhǔn)液,其他步驟同上。測定并記錄吸光度。由繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線查出Fe2+離子濃度。五、實驗數(shù)據(jù)記錄與處理1.吸收曲線的繪制波長(nm)吸光度A波長(nm)吸光度A5700.0
4、485000.4305500.1334900.4155300.3494700.3885200.4224500.3275100.4464300.278根據(jù)上面數(shù)據(jù),作得標(biāo)準(zhǔn)曲線圖如下: 由作圖可知,最大吸收波長為510nm。2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 試液編號標(biāo)準(zhǔn)溶液的量/ mL標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度/(ug/mL)總含鐵量/吸光度A1000022.00.8400.20334.01.6800.40446.02.41200.60958.03.21600.808610.04.02001.011根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制出Fe2+離子濃度吸光度曲線圖,如下3. 未知液中鐵含量測定測得未知液 A=0.416 由表得 C(Fe2+) =1.64 g/mL 。 所以,未知液濃度 C未知液 = C(Fe2+)*50/5 =16.4 g/mL。小結(jié):通過實驗數(shù)據(jù)可知,最適宜波長為=510nm;最終由標(biāo)準(zhǔn)曲線得未知液鐵的含量為:16.4 g/mL。六、實驗誤差分析實
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