低溫誘導(dǎo)染色體加倍

1、探究低溫誘導(dǎo)染色體加倍 低溫和秋水仙素一樣，處理植物分生組織細(xì)胞，能夠抑制紡錘體的形成，導(dǎo)致分裂后期染色體不能移向兩極，細(xì)胞加大而不分裂，著絲點分裂后的染色體仍在一個細(xì)胞中，故細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍。如果用低溫處理根尖，則在根尖分生區(qū)內(nèi)可以檢測到大量染色體加倍的細(xì)胞，如：處理植物幼苗的芽，則可以得到染色體加倍的植株。 洋蔥洋蔥：實驗課前的：實驗課前的35d35d，把洋蔥放在盛滿，把洋蔥放在盛滿水的廣口瓶上，讓它的底部接觸瓶內(nèi)的水面。水的廣口瓶上，讓它的底部接觸瓶內(nèi)的水面。蒜蒜：實驗課前的：實驗課前的35d35d，取放在盛有少量水，取放在盛有少量水的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。選材時注意選擇進(jìn)

2、行分裂的分生組織細(xì)胞，不分裂的細(xì)胞染色體不復(fù)制，不會出現(xiàn)染色體加倍的情況 卡諾氏固定液的配制卡諾氏固定液的配制：取無水酒精和冰醋酸，取無水酒精和冰醋酸，按按體積比體積比3 3：1 1的比例混合的比例混合： 鹽酸酒精解離液的配制：取鹽酸酒精解離液的配制：取 95 95酒精和酒精和1515鹽酸，按鹽酸，按體積比體積比1 1：1 1的比例混合的比例混合。 質(zhì)量濃度為質(zhì)量濃度為10mg10mgmLmL的龍膽紫溶液的配制：將的龍膽紫溶液的配制：將100mL100mL的體積分?jǐn)?shù)為的體積分?jǐn)?shù)為4545的醋酸溶液的醋酸溶液煮沸煮沸，加加入入1g1g龍膽紫后，攪勻龍膽紫后，攪勻再煮再煮5min5min，待待冷卻

3、后冷卻后過濾，過濾，備用備用注意：鹽酸有刺激性和腐蝕性，應(yīng)小心使用，注意：鹽酸有刺激性和腐蝕性，應(yīng)小心使用，避免與皮膚和眼避免與皮膚和眼 睛接觸。睛接觸。一）根尖的培養(yǎng)一）根尖的培養(yǎng) 方法方法1 1：實驗課前的：實驗課前的35d35d，把洋蔥放在，把洋蔥放在盛滿水的廣口瓶上，讓它的底部接觸瓶盛滿水的廣口瓶上，讓它的底部接觸瓶內(nèi)的水面。內(nèi)的水面。 方法方法2 2：實驗課前的：實驗課前的35d35d，取蒜瓣，取蒜瓣，放，放在盛有少量水的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)在盛有少量水的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)二）低溫誘導(dǎo)當(dāng)根長到當(dāng)根長到lcmlcm時，放入冰箱時，放入冰箱內(nèi)內(nèi)44低溫下培養(yǎng)，處理低溫下培養(yǎng)，處理36h36h。三)固定

4、根尖剪取以上處理的根尖，每個根尖為剪取以上處理的根尖，每個根尖為0 0551cm1cm，分別放人卡諾氏固定液中固定，分別放人卡諾氏固定液中固定303060min60min，然后用體積分?jǐn)?shù)，然后用體積分?jǐn)?shù)9595酒精洗兩酒精洗兩次次卡諾是固定液作用 固定根尖的形態(tài)所觀察的細(xì)胞被鹽酸殺死了，最終在顯微鏡下觀察到的是死細(xì)胞四）制作裝片及觀察 取固定好的根尖，進(jìn)行取固定好的根尖，進(jìn)行解離、漂洗、染色解離、漂洗、染色和制片和制片4 4個步驟，具體操作方法與實驗個步驟，具體操作方法與實驗“觀觀察植物細(xì)胞的有絲分裂察植物細(xì)胞的有絲分裂”相同相同 先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相，先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相，再換上高倍鏡并調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡，再換上高倍鏡并調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡，使物像清晰，仔細(xì)觀察