支氣管哮喘小鼠氣道反應(yīng)性無(wú)創(chuàng)檢測(cè)方法的建立

1、支氣管哮喘小鼠氣道反應(yīng)性無(wú)創(chuàng)檢測(cè)方法的建立李斌愷 賴克方 洪燕華 王法霞 陳如沖 林少建 鐘南山 【摘要】 目的 目前國(guó)內(nèi)對(duì)支氣管哮喘 (簡(jiǎn)稱哮喘) 小鼠的評(píng)價(jià)多數(shù)僅立足于氣道炎性指標(biāo) ,不能完全反映哮喘的病理生理特征 。 本所率先從國(guó)外引進(jìn)了小動(dòng)物無(wú)創(chuàng)檢測(cè)和有創(chuàng)檢測(cè)肺功能儀 。 無(wú)創(chuàng)法檢測(cè)時(shí)小鼠不必麻醉 ,而且每次可以同時(shí)檢測(cè)多只小鼠 ,具有較大的優(yōu)越性 ,但能否取代有創(chuàng)法尚需更多的數(shù)據(jù) 。本研究旨在建立無(wú)創(chuàng)檢測(cè)小鼠氣道高反應(yīng)性的檢測(cè)方法 ,并與有創(chuàng)檢測(cè)方法進(jìn)行比較 。 方法 根據(jù)動(dòng)物模型和氣道反應(yīng)性檢測(cè)方法不同 ,動(dòng)物分為 : 無(wú)創(chuàng)哮喘組 ; 無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 ; 有創(chuàng)哮喘組 ; 有創(chuàng)對(duì)照組 。

2、 采用卵白蛋白致敏和激發(fā) ,建立 BALB/ c 小鼠哮喘模型 ,生理鹽水作為對(duì)照 ,分別用無(wú)創(chuàng)和有創(chuàng)的方法測(cè)定氣道反應(yīng)性 。 哮喘動(dòng)物霧化吸入0 . 250 g/ L 倍增濃度的乙酰甲膽堿 ( Mch) ,測(cè)定相應(yīng)濃度下的增強(qiáng)呼氣間歇 ( Pe nh) 值或氣道阻力 ( RL ) 值等指標(biāo) 。 將小鼠吸入 Mc h 后 RL 或 Penh 增加 2 倍的激發(fā)濃度以 PC100 來(lái)表示 。 所有動(dòng)物都行支氣管肺泡灌洗 , 收集灌洗液 , 涂片染色后分類計(jì)數(shù) 。結(jié)果 無(wú)創(chuàng)哮喘組 PC100 均 6 . 25 g/ L ,對(duì)照組 PC100 均 12 . 5 g/ L 。 其 Lo g2 ( 10

3、 PC100 ) 值 ( 5 . 36 ± 0 . 84) 顯著低于對(duì)照組 ( 7 . 97 ± 0 . 82)( P < 0 . 01) 。 無(wú)創(chuàng)哮喘組從 Mc h 濃度3 . 12 g/ L 開始 , 其 Pe nh 值明顯高于對(duì)照組 。有創(chuàng)哮喘組 RL 值從Mc h 濃度0 . 39 g/ L開始就明顯高于相應(yīng)對(duì)照組 ( P < 0 . 05) 。 無(wú)創(chuàng)組與有創(chuàng)組的氣道反應(yīng)性相關(guān)系數(shù) R =0 . 96 ( P < 0 . 01) 。 無(wú)創(chuàng)哮喘組和有創(chuàng)哮喘組的嗜酸粒細(xì)胞分別為 ( 54 . 00 ± 5 . 96) % , ( 55 . 9

4、3 ± 5 . 92) % ,顯著高于各自對(duì)照組的 ( 0 . 38 ± 0 . 52) % , ( 0 . 63 ± 0 . 74) %( P < 0 . 01) 。 結(jié)論 本研究表明以 Penh 為主要測(cè)定指標(biāo)的無(wú)創(chuàng)方法 ,可以成功檢測(cè)哮喘小鼠氣道高反應(yīng)性 ?！娟P(guān)鍵詞】 小鼠 ;氣道反應(yīng)性 ; 支氣管哮喘 ;增強(qiáng)呼氣間歇 ; 無(wú)創(chuàng)檢測(cè) 【Ab st ra ct】 Objective Most of t he evaluation on asthmatic mouse model only based on the airway inflammation

5、, not fully reflecting its pathophysiology. Noninvasive method of measuring bronchial hyper responsiveness can detect several conscious mice in one time , but whether it can replace the invasive technique needs more data to be identified. This study aims to establish a non-invasive detection of mous

6、e airway hyper responsiveness ,comparing with the invasive method. Methods According to different ways of detection , mice were divided into four groups : non-invasive asthma group , non-invasive control group ,invasive asthma group and invasive control group . Mouse was sensitized and challenged wi

7、th ovalbumin ( OVA) for asthmatic model . The mice were challenged with increasing concentrations of methacholine aero sol from 0 . 2 250 g/ L ,and the airway resistance was measured. Enhance pause ( Penh) or airway resistance ( RL ) was taken for each group . The dose of methacholine causing 100 %

8、increase of respiratory resistance was defined as PC100 . The PC100 values were converted into Log2 ( 10 PC100 ) for statistical analysis. Bro nchoalveolar lavage cytology was performed to evaluate the airway inflammation. Results The PC100 of non-invasive asthma group was 6 . 25 g/ L , and the non-

9、invasive control groups 12 . 5 g/ L . I t s Lo g2 ( 10 PC100 ) value was significantly less than that of control group , ( 5 . 36 ± 0 . 84) vs ( 7 . 97 ± 0 . 82) ( P < 0 . 01) . The Penh value of non -invasive asthma group began significantly increasing when the concentration of Mch was

10、 3 . 12 g/ L . The RL value of invasive asthma group was increasing at the beginning of 0 . 39 g/ L ( P < 0 . 05) . The coefficient rate of two groups was 0 . 96 ( P < 0 . 01 ) . The EOS ( %) of non-invasive asthma group or invasive asthma group was 54 . 00 ± 5 . 96 , 55 . 93 ± 5 . 9

11、2 respectively , significantly larger than that of control group ( 0 . 38 ±0 . 52 ,0 . 63 ± 0 . 74 , P < 0 . 01) . Conclusions This study shows that single-chambered barometric whole-body plethysmography as a non- invasive lung function test can success fully detect airway responsivenes

12、s in asthmatic mouse model .【Key words 】Mice ; Airway hyper responsiveness ; Bronchial asthma ; Enhance pause ; Noninvasive method從最早的電刺激離體氣管平滑肌收縮能力測(cè)定 ,到現(xiàn)在的無(wú)創(chuàng)單腔整體體積描計(jì),國(guó)外在對(duì)動(dòng)物氣道反應(yīng)性的測(cè)定技術(shù)上經(jīng)過(guò)了漫長(zhǎng)的發(fā)展歷程 。 而目前國(guó)內(nèi)在對(duì)支氣管哮喘 ( 簡(jiǎn)稱哮喘) 小鼠的評(píng)價(jià)上多數(shù)僅僅立足于氣道炎性指標(biāo) ,在氣道反應(yīng)性的檢測(cè)方面近幾年才起步 ,而且是用有創(chuàng)的方法。我所率先從國(guó)外引進(jìn)了動(dòng)物無(wú)創(chuàng)檢測(cè)的肺功能儀 。氣管插管后再測(cè)定動(dòng)

13、物氣道阻力的有創(chuàng)法是評(píng)價(jià)動(dòng)物氣道反應(yīng)性的經(jīng)典方法 。 無(wú)創(chuàng)法則不需氣管插管等繁瑣的步驟 ,在動(dòng)物處于自然狀態(tài)下就可以直接測(cè)定其氣道反應(yīng)性 ,而且每次可以同時(shí)檢測(cè)多只小鼠 ,具有較大的優(yōu)越性 ,但能否取代有創(chuàng)法尚需更多的數(shù)據(jù) 。 因此 ,我們有必要探討其與有創(chuàng)法的相關(guān)性 ,判定其是否能夠有效檢測(cè)動(dòng)物的氣道反應(yīng)性 ,以期建立哮喘小鼠氣道反應(yīng)性的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)方法 。材 料 與 方 法 一 、 儀器與試劑 儀器 : 本實(shí)驗(yàn)采用美國(guó) B u xco 公司小鼠無(wú)創(chuàng)肺功能儀和有創(chuàng)肺功能儀 , 是目前國(guó)際上通用的小鼠肺功能檢測(cè)儀器 ,主要包括體描箱 ,壓力傳感器 ( 流量傳感器) ,信號(hào)放大器和霧化器等 。 其工

14、作原理是 ,將乙酰甲膽堿 ( met hac holi ne , Mc h) 或生理鹽水 ( N S) 等通過(guò)霧化器霧化入體描箱內(nèi) ,箱內(nèi)小鼠吸入霧化氣體后呼吸運(yùn)動(dòng)的改變引起箱內(nèi)壓力 、 流量產(chǎn)出相應(yīng)的變化 ,連接于體描箱的壓力傳感器 ( 流量傳感器) 將采集到的信號(hào)傳至信號(hào)處理系統(tǒng) ,并在信號(hào)放大器作用下轉(zhuǎn)化為呼吸動(dòng)力學(xué)各指標(biāo)值 。 兩套肺功能儀中 ,無(wú)創(chuàng)肺功能儀具有 6 個(gè)體描箱 ( 也有配置更多的) ,相應(yīng)的傳感器可以將各個(gè)箱內(nèi)壓力 、 流量的變化同步傳至信號(hào)處理系統(tǒng)處理 ,因此可以同步為多只小鼠進(jìn)行肺功能檢測(cè) 。 主要試劑 : 雞卵白蛋白 ( OVA ) ( 級(jí) , 美國(guó) S i gm

15、a 公司) , 氫氧化鋁凝膠 ( 美國(guó) S i g ma 公司) , Mc h ( 美國(guó) Si gma 公司) 。 二 、 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 : SP F 級(jí) BALB/ c 雌鼠 ,56 周齡 ,體質(zhì)量 1820 g ,購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 ,并在該中心飼養(yǎng) 。 飼料為去 OVA ( 不含雞蛋) 的特殊食物 。 飼養(yǎng)環(huán)境符合 SP F 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物級(jí)環(huán)境設(shè)施標(biāo)準(zhǔn) 。分組 : 根據(jù)動(dòng)物模型和氣道反應(yīng)性檢測(cè)方法不同 ,分為 : 無(wú)創(chuàng)哮喘組 ; 無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 ; 有創(chuàng)哮喘組 ; 有創(chuàng)對(duì)照組 。 其中 ,無(wú)創(chuàng)哮喘組 、 有創(chuàng)哮喘組每組 10 只小鼠 ; 無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 、 有創(chuàng)對(duì)照組每組 8

16、 只小鼠 。 三 、 哮喘模型的建立方法 實(shí)驗(yàn)第 0 天 、 第 7 天和第 14 天行腹腔注射致敏 :模型組每次給予 20 g OV A + 150 l Al (O H) 3 + 50 l N S( 100 mg/ L ) 混懸液 ; 對(duì)照組給予 200 l N S 。 實(shí)驗(yàn)第 28 天 、 第 29 天和第 30 天行滴鼻激發(fā) ; 模型組每次給予50 l OV A2 N S ( 2 g/ L ) 滴鼻 ,對(duì)照組給予 50 l N S 。 四 、 檢測(cè)的指標(biāo)及原理 無(wú)創(chuàng)組用體積描記法測(cè)定增強(qiáng)呼氣間歇 ( e n ha nce d p a u se , Pe n h) 如圖 1 1 所示 :

17、曲線反映的是體描箱內(nèi)小鼠呼吸時(shí)的壓力變化 ; 曲線上部分為呼氣相 ,下部分為吸氣相 ; 氣流受限時(shí) , 曲線的呼氣相部分明顯延長(zhǎng) ,呈現(xiàn)阻塞性通氣功能障礙時(shí)特有的呼氣末凹陷 ,呼氣相延長(zhǎng)的程度反映了氣流受限的程度 ,定義為呼氣間歇( Pa u se) ,用吸氣峰流速 (p ea k i n spi r a t io n p re s s ur e , P I P) 及呼氣峰流速 ( p ea k e xpi r at io n p r e s s ur e , P EP) 比將其標(biāo)準(zhǔn)化即得 Pe n h ,此參數(shù)即可反映氣道反應(yīng)性 。 計(jì)算公式如圖所示 : 其中 Te 代表呼氣相時(shí)間 , Ti

18、 代表吸氣相時(shí)間 , T r 代表呼氣相 “ 松弛時(shí)間” 即呼氣相描記箱內(nèi)壓力衰減為 P EP 的 36 %所用時(shí)間。Penh = P EP/ PIP ×Pa u se 。 有創(chuàng)組測(cè)定的是氣道阻力 ( RL ) 值 。 五 、 氣道反應(yīng)性的檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)第 32 天 , 首先 , 連接好 B u xco 無(wú)創(chuàng)肺功能儀并定標(biāo) 。將自然狀態(tài)下的 BALB/ c 小鼠置入體描箱中 ,先測(cè)定基礎(chǔ) Pe n h 值 ; 隨后用 Mc h 激發(fā) , 濃度由低到高依次為 0 、 0 . 20 、 0 . 39 、 0 . 78 、 1 . 56 、 3 . 12 、 6 . 25 、12 . 5 、

19、25 和 50 g/ L ,記錄此時(shí)的 Pe n h 值 ,每次霧化吸入 2 mi n ,記錄3 mi n 。 有創(chuàng)組則是將小鼠行氣管插管后用 B u xco 有創(chuàng)肺功能儀測(cè)定其 RL 值 。 六 、 氣道炎癥 氣道反應(yīng)性檢測(cè)后行支氣管肺泡灌洗 ( PB S 0 . 8 ml × 3 次) , 回收支氣管肺泡灌洗液 , 離心 , 細(xì)胞沉淀重懸 ,取部分計(jì)算細(xì)胞總數(shù) ,余下部分制備涂片 , H E 染色后行細(xì)胞分類計(jì)數(shù) , 每張涂片計(jì)數(shù) 400 個(gè)細(xì)胞 , 記錄各種細(xì)胞數(shù)目 。 七 、 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以 x ±s 表示 ,為進(jìn)行無(wú)創(chuàng)組和有創(chuàng)組氣道反應(yīng)性相關(guān)分析 , 分別

20、將每個(gè) Mc h 激發(fā)濃度下的Pe n h 與 RL 組轉(zhuǎn)換為與 N S 激發(fā)的基礎(chǔ)值的百分比 ( Mc h 激發(fā)的 Pe n h 值或 RL 值/ N S 激發(fā)的 Pe n h 值或 RL值 × 100 %) 來(lái)表示 。 采用 SPSS 11 . 0統(tǒng)計(jì)軟件分析 ,兩組樣本均數(shù)進(jìn)行 t 檢驗(yàn)或相關(guān)分析 , P < 0 . 05 、P <0 . 01表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 。結(jié) 果 一 、 小鼠的氣道反應(yīng)性 小鼠在各濃度級(jí) Mc h 激發(fā)下 ,各組 RL 變化各異 ,具體見(jiàn)表 1 。Penh 升為基礎(chǔ)水平 2 倍時(shí)的 Mch 濃度定為 PC 100 。 無(wú)創(chuàng)哮喘組 PC 1

21、00 均 6. 25 g/ L ,對(duì)照組 PC 100 均 12. 5 g/ L 。 具體分布見(jiàn)表 2 。無(wú)創(chuàng)哮喘組 Lo g2( 10 PC100 ) 值 ( 5 . 36 ± 0 . 84) 顯著低于對(duì)照組 ( 7 . 97 ± 0 . 82) ( P < 0 . 01) 。表 1 各濃度級(jí) Mch 激發(fā)下各組的平均氣道阻力組別Mch ( g/ L) 基線 生理鹽水 0 . 20 0 . 39 0 . 78 1 . 56 3 . 12 6 . 25 12 . 50 25 . 00 50 . 00無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 0 . 48 0 . 45 0 . 46 0 . 49 0

22、 . 45 0 . 52 0 . 52 0 . 54 0 . 77 1 . 39 2 . 03無(wú)創(chuàng)哮喘組 0 . 45 0 . 46 0 . 52 0 . 49 0 . 52 0 . 65 0 . 96 1 . 38 2 . 41 3 . 90 5 . 25有創(chuàng)對(duì)照組 1 . 57 1 . 61 1 . 68 1 . 85 2 . 21 2 . 41 2 . 61 3 . 22 4 . 07 5 . 05 6 . 81有創(chuàng)哮喘組 1 . 78 1 . 84 2 . 05 3 . 12 3 . 90 4 . 14 5 . 14 5 . 85 7 . 10 8 . 83 11 . 01 注 : M

23、ch : 乙酰甲膽堿表 2 無(wú)創(chuàng)哮喘組和無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 PC100 分布組別PC100 ( g/ L)0 . 00 0 . 20 0 . 39 0 . 78 1 . 56 3 . 12 6 . 25 12 . 50 25 . 00 50 . 00無(wú)創(chuàng)哮喘組 無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 注 : “ ” 個(gè)數(shù)表示 PC100 分布數(shù)目 用無(wú)創(chuàng)方法測(cè)得的小鼠氣道反應(yīng)性如圖 2 所示 ,其氣道反應(yīng)性是以小鼠在 NS 激發(fā)下的 Penh 值為基準(zhǔn) ,取其他各個(gè)濃度級(jí) Mch 激發(fā)下的 Penh 值與其百分比來(lái)反映。 對(duì)于用有創(chuàng)方法測(cè)得的 R L 值也是用類似的方法轉(zhuǎn)換成比值來(lái)表示。 兩種方法(無(wú)創(chuàng)與有創(chuàng)) 分別測(cè)定的模型組

24、與對(duì)照組的氣道高反應(yīng)性結(jié)果見(jiàn)圖 2 、 圖 3 。 將無(wú)創(chuàng)哮喘組和有創(chuàng)哮喘組的氣道反應(yīng)性相應(yīng)值行兩樣本的 t 檢驗(yàn) ,得 P > 0. 05 。二 、 氣道反應(yīng)性的相關(guān)性將反映無(wú)創(chuàng)哮喘組和有創(chuàng)哮喘組氣道反應(yīng)性的 Penh 值和 R L 行相關(guān)分析得出其相關(guān)系數(shù) R = 0. 96 ( P <0 . 01) 。 見(jiàn)圖 4 。三 、 氣道炎癥見(jiàn)表 3 。表 3 各實(shí)驗(yàn)組肺泡灌洗液細(xì)胞涂片的細(xì)胞分類組別 鼠數(shù) 嗜酸粒細(xì)胞( %) 中性粒細(xì)胞( %) 淋巴細(xì)胞( %) 巨噬細(xì)胞( %)無(wú)創(chuàng)對(duì)照組 8 0 . 38 ± 0 . 52 10 . 63 ± 5 . 18 14

25、 . 75 ± 6. 34 74 . 25 ± 5 . 55無(wú)創(chuàng)哮喘組 10 54 . 00 ± 5 . 96a 7 . 25 ± 2 . 39 10 . 43 ± 5. 07 28 . 33 ± 5 . 64有創(chuàng)對(duì)照組 8 0 . 63 ± 0 . 74 12 . 00 ± 4 . 87 14 . 00 ± 4. 10 73 . 37 ± 6 . 84有創(chuàng)哮喘組 10 55 . 93 ± 5 . 92b 7 . 73 ± 3 . 55 11 . 88 ± 2. 8

26、1 24 . 48 ± 7 . 12注 :與無(wú)創(chuàng)對(duì)照組相比 ,aP < 0 . 01 ;與有創(chuàng)對(duì)照組相比 ,bP < 0 . 01討 論 國(guó)外對(duì)小鼠氣道反應(yīng)性測(cè)定的方法研究頗多 。 最早的為電刺激離體氣管平滑肌收縮能力測(cè)定 。 由于是離體測(cè)定 ,故難以反映氣道受刺激后黏液分泌和黏膜水腫等情況 ; 又因?yàn)闃?biāo)本只是取自大氣道 ,所以不能完全反映小氣道病變所引起的肺通氣功能障礙 。 1967 年 , Pal ece k 等 1 首次建立體積描記法測(cè)定肺阻抗 ,此方法是通過(guò)氣管切開和機(jī)械通氣的方式進(jìn)行的 ,因此存在麻醉及手術(shù)等影響因素 ,而且不能對(duì)同一動(dòng)物進(jìn)行反復(fù)檢測(cè) 。 后來(lái)

27、,L i ke n s 等 2 將此法改進(jìn)為經(jīng)口氣管插管 ,實(shí)現(xiàn)了重復(fù)檢測(cè) ,但對(duì)小鼠行經(jīng)口氣管插管則有一定的技術(shù)難度 。 1979 年 , Pe n noc k 等 3 建立了雙室體積描記法 ,但此法需要限制小鼠活動(dòng) , 不適進(jìn)行長(zhǎng)期監(jiān)測(cè) 。 1997 年 , Ha mel ma n n 等 4 初步建立了無(wú)創(chuàng)的單腔整體體積描計(jì)法 ,克服了雙室體積描記的不足 。 該方法是根據(jù)哮喘時(shí) Te 延長(zhǎng) 、 表現(xiàn)為呼氣末暫停時(shí)間延長(zhǎng)即 Pe n h 來(lái)定量反映氣流受限程度 。 但 Pe n h 并不是反映 RL 的一個(gè)直接指標(biāo) ,目前仍存在不少爭(zhēng)議 。 目前國(guó)內(nèi)對(duì)哮喘小鼠的評(píng)價(jià)多數(shù)僅立足于氣道炎性指標(biāo)

28、 ,不能完全反映哮喘的病理生理特征 。 本實(shí)驗(yàn)率先在國(guó)內(nèi)采用單腔的整體體積描計(jì)法檢測(cè) BALB/ c 小鼠的氣道反應(yīng)性 ,探討 Pe n h 作為氣道反應(yīng)性無(wú)創(chuàng)檢測(cè)指標(biāo)的可行性 ,嘗試建立無(wú)創(chuàng)高效的氣道反應(yīng)性檢測(cè)方法 。既往已證實(shí) ,同樣方法制作的哮喘模型 ,以有創(chuàng)檢測(cè)的方式測(cè)得的氣道反應(yīng)性已明確高于對(duì)照組 5 ,本實(shí)驗(yàn)的有創(chuàng)哮喘組與對(duì)照組相比也同樣證實(shí)有明顯的氣道高反應(yīng)性 。 提示本實(shí)驗(yàn)建立的無(wú)創(chuàng)的氣道反應(yīng)性檢測(cè)方法可能與既往經(jīng)典的有創(chuàng)檢測(cè)方法有一定的相關(guān)性 。 而將反映無(wú)創(chuàng)哮喘組和有創(chuàng)哮喘組的氣道反應(yīng)性的 Pe n h 值和 RL 值行相關(guān)分析 ,結(jié)果非常接近 1 ( P < 0 .

29、 01) ,證實(shí)兩種方法密切相關(guān) 。無(wú)創(chuàng)哮喘組從 Mc h 為3 . 12 g/ L 開始出現(xiàn) Pe n h 明顯升高 ,而有創(chuàng)哮喘組從0 . 39 g/ L 就開始呈現(xiàn)這樣的變化 ,提示無(wú)創(chuàng)方法的敏感性稍低 。 這可能與 Mc h 在有創(chuàng)方法中是通過(guò)插管直接作用于下氣道 , 而在無(wú)創(chuàng)法中要經(jīng)過(guò)鼻部等上氣道后才作用于下氣道有關(guān) 。 但是兩組反應(yīng)性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 ,說(shuō)明兩種方法測(cè)得的反應(yīng)性相當(dāng) 。此外 ,在檢測(cè)小鼠氣道反應(yīng)性過(guò)程中 ,行無(wú)創(chuàng)方法的小鼠不必麻醉 ,而且每次可以同時(shí)檢測(cè) 6 只小鼠 ,動(dòng)態(tài)觀察也不受限 ; 這些在有創(chuàng)方法中都無(wú)法實(shí)現(xiàn) 。從氣道炎性指標(biāo)上看 ,無(wú)創(chuàng)哮喘組和有創(chuàng)哮喘組的嗜酸粒細(xì)胞明顯高于各自的對(duì)照組 ( P < 0 . 01) 。 而本實(shí)驗(yàn)所制作的模型是參照我所于 2006 年已成功制作的哮喘模型 5 , 說(shuō)明該模型的氣道炎性有良好的重復(fù)性 。 綜上所述 ,以 Pe n h 為主要測(cè)定指標(biāo)的無(wú)創(chuàng)肺功能檢測(cè)方法作為 BALB/ c 雌鼠氣道高反應(yīng)性的檢測(cè)可行 、 高效 。 至于是否能應(yīng)用于其他品系的檢測(cè) ,還有待論證 ,有報(bào)道 Pe n h 在其他種群中敏感性不一致 6 。參 考 文 獻(xiàn) 1 Pal ecek F , Palece ko va M , Aviado DM , et al . Emp hyse ma i n