苯丙氨酸檢測(cè)試劑盒(細(xì)菌抑制法)說(shuō)明書(shū)

1、苯丙氨酸檢測(cè)試劑盒（細(xì)菌抑制法）說(shuō)明書(shū)【產(chǎn)品名稱(chēng)】通用名稱(chēng)：英文名稱(chēng)：【包裝規(guī)格】【預(yù)期用途】【檢驗(yàn)原理】【主要組成成分】【儲(chǔ)存條件及有效期】【適用機(jī)型】【樣本要求】【檢驗(yàn)方法】【參考值（參考范圍）】【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】【檢驗(yàn)方法的局限性】【產(chǎn)品性能指標(biāo)】【注意事項(xiàng)】【參考文獻(xiàn)】【生產(chǎn)企業(yè)】【 醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證編號(hào)】【醫(yī)療器械注冊(cè)證書(shū)編號(hào)】 【產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)】 【說(shuō)明書(shū)批準(zhǔn)及修改日期】【產(chǎn)品名稱(chēng)】通用名：苯丙氨酸檢測(cè)試劑盒（細(xì)菌抑制法）英文名稱(chēng)： Phenylalanine Kit（BIA）【包裝規(guī)格】96人份/盒 【預(yù)期用途】用于檢測(cè)采集在S&S 903# 濾紙上的新生兒血樣品中苯

2、丙氨酸的含量。適用于新生兒苯丙酮尿癥（PKU）的篩查，僅用于體外檢測(cè)。苯丙酮尿癥（簡(jiǎn)稱(chēng)PKU）是一種較常見(jiàn)的常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝病，發(fā)病率約1/10,000。本病可因苯丙氨酸羥化酶缺乏引起，也可因輔酶因子BH4缺陷引起。這些缺陷致使苯丙氨酸不能被轉(zhuǎn)化為酪氨酸，導(dǎo)致大量的苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)堆積，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。其臨床主要表現(xiàn)為：發(fā)育遲緩，毛發(fā)、皮膚及虹膜變淺，癲癇，進(jìn)行性智力低下等。由于本病的早期發(fā)現(xiàn)早期治療，對(duì)患兒的生長(zhǎng)發(fā)育、智力發(fā)育不受影響，因此被我國(guó)列為新生兒疾病篩查項(xiàng)目之一。檢測(cè)方法還有熒光法、酶法等。 【檢驗(yàn)原理】 枯草桿菌在含有抑制劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)受到抑制，而當(dāng)

3、外界提供苯丙氨酸環(huán)境時(shí)，抑制作用解除，枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)且細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)的直徑與苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制備好的培養(yǎng)基上，放上濾紙干血片，血中的苯丙氨酸會(huì)擴(kuò)散到周?chē)囵B(yǎng)基中，被抑制的枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)。用被檢樣品的菌環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品的菌環(huán)直徑相比，得出樣品中苯丙氨酸的含量。 【主要組成成分】苯丙氨酸篩查試劑盒（細(xì)菌抑制法）組成表名稱(chēng)96人份/盒包裝瓊脂糖粉 （瓊脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶無(wú)色透明玻璃瓶營(yíng)養(yǎng)液（氨基酸、磷酸鹽緩沖液等）10ml/瓶青霉素酶（青霉素酶、生理鹽水）0.3ml/瓶抑制劑（-2-噻吩丙氨酸）1.0ml/瓶菌株孢子懸液（枯草桿菌）0.2ml/瓶一次性培養(yǎng)皿（透明聚苯乙

4、烯）1塊無(wú)色透明塑料袋標(biāo)準(zhǔn)血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸)1份質(zhì)控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸)1份說(shuō)明書(shū)1份 注*：標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品的濃度若有改變，將在試劑盒內(nèi)放通知單，同時(shí)電話通知。 【儲(chǔ)存條件及有效期】 儲(chǔ)存條件 28,防止冷凍。 有效期 個(gè)月，試劑盒開(kāi)啟后一次性使用?！具m用機(jī)型】 無(wú)需儀器檢測(cè)。 【樣本要求】按照衛(wèi)生部規(guī)定的“新生兒采血常規(guī)”采取足跟血?！緳z驗(yàn)方法】1.瓊脂液配制：將瓊脂糖倒入三角燒瓶中，加入100ml雙蒸水（7日內(nèi)）加熱煮沸（建議沸騰三次）至完全溶解，（燒瓶中放入一支溫度計(jì)監(jiān)控溫度）；2.混合液配制：將青霉素酶、抑制劑、菌株孢子懸液加入到營(yíng)養(yǎng)液瓶中，

5、充分混勻備用；3.當(dāng)瓊脂糖液的溫度降至5560時(shí)，將混合液全部倒入瓊脂糖液中，充分混勻后（避免產(chǎn)生氣泡）快速倒入一次性培養(yǎng)皿中，使其成為厚薄均勻、平整光潔的薄層（厚度約mm），待冷卻后備用；4.用直徑3mm打孔器分別打取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片，按照加樣模板所示排列在培養(yǎng)皿上，將培養(yǎng)皿倒置放入37±0.5恒溫箱中培養(yǎng)16-18小時(shí)；5.菌環(huán)量取：在菌環(huán)最致密處分別量取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)的直徑，將待檢血片的細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品相比較，可得出待檢血片的苯丙氨酸含量。標(biāo)準(zhǔn)品菌環(huán)范圍：2 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 0.75-1.05cm；4 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 1

6、.25-.155cm；8 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 1.55-1.85cm；20 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為2.05-2.35cm；質(zhì)控品菌環(huán)范圍： 陰性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) 2mg/dl濃度點(diǎn)的直徑；陽(yáng)性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) 4mg/dl濃度點(diǎn)的直徑?！緟⒖贾担▍⒖挤秶繀⒖贾?lt; 4mg/dl【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】1. 苯丙氨酸含量4mg/dl為可疑陽(yáng)性，原血片復(fù)查，苯丙氨酸含量仍4mg/dl，即召回復(fù)查；2. 檢測(cè)結(jié)果本身不能成為治療的惟一因素。必須與其他的臨床觀察和診斷試驗(yàn)相結(jié)合；3. 質(zhì)控品的結(jié)果必須控制在試劑盒要求范圍之內(nèi)，否則實(shí)驗(yàn)結(jié)果可視為無(wú)效?！緳z驗(yàn)方法的局限性】1.應(yīng)使用新生兒篩查專(zhuān)用S&a

7、mp;S 903#濾紙采集血斑。使用其他濾紙結(jié)果將不同；2.采血時(shí)間為出生后72小時(shí)，并充分哺乳6次以上，否則會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果。 【產(chǎn)品性能指標(biāo)】1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度范圍：2-20 mg/dl.；2. 批內(nèi)精密度：CV不大于10 %；3. 批間精密度：CV不大于12 %；4. 準(zhǔn)確性：回收率為100125；5. 靈敏度：小于1mg/dl.；6. 特異性：與酪氨酸、色氨酸無(wú)交叉反應(yīng)。【注意事項(xiàng)】1. 本試劑盒為一次性使用產(chǎn)品；不同批號(hào)試劑不可混用；超出效期不可使用；僅用于體外檢測(cè)；2.所有試劑、樣本應(yīng)視為有潛在的傳染源，實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)采用高壓或消毒液浸泡處理。 【參考文獻(xiàn)】 衛(wèi)生部衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)新生兒疾病技術(shù)規(guī)范的通知，附件2。 黃雨三主編新生兒疾病篩查與臨床診斷治療技術(shù)操作規(guī)范全書(shū)2005，2：111-119【生產(chǎn)企業(yè)】企業(yè)名稱(chēng)：北京協(xié)和洛克生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心地址：北京市海淀區(qū)恩濟(jì)莊18號(hào)院4號(hào)樓2單元302號(hào)郵政編碼：100142電話：01051295656 傳真：01088140690網(wǎng)址：【醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證編號(hào)】京藥管械生產(chǎn)許20040085 號(hào)【醫(yī)療器械注冊(cè)證書(shū)編號(hào)】國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第34004