第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

1、第六章 芳酸類非甾體抗炎藥物的分析特殊雜質與檢查 3結構與性質1鑒別試驗2含量測定含量測定4又稱又稱: :解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥（NSAID），阿司），阿司匹林類藥物匹林類藥物 具有解熱、鎮(zhèn)痛作用具有解熱、鎮(zhèn)痛作用 多數(shù)有抗炎、抗風濕作用多數(shù)有抗炎、抗風濕作用 共同的作用基礎共同的作用基礎 抑制前列腺素（PGs）的）的生物合成性質性質 （一）物理性質（一）物理性質 （1 1）固體）固體 具有一定的熔點具有一定的熔點 （2 2）溶解性）溶解性 游離芳酸類藥物幾乎游離芳酸類藥物幾乎不溶于水，易溶于有機溶劑；芳酸不溶于水，易溶于有機溶劑；芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水，難溶堿金屬鹽及其它鹽易溶于

2、水，難溶于有機溶劑。于有機溶劑。 （二）化學性質 1. 酸性：芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在36之間，屬中等強度的酸或弱酸； 鄰位有X、NO2、OH等吸電子取代基存在使酸性增強；若羧基不直接與苯環(huán)相連，屬于脂肪酸類，酸性較弱；酰胺結構，無明顯酸性。 2. 水解性：酯鍵、酰胺鍵可水解，利用其水解得到酸和醇的性質可進行鑒別；利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測定含量；芳酸酯類藥物還應檢查因水解而引入的特殊雜質。 3. UV 3. UV 4. 取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質進行鑒別和含量測定。如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應鑒別。具芳伯氨基的藥物可用重

3、氮化偶合反應鑒別、亞硝酸鈉滴定法測定含量。 第二節(jié) 鑒別試驗 一、FeCl3反應 具酚羥基或水解后能產生酚羥基的藥物具酚羥基或水解后能產生酚羥基的藥物 OHOHOOOOFeOH+ FeCl3+ H2O+ 3HCl紫堇色阿司匹林：紫堇色阿司匹林：紫堇色雙水楊酯：紫色雙水楊酯：紫色二氟尼柳：深紫色二氟尼柳：深紫色均通過產生水楊酸與三氯化鐵反應顯均通過產生水楊酸與三氯化鐵反應顯色色水楊酸反水楊酸反應應pH4-6 對乙酰氨基酚與三氯化鐵顯藍紫色HONCH3OH對乙酰胺基酚 ParacetamolFeCl3+Fe1/3ONCH3OH+HCl藍紫色NSOHCH3NOONOH吡羅昔康 PiroxicamNS

4、OHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam顯玫瑰紅色顯玫瑰紅色顯淡紫色顯淡紫色酚羥基反酚羥基反應應二、縮合反應顯色CH3HOOO酮洛芬+NHNO2NO2NH2CH3HOON NO2NNO2橙紅色H2SO4-H2OH二苯甲酮結構二苯甲酮結構 三、重氮化-偶合反應 對乙酰氨基酚具有潛在的芳伯氨基，在酸性條件下反應可生成對氨基酚，再與亞硝酸鈉進行重氮化反應，之后再與堿性-萘酚偶合生成紅色偶氮化合物。NHCOCH3HO+HCl+H2ONH2HOHCl + CH3COOHN2ClHO+2H2ONH2HOHClHNO2+N2ClHO+OHNaOHOHNNOH紅色偶氮化合物水解反應水解反應產

5、生芳伯產生芳伯胺胺芳伯胺重氮化芳伯胺重氮化偶合反應偶合反應重氮化重氮化- -偶合反應偶合反應OCOCH3COONHCOCH3+3H2OHCl貝諾酯HONH2HCl+OHCOOHNaNO2,2HClHON2+Cl-OHNaOHOHNNOH橙紅色四、四、氧化反應氧化反應甲芬那酸H2SO4深藍色(O)K2Cr2O7隨即變?yōu)樽鼐G色吲哚美辛H2SO4紫色(O)K2Cr2O7吲哚美辛HCl 綠色(O)K2Cr2O7 NaNO2放置后漸變黃色五、水解反應COOHOCOCH3Na2CO3COONaOHCH3COONa+CO2+H2SO4COOHOHH2SO4CH3COOH阿司匹林阿司匹林白色水楊酸白色水楊酸醋

6、酸醋酸可溶于醋酸銨（測定熔點），水楊酸白色雙水楊酯稀鹽酸NaOH 六、特征元素反應： 分子中含有氯、硫等元素可以轉化為氯化物或硫化物進而進行鑒別。 如雙氯芬酸鈉與碳酸鈉熾灼灰化，加水煮沸、濾過后，顯氯化物的鑒別反應。 美洛昔康經(jīng)高溫分解產生H2S氣體，與醋酸鉛生成黑色硫化鉛沉淀。（1） 測定測定max ；min。 例如：布洛芬用例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制備溶液制備0.25mg/ml； max ； 265nm, 273nm; min。245nm, 271nm。（2） 測定測定max 例如：雙氯芬酸鈉，例如：雙氯芬酸鈉，20g/ml max =276nm; （3） 在在max 處測定一定

7、濃度供試液的吸收度處測定一定濃度供試液的吸收度A 。 例如：例如： 20g/ml甲酚鈉酸甲醇液在甲酚鈉酸甲醇液在max =279nm，A=0.690.74； 在在max =350nm，A=0.560.60。 1 1、紫外吸收光譜法、紫外吸收光譜法七、光譜法七、光譜法（4） 在規(guī)定的波長測定吸收度比值（即雙波長吸收度在規(guī)定的波長測定吸收度比值（即雙波長吸收度 比值法）比值法） 例如：對氨基水楊酸鈉例如：對氨基水楊酸鈉10g/ml; A265/A299 = 1.501.56 再例如：二氟尼柳再例如：二氟尼柳20g/ml（鹽酸乙醇液）（鹽酸乙醇液）; A251/A315 = 4.24.6 2、 IR

8、：阿司匹林阿司匹林-COOH-OH-COOHPh-C鄰位取代PhN-HO-HN-HPh:C=C芳胺酚 八、色譜法供試品保留時間供試品保留時間對照品保留時間對照品保留時間第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質及其檢查法特殊雜質及其檢查法一、阿司匹林和雙水楊酯中游離水楊酸及有關物質的檢查一、阿司匹林和雙水楊酯中游離水楊酸及有關物質的檢查ONaCO2加壓，ONaCOONaOHCOOHH+COOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,7075 C。ASAOH-CO2副產物水楊酸COOHOOOH雙水楊酯COOHOHCOOHOHHOOOCOOHOOHOOHCOOHCOOHHOOOCOOHHOCOOHOO+COOHOO

9、OCOOH-+HPLC法法淡黃、淡黃、紅棕、紅棕、深棕色深棕色1、阿司匹林中游離水楊酸的檢查 來源：原料殘存（生產過程中乙?；煌耆?、水解產生（貯存過程中水解產生） 用用1%1%冰醋酸甲醇冰醋酸甲醇溶液制備供試品，溶液制備供試品，以防阿司匹林水以防阿司匹林水解解2 2、有關物質的檢查、有關物質的檢查OH(CH3CO)2OOCOCH3+OCOCH3COOHOCOCH3COO+OHCOOHOHCOO醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯HPLC法法3、雙水楊酯中游離水楊酸的檢查 水楊酸+Fe(NO3)3 顯色 在=530nm處測定吸光度A，規(guī)定供試品溶液的吸光度不得大于水楊酸對照溶液的吸光度。二、甲芬

10、那酸中2,3-二甲基苯胺的檢查甲芬那酸ClCOOHH3CCH3NH2NHCOOHH3CCH3+CuGC法法三、二氟尼柳中有關物質的檢查FFNH2FFCOCH3FFOCOCH3FFOHFFOHCOOHFF+Cu偶聯(lián)乙酰化(CH3CO)2O,AlCl3氧化H2O2水解OH/H-+羧化CO2,CH3ONaTLCHPLC所謂物質A和物質B的檢查是采用自身對照法進行檢查的相同藥物,不同濃度,相互比較,主點限量四、萘普生的有關物質檢查四、萘普生的有關物質檢查MeOMeOCH3O?；然疢eOOHCH3COOH催化氫化MeOCH3COOH2-萘甲醚6-甲氧基-2-萘乙酮2-羥基-2-(6-甲氧基-2-萘基)

11、丙酸萘普生HPLC五、對乙酰氨基酚中氨基酚和對氯苯乙酰胺HPLCClNO2NH2HOHONO2HONHCOCH3水解還原?；疌lNHCOCH3一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法苯甲酸苯甲酸pKa 4.20水楊酸水楊酸pKa 2.98酸性較強酸性較強COHOHO羧酸鄰位羧酸鄰位-OH-OH，吸電子基團，使酸性增加；，吸電子基團，使酸性增加；分子內氫鍵，更增加了其極性分子內氫鍵，更增加了其極性直接滴定Aspirin、丙磺舒丙磺舒(Ch.P. BP. JP等等) 苯甲酸苯甲酸(Ch.P等等)均均采用本法采用本法1.直接滴定法直接滴定法中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20以下COONaOCOCH3H2O

12、阿司匹林在水中微溶，易溶于乙醇，固使用阿司匹林在水中微溶，易溶于乙醇，固使用乙醇為溶劑。乙醇為溶劑。中性乙醇：中性乙醇：對指示劑對指示劑( (酚酞酚酞) )而言為中性，而言為中性， 可消除滴定誤差可消除滴定誤差2 2、剩余量滴定法、剩余量滴定法NSOHCH3NOOOSNCH3H美洛昔康 Meloxicam本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾本品在甲醇、乙醇及水中極微溶或者幾乎不溶，在丙酮中微溶。所以乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使使用用定量過量的氫氧化鈉滴定液定量過量的氫氧化鈉滴定液溶解后，溶解后，再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。再用鹽酸滴定液回滴剩余的氫氧化鈉。烯醇式結烯醇式結構構:酸性酸

13、性3.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOH H2SO4 Na2SO4 2H2O取本品約1.5g，精密稱定，準確加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，緩緩煮沸10min，放冷，以酚酞為指示劑，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并將滴定結果用空白試驗校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相當于45.04mg的C9H9O4USP32-NF27（1）水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法含量% = ( V0-V) FTW 100%T = 0.5 12180.16 = 45.04 (mg/ml)滴定度滴

14、定度滴定度滴定度濃度濃度待測物反應待測物反應系數(shù)系數(shù)滴定液物反滴定液物反應系數(shù)應系數(shù)滴定液物摩滴定液物摩而質量而質量空白反應體空白反應體積積樣品測定消樣品測定消耗體積耗體積樣品稱重量樣品稱重量（2）.兩步滴定法兩步滴定法Aspirin片HOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸櫞酸枸櫞酸HOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸酒石酸水解產物水解產物水楊酸水楊酸HAc第一步：NaOH滴定所有的酸滴定所有的酸：酸性水解產物和酸性穩(wěn)定劑及阿司匹林的游離羧基。第二步：水解后剩余滴定水解后剩余滴定取本品取本品1010片，精密稱定，研細，精密稱取適量片，精密稱定，研細，精密稱取適量( (約相當于約相當于阿

15、司匹林阿司匹林0.3g)0.3g)，置錐形瓶中，加中性乙醇，置錐形瓶中，加中性乙醇( (對酚酞指示劑對酚酞指示劑顯中性顯中性)20ml)20ml，振搖使，振搖使ASAASA溶解，加酚酞指示液溶解，加酚酞指示液3 3滴，滴，滴加滴加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)至顯粉紅色，至顯粉紅色，再精密加再精密加NaOHNaOH液液(0.1mol/L)40ml(0.1mol/L)40ml，置水浴上加熱，置水浴上加熱15min15min，并時時振搖，迅，并時時振搖，迅速放冷至室溫，速放冷至室溫，用用H H2 2SOSO4 4液液(0.05mol/L)(0.05mol/L)滴定滴定，并將滴定的并將滴定的結果用空白試驗校正。結果用空白試驗校正。每每1ml1ml的的NaOHNaOH液液(0.1mol/L)(0.1mol/L)相當于相當于18.02mg18.02mg的的C C9 9H H8 8OO4 4COONaOCOCH3NaOHCOONaOHNaAc H2O2NaOH H2SO4