[醫(yī)療質(zhì)量控制方案]醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)ICS

1、20XX年XX月（醫(yī)療質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)）醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)ICS多年的企業(yè)咨詢跋問經(jīng)瞼，經(jīng)過實(shí)戰(zhàn)瞼證可以落地執(zhí)行的卓越管理方案,值得您下載:ICS中華人民共和國家標(biāo)GB18466-2005甌幡水污染!相瞅標(biāo)準(zhǔn)Dischargestandardofwa terpollutantsformedica （organization（發(fā)布稿）2005 - 07 -27 發(fā)布 2006 - 01 - 01 實(shí)施家 環(huán)境保 護(hù)總局家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局目錄1范圍12規(guī)范性引用文件13術(shù)語和定義14技術(shù)內(nèi)容14.1 污水排放要求14.2 廢氣排放要求44.3 污泥控制和處置45處理工藝和消毒要求46取樣和監(jiān)

2、測56.1 污水取樣和監(jiān)測56.2 大氣取樣和監(jiān)測76.3 污泥取樣和監(jiān)測77標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施和監(jiān)督7附錄A8附錄B15附錄C19附錄D21附錄E23附錄F25刖百為貫徹中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法、中華人民共和國水污染防治法、中華人 民共和國海洋環(huán)境保護(hù)法、中華人民共和國大'污染防治法、中華人民共和國傳染 病防治法，加強(qiáng)對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水、污水處理站廢氣、污泥排放的控制和管理，預(yù)防和 控制傳染病的發(fā)生和流行，保障人體健康，維護(hù)良好的生態(tài)環(huán)境，制定本標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水及污水處理站產(chǎn)生的廢氣和污泥的污染物控制項(xiàng)目及其排 放限值、處理工藝和消雷要求、取帶口監(jiān)測和標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施W監(jiān)督等。本標(biāo)準(zhǔn)自實(shí)

3、施之日起，代替GB8978-1996污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污 染物排放標(biāo)準(zhǔn)部分，且取代GB18466-2001醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放要求。新、擴(kuò)、改醫(yī) 療機(jī)構(gòu)自本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之日起按本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施管理，現(xiàn)有醫(yī)療機(jī)構(gòu)于2007年12月31日前 達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)要求。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C、附錄D、附錄E和附錄F為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。本標(biāo)準(zhǔn)由國家環(huán)境保護(hù)總局科技標(biāo)準(zhǔn)司提出且歸口。本標(biāo)準(zhǔn)委托市環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院和中國疾病預(yù)防控制中心起草。本標(biāo)準(zhǔn)由國家環(huán)境保護(hù)總局2005年07月27日批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)由國家環(huán)境彳耕總局負(fù)責(zé)解釋。醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水、污水處理站產(chǎn)生

4、的廢氣、污泥的污染物控制項(xiàng)目及其排放 和控制限值、處理工藝和消毒要求、取樣和監(jiān)測和標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施和監(jiān)督。本標(biāo)準(zhǔn)適用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水、污水處理站產(chǎn)生污泥及廢氣排放的控制，醫(yī)療機(jī)構(gòu)建設(shè)項(xiàng) 目的環(huán)境影響評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)設(shè)施設(shè)計(jì)、竣工驗(yàn)收及驗(yàn)收后的排放管理。當(dāng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的辦公 區(qū)、非醫(yī)療生活區(qū)等污水和病區(qū)污水合流收集時(shí)，其綜合污水排放均執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)。建有分流 污水收集系統(tǒng)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，躬E病區(qū)生活區(qū)污水排放執(zhí)行GB8978的關(guān)聯(lián)規(guī)定。2規(guī)范性引用文件下列標(biāo)準(zhǔn)和本標(biāo)準(zhǔn)表5、表6所列分析方法標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范所含條文于本標(biāo)準(zhǔn)中被引用即構(gòu) 成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文，和本標(biāo)準(zhǔn)同效。當(dāng)上述標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范被修訂時(shí)，應(yīng)使用其最新版本。GB8978污

5、水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)GB3838地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB3097海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB16297大氣污染物綜合排放標(biāo)準(zhǔn)HJ/T55大氣污染物無組織排放監(jiān)測技術(shù)導(dǎo)則HJ/T91地表水和污水檢助鼓術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。3.1 醫(yī)療機(jī)構(gòu) medicalorganization指從事疾病診斷、治療活動(dòng)的醫(yī)院、衛(wèi)生院、療養(yǎng)院、門診部、診所、衛(wèi)生急救站等。3.2 醫(yī)用幾構(gòu)污水 medicalorganizationwastewater指醫(yī)療機(jī)構(gòu)門診、病房、手術(shù)室、各類檢驗(yàn)室、病理解剖室、放射室、洗衣房、太平間 等處排出的診療、生活及糞便污水。當(dāng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)其他污水和上述污水混合排出時(shí)壹律視為醫(yī) 療機(jī)構(gòu)污水。

6、3.3 污泥 sludge指醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水處理過程中產(chǎn)生的柵渣、沉淀污潮口化糞池污泥。3.4 廢氣 wastegas指醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水處理過程中產(chǎn)生的有害氣體。4技術(shù)內(nèi)容4.T污水排放要求4.L1傳染病和結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放執(zhí)行表1的規(guī)定。4.1.2 縣級(jí)及縣級(jí)之上或20張床位及之上的綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放執(zhí)行表2 的規(guī)定。直接或間接排入地表水體和海域的污水執(zhí)行排放標(biāo)準(zhǔn)，排入終端已建有正常運(yùn)行城 鎮(zhèn)二級(jí)污水處理廠的下水道的污水，執(zhí)行預(yù)處理標(biāo)準(zhǔn)。4.1.3 級(jí)以下或20張床位以下的綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其他所有醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水經(jīng)消毒處理后方 可排放。4.1.4 禁止向GB3838I、D類水域和III

7、類水域的飲用水保護(hù)區(qū)和游泳區(qū),GB3097壹、二類 海域直接排放醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水。4.1.5 帶傳染病房的綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)，應(yīng)將傳染病房污水和非傳染病房污水分開。傳染病房的 污水、糞便經(jīng)過消毒后方可和其他污水合且處理。4.1.6 采用含氯消毒劑進(jìn)行消毒的醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水,若直接排入地表水體和海域，應(yīng)進(jìn)行脫氯 處理，使總余氯小于0.5mg/L。表1傳染病、結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放限值（日均值）序號(hào)控制項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)值1糞大腸菌群數(shù)(MPN/L )1002腸道致病菌不得檢出3腸道病毒不得檢出4結(jié)核桿菌不得檢出5PH6-96化學(xué)需氧量(COD )濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)60607生化需氧量(BO

8、D )濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)20208懸浮 (SS)濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)20209氨氮(mg/L)1510動(dòng)植物油(mg/L )511石油類(mg/L)512陽離子表白活性劑(mg/L )513色度(稀釋倍數(shù))3014揮發(fā)酚(mg/L)0.515總氟化物(mg/L )0.516總汞(mg/L)0.0517總鎘(mg/L)0.118總銘(mg/L)1.519六價(jià)銘(mg/L)0.520總礎(chǔ)(mg/L)0.521總鉛(mg/L)1.022總銀(mg/L)0.523總 A(Bq/L)124總 B(Bq/L)1025總余氯i)2 ( mg/L )(直接排入

9、水體的要求)0.5注：1)采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為：消毒接觸池的接觸時(shí)間“.5h ,接觸池出口總余氯6.5-10mg/L。2 )采用其他消毒劑對(duì)總余氯不作要求。表2綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放限值(日均值)序號(hào)控制項(xiàng)目排放標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理標(biāo)準(zhǔn)1糞大腸菌群數(shù)(MPN/L )50050002腸道致病菌不得檢出3腸道病毒不得檢出4PH6-96-95化學(xué)需氧量(COD )濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)60602502506生化需氧量(BOD )濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)20201001007懸浮物(SS)濃度(mg/L)最高允許排放負(fù)荷(g/床位)2020

10、60608氨氮(mg/L)159動(dòng)植物油(mg/L )52010石油類(mg/L)52011陰離于表白活性劑(mg/L )51012色度(稀釋倍數(shù))3013揮發(fā)酚(mg/L)0.51.014總氟化物(mg/L )0.50.515，鰥(mg/L)0.050.0516總鎘(mg/L)0.10.117總銘(mg/L)1.51.518六價(jià)銘(mg/L)0.50.519總硫(mg/L)0.50.520總鉛(mg/L)1.01.021總銀(mg/L)0.50.522總A(Bq/L)1123總B(Bq/L)101024總余氯 1)2)( mg/L)0.5注：1）采用含氯消毒劑消毒的工藝控制要求為：壹級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：

11、消毒接觸池接觸時(shí)間之lh ,接觸池出口總余氯3-10mg/L。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：消毒接觸池接觸時(shí)間zlh ,接觸池出口總余氯2-8mg/L.2 ）采用其他消毒劑對(duì)總余氯不作要求。4.2廢氣排放要求4.2.1 污水處理站排出的廢氣應(yīng)進(jìn)行除臭除味處理，保證污水處理站周邊空母中污染物達(dá)到表3要求。4.22傳染病和結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)對(duì)污水處理站排出的廢氣進(jìn)行消毒處理。表3污水處理站周邊大氣污染物最高允許濃度序號(hào)控制項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)值1氨(mg/m3)1.02硫化氫（mg/m3）0.033臭氣濃度（無量綱）104氯氣(mg/m3)0.15甲烷（指處理站內(nèi)最高體積百分?jǐn)?shù)）1%43污泥控制和處置4.3.1柵渣、化糞池和污水處

12、理站污泥屬危險(xiǎn)廢物,應(yīng)按危險(xiǎn)廢物進(jìn)行處理和處置。43.2污泥清淘前應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測，達(dá)到表4要求。表4醫(yī)療機(jī)構(gòu)i虧泥控制標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)類別糞大腸菌殿(MPN/g)腸道致病菌腸道病毒結(jié)核桿菌蛔蟲卵死亡率(%)傳染病醫(yī)療機(jī)構(gòu)<100不得檢出不得t僉出>95結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)<100不得檢出>95綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其它醫(yī)療機(jī)構(gòu)<100>955處理工藝和消毒要求5.1 醫(yī)療機(jī)構(gòu)病區(qū)和非病區(qū)的污水，傳染病區(qū)和非傳染病區(qū)的污水應(yīng)分流，不得將固體傳染 性廢物、各種化學(xué)廢液棄置和傾倒排入下水道。5.2 傳染病醫(yī)療機(jī)構(gòu)和綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)的傳染病房應(yīng)設(shè)專用化糞池，收集經(jīng)消毒處理后的糞便 排泄物等傳

13、染性廢物。53化糞池應(yīng)按最高日排水量設(shè)計(jì)，停留時(shí)間為24-36%清掏周期為180-360do5.4 醫(yī)療機(jī)構(gòu)的各種特殊排水應(yīng)單獨(dú)收集且進(jìn)行處理后，再排入醫(yī)院污水處理系統(tǒng)。5.4.1 低放射性廢水應(yīng)經(jīng)衰變池處理。5.4.2 洗相室廢液應(yīng)回收銀,且對(duì)廢液進(jìn)行處理。5.4.3 口腔科含汞廢水應(yīng)進(jìn)行除汞處理。5.4.4 檢驗(yàn)室廢水應(yīng)根據(jù)使用化學(xué)品的性質(zhì)單獨(dú)收集，單獨(dú)處理。54.5含油廢水應(yīng)設(shè)置隔油池處理。5.5 傳染病醫(yī)療機(jī)構(gòu)和結(jié)核病醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水處理宜采用二級(jí)處理+消毒工藝或深度處理+消 毒工藝。5.6 綜合醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水排放執(zhí)行排放標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，宜采用二級(jí)處理+消毒工藝或深度處理+消毒工 藝；執(zhí)行預(yù)處理標(biāo)準(zhǔn)

14、時(shí)宜采用壹級(jí)處理或壹級(jí)強(qiáng)化處理+消毒工藝。5.7 消毒劑應(yīng)根據(jù)技術(shù)經(jīng)濟(jì)分析選用，通常使用的有：二氧化氯、次氯酸鈉、液氯、紫外線 和臭氧等。采用含氯消毒劑時(shí)按表1、表2要求設(shè)計(jì)。5.7.1 采用紫外線消毒，污水懸浮物濃度應(yīng)小于10mg/L ,照射劑量30-40mJ/cm，照射接 觸時(shí)間應(yīng)大于10s或由試驗(yàn)確定。5.7.2 采用臭氧消毒,污水懸浮物濃度應(yīng)小于20mg/L ,臭氧用量應(yīng)大于10mg/L,接觸時(shí)間 應(yīng)大于12min或由試驗(yàn)確定。6取樣和監(jiān)測6.T污水取樣和監(jiān)測6.1.1應(yīng)按規(guī)定設(shè)置科室處理設(shè)施排出口和單位污水外排口，且設(shè)置排放口標(biāo)志。6.1.2表1第16-22項(xiàng)，表2第15-21項(xiàng)于科

15、室處理設(shè)施排出口取樣，總A、總B于衰變池 出口取樣監(jiān)測。其它污染物的采樣點(diǎn)壹律設(shè)于排污單位的外排口。6.1.2醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水外排口處應(yīng)設(shè)污水計(jì)量裝置，且宜設(shè)污水比例采樣器和于線監(jiān)測設(shè)備。6.L3監(jiān)測頻率6.L3.1糞大腸菌群數(shù)每月監(jiān)測不得少于1次。采用含氯消毒劑消毒時(shí)，接觸池出口總余氯 每日監(jiān)測不得少于2次（采用間歇式消毒處理的，每次排放前監(jiān)測X6.1.3.2腸道致病菌主要監(jiān)測沙門氏菌、志賀氏菌。沙門氏菌的監(jiān)測，每季度不少于1次； 志費(fèi)氏菌的監(jiān)測，每年不少于2次。其他致病菌和腸道病毒按6.133規(guī)定進(jìn)行監(jiān)測。結(jié)核 病醫(yī)療機(jī)構(gòu)根據(jù)需要監(jiān)測結(jié)核桿菌。6.1.33收治了傳染病病人的醫(yī)院應(yīng)加強(qiáng)對(duì)腸道致病

16、菌和腸道病毒的監(jiān)測。同時(shí)收治的感染 上同壹種腸道致病菌或腸道病毒的甲類傳染病病人數(shù)超過5人、或乙類傳染病病人數(shù)超過10 人、或丙類傳染病病人數(shù)超過20人時(shí)，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測該種傳染病病原體。6.1.3.4理化指標(biāo)監(jiān)測頻率：pH每日監(jiān)測不少于2次，COD和SS每周監(jiān)測1次，其他污 染物每季度監(jiān)測不少于1次。6.13.5采樣頻率：每4小時(shí)采樣1次,壹日至少采樣3次，測定結(jié)果以日均值計(jì)。6.1.4監(jiān)督性監(jiān)測按HJ/T91執(zhí)行。6.L 5監(jiān)測分析方法按表5和附錄。6.1.6污染物單位排放負(fù)荷計(jì)算見附錄F。表5水污染物監(jiān)測分析方法序號(hào)控制項(xiàng)目測定方法測定下限（mg/L方法來源1糞大腸菌群數(shù)多管發(fā)酵法附錄A2沙

17、門氏菌附錄B3志賀氏菌附錄C4結(jié)核桿菌附錄E5總余氯N,N -二乙基-1,4-苯二胺分光光度法GB118986化學(xué)需氧量(COD)N,N-_乙基-1,4-苯_股滴定法重銘酸鹽法30GB11897GB119147生化需氧量(BOD)稀釋和接種法2GB74888懸浮物(SS)重量法GB11901蒸儲(chǔ)和滴定法0.2GB7478GB7479氨氮比色法0.05910動(dòng)植物油紅外光度法0.1GB/T1648811石油類紅外光度法0.1GB/T1648812明離子表面活性劑業(yè)甲藍(lán)分光光度法0.05GB749413色度稀釋倍數(shù)法GB1190314pH值玻璃電極法GB6920冷吸收分光光度法0.0001GB74

18、6815，鰥雙硫蹤分光光度法0.002GB746916揮發(fā)酚蒸儲(chǔ)后4 氨基安替比林分光光度法0.002GB7490硝酸銀滴定法0.25GB748617總氟化物異煙酸-叱喋琳酮比色法0.004GB7486口比咤-巴比妥酸比色法0.002GB7486原子吸收分光光度法(螯合萃取法)0.001GB747518總鎘雙硫蹤分光光度法0.001GB747119總鋁高鎰酸鉀氧化-二不碳酰二臍分光光度法0.004GB746620六價(jià)銘苯碳酰一脫分光光度法0.004GB746721總珅二乙基二硫代氨基甲酸銀分光光度法0.007GB748522總鉛原子吸收分光光度法（螯合萃取法）雙硫蹤分光光度法0.010.01G

19、B7475GB747023總銀火焰原子吸收分光光度法鎘試劑2 B分光光度法0.030.01GB119079GB1190824厚源法0.05Bq/LEJ/T107525,蒸發(fā)法EJ/T9006.2 大初樣ft監(jiān)測6.2.1 污水處理站大氣監(jiān)測點(diǎn)的布置方法和采樣方法按GB16297中附錄C和HJ/T55的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。6.2.2 采樣頻率，每2h采樣壹次，共采集4次，取其最大測定值。每季度監(jiān)測壹次。6.2.3 監(jiān)測分析方法按表6。表6大氣污染物監(jiān)測分析方法序號(hào)控制項(xiàng)目測定方法方法來源1氨次氯醛內(nèi)-水楊酸分光光度法GB/T146792氫氣相色譜法GB/T146783臭氣濃度（無量綱）三點(diǎn)比較式臭袋法

20、GB/T146754氯氣甲基橙分光光度法HJ/T305甲烷氣相色譜法CJ/30376.3污泥取樣和監(jiān)測6.3 .工取樣方法，采用多點(diǎn)取樣，樣品應(yīng)有代表性，樣品重量不小于1kg。清掏前監(jiān)測。6.3.2監(jiān)測分析方法見附錄A、附錄B、附錄C、附錄D和附錄E。7標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施和監(jiān)督7.1 .本標(biāo)準(zhǔn)由縣級(jí)之上人民政府環(huán)境保護(hù)行政主管部門負(fù)責(zé)監(jiān)督實(shí)施。7.2 省、自治區(qū)、直轄市人民政府對(duì)執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)不能達(dá)到本地區(qū)環(huán)境功能要求時(shí)，能夠根據(jù) 總量控制要求和環(huán)境影響評(píng)價(jià)結(jié)果制定嚴(yán)于本標(biāo)準(zhǔn)的地方污染物排放標(biāo)準(zhǔn)。附錄A（規(guī)范性附錄）醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水和污泥中糞大腸菌群的檢驗(yàn)方法A1儀器和設(shè)備A1.1高壓蒸汽滅菌器。A1.2干燥

21、滅菌箱。A13培養(yǎng)箱：370A1.4恒溫水浴箱。A1.5電爐。A1.6天平。A1.7滅菌平皿。A1.8滅菌刻度吸管。A1.9酒精燈A2培養(yǎng)基和試劑A2.1孚腐膽鹽培養(yǎng)液A2.1.1成分蛋白月東20g豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）5g孚腐5g0.4%涅甲酚紫水溶液2.5mL蒸播水1000mLA2.1.2制法將蛋白月東、豬膽鹽及孚腐溶解于1000mL蒸徭水中，調(diào)整pH到7.4 ,加入指示劑，充分混勻，分裝于內(nèi)有倒管的試管中。1150c下滅菌20mino貯存于冷暗處備用。A2.2三倍濃度孚腐膽鹽培養(yǎng)液A2.2.1成分蛋白月東60g豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）15g孚 LB 15g0.4%漠甲酚紫水溶液7.5mL蒸

22、播水1000mLA2.2.2制法制法同附錄A2.1.2。A23伊紅美蘭培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）A2.3.1成分蛋白豚10g乳糖10g磷酸氫二鉀2g瓊脂20g2%伊紅水溶液20mL0.5%美藍(lán)水溶液13mL蒸福水1000mLA2.3.2制法將瓊脂加到900mL蒸儲(chǔ)水中，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀和蛋白月東，混勻使溶解, 再加入蒸播水補(bǔ)足至1000mL ,調(diào)整pH至7.2 7.4。趁熱用月期旨棉和砂布過濾，再加入乳 糖,混勻，定量分裝于燒瓶內(nèi)，115滅菌20mino作為儲(chǔ)備培養(yǎng)基貯存于冷暗處備用。臨用時(shí)，加熱融化儲(chǔ)備培養(yǎng)基，待冷至60左右，根據(jù)燒瓶內(nèi)培養(yǎng)基的容量，加入壹定 量的已滅菌的2%伊紅水溶

23、液和0.5%美藍(lán)水溶液,充分搖勻（防止產(chǎn)生氣泡傾注平皿備 用。A2.4孚腐蛋白豚培養(yǎng)液A2.4.1成分蛋白月東10g牛肉膏3g孚腐5g氯化鈉5 g1.6%漠甲酚紫乙醇溶液1mL蒸儲(chǔ)水1000mLA2.4.2制法將蛋白月東、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000mL蒸儲(chǔ)水中，調(diào)整pH到7.2 7.4 , 加入1.6%涅甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混勻，分裝于內(nèi)有倒管的試管中。115下滅菌 20mino貯存于冷暗處備用。A2.5革蘭氏染色液A251結(jié)晶紫染色液結(jié)晶紫1g95%乙醇溶液20mL1%草酸鐵水溶液1000mL將結(jié)晶紫溶于乙醇中，然后和草酸核水溶液混合。A2.5.2革蘭氏碘液碘1g碘化鉀2g

24、蒸儲(chǔ)水300mL將碘W硬化鉀混合，加入蒸謠水少許，充分搖勻，待完全溶解，再加入蒸儲(chǔ)水至300mL。 A2.5.3月兌色液95%乙醇。A2.5.4沙黃復(fù)染液沙黃ig95%乙醇2g蒸儲(chǔ)水90mL將沙黃溶于95%乙醇中,然后用蒸儲(chǔ)水稀釋。A2.6染色法染色的基本步驟為：1）涂片：于載玻片上滴加壹滴生理鹽水，用滅菌的接種環(huán)取菌落 少許，和生理鹽水混勻，涂布成薄膜；2 ）干燥：于室溫中使自然干燥；3 ）固定：將涂片迅 速通過火焰23次，以載玻片反面接觸皮膚，熱而不燙為度；4 ）染色：滴加結(jié)晶紫染色液, 染色lmin，水洗；5 ）媒染：滴加革蘭氏碘液，作用Imin，水洗；6 ）脫色：滴加95%乙 醇脫色，

25、約30s ,水洗；7 ）復(fù)染：滴加復(fù)染液，復(fù)染lmin ,水洗。革蘭氏陽性菌染色后呈紫色，革蘭氏陰性菌染色后呈紅色。注：亦可用1:10稀釋的石炭酸復(fù)紅染色液作復(fù)染劑，復(fù)染時(shí)間為10s.A3檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序見圖A.樣品處理：確定樣品接種量A4操作步驟發(fā)酵試驗(yàn)：將樣品接種于乳精膽鹽培養(yǎng)液A4.1樣品準(zhǔn)備44C、培養(yǎng)24hA4.1.1污水平板分離：將產(chǎn)酸發(fā)酵管液接種于EMB污水樣品應(yīng)至少取2037C、培養(yǎng)1824h簟軟染色、鏡檢根據(jù)預(yù)計(jì)的污水樣品中糞大腸菌群數(shù)確水樣品接種量。糞大腸菌群數(shù)量相對(duì)較少的_ A 1 鑒定：挑取革蘭氏陰 接種量品般為10mLs 1ml； 0,lrnLo芽儂*MB闔、0.1m

26、L, 0.01mL 44C、培養(yǎng)24h或0.1mL、0.01mL. 0°（）1用酵根據(jù)產(chǎn)檢產(chǎn)氣的陽性管數(shù)查mpn表接種量少于1mL時(shí)，水樣應(yīng)制成稀釋樣金股酵試驗(yàn)使用。接種量為0.1mL、0.01mL時(shí)，取稀釋比分別為1:10、1:100。其比依此類推。檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告1:10稀釋樣品的制上圖A污水、污泥中糞大腸菌群檢驗(yàn)程序滅菌水的試管中，混勻，制成1:10稀釋樣品。因此，取lmLl:10稀釋樣品，等于取0.1mL污水樣品。其它稀釋比的稀釋樣品同法制作。注1 :苕樣品為經(jīng)過氯消毒的污水，應(yīng)于采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。A4.1.2 5虧泥污泥樣品應(yīng)至少取200g ,使用前應(yīng)

27、充分混勻。根據(jù)預(yù)計(jì)的污泥樣品中糞大腸菌群數(shù)量確定污泥樣品接種量。糞大腸菌群數(shù)量相對(duì)較少 的污泥樣品接種量壹股為0.1g、0.01g. 0.001g。糞大腸菌群數(shù)量較多時(shí)接種量為0.01g、 0.001gv 0.0001g 或 0.001g、0.0001g. 0.00001g 等。污泥樣品應(yīng)制成稀釋樣品后供發(fā)酵試驗(yàn)使用。接種量0.1g、0.01g, 0.001g的稀釋樣 品制作方法如下：取20g污泥樣品，加入到三角燒瓶中，加滅菌水使成200mL ,混勻，制成1:10稀釋樣品。吸取1:10稀釋樣品1mL ,注入到盔有9mL滅菌水的試管中，混勻，制 成1:100稀程樣品。按同法制成1:1000稀程樣

28、品。接種1mLi:10、1:100. 1:1000稀釋樣 品等于接種0.1g、0.01g、0.001g ;弓泥樣品。注1:若樣品為經(jīng)過氯消毒的污泥，應(yīng)于采樣后立即用5 %硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯.A4.2發(fā)酵試驗(yàn)將樣品接種于裝有孚廉膽鹽培養(yǎng)液的試管（內(nèi)有小倒管）中，44培養(yǎng)24h。樣品接種 體積以及管內(nèi)學(xué)廉膽鹽培養(yǎng)液的濃度和體積根據(jù)以下條件確定：樣品為污水時(shí)，取三個(gè)接種量、每個(gè)接種量的樣品分別接種于5個(gè)試管內(nèi)，共需15個(gè) 試管。試管內(nèi)乳糖膽鹽培養(yǎng)液的濃度和體積應(yīng)根據(jù)接種量確定。若接種量為10mL ,吸取 10mL樣品接種于裝有5mL三倍濃度乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管內(nèi)；若接種量為1mL時(shí)，吸取 1

29、mL樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管內(nèi)；若接種量少于1mL時(shí)，吸 取1mL稀釋樣品接種于裝有10mL普通濃度乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管內(nèi)。樣品為污泥時(shí)，取三個(gè)接種量、每個(gè)接種量的稀釋樣品分別接種于3個(gè)試管內(nèi)，共需9 個(gè)試管。9個(gè)試管中，各裝有10mL學(xué)腐膽鹽培養(yǎng)液。各個(gè)試管接種稀釋樣品體積均為lmL0 A4.3平板分離大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)培養(yǎng)液變色、產(chǎn)氣時(shí)小倒管內(nèi)出現(xiàn)氣泡。經(jīng)24h培養(yǎng)后，將產(chǎn) 酸的試管內(nèi)培養(yǎng)液分別劃線接種于EMB培養(yǎng)基上。置于37培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)1824he A4.4鑒定挑選可疑糞大腸菌群菌落，進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢。可疑菌落有：1）深紫黑色，具有 金屬光澤的菌落；

30、2 ）紫黑色，不帶或略帶金屑光澤的菌落；3 ）淡紫紅色，中心色較深的菌 落。上述涂片鏡檢的菌落如為革蘭氏陽性無芽抱桿菌，則挑取上述典型菌落13個(gè)接種于 盔有5mL學(xué)牖蛋白豚培養(yǎng)液倒管W倒管的試管內(nèi)，置于44培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24匕產(chǎn)酸產(chǎn)氣 試管為糞大腸菌群陽性管。A5計(jì)數(shù)根據(jù)證實(shí)有糞大腸菌群存于的陽性管數(shù)，查表A1或A2可得100mL污水或1g污泥中 糞大腸菌群MPN值。由于表A1和表A2是按壹定的三個(gè)10倍濃度差接種量設(shè)計(jì)的（污水接種量為10mL、 1mL和0.1mL ,污泥接種量為0.1g、0.01g和0.001g ）,當(dāng)采用其他三個(gè)10倍濃度差接種 量時(shí)，需要修正表內(nèi)MPN值，具體方法如下：表

31、內(nèi)所列污水（污泥）最大接種量增加10倍時(shí)表內(nèi)MPN值相應(yīng)降低10倍;污水（污 泥）最大接種量減少10倍時(shí)表內(nèi)MPN值相應(yīng)增加10倍。如污水接種量改為1mL、0.1mL 和0.01mL時(shí)，Al表內(nèi)MPN值相應(yīng)增加10倍。其它的三個(gè)10倍濃度差接種量的MPN 值相應(yīng)類推。由于A1表內(nèi)MPN值的單位為每100mL污水樣品中MPN值，而污水以1L為方案單位，因此需將查A1表得到的MPN值乘上10 ,換算成1L污水樣品中的MPN值。表Al污水中糞大腸菌群最可能數(shù)（MPN ）檢索表（污水樣品接種量為5份10mL水樣，5份1mL水樣和5份0.1mL水樣）陽性管教每100mL 水樣中 MPN陽性管數(shù)每 100

32、mL 水樣中 MPN陽性管數(shù)每 100mL 水樣中 MPN接種100mL 水樣接種 10mL 水樣接種 0.1mL 水樣接種100mL 水樣接種 10mL 水樣接種 0.1mL 水樣接種 100mL 水樣接種 10mL 水樣接種 0.1mL 水樣000020054001300122017401170024202940221003520312403250047204144043000592051640536010221074101701142119411210126212124122601372131411331014921417414360151121519415420204220942022

33、021622112421260227222144223202392231742338024112241942444025132252242550030623012430270317231144313303292321743239033112332043345034132342243452035152352543559040824015440340419241174414004211242204424704313243234435404415244254446204517245284456905092501745041051112512045148052132522345256053152532

34、645364005545171922554529324455457281陽性管教每陽性管數(shù)每陽性管數(shù)每接種接種接種100mL接種接種接種100mL接種接種接種100mL100mL10mL0.1mL水樣中100mL10mL0.1mL水樣中100mL10mL0.1mL水樣中水樣水樣水樣MPN水樣水樣水樣MPN水樣水樣水樣MPN100230085002310143011150131102630213502431038303165035810410304205047610512305235059511043101151033111631114511461128312175126311310313205

35、138411412314235141101151431527515130120632014520491218321175217012210322205229412312323245231201241532427524150125173253152518013083301753079131103312153111013212332245321401331533328533180134173343253421013519335365352501401134021540130141133412454117014215342285422201431734332543280144193443654435

36、014522345405454301501335025550240151153512955135015217352325525401531935337553920154223544155416001552435545555>1600表A2污泥中糞大腸菌群最可能數(shù)(MPN)檢索表(污泥樣品接種量為3份0.1g泥樣，3份0.01g泥樣和3份0.001g泥樣)陽性管教每ig陽性管數(shù)每ig陽性管數(shù)接種 0.1g 污樣 管接種 0.01g 污樣 管接種 0.001g 污樣管雌中MPN接種 0.1g 污樣 管接種 0.01g 污樣 管接種 0.001g 污樣管雌中MPN接種 0.1g 污樣 管接種

37、0.01g 污樣 管接種 0.001g 污樣管0泥樣中MPN000<31201130023001312115301390026122203026400391232430395010313016310430116.113120311750129.21322431212001312133293131600206.22009.1320930219.320114321150022122022032221002316203263232900309.4210153302400311321120331460032162122733211000331921334333>11001003.62202

38、11017.222128102112223510315223421107.323029111112313611215232441131923353A6檢驗(yàn)結(jié)果方案根據(jù)糞大腸菌群MPN值，方案1L污水或1g污泥樣品中糞大腸菌群MPN值。附錄B（規(guī)范性附錄）醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水和污泥中沙門氏菌的檢驗(yàn)B1儀器和設(shè)備81.1 高壓蒸汽滅菌器。81.2 干燥滅菌箱。81.3 培養(yǎng)箱。81.4 恒溫水浴箱。81.5 電爐。81.6 天平。81.7 滅菌平皿。B1.9酒精燈。B2嘲鄲口試劑82.1 亞硒酸鹽增菌液（SF增菌液）82.1.1 成分胰蛋白月東（或多價(jià)陳）10g磷酸氫二鈉（Na2HPO3）16g磷酸二氫鈉

39、（NaH2Po3）2.5g孚牖4g亞硒酸氫鈉4g蒸儲(chǔ)水1000mL82.1.2 制法除亞硒酸氫鈉外,將之上各成分放入蒸儲(chǔ)水中，加熱溶化。再加入亞硒酸氫鈉,待完全溶解后，調(diào)整pH到7.0 7.1,分裝于三角燒杯內(nèi)。1210c下滅菌15min備用。82.2 二倍濃度亞硒酸鹽增菌液（二倍濃度SF增菌液）82.2.1 成分除蒸儲(chǔ)水改為500mL外，其它成分同附錄B2.1.1。82.2.2 制法制法同附錄B2.1.2。B2.3SS培養(yǎng)基1.1.1 1基礎(chǔ)培養(yǎng)基1.1.1.1 1 成分牛肉膏5g示陳5g三號(hào)月盹3.5g瓊脂17g蒸儲(chǔ)水1000mL1.1.1.2 2 制法將牛肉膏、示豚和膽鹽溶解于400mL

40、蒸儲(chǔ)水中。將瓊脂加到600mL蒸儲(chǔ)水中，煮沸使其溶解。再將二者混合，121下滅菌ISmin，保存?zhèn)溆谩?.1.2 2完成培養(yǎng)基1.1.2.1 1 成分基礎(chǔ)培養(yǎng)基1000mL孚浦10g檸檬酸鈉8.5g硫代硫酸鈉8.5g10%檸檬酸鐵溶液10mL1%中性紅溶液2.5mL0.1%煌綠溶液0.33mL1.1.2.2 2 制法加熱溶化要出培養(yǎng)基，按比例加入除中性紅和煌綠溶液以外的各成分，充分混合均勻,調(diào)整pH到7.0 ,加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。注：制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存于冰箱內(nèi)于18h內(nèi)使用.煌綠溶液配好后應(yīng)于10天以內(nèi)使用.82.4 亞硫酸鈍瓊脂培養(yǎng)基（BS培養(yǎng)基）82.4.1 基礎(chǔ)培

41、養(yǎng)基B2.4.1.1 成分蛋白月東10g牛肉膏5g氯化鈉5g瓊脂20g蒸儲(chǔ)水1000mLB2.4.1.2 制法加熱溶解各成分,按每份100mL的量分裝于250mL三角瓶中，1210c下滅菌20min 備用。82.4.2 亞硫酸鈍貯備液82.4.2.1 成分檸檬酸銃鉉2g亞硫酸鈉20g磷酸氨二鈉10g葡萄糖10g蒸播水200mL82.4.2.2 制法將檸檬酸銃鉉溶解于50mL沸水中，同時(shí)將壓硫醛內(nèi)溶解于100mL沸水中，混合倆液 且煮沸3min ,趁熱加入磷酸氯二鈉攪拌至溶解。冷卻后，加入剩余的50mL葡萄糖水溶液, 貯存于冰箱中。82.4.3 檸檬酸鐵煌綠貯備液82.4.3.1 成分檸檬酸鐵2

42、g煌綠（1%水溶液）25mL蒸儲(chǔ)水200mL82.4.3.2 制法將上述成分溶解于水中，盔于已滅菌的玻璃瓶內(nèi)，貯存于冰箱。82.4.4 完成培養(yǎng)基82.4.4.1 成分基礎(chǔ)培養(yǎng)基100mL亞硫酸鈍貯備液20mL檸檬酸鐵煌綠貯備液4.5mL82.4.4.2 制法加熱融化要出培養(yǎng)基且冷卻至50同時(shí)分別加熱亞硫酸鑰貯備液和檸檬酸鐵煌綠貯備液至50。于無菌操作下將后者加入到前者去，充分混合，無菌傾入已滅菌的培養(yǎng)皿中。82.5 三糖鐵刷旨培養(yǎng)基（TSI培養(yǎng)基）82.5.1 成分蛋白月東20g牛肉膏5g孚廉10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化鈉5g硫酸亞鐵錢0.2g 硫代硫酸鈉0.2g瓊脂12g 酚紅0.025

43、g蒸播水1000mLB2.5.2制法將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸播水中，調(diào)pH到7.4。加入瓊脂，加熱煮沸，再加入0.2%酚紅水溶液12.5mL ,搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121 下滅菌15min。放置高層斜面?zhèn)溆谩?2.6 沙門氏菌診斷血清B3檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序見圖B。污水樣品處理：過濾污水樣品處理:稀釋B4操作步驟B4.1樣品處理和增菌平板分離：將增菌培養(yǎng)液分別接種SS和BS上373培養(yǎng)2448h取200mL污水，用3濾瞳講行抽濾八箱100mL二倍濃度SF增菌液把濾膜上截留的平板分離：挑選可疑菌落接種于TSI雜質(zhì)洗脫到滅菌三角燒瓶丙丁浣公搖勻,置斗37亞恒溫培養(yǎng)

44、箱h增菌培養(yǎng)12 24h0注：若樣品為經(jīng)過氯消毒的污乂，廛殍睡浙瞄免髏硫料溶液充分中和余氯。B4.1.2 ;虧泥用滅菌匙稱取污泥20g ,放入滅鼠獸輯0%入boOmL滅菌水，充分混勻，制成1 : 10混懸液。吸取上述1 ：圖B污水、污泥中沙I 1氏南檢狀程序二倍濃度sf增菌液的已滅菌的三角燒瓶內(nèi),搖勻，置于37恒溫培養(yǎng)箱，增菌培養(yǎng)24h0注：若樣品為經(jīng)過氮消毒的污泥，應(yīng)于采樣后立即用5%硫代硫酸鈉溶液充分中和余氯。B4.2平板分離取上述增菌培養(yǎng)液，分別接種于SS培養(yǎng)基平板和BS培養(yǎng)基平板，置于37培養(yǎng)箱中， 培養(yǎng)24 48h0觀察各平板上生長的菌落形態(tài)。擬燃于SS培養(yǎng)基平板上呈無色透明或中間有

45、黑心，直徑1 2mm的菌落;挑取于BS 培養(yǎng)基平板上呈黑色的菌落或灰綠色的可疑腸道病原菌菌落。每個(gè)平板最少挑取5個(gè)菌落， 接種于TSI培養(yǎng)基中，置于37培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)1824%B4.3鑒定B4.3.1血清學(xué)試驗(yàn)于TSI培養(yǎng)基中，如不發(fā)酵孚廉，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,壹股產(chǎn)生硫化 氫,有動(dòng)力者，先和沙門氏A-F群0多價(jià)血清作玻璃片凝集，凡和多價(jià)0血清凝集者，再 和0因子血清凝集,以確定所屬群別，然后用H因子血清，確定血清型。雙向菌株應(yīng)證實(shí) 倆相的H抗原，有Vi抗原的菌型（傷寒和丙型副傷寒沙門氏菌）應(yīng)用Vi因子血清檢驗(yàn)。B4.3.2生化試驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行葡萄糖、甘露醇、麥芽糖、乳糖、蔗糖、靛基質(zhì)

46、、硫化氫、動(dòng)力、尿素試驗(yàn)。沙 門氏菌屬中除傷寒沙門氏菌和雞沙門氏菌不產(chǎn)氣外，通過發(fā)酵葡萄糖、產(chǎn)氣、均發(fā)酵甘露醇 和麥芽糖（但豬沙門氏菌、維沙門氏菌不發(fā)酵麥芽糖）,不分解孚牖、蔗糖，尿素郵口靛基質(zhì) 為陰性，通常產(chǎn)生硫化氫。除雞、雛沙門氏菌和傷寒沙門氏菌的0型菌株無動(dòng)力外，通常均 有動(dòng)力。如遇多價(jià)0血清不凝集而壹般生化反應(yīng)符合上述情況時(shí)，可加做側(cè)金盞花醇、水楊素和氟化 鉀試驗(yàn)，沙門氏菌均為陰性。B5檢驗(yàn)結(jié)果方案根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果，方案壹定體積的樣品中存于或不存于沙門氏菌。附錄c（規(guī)范性附錄）醫(yī)療機(jī)構(gòu)污水及污泥中志賀氏菌的檢驗(yàn)方法C1儀器和設(shè)備C1.1高壓蒸汽滅菌器C1.2干燥滅菌箱。C1.3培養(yǎng)箱。C1.4恒溫水浴箱。C1.5電爐。C1.6天平。C1.7滅菌平皿。C1.8滅菌刻度吸管。C1.9酒精燈。C2培養(yǎng)基和培養(yǎng)液C2.1革蘭氏陰性增菌液（GN增菌液）C2.1.1成分胰蛋白豚（或多價(jià)陳）20g葡萄糖1g甘露醇2g枸械酸鈉5g去氧膽酸鈉0.5g磷酸二氧鉀2.5g氯化鈉5g蒸