小兒閏土顆粒質量標準研究

1、小兒閏土顆粒質量標準研究    小兒閏土顆粒質量標準研究文/中年閏土，小兒閏土顆粒質量標準【摘要】目的制定小兒閏土顆粒質量標準。方法采用薄層色譜法對制劑中的香附、白術、砂仁、陳皮進行鑒別;采用高效液相色譜法測定白芍中芍藥苷的含量。結果用薄層色譜法能較好地鑒別出制劑中的香附、白術、砂仁、陳皮;芍藥苷在1.17611.760?g范圍內線性關系良好,r=0.99999,平均回收率為99.42%,RSD=2.26%。結論本法簡便、準確、重復性好,可用于本制劑的質量控制?！娟P鍵詞】小兒閏土顆粒;薄層色譜法;高效液相色譜法;芍藥苷;質量標準Abstract：Obje

2、ctiveToestablishthequalitystandardofXiaoerRuntugranule.MethodsXiangfu,Baizhu,SharenandChenpiwereidentifiedbyTLC.ThecontentofpaeoniflorinwasdeterminedbyHPLC.ResultsTLCcouldidentifyXiangfu,Baizhu,SharenandChenpi.Thepeoniflorinshowedgoodlinearcorrelationattherangeof1.17611.760?g,r=0.99999,theaveragerec

3、overyofpaeoniflorinwas99.42%,RSD=2.26%.ConclusionThemethodis*andcanbeusedtocontrolthequalityofXiaoerRuntugranulewithhighaccuracyandgoodreproducibility.Keywords：XiaoerRuntugranule;TLC;HPLC;paeoniflorin;qualitystandard小兒閏土顆粒由白芍、香附、白術、陳皮、砂仁等組成,具有行氣止痛、養(yǎng)胃健脾的作用,用于治療氣瘀、氣滯所致胃脘疼痛、食積、消化不良等病癥。為更好地控制本制劑的質量,筆者對其

4、質量標準進行了研究。1儀器與試藥KQ-250E醫(yī)用超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);751GD紫外分光光度計(上海分析儀器廠);LC-10AT高效液相色譜儀(日本島津),SPD-10A檢測器。小兒閏土顆粒(山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院制劑室)。芍藥苷(批號110736-200732,供含量測定用)、-香附酮(批號110748-200507)、橙皮苷(批號110721-200512)、乙酸龍腦酯(批號0759-9001)、白術對照藥材(批號0925-200005)均購于中國藥品生物制品檢定所。硅膠G(青島海洋化工廠);乙腈(色譜純);其余試劑均為分析純。2方法與結果2.1薄層鑒別2.1.1香附的鑒

5、別取本品40g,研細,置1000mL圓底燒瓶中,連接揮發(fā)油提取器,加水適量,自上端加醋酸乙酯5mL,加熱回流提取1h,取醋酸乙酯層作為供試品溶液。取陰性對照品按供試品溶液的制法制成陰性對照溶液。另取-香附酮對照品,加醋酸乙酯制成每1mL含1mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取供試品溶液、陰性對照溶液、對照品溶液各5?L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-醋酸乙酯(91)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以二硝基苯肼試液,放置片刻。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾。2.1

6、.2白術的鑒別勸2.1.1”項下的供試品溶液作為供試品溶液。取陰性對照品按供試品溶液的制法制成陰性對照溶液。另取白術對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取供試品溶液、陰性對照溶液、對照藥材溶液各5?L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-醋酸乙酯(501)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,105加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾。2.1.3砂仁的鑒別勸2.1.1”項下的供試品溶液作為供試品溶液。取陰性對照品按供試品溶液的制法

7、制成陰性對照溶液。另取乙酸龍腦脂對照品,加醋酸乙酯溶解制成每1mL含10?L的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取供試品溶液、陰性對照品溶液、對照品溶液各4?L,分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚(3060)-醋酸乙酯(383)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液,105加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。陰性對照無干擾1。2.1.4陳皮的鑒別取本品5g,研細,加甲醇20mL,超聲處理15min,濾過,濾液濃縮至5mL,作為供試品溶液。取陰性對照品按供試品溶

8、液的制法制成陰性對照溶液。另取橙皮苷對照品,加甲醇制成飽和溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取供試品溶液、陰性對照品溶液各3?L,對照品溶液5?L,分別點于同一用0.5%NaOH制成的硅膠G薄層板上,以醋酸乙酯-甲醇-水(1001713)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以AlCl3試液,置紫外光(365nm)燈下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照無干擾2。2.2含量測定2.2.1色譜條件色譜柱：KromasilC18(4.6mm×30mm,5?m);流動相：乙腈-水(12.587.5);流速

9、：1.0mL/min;檢測波長：230nm;進樣量：20?L3。2.2.2對照品溶液的制備精密稱取于五氧化二磷干燥器中干燥36h的芍藥苷對照品適量,加甲醇制成每1mL含0.31mg的溶液,即得。2.2.3供試品溶液的制備取本品5g,研細,精密稱定,加甲醇100mL,索氏提取4h,提取液加熱揮去甲醇,殘渣加甲醇10mL溶解,作為供試品溶液。2.2.4陰性對照溶液的制備取缺白芍的各味藥材,按本制劑的制備工藝,制作空白樣品,并按供試品溶液的制法制成陰性對照溶液。2.2.5空白試驗吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各20?L分別進樣測定,色譜圖見圖1?？梢?供試品色譜中具有與芍藥苷對照品保留時間

10、一致的色譜峰,而陰性對照沒有。說明測定的專屬性好、無干擾。2.2.6線性關系的考察精密稱取芍藥苷對照品5.88mg,置10mL量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,混勻,分別精密吸取上述對照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、1.0mL置1mL量瓶中。以芍藥苷對照品進樣量對峰面積作圖繪制標準曲線,計算,得回歸方程：Y=17122826X-16702.4,r=0.99999,說明芍藥苷對照品在1.17611.760?g范圍有較好的線性關系。2.2.7精密度試驗分別精密吸取供試品溶液20?L,連續(xù)進樣5次,測定芍藥苷的峰面積,結果RSD=2.56%,表明儀器精密度良好。2.2.8穩(wěn)定性試驗精密吸取供試

11、品溶液,每隔2h進樣1次,共進樣6次,測定峰面積,結果RSD=1.71%,表明供試品溶液在12h內穩(wěn)定性較好。2.2.9重復性試驗取本制劑5份,照供試品溶液的制備方法操作,如法測定,計算芍藥苷含量,結果RSD=0.98%,表明方法的重復性良好。2.2.10加樣回收率試驗取已知芍藥苷含量的樣品,精密稱定,加入一定量的芍藥苷對照品,按樣品測定方法測定芍藥苷含量,計算回收率。由結果可知,測定方法的回收率高,能準確測定出制劑中芍藥苷的含量。結果見表1。表1加樣回收率試驗結果2.2.11樣品含量測定分別取3批小兒閏土顆粒,按上述含量測定方法進行測定,結果芍藥苷含量分別為1.88、1.86、1.87mg/

12、g。3討論鑒別砂仁時,曾試用2005年版中華人民共和國藥典(一部)砂仁項下的展開劑環(huán)己烷-醋酸乙酯(221),但分離度差,后改用石油醚-醋酸乙酯(383)為展開劑,效果較好。此外,采用低溫展開,斑點圓整清晰。鑒別陳皮時,以2005年版中華人民共和國藥典(一部)陳皮項下的一次展開系統(tǒng)醋酸乙酯-甲醇-水(1001713)展開,即可具有較好的效果,故未采用其二次展開系統(tǒng)。芍藥苷性質穩(wěn)定,含量較高,是小兒閏土顆粒中的主要有效成分之一,因此通過測定其含量來進行質量控制。芍藥苷能夠溶于甲醇,本試驗采用甲醇進行提齲由于提取方法不同,提取出的芍藥苷含量也不同,因而分別對供試品溶液制備方法中提取方法、提取時間進行考察,結果表明,采用索氏提取4h效果比較好,