【課件】1.2微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)（培養(yǎng)基 無(wú)菌技術(shù)）課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

1、課前6分鐘：閱讀P9-10，快速找答案1）微生物范圍2）培養(yǎng)基作用及類(lèi)型3）培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成成分4）無(wú)菌技術(shù)的類(lèi)型及相應(yīng)的方法與對(duì)象從社會(huì)中來(lái)從社會(huì)中來(lái) P9 P9家庭自制成功率低葡萄酒、泡菜發(fā)霉變質(zhì)食用自制酸奶導(dǎo)致腸胃不適屢見(jiàn)不鮮原因：原因：解決思路：解決思路：制作過(guò)程中有雜菌混入讓雜菌無(wú)法混入發(fā)酵物中需要應(yīng)用無(wú)菌技術(shù) + 微生物的純化技術(shù)（培養(yǎng)基培養(yǎng)）第2節(jié) 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù) 本節(jié)聚焦:l 什么是培養(yǎng)基？如何配制？l 什么是無(wú)菌技術(shù)？l 怎樣進(jìn)行酵母菌的培養(yǎng)？ 一微生物是一切難以用肉眼觀察的微小生物的總稱。酵母菌酵母菌青霉菌青霉菌球菌球菌藍(lán)細(xì)菌藍(lán)細(xì)菌草履蟲(chóng)草履蟲(chóng)衣藻衣藻新冠病毒新冠病毒

2、1 1）病毒類(lèi)：）病毒類(lèi)：病毒、類(lèi)病毒、朊病毒病毒、類(lèi)病毒、朊病毒（需寄主活細(xì)胞作為培養(yǎng)基）（需寄主活細(xì)胞作為培養(yǎng)基）2 2）原核類(lèi)原核類(lèi): :3 3）真核類(lèi)真核類(lèi)細(xì)菌、支原體、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、支原體、放線菌、藍(lán)細(xì)菌細(xì)菌真菌真菌（酵母菌、霉菌、食用菌酵母菌、霉菌、食用菌）原生生物原生生物（藻類(lèi)、原生動(dòng)物藻類(lèi)、原生動(dòng)物）一培養(yǎng)基 + 無(wú)菌技術(shù)提供微生物生長(zhǎng)繁殖提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需所需營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)和和環(huán)境條件環(huán)境條件避免雜菌污染避免雜菌污染高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌干熱滅菌箱干熱滅菌箱超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)酒精燈燃燒酒精燈燃燒一培養(yǎng)基1. 1. 作用：作用：只有適應(yīng)環(huán)境（選擇培養(yǎng)基只有適應(yīng)環(huán)境（選擇培養(yǎng)

3、基的基底）的菌種才能存活。的基底）的菌種才能存活。培養(yǎng)、分離培養(yǎng)、分離( (篩選篩選) )、鑒定、保存、鑒定、保存微生物或積累其代謝微生物或積累其代謝物。物。選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)后會(huì)發(fā)生某種變化，從后會(huì)發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類(lèi)型的微生而區(qū)別不同類(lèi)型的微生物（但物（但培養(yǎng)基上的各個(gè)培養(yǎng)基上的各個(gè)菌種均不死亡菌種均不死亡）。）。一培養(yǎng)基2. 2. 類(lèi)型：類(lèi)型：劃分培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)主要應(yīng)用物理性質(zhì)化學(xué)成分功能不加凝固劑不加凝固劑加凝固劑，如加凝固劑，如瓊脂瓊脂（易溶于沸易溶于沸水，熔化后的溶液溫度需

4、降到水，熔化后的溶液溫度需降到4040時(shí)才開(kāi)始凝固時(shí)才開(kāi)始凝固）工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)鑒定。分類(lèi)鑒定。分離、鑒定、活菌計(jì)分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保存等數(shù)、保存等含有天然成分，培養(yǎng)基成分不明確含有天然成分，培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生產(chǎn)，降低成本工業(yè)生產(chǎn)，降低成本由已知成分配制而成的培養(yǎng)基由已知成分配制而成的培養(yǎng)基分類(lèi)、鑒定分類(lèi)、鑒定添加（或缺少）某種化學(xué)成分添加（或缺少）某種化學(xué)成分培養(yǎng)、分離出特定培養(yǎng)、分離出特定微生物。微生物。添加某種指示劑或化學(xué)藥劑添加某種指示劑或化學(xué)藥劑鑒別不同種類(lèi)微生物鑒別不同種類(lèi)微生物選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基半固

5、體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基一培養(yǎng)基3. 3. 營(yíng)養(yǎng)組成營(yíng)養(yǎng)組成: : 碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽（基本成分）無(wú)機(jī)碳源：無(wú)機(jī)碳源： COCO2 2、COCO3 32-2-、HCOHCO3 3- -2）無(wú)機(jī)氮源：無(wú)機(jī)氮源： NHNH4 4、NONO3 3- -、NHNH3 3等等3）CaCa、K K 、MgMg、NaNa、ClCl等等各種有機(jī)物各種有機(jī)物蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸（調(diào)節(jié)酸堿平衡、維持滲透壓）（調(diào)節(jié)酸堿平衡、維持滲透壓）主要提供碳源、磷主要提供碳源、磷酸鹽、維生素等酸鹽、維生素等有機(jī)碳源：有機(jī)碳源： 葡萄糖、葡萄糖、牛肉膏牛肉膏

6、等等主要提供氮源和維生素等主要提供氮源和維生素等有機(jī)氮源：有機(jī)氮源： 蛋白胨蛋白胨、牛肉膏、牛肉膏、尿素、氨基酸等尿素、氨基酸等碳源、氮源一培養(yǎng)基各種培養(yǎng)基一般都含有 、_、_和 等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)_、 以及_的需求。例如：乳酸桿菌霉菌細(xì)菌厭氧微生物培養(yǎng)基特殊處理碳源氮源PHO2添加維生素調(diào)至酸性調(diào)至中性或弱堿性提供無(wú)氧條件水無(wú)機(jī)鹽特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)理解和分析下列語(yǔ)句：1）含C、H、O、N的有機(jī)物能為微生物提供碳源、氮源和能源2）培養(yǎng)基中的無(wú)機(jī)物可調(diào)節(jié)pH和滲透壓，有時(shí)也可作為微生物的能源3） 并非所有的培養(yǎng)基都必須添加碳源和氮源4） 自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基的主要差別在

7、于碳源化能合成作用的微生物化能合成作用的微生物固氮菌不需要額外添加氮源固氮菌不需要額外添加氮源鐵、硫、硝化鐵、硫、硝化可無(wú)需加碳源可無(wú)需加碳源一無(wú)菌技術(shù)（1 1）防止培養(yǎng)物被污染）防止培養(yǎng)物被污染（2 2）防止感染實(shí)驗(yàn)操作者）防止感染實(shí)驗(yàn)操作者用較為用較為溫和溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部面或內(nèi)部一部分一部分對(duì)人體有害的微生物（對(duì)人體有害的微生物（不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子）使用使用強(qiáng)烈強(qiáng)烈理化因素殺死物體內(nèi)外理化因素殺死物體內(nèi)外所有的所有的微生物，微生物，包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子，而達(dá)到，而達(dá)到完全無(wú)菌完全無(wú)菌之過(guò)程。之過(guò)程。避免雜菌污染。是獲

8、得純凈微生物培養(yǎng)物的避免雜菌污染。是獲得純凈微生物培養(yǎng)物的！1. 1. 目的目的: : 2. 2. 類(lèi)型類(lèi)型: : （1 1）消毒）消毒（2 2）滅菌）滅菌P11類(lèi)型適用范圍操作方法消毒滅菌較為較為溫和溫和理化方法，理化方法，殺死殺死部分部分微生物微生物（不包括（不包括芽孢、孢芽孢、孢子）子）強(qiáng)烈強(qiáng)烈的理的理化方法，化方法，殺死所有殺死所有微生物微生物（包括芽（包括芽孢、孢子）孢、孢子）煮沸消毒法煮沸消毒法日常生活日常生活100 100 煮沸煮沸5 56 min6 min巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高溫的液體（如牛奶）不耐高溫的液體（如牛奶）626265 65 煮煮30 min30 min或或80

9、-90 80-90 煮煮30s-1 min30s-1 min化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑實(shí)驗(yàn)員、水源等實(shí)驗(yàn)員、水源等擦拭等擦拭等, ,如用如用酒精酒精擦拭雙手、擦拭雙手、用用氯氣氯氣消毒水源消毒水源紫外線紫外線紫外線照射紫外線照射30 min30 min灼燒滅菌灼燒滅菌接種的接種的金屬工具金屬工具、接種時(shí)、接種時(shí)用的用的試管口試管口或或瓶口瓶口等等直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒干熱滅菌干熱滅菌耐高溫、需要保持干燥的耐高溫、需要保持干燥的物品物品, ,如如玻璃器皿和金屬玻璃器皿和金屬用具用具等等物品放入物品放入干熱滅菌箱干熱滅菌箱,160,160170 170 加熱加熱2

10、23h3h濕熱滅菌濕熱滅菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基等等, ,生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)內(nèi),100 kPa,100 kPa,溫溫度度121 ,15121 ,1530 min30 min接種室、接種箱，超凈工作臺(tái)接種室、接種箱，超凈工作臺(tái)一消 毒煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑紫外線紫外線一滅 菌可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的可以殺滅所有的生物，包括最耐熱的 某些微生物的休眠體。某些微生物的休眠體?；颈３峙囵B(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。基本保持培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞。注：使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后注：使用后的培養(yǎng)基必須滅菌后才能丟棄，以免污染環(huán)境。才能丟棄，以免污染環(huán)境。一滅 菌原理：原理：使微生物細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生使微生物細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥等質(zhì)干燥等對(duì)象：對(duì)象：耐高溫，需保持干燥的物品，耐高溫，需保持干燥的物品， 玻璃器皿玻璃器皿 ( (如試管、培養(yǎng)皿、吸管、注射器如試管、培養(yǎng)皿、吸管、注射器) ) 金屬器具金屬器具 ( (如針頭、如針頭、 鑷子、剪刀等鑷子、剪刀等) )干熱滅菌箱干熱滅菌箱涂布器涂布器一滅 菌3）灼燒滅菌：酒精燈火焰灼燒1.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，要十分重視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面