食品中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)學(xué)習(xí)資料

1、食品中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性一、生物學(xué)特性（二）、培養(yǎng)特性1、需氧，最適生長(zhǎng)3032.2、在肉湯中混濁生長(zhǎng)，有菌膜或壁環(huán)，振搖易乳化。3、在普通瓊脂平板上，菌落灰白色,不透明，邊緣不整齊，表面粗糙，呈毛玻璃狀或白蠟狀。 4 4、在血平板上，菌落呈淺灰色，不透明，、在血平板上，菌落呈淺灰色，不透明，似白色毛玻璃狀，有溶血環(huán)。似白色毛玻璃狀，有溶血環(huán)。5 5、在甘露醇卵黃多粘菌素平板上，菌落、在甘露醇卵黃多粘菌素平板上，菌落呈粉紅色（表示不發(fā)酵甘露醇）呈粉紅色（表示不發(fā)酵甘露醇）, ,周圍周圍有粉紅色的暈（表示產(chǎn)生卵磷脂酶）有粉紅色的暈（表示產(chǎn)生卵磷脂酶）（三）、生化反應(yīng)（三）、生化反應(yīng)

2、1、能分解GLU，麥芽糖，蔗糖，水楊苷，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。2、不分解乳糖，甘露醇，阿拉伯糖，山梨醇，木糖3、H2S（-），尿素酶試驗(yàn)（-）卵磷脂酶（+），VP試驗(yàn)（+），液化明膠，胨化中乳。（三）、生化反應(yīng)（三）、生化反應(yīng) 麥芽糖：陽(yáng)性（三）、生化反應(yīng)（三）、生化反應(yīng) 甘露醇：陰性（三）、生化反應(yīng)（三）、生化反應(yīng) 木糖：陰性（三）、生化反應(yīng)（三）、生化反應(yīng) 尿素酶試驗(yàn)：陰性未接種接種（四）、抵抗力（四）、抵抗力1 1、耐熱；、耐熱；2 2、對(duì)抗菌素的敏感性。、對(duì)抗菌素的敏感性。 二、流行病學(xué)二、流行病學(xué)（一）、細(xì)菌分布 蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛，常存在于土壤、灰塵和污水中，植物和許多生熟食品中常

3、見。已從多種食品中分離出該菌，包括肉、乳制品、蔬菜、魚、土豆、糊、醬油、布丁、炒米飯以及各種甜點(diǎn)等。 在美國(guó)，炒米飯是引發(fā)蠟樣芽胞桿菌嘔吐型食物中毒的主要原因；在歐洲大都由甜點(diǎn)、肉餅、色拉和奶、肉類食品引起；在我國(guó)主要與受污染的米飯或淀粉類制品有關(guān)。二、流行病學(xué)二、流行病學(xué)（一）、細(xì)菌分布（一）、細(xì)菌分布 以前調(diào)查各種食品514件，發(fā)現(xiàn)本菌：日本1641件中有193件陽(yáng)性，陽(yáng)性率11.8%11.8%；國(guó)內(nèi)480件中有221件陽(yáng)性，陽(yáng)性率46%46%；乳制品陽(yáng)性率77%77%；水果、干果陽(yáng)性率8.1%8.1%；肉制品陽(yáng)性率26%26%。（二）蠟樣芽胞桿菌的食物中毒的一般情況（二）蠟樣芽胞桿菌的食

4、物中毒的一般情況1、季節(jié)性強(qiáng)：（610月）夏秋季為高峰期2、中毒發(fā)病率高：60%100%60%100%，集團(tuán)中爆發(fā)，與葡萄球菌相似3、中毒與性別、年齡無關(guān)：4、潛伏期長(zhǎng)短與中毒癥狀相關(guān)： 嘔吐癥 0.55h0.55h，發(fā)病 腹瀉 8h8h后后5、污染源：主要泥土，灰塵，通過昆蟲，不潔用具，工作人員傳播，原料也有.6、常見中毒食品：乳類食品，肉類，米飯，淀粉類食品，甜點(diǎn)心，涼拌蔬菜，水果，色拉。 國(guó)內(nèi)：與淀粉質(zhì)食品相關(guān)多，7、臨床癥狀：（1）嘔吐型（2）腹瀉型三、微生物檢驗(yàn)三、微生物檢驗(yàn) （一）檢驗(yàn)程序（一）檢驗(yàn)程序 檢樣檢樣 稀釋處理稀釋處理鏡檢鏡檢 平板分離平板分離菌落計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù) 培養(yǎng)特性

5、觀察培養(yǎng)特性觀察 報(bào)告結(jié)果報(bào)告結(jié)果 生化試驗(yàn)生化試驗(yàn) 證實(shí)試驗(yàn)證實(shí)試驗(yàn) 三、微生物檢驗(yàn)三、微生物檢驗(yàn)（二）操作步驟： 1、菌數(shù)測(cè)定 以無菌操作將檢樣25g(ml),用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-110-5的稀釋液。取各稀釋液0.1ml，接種在兩個(gè)選擇性培養(yǎng)基甘露醇卵黃多孢菌素（MYP）瓊脂培養(yǎng)基上，用L形涂棒涂布于整個(gè)表面，置361恒溫箱培養(yǎng) 12-20h后選取適當(dāng)菌落數(shù)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，蠟樣芽胞桿菌在此培養(yǎng)基上的菌落為粉紅色（表示不發(fā)酵甘露醇），周圍有粉紅色的暈（表示產(chǎn)生卵磷脂酶）。計(jì)算后從中選取5個(gè)此種菌落做證實(shí)試驗(yàn)。三、微生物檢驗(yàn)三、微生物檢驗(yàn) 操作步驟：2、分離試驗(yàn) 取檢樣或稀釋

6、液劃線分離培養(yǎng)于選擇性培養(yǎng)基（MYP）上，置37培養(yǎng)12-20h，挑取可疑的蠟狀芽胞桿菌菌落接種于肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂作成純培養(yǎng)，然后做證實(shí)試驗(yàn)。3 證實(shí)試驗(yàn)（1）鏡檢觀察形態(tài)（2）培養(yǎng)特性（3）生化性狀及分型三、微生物檢驗(yàn)三、微生物檢驗(yàn) （三）結(jié)果報(bào)告 根據(jù)證實(shí)為蠟狀芽胞桿菌的菌落數(shù)計(jì)算出該平板上的菌落數(shù)，然后乘以稀釋倍數(shù)，即得每g(ml)樣品中所含蠟狀芽孢桿菌數(shù)。如MYP平板上的可以菌落為25個(gè)，取5個(gè)鑒定，證實(shí)為四個(gè)，乘上稀釋倍數(shù)（104），再乘上1g(ml)檢樣數(shù)（取的是0.1ml樣)，則N=25*4/5*104*10=2*106 報(bào)告每個(gè)g(ml)檢樣中含蠟狀芽胞桿菌的數(shù)量（個(gè)/個(gè)g(ml)結(jié)果報(bào)告或MYPMYP檢樣25克生化試驗(yàn)菌落計(jì)數(shù)0.1ml鏡檢鏡檢挑可疑菌落血平板或血平板或營(yíng)養(yǎng)瓊脂營(yíng)養(yǎng)瓊脂或思考題思考題 1、引起蠟樣芽胞桿菌食物中毒的常見食物有哪些，什么條件下可引起蠟樣芽胞桿菌食中毒。 2、蠟樣芽胞桿菌的形態(tài)與染色特性如何。 3、蠟樣芽胞桿菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂和甘露醇卵黃多粘菌瓊脂平