大學(xué)課件 生物化學(xué) Biochemistry 第1章 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能

1、大學(xué)課件大學(xué)課件生物化學(xué)生物化學(xué)BiochemistryBiochemistry第第1 1章章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能主要內(nèi)容蛋白質(zhì)的分子組成蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)蛋白質(zhì)的分類 第一節(jié) 體液平衡及滲透壓的調(diào)節(jié)1. 1. 掌握蛋白質(zhì)的元素組成及其特點(diǎn)，會(huì)計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量。掌握蛋白質(zhì)的元素組成及其特點(diǎn)，會(huì)計(jì)算樣品中的蛋白質(zhì)含量。2. 2. 熟悉組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸種類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和氨基酸的分類。熟悉組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸種類、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和氨基酸的分類。3. 3. 理解蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)的功能活性關(guān)系，以及分子病、構(gòu)象病的概念。理解蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與

2、蛋白質(zhì)的功能活性關(guān)系，以及分子病、構(gòu)象病的概念。4. 4. 掌握蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)、引起蛋白質(zhì)變性的因素、變性作用在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。掌握蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)、引起蛋白質(zhì)變性的因素、變性作用在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ) 1.1.催化功能催化功能2.2.調(diào)節(jié)功能調(diào)節(jié)功能3.3.支持和保護(hù)功能支持和保護(hù)功能4.4.運(yùn)輸和儲(chǔ)存功能運(yùn)輸和儲(chǔ)存功能5.5.營(yíng)養(yǎng)功能營(yíng)養(yǎng)功能 6.6.收縮和運(yùn)動(dòng)功能收縮和運(yùn)動(dòng)功能7.7.免疫功能免疫功能8.8.識(shí)別功能識(shí)別功能9.9.遺傳信息傳遞功能遺傳信息傳遞功能10.10.凝血與抗凝血功能凝血與抗凝血功能 蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能蛋白質(zhì)

3、的種類繁多蛋白質(zhì)的種類繁多大腸桿菌約含蛋白質(zhì)3 000種，人體內(nèi)含蛋白質(zhì)10萬余種。蛋白質(zhì)是細(xì)胞中含量最豐富的生物大分子約占人體固體成分的45% ，可達(dá)細(xì)胞干重的70%。 第一節(jié) 蛋白質(zhì)的分子組成一、蛋白質(zhì)的元素組成及其特點(diǎn)一、蛋白質(zhì)的元素組成及其特點(diǎn) 組成蛋白質(zhì)的元素主要有： C、H、O、N。有些蛋白質(zhì)還含有少量的S 、P、Se、Fe、Cu、Zn、Mn、Co 、Mo，個(gè)別蛋白質(zhì)還含有 I。蛋白質(zhì)的元素組成特點(diǎn)：一切蛋白質(zhì)都含有氮，而且含氮量相當(dāng)恒定,平均為 16% 。 1g 氮相當(dāng)于 6.25g 蛋白質(zhì)。 生物體內(nèi)的含氮物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)，因此只要測(cè)定生生物體內(nèi)的含氮物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)，因此只要

4、測(cè)定生物樣品的含氮量，就可按下式計(jì)算出其蛋白質(zhì)大致含量：物樣品的含氮量，就可按下式計(jì)算出其蛋白質(zhì)大致含量：100g樣品中蛋白質(zhì)的含量（g%） 每克樣品中含氮克數(shù)6.25100二、蛋白質(zhì)的基本組成單位氨基酸 蛋白質(zhì)受酸、堿或蛋白酶水解產(chǎn)生游離氨基酸。因此，組成蛋蛋白質(zhì)受酸、堿或蛋白酶水解產(chǎn)生游離氨基酸。因此，組成蛋白質(zhì)的基本單位是白質(zhì)的基本單位是氨基酸氨基酸(amino acid) (amino acid) 。 自然界存在的氨基酸有300多種，但組成人體蛋白質(zhì)氨基酸僅有20種，且都有特異的遺傳密碼，為編碼氨基酸。 （一）氨基酸的結(jié)構(gòu)（一）氨基酸的結(jié)構(gòu)R R代表氨基酸側(cè)鏈代表氨基酸側(cè)鏈氨基酸的結(jié)構(gòu)

5、通式：H2NCHRCOOHCOO-C CHRH3N N+ +或氨基酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：除脯氨酸為亞氨基酸外，其余19種均符合上述通式，均為-氨基酸 ； 除甘氨酸的R為H外，其它氨基酸的-碳原子都是不對(duì)稱碳原子，因而有兩種不同的構(gòu)型，即L型和D型。組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸都是L型。 組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有20種，其中除甘氨酸和脯氨酸外，均屬于L型-氨基酸。 不同氨基酸的R側(cè)鏈各異，它們的分子量、解離程度和化學(xué)反應(yīng)性質(zhì)也不相同。 L L- - -氨氨基基酸酸D D- - -氨氨基基酸酸C CN NH H2 2R RC CO OO OH HH HC CH HR RC CO OO OH HN NH H2

6、2 （二）氨基酸的分類（二）氨基酸的分類根據(jù)R側(cè)鏈基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的不同，可將20種氨基酸分為4類： 1.非極性疏水性氨基酸：7種 2.極性中性氨基酸：8種 3.酸性氨基酸：2種 4.堿性氨基酸：3種 1.非極性疏水氨基酸 側(cè)鏈特征是含有非極性R側(cè)鏈，它們顯示出不同程度的疏水性。 2.極性中性氨基酸 側(cè)鏈特征是含有極性R側(cè)鏈（如側(cè)鏈上含有羥基或巰基、酰胺基等極性基團(tuán)），故有親水性，但在中性水溶液中不電離。 3.酸性氨基酸 特征是它們的側(cè)鏈含有羧基，易解離出H+而具有酸性。此類氨基酸有兩種：谷氨酸、天冬氨酸 4.堿性氨基酸 特征是它們的側(cè)鏈含有易接受H+的基團(tuán)而具有堿性。此類氨基酸有三種：賴氨酸

7、、精氨酸和組氨酸（二）氨基酸的分類（二）氨基酸的分類根據(jù)人體內(nèi)能否合成，將氨基酸分為3類：1.必需氨基酸：賴、色、苯丙、蛋、纈、蘇、亮、異亮等8種。2.半必需氨基酸：精、組等2種。3.非必需氨基酸：其余10種。氨基酸在多肽鏈中的連接方式氨基酸在多肽鏈中的連接方式肽鍵和肽肽鍵和肽 肽鍵由一個(gè)氨基酸的羧基（-COOH）與另一個(gè)氨基酸的氨基（-NH2）縮合脫去一分子水所形成的酰胺鍵（-CO-NH-）。 肽鍵上的四個(gè)原子（C H O N）處于同一平面上，該平面稱為肽鍵平面或酰胺平面。 N NC CC C O OH HR R2 2O OH HH HH H+ +肽鍵肽鍵-H-H2 2O ON NH H2

8、2C CC CN NC CCOOHCOOHR R1 1R R2 2O OH HH HH HN NC CC C O OH HR R1 1O OH HH HH H肽鍵平面肽鍵平面 氨基酸通過肽鍵連接所形成的化合物稱為肽。 由兩個(gè)氨基酸形成的肽稱為二肽，由三個(gè)氨基酸形成的肽稱為三肽，以此類推。通常將10個(gè)以內(nèi)的氨基酸形成的肽稱為寡肽，十肽以上者形成的肽稱為多肽。 多肽分子中的氨基酸相互連接形成長(zhǎng)鏈，稱為多肽鏈。 肽鏈中的氨基酸因脫水縮合已不是完整的氨基酸，故稱為氨基酸殘基。 氨基酸由肽鍵連接成的長(zhǎng)鏈骨架，稱為主鏈，而各氨基酸殘基的R基團(tuán)統(tǒng)稱為側(cè)鏈。 多肽鏈有兩端： 有自由氨基的一端稱為氨基末端或 N

9、 端，通常寫在多肽鏈的左側(cè)。 有自由羧基的一端稱為羧基末端或 C 端，通常寫在多肽鏈的右側(cè)。 N NH H2 2C C CONHCONH C C CONHCONH C C CONHCONH C C COOHCOOHR R1 1R R4 4R R2 2R R3 3H HH HH HH H主主鏈鏈側(cè)鏈側(cè)鏈N端N端C端C端 多肽鏈中氨基酸殘基的順序編號(hào)從N端開始。 肽的命名也從N端開始，如由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的三肽稱為谷氨酰半胱氨酰甘氨酸，簡(jiǎn)稱為谷胱甘肽(glutathione,GSH)。 H HSHSHC CH H2 2CHCHC C NHNHC CH H2 2COO-COO-O ON

10、NH HC C O OC CH H2 2N NH H2 2C CH H2 2C C COOHCOOH谷谷胱胱甘甘肽肽 第二節(jié) 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)是由許多氨基酸單位通過肽鍵連接所形成的具有特定分子結(jié)構(gòu)的高分子化合物。 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)可分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)。一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)稱為高級(jí)或空間構(gòu)象。一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)概念 指氨基酸在蛋白質(zhì)多肽鏈中的排列順序 。主要的化學(xué)鍵肽鍵、有些蛋白質(zhì)還含有二硫鍵。 胰島素（Insulin）世界上第一個(gè)被確定一級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。牛胰島素的一級(jí)結(jié)構(gòu) 一級(jí)結(jié)構(gòu)是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ)，但不

11、是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象唯一因素。 二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)包括二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)結(jié)構(gòu)。（一）蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu) 概念 是指多肽鏈本身沿長(zhǎng)軸方向折疊或盤曲所形成的有規(guī)律的、重復(fù)出現(xiàn)的空間結(jié)構(gòu)。 維系蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要化學(xué)鍵是氫鍵 蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式-螺旋 -折疊 -轉(zhuǎn)角 無規(guī)卷曲“-螺旋和-折疊”是蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)中最常見的構(gòu)象形式1. -螺旋-螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 多肽鏈以肽鍵平面為單位，-碳原子為轉(zhuǎn)折點(diǎn)，有規(guī)律的盤繞成右手螺旋結(jié)構(gòu)。 每3.6個(gè)氨基酸殘基盤繞一圈，螺距為0.54nm。 相鄰螺旋的肽鍵之間形成氫鍵，方向與長(zhǎng)軸基本平行，維持螺旋的

12、穩(wěn)定。 R基團(tuán)伸向螺旋外側(cè)，其大小、形狀及電荷性質(zhì)均影響-螺旋的形成。2 2.-.-折疊折疊 -折疊的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 多肽鏈呈伸展?fàn)顟B(tài)，肽鍵平面沿長(zhǎng)軸折疊呈鋸齒狀，兩平面間夾角為110，R基交替地伸向鋸齒狀結(jié)構(gòu)的上下方。 若干肽段互相靠攏，平行排列，通過氫鍵連接。氫鍵的方向與長(zhǎng)軸垂直。 若兩條肽段走向一致（N端、C端方向相同），稱為順向平行；反之，稱之為逆向平行，逆向更穩(wěn)定。-折疊包括平行式和反平行式兩種類型折疊包括平行式和反平行式兩種類型 3 3.-.-轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角 -轉(zhuǎn)角的特點(diǎn)主鏈骨架本身以大約180回折 回折部分通常由4個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成 構(gòu)象依靠第一殘基的-CO基與第四殘基的- NH基之間形成氫鍵

13、來維系。 4 4. .無規(guī)卷曲無規(guī)卷曲 是指多肽鏈中除了以上幾種比較規(guī)則的構(gòu)象外，其余沒有確定規(guī)律性的那部分肽鏈構(gòu)象。 （二）蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)（二）蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)概念 指具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈進(jìn)一步折疊盤曲所形成的空間結(jié)構(gòu)。 一般為球狀或橢圓狀，并具有一定的生物學(xué)活性。 主要化學(xué)鍵疏水鍵、氫鍵、鹽鍵等非共價(jià)鍵和二硫鍵。疏水鍵是維持三級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的最主要作用力。蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu) （三）蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)（三）蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu) 概念 是指各亞基之間的空間排布及亞基間的連接和相互作用所形成的更高級(jí)空間結(jié)構(gòu) 具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈稱為亞基。 化學(xué)鍵 氫鍵、鹽鍵、范氏引力、

14、疏水鍵等非共價(jià)鍵。 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中應(yīng)注意的幾個(gè)問題蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中應(yīng)注意的幾個(gè)問題 由一條多肽鏈形成的蛋白質(zhì)其最高級(jí)結(jié)構(gòu)為三級(jí)，具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)才具有生物學(xué)活性。 形成蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)至少要有兩條多肽鏈。 兩條或兩條以上的多肽鏈靠共價(jià)鍵連接的蛋白質(zhì)沒有四級(jí)結(jié)構(gòu)。 由一條多肽鏈形成的蛋白質(zhì)與亞基不同。蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵 氫鍵氫鍵 常見于連接在一電負(fù)性很強(qiáng)的原子上的氫原常見于連接在一電負(fù)性很強(qiáng)的原子上的氫原 子與另一電負(fù)性很強(qiáng)的原子之間。子與另一電負(fù)性很強(qiáng)的原子之間。 蛋白質(zhì)分子中氫鍵的形成蛋白質(zhì)分子中氫鍵的形成氫鍵氫鍵疏水鍵 非極性物質(zhì)在含水的極性環(huán)境中存在時(shí)，會(huì)產(chǎn)生一種相互聚集的力，這種力稱為

15、疏水鍵或疏水作用力。 蛋白質(zhì)分子中的許多氨基酸殘基側(cè)鏈也是非極性的，這些非極性的基團(tuán)在水中也可相互聚集，形成疏水鍵，如Leu，Ile，Val，Phe，Ala等的側(cè)鏈基團(tuán)。 離子鍵（鹽鍵）是由正、負(fù)離子間通過靜電引力相互吸引而形成的化學(xué)鍵。 在近中性環(huán)境中，蛋白質(zhì)分子中的酸性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶負(fù)電荷，而堿性氨基酸殘基側(cè)鏈電離后帶正電荷，二者之間可形成離子鍵。范德華氏（van der Waals)引力原子之間存在的相互作用力原子之間存在的相互作用力 第三節(jié) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系相似結(jié)構(gòu)表現(xiàn)相似的功能。不同結(jié)構(gòu)具有不同的功能。 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)構(gòu)象是其

16、生物學(xué)功能的基礎(chǔ)，構(gòu)象改變功能改變。三、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變與疾病三、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變與疾?。ㄒ唬┮患?jí)結(jié)構(gòu)改變與疾?。ǚ肿硬。╃牭稜罴t細(xì)胞性貧血，是一種蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變導(dǎo)致的血紅蛋白異常病。 （二）空間結(jié)構(gòu)改變與疾?。?gòu)象病）蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)不變而僅其構(gòu)象發(fā)生改變也可導(dǎo)致疾病發(fā)生，有人稱此類疾病為構(gòu)象病。例如肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥。 第四節(jié) 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)一、蛋白質(zhì)的兩性電離與等電點(diǎn)一、蛋白質(zhì)的兩性電離與等電點(diǎn) 1 1. . 蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì) 蛋白質(zhì)分子中可解離的基團(tuán) 多肽兩端游離的-氨基和-羧基 多肽側(cè)鏈R上解離的基團(tuán) 決定蛋白質(zhì)解離成正負(fù)離子的因素 蛋白質(zhì)所含酸性和堿性基

17、團(tuán)的數(shù)目 蛋白質(zhì)所在溶液的PH值2 2. .蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（pIpI） 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH值時(shí)，蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等，即成為兼性離子或兩性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（pI）。 PrPrNHNH2 2COOCOO- -PrPrNHNH3 3+ +COOHCOOHPrPrNHNH3 3+ +COOCOO- -OHOH- -H H+ +(pHpI)(pHpI)(pHpI)(pHpI)(pHpI)(pHpI)OHOH- -H H+ +蛋白質(zhì)的陽離子蛋白質(zhì)的陽離子蛋白質(zhì)的兼性離子蛋白質(zhì)的兼性離子蛋白質(zhì)的陰離子蛋白質(zhì)的陰離子 體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)的

18、等電點(diǎn)在體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)在pH5.0pH5.0左右，因而在生理左右，因而在生理?xiàng)l件下（條件下（pH7.35-7.45pH7.35-7.45 ）以陰離子形式存在）以陰離子形式存在 。 3 3. .電泳電泳帶電粒子在電場(chǎng)中向電性相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。 蛋白質(zhì)在帶電場(chǎng)中泳動(dòng)的速度和方向與其所帶電荷的性質(zhì)、數(shù)量及分子的大小、形狀有關(guān)。帶電荷多，分子小的泳動(dòng)速度較快；反之則泳動(dòng)較慢，從而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的。 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳可將血清蛋白分為清蛋白、1球蛋白、2球蛋白、球蛋白、球蛋白。 A A：染色后顯示的蛋白質(zhì)區(qū)帶：染色后顯示的蛋白質(zhì)區(qū)帶 B B：光密度掃描定量分析：光密度掃描定量分

19、析二、膠體性質(zhì)二、膠體性質(zhì) 1 1. .蛋白質(zhì)有膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)有膠體性質(zhì) 蛋白質(zhì)是生物大分子，分子量在蛋白質(zhì)是生物大分子，分子量在1 1萬萬1010萬之間，分子直徑在膠萬之間，分子直徑在膠體顆粒的范圍（體顆粒的范圍（11001100nmnm），因此，蛋白質(zhì)具有膠體的性質(zhì)。），因此，蛋白質(zhì)具有膠體的性質(zhì)。 2 2. .蛋白質(zhì)親水膠體穩(wěn)定的因素蛋白質(zhì)親水膠體穩(wěn)定的因素 蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和同種電荷。破壞兩個(gè)穩(wěn)定因素，則蛋白質(zhì)從溶液中析出而產(chǎn)生沉淀。 3 3. .蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)的應(yīng)用蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)的應(yīng)用 透析用于分離純化蛋白質(zhì)超速離心用于蛋白質(zhì)的分離純化及分子量的測(cè)定。沉降系數(shù)（沉降系數(shù)（sed

20、imentation coefficient,S)sedimentation coefficient,S) 指單位力場(chǎng)中的沉降速度（指單位力場(chǎng)中的沉降速度（1S1S1010-13-13秒）。秒）。 沉降系數(shù)與物質(zhì)的分子量的大小、形狀、密 度及溶劑的密度高低有關(guān)。分子量越大，顆粒越 緊密，沉降系數(shù)越大。三、蛋白質(zhì)的變性作用變性作用的概念變性作用的概念 在某些物理或化學(xué)因素的作用下，蛋白質(zhì)特定的空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性喪失，稱為蛋白質(zhì)的變性。變性的實(shí)質(zhì)變性的實(shí)質(zhì) 次級(jí)鍵斷裂，空間結(jié)構(gòu)破壞 引起變性的因素引起變性的因素 物理因素物理因素 高溫、高壓、紫外線、電離輻射、超聲波等

21、。高溫、高壓、紫外線、電離輻射、超聲波等。 化學(xué)因素化學(xué)因素 強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑、尿素、重金屬鹽等。強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑、尿素、重金屬鹽等。變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn)變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn) A. A.生物學(xué)活性喪失生物學(xué)活性喪失 B. B.溶解度降低，易于沉淀溶解度降低，易于沉淀 C.C.粘度增加粘度增加 D.D.結(jié)晶能力消失結(jié)晶能力消失 E.E.易被蛋白酶水解易被蛋白酶水解蛋白質(zhì)變性的應(yīng)用用用75%75%乙醇、高溫、高壓和紫外線等消毒殺菌；乙醇、高溫、高壓和紫外線等消毒殺菌；臨床化驗(yàn)室常用鎢酸、三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)制備無蛋白血濾液，臨床化驗(yàn)室常用鎢酸、三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)制備無蛋白血濾液，采用熱凝法檢查尿蛋白；采用熱凝法檢查尿蛋白；低溫保存激素、酶、疫苗和免疫血清等蛋白質(zhì)生物制劑。低溫保存激素、酶、疫苗和免疫血清等蛋白質(zhì)生物制劑。牛核糖核酸酶的變性與復(fù)性牛核糖核酸酶的變性與復(fù)性蛋白質(zhì)沉淀 概念 蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。 方法 鹽析法、有機(jī)溶劑的沉淀、重金屬鹽沉淀、生物堿試劑沉淀。 變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，但不一定都發(fā)生沉淀。沉淀的蛋白質(zhì)易發(fā)生變性，但并不都變性，如鹽析。 蛋白質(zhì)的凝固蛋白質(zhì)的凝固加熱使蛋白質(zhì)變性并凝聚成塊狀稱為凝固。此凝塊不溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中。凝固實(shí)際上是蛋白質(zhì)變性后進(jìn)一步發(fā)展的不可逆的結(jié)果。因此