古方黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效研究

1、古方黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效研究2010-11-2 7:44:44論文代寫作者：胡惠蘭 王姿媛【摘要】 目的 觀察黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效。方法 采用相應的動物模型，觀察黃連香薷飲不同配比混合提取物的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等作用。結果 不同比例的黃連香薷飲提取物可明顯抑制甲型流感病毒FM1株引起的小鼠肺部病變、降低肺指數(shù)，有體內抗流感病毒作用，對酵母所致發(fā)熱大鼠有退熱作用，對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有抗急性炎癥的作用，有減少冰乙酸致小鼠疼痛扭體次數(shù)和提高熱板致痛小鼠痛閾值的作用。結論 黃連香薷飲有效部位不同配比均有一定的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理作用。 【關鍵詞】 黃連香薷

2、飲 藥理作用 抗病毒 抗炎古方黃連香薷飲1出自類證活人書，由黃連、香薷、厚樸三味藥材組成，功效清暑化濕，治療暑濕癥即現(xiàn)代臨床常見的暑濕感冒、空調病、胃腸型感冒等，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、出汗、鼻塞頭痛、頭昏重脹、身重倦怠。方中藥材黃連的主要有效成分是以小檗堿為主的生物學堿類成分，黃連提取物對革蘭陽性和陰性細菌、各型流感病毒均有一定的抑制作用，小檗堿具有抗急慢性炎癥的作用2。嚴銀芳等3采用柱層析法從香薷的揮發(fā)油中分離到了抗流感病毒的活性成分，厚樸提取物也具有明顯的抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜抗炎作用4。本實驗對黃連、香薷、厚樸提取物不同配比的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用進行了實驗研究，現(xiàn)將結果報道如下。1 實驗材

3、料1.1 動物 NIH小鼠，雌雄兼有，1822 g，廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，符合清潔級實驗標準，許可證號SCXK(粵)20050002；SD大鼠，雌雄兼有，180220 g，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（粵）20050001。1.2 藥物與試劑 黃連、香薷、厚樸三位藥材的有效部位不同比例配比混合物（由廣州中醫(yī)藥大學中藥學院提供），比例如下：111（A）、233(B)、122(C)；甲型流感病毒FM1株，由中國藥品生物檢定所提供，經小鼠增強毒力后，于雞胚尿囊腔傳代2次；病毒唑，山東齊魯制藥有限公司出品，批號080206；阿司匹林，北京華豐制藥公司生產，批號20071005

4、；面包酵母，Yung Cheng Industries LTD出品；地塞米松片，通化東寶藥業(yè)有限公司生產，批號070763；二甲苯：廣州化學試劑廠，批號200604032；乙醚，天津化學試劑有限公司；生理鹽水，廣州市宏祥醫(yī)藥科技有限公司；冰乙酸，分析純，進口分裝，廣東醫(yī)藥站化學公司；嗎啡注射液，沈陽第一制藥廠出品，批號865354。1.3 儀器 YJ875醫(yī)用凈化工作臺，蘇州凈化設備公司；壓力蒸汽滅菌器，上海南華醫(yī)療器械廠；超純水器，Millipore；超低溫冰箱，Sanyo 日本；精密電子分析天平，上海良平儀器儀表有限公司； LRH800GS型人工氣候箱，廣東省醫(yī)療器械廠出品。2 方法與結果

5、2.1 對甲型流感病毒FM1株的體內抑制作用5 模型的建立：取甲型流感病毒FM1株用流水沖浸融化，以無菌鹽水稀釋成每0.05 mL含15個LD50(半數(shù)致死量)，放冰水中保存。在乙醚輕度麻醉下，用已滴定的流感病毒液滴鼻感染，每鼠4滴約0.05 mL，同時設正常小鼠對照組。 取小鼠60只，雌雄各半，隨機分成6組，每組10只：正常小鼠對照組、模型組、陽性藥物組（病毒唑）、 A配比組、 B配比組、 C配比組。藥物在病毒攻擊后2 h開始給藥。共給藥4 d，每天1次，灌胃給藥。感染4 d后，禁食禁水4 h以上，稱小鼠體質量，處死小鼠，取出鼠肺，記錄病變程度。 將肺放在盛有生理鹽水的平碟中洗滌2次，用吸水

6、紙吸干表面水分，稱出肺重。按下式計算出肺指數(shù)與抑制率：肺指數(shù)=小鼠肺重（g）/小鼠體質量（g）100%，肺指數(shù)抑制率=（模型組平均肺指數(shù)-給藥組平均肺指數(shù)）/模型組平均肺指數(shù)100%。肺實變程度從“病變-”到“+”程度逐漸加深：-：雙側肺無病變出現(xiàn)；+：肺實變少于整個肺表面積的25%；+：肺實變占整個肺表面積的25%50%；+:肺實變占整個肺表面積的50%75%；+：肺實變占整個肺表面積的75%以上。結果見表1，2。表1 不同配比對流感病毒感染小鼠肺炎抑制作用（略）Table 1 Inhibitory action on mouse pneumonia infected with influe

7、nza virus與模型組比較: *P0.05,*P0.01 （t檢驗）表2 不同配比對流感病毒感染小鼠肺實變程度的影響（略）Table 1 Influence on mouse lung consolidation infected with influenza virus由表1可見，正常組與模型組肺指數(shù)比較，P0.01，提示造模成功。黃連香薷飲不同配比組平均肺指數(shù)與模型組比較差異有顯著性。不同配比的黃連香薷飲均能減輕病毒感染后小鼠肺實質病變的程度，其中C配比的作用略強。2.2 對酵母所致發(fā)熱大鼠的退熱作用6 取大鼠50只，雌雄各半，在安靜狀態(tài)下測量基礎體溫，然后按照基礎體溫隨機分成5組，每

8、組10只：蒸餾水組、阿司匹林組、 A配比組、 B配比組、 C配比組。每組大鼠分2次給藥，第1次灌胃給各組藥物一半劑量后，每只大鼠腹部皮下注射9%酵母混懸液，造模4 h后，第2次灌胃給另一半劑量。于造模后4 h、6 h、8 h、10 h時，分別測大鼠肛溫1次，以造模后各時間點的肛溫減去基礎體溫，作為退熱效果進行統(tǒng)計。結果見表3。表3 不同配比對酵母致大鼠發(fā)熱的影響實驗（略）Table 3 Influence on rat fever caused by yeast與蒸餾水組比較： *P0.05, *P0.01表3結果表明，黃連香薷飲不同配比組在10 h時大鼠肛溫與蒸餾水組比較有下降，差異有顯著性

9、，不同配比組間的差異不明顯。2.3 對二甲苯所致小鼠急性炎癥的影響 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、地塞米松組、 A配比組、 B配比組、 C配比組。灌胃給藥3 d（地塞米松組灌蒸餾水，于第3天灌胃地塞米松），末次給藥1 h后，將50 L的二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩面致炎，左耳作對照，20 min后處死小鼠，用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，用電子天平分別稱重，以左右耳片重量之差為腫脹程度。結果見表4。表4 不同配比對二甲苯致小鼠耳腫脹影響的實驗（略）Table 4 Influence on ear swelling of mice caused by pa

10、raxylene與蒸餾水組比較：*P0.01 表4結果表明，黃連香薷飲不同配比組腫脹程度小于蒸餾水組，差異有顯著性，提示對二甲苯所致小鼠有抗急性炎癥作用。2.4 小鼠冰乙酸致痛扭體實驗7 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、嗎啡組、 A配比組、B配比組、 C配比組。分別灌胃給藥（嗎啡組腹腔注射），1 h后（嗎啡半小時后），每只小鼠腹腔注射0.6%冰乙酸0.2 mL，記錄注射后20 min內小鼠因疼痛扭體的次數(shù)。結果見表5。表5 不同配比對冰乙酸致小鼠疼痛扭體影響的實驗（略）Table 5 Influence on mouse pain stretching caused

11、 by glacial acetic acid蒸餾水組比較：*P0.05;*P0.01 結果表明，黃連香薷飲不同配比組小鼠扭體次數(shù)都少于蒸餾水組，差異有顯著性，提示對冰乙酸致小鼠疼痛有抑制作用。2.5小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗 取雌性小鼠，將水浴箱調節(jié)恒溫（551），放一個大燒杯于水中，將小鼠投入燒杯，記錄小鼠從投入燒杯至受熱疼痛舔后足的時間，作為該鼠的痛閾值。篩選痛閾值在1030 s的小鼠，按痛閾值分層隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、嗎啡組、 A配比組、 B配比組、 C配比組，分別灌藥，記錄各組給藥后30、60、90和120 min時的痛閾值。結果見表6。表6 不同配比對小鼠熱板實驗鎮(zhèn)痛作用的影響

12、（略）Table 6 Influence on analgesic effect of mice caused by hot plate與蒸餾水組比較：*P0.05,*P0.01表6結果表明，黃連香薷飲不同配比組在不同時間點的痛閾值均大于蒸餾水組,差異有顯著性，提示對熱板致痛小鼠有鎮(zhèn)痛作用。3 討論3.1 黃連香薷飲原方為黃連6 g、香薷9 g、厚樸9 g，傳統(tǒng)服用方法多采用水煎煮的方式，本研究中各藥材有效部位是分別根據(jù)有效成分的理化性質采用水提酸堿處理、超臨界萃取等方法得到，由于與傳統(tǒng)工藝差異較大，因此所提化學成分的種類和數(shù)量也大不相同。對于有效部位的配比組方必須通過試驗研究才能確定。本實驗

13、對3種不同配比的藥效進行了初步的比較研究。其中A配比為等比例混合，B配比根據(jù)原處方量結合藥材的提取率確定，C配比是根據(jù)各藥材有效部位的急性毒性試驗及初步藥效試驗結果而定。3.2 研究結果顯示黃連香薷飲有效部位不同配比均有顯著的抗病毒、退熱、抗炎、鎮(zhèn)痛作用，其中對甲型流感病毒FM1株的體內抑制試驗、二甲苯所致小鼠急性炎癥試驗、小鼠冰乙酸致痛扭體實驗、小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗從數(shù)據(jù)趨勢上來看，C配比的藥效可能強于A配比和B配比。3.3 本實驗對黃連香薷飲3種有效部位的配比進行了藥效比較研究，初步得出了結論。但對于有效部位配伍的最佳比例還應采用更科學的試驗方法如正交設計、均勻設計等來確定，筆者將在本實驗的基礎上進行進一步研究?！緟⒖嘉墨I】 1 魏敏. 黃連香薷飲加味治療小兒夏季熱15例J. 實用中醫(yī)藥雜志， 2005，21（10）：602.2 舒華，向麗華. 黃連藥理作用及臨床應用J. 甘肅中醫(yī), 2004，17（12）：5-6.3 嚴銀芳，陳曉，楊小清，等. 石香薷揮發(fā)油抗流感病毒活性成分的初步研究J. 青島大學醫(yī)學院學報, 2002，38（2）：155-157.4 陳芨，王伯初. 厚樸的藥理研究進展J. 重慶