臨床常用免疫學(xué)檢查講義

1、 免疫學(xué)診斷：用免疫學(xué)方法確定疾病相關(guān)因子、監(jiān)測(cè)疾病過(guò)程、判斷療效及預(yù)后，涉及對(duì)疾病相關(guān)因子的診斷和輔助診斷，以及檢測(cè)機(jī)體免疫功能狀態(tài)。 臨床常用免疫學(xué)檢查臨床常用免疫學(xué)檢查：血清免疫球蛋白檢測(cè)，血清補(bǔ)體檢測(cè)，細(xì)胞免疫檢測(cè)，肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)，感染免疫檢測(cè)，腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，自身抗體檢測(cè)及其它免疫檢測(cè)。一.體液免疫功能 檢測(cè) 檢測(cè)血清免疫球蛋白及其類(lèi)別（尤檢測(cè)血清免疫球蛋白及其類(lèi)別（尤其是其是IgG、IgA和和IgM ）和水平，可為診）和水平，可為診斷免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病斷免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病提供重要參數(shù)。提供重要參數(shù)。 檢測(cè)針對(duì)疫苗或感染因子的特異性抗檢測(cè)針對(duì)疫苗或感染因子

2、的特異性抗體及其水平，可較直接反映機(jī)體特異體及其水平，可較直接反映機(jī)體特異性體液免疫功能狀態(tài)。性體液免疫功能狀態(tài)。1免疫球蛋白免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)具有抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白，由漿細(xì)胞產(chǎn)具有抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白，由漿細(xì)胞產(chǎn)生，存在于血液、體液、外分泌液及部分細(xì)胞的生，存在于血液、體液、外分泌液及部分細(xì)胞的表面。分五類(lèi)：表面。分五類(lèi)：IGG、IGM、IGA、IGD、IGE。1.IgG、IgM、IgA的檢測(cè)：的檢測(cè)：IgG是血清中的主要抗體成分，占總是血清中的主要抗體成分，占總Ig的的75%是唯是唯一能通過(guò)胎盤(pán)的一能通過(guò)胎盤(pán)的Ig，通過(guò)自然被動(dòng)免疫獲得。，通

3、過(guò)自然被動(dòng)免疫獲得。IgM是是Ig中分子量最大者，亦是最早出現(xiàn)的抗體為中分子量最大者，亦是最早出現(xiàn)的抗體為五聚體，在機(jī)體早期的免疫防御中起重要作用。五聚體，在機(jī)體早期的免疫防御中起重要作用。IgA分血清型與分泌型，尤以分泌型分血清型與分泌型，尤以分泌型IgA在局部抗感在局部抗感染、抗過(guò)敏起重要免疫屏障。染、抗過(guò)敏起重要免疫屏障。檢測(cè)方法：免疫擴(kuò)散法及免疫比濁法參考值：各個(gè)年齡階段有差別臨床意義：(1).Ig均增高常見(jiàn)于慢性肝病、淋巴均增高常見(jiàn)于慢性肝病、淋巴瘤、瘤、SLE、RA、MM等等(2).單一單一Ig增高：見(jiàn)于免疫增殖性疾病如增高：見(jiàn)于免疫增殖性疾病如MM（IGG），巨球蛋白血癥（），巨

4、球蛋白血癥（IGM）(3). Ig降低：反復(fù)呼吸道感染者常見(jiàn)降低：反復(fù)呼吸道感染者常見(jiàn)IGA單一降低單一降低2.IgG亞類(lèi)測(cè)定亞類(lèi)測(cè)定分四類(lèi)：分四類(lèi)：IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 與免疫缺陷病和與免疫缺陷病和變態(tài)反應(yīng)性疾病有關(guān)變態(tài)反應(yīng)性疾病有關(guān)3.IgE測(cè)定測(cè)定血清含量低但與血清含量低但與I型變態(tài)反應(yīng)疾病有關(guān)型變態(tài)反應(yīng)疾病有關(guān)測(cè)定方法：ELISA法 參考值：0.10.9mg/L意義： IgE增高：見(jiàn)于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過(guò)敏性疾病。 IgE降低：見(jiàn)于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長(zhǎng)期用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。 二.血清M蛋白(mon

5、oclonal immunoglobulins)測(cè)定測(cè)定方法：蛋白電泳法、免疫比濁法和免疫電泳法 參考值：陰性 意義：檢測(cè)到 M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖性疾病。見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病和半分子病等 三.血清補(bǔ)體檢測(cè) 基本概念 補(bǔ)體(complement)：是一組具有酶原活性的糖蛋白，由傳統(tǒng)途徑的 9種成分C 1 - C 9 、旁路途徑的3種成分及其衍生物組成，參與滅活病原體的免疫反應(yīng)，也參與破壞自身組織和自身細(xì)胞而造成的免疫損傷。 1.補(bǔ)體 CH 50 方法：試管法 參考值：50000-100000u/l 意義：反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑活化的活性程度。 1、CH 50 增高

6、見(jiàn)于急性炎癥、組織損傷和某些惡性腫瘤；2、CH 50 降低見(jiàn)于腎小球腎炎、自身免疫病、感染性心內(nèi)膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。 2.補(bǔ)體 C 3 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法 (1.140.27 g/L) 免疫比濁法(0.85-1.70 g/L)意義：1、增高見(jiàn)于急性炎癥、傳染病早期、腫瘤和排異反應(yīng)；2、減低見(jiàn)于70%以上的急性腎小球腎炎、85%以上的鏈球菌感染后腎炎、78%狼瘡性腎炎患者。還見(jiàn)于活動(dòng)性SLE和類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。 2.補(bǔ)體 C 4 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法 (0.553-0.109 g/L )意義：1、升高見(jiàn)于急性風(fēng)濕熱、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周?chē)住⑵ぜ⊙?、關(guān)節(jié)炎、和組織損傷等；2、降低見(jiàn)于自身免疫性肝

7、炎、狼瘡性腎炎、SLE、1型糖尿病、胰腺癌、多發(fā)性硬化癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 IgA腎病和遺傳性IgA缺乏癥。3.補(bǔ)體 C 1q 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法 (0.197-0.04 g/L )意義：1、增加見(jiàn)于骨髓炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、過(guò)敏性紫癜等；2、降低見(jiàn)于SLE和混合性結(jié)締組織病等。 4.BF 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法 (0.1-0.4g/L) 意義：增高見(jiàn)于某些自身免疫病、腎病綜合征、慢性腎炎、惡性腫瘤； 2、減低見(jiàn)于肝病、急性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血。 第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)胞免疫檢測(cè)細(xì)胞免疫檢測(cè) 主要包括有主要包括有T細(xì)胞、細(xì)胞、B細(xì)胞、細(xì)胞、K細(xì)胞、細(xì)胞、NK細(xì)胞及其細(xì)胞及其亞群；臨床

8、常對(duì)淋巴細(xì)胞的數(shù)量，表面標(biāo)志物及亞群；臨床常對(duì)淋巴細(xì)胞的數(shù)量，表面標(biāo)志物及功能進(jìn)行檢測(cè)，以了解機(jī)體的細(xì)胞免疫功能功能進(jìn)行檢測(cè)，以了解機(jī)體的細(xì)胞免疫功能. T細(xì)胞免疫檢測(cè) 1. T細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)(1).E-玫瑰花形成試驗(yàn)：用于檢測(cè)T細(xì)胞的數(shù)量。其臨床意義： 降低；見(jiàn)于免疫缺陷性疾病，如惡性腫瘤、免疫性疾病、大面積燒傷、多發(fā)性神經(jīng)炎等。 升高：見(jiàn)于甲亢、甲狀腺炎、重癥肌無(wú)力、慢性活動(dòng)性肝炎、SLE活動(dòng)期和器官移植排斥反應(yīng)等。（2）T細(xì)胞分化抗原測(cè)定 CD3 :參考值（ IFA法）61%-85% 意義： 降低見(jiàn)于自身免疫性疾病，如 SLE、RA等 CD4:參考值（ IFA法）28%-58% 意義

9、：降低見(jiàn)于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、愛(ài)滋病、應(yīng)用免疫抑制劑者 CD8+:參考值（ IFA法）19%-48% 意義：減低見(jiàn)于自身免疫性疾病或變態(tài)反應(yīng)性疾病 CD4+ /CD8+：參考值（ IFA法）1.660.33 意義： 比值增高見(jiàn)于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、變態(tài)反應(yīng)等； 比值降低見(jiàn)于愛(ài)滋?。?監(jiān)測(cè)器官移植排斥反應(yīng)時(shí)比值增高提示可能發(fā)生排斥反應(yīng)。 注：當(dāng) CD 1-8 都增高可能為T(mén)細(xì)胞型急性淋巴細(xì)胞白血病 B細(xì)胞免疫檢測(cè) 1. B細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)： B細(xì)胞表面有表面抗原(CD19、CD20、CD21、CD22、CD40等)與表面受體(BCR、CKR、CR、FC等)BCR又稱(chēng)B細(xì)

10、胞表面免疫球蛋白（SmIg），是B細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志，其類(lèi)別隨B細(xì)胞發(fā)育階段不同而變化。(1).B細(xì)胞表面免疫球蛋白（SmIg）測(cè)定：主要用于檢測(cè)外周血B細(xì)胞的百分率。臨床意義： SmIg減低見(jiàn)于免疫缺陷性疾??； SmIg升高見(jiàn)于慢性淋巴細(xì)胞性白血病、多毛細(xì)胞白血病和原發(fā)性巨球蛋白血癥。原發(fā)性巨球蛋白血癥患者SmIgM陽(yáng)性細(xì)胞可占78%。 (2).B細(xì)胞分化抗原測(cè)定：臨床意義： 升高見(jiàn)于急性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等； 降低見(jiàn)于無(wú)丙種球蛋白血癥、使用化療或免疫抑制劑后。 淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)(1).T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)：反映T細(xì)胞的免疫功能。臨床意義同T細(xì)胞花結(jié)形成

11、試驗(yàn)。但Down綜合征時(shí)明顯增高。 (2).混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)：反映機(jī)體整體的細(xì)胞免疫功能，還可用于HLA的細(xì)胞學(xué)分型 自然殺傷細(xì)胞免疫檢測(cè) 自然殺傷細(xì)胞活性測(cè)定：可作為判斷機(jī)體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)之一。在血液系統(tǒng)腫瘤、實(shí)體瘤、免疫缺陷病，愛(ài)滋病和某些病毒感染者活性降低；宿主抗移植物反應(yīng)者活性升高。 中性粒細(xì)胞吞噬、殺菌功能檢測(cè)反映機(jī)體抗感染免疫的能力第四節(jié)第四節(jié) 感染免疫檢測(cè)感染免疫檢測(cè) 病原體及其代謝產(chǎn)物進(jìn)入人體后刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生相應(yīng)的免疫產(chǎn)物，免疫產(chǎn)物進(jìn)入血液。臨床多利用凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、免疫熒光發(fā)（ IFA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、放射免疫法（RIA）

12、等手段檢測(cè)血清中的免疫產(chǎn)物或病原體的抗原成分，幫助某些感染性疾病的診斷或早期診斷。近年來(lái)隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，可以利用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）或DNA探針?lè)肿与s交技術(shù)對(duì)病原體的核酸進(jìn)行檢測(cè)，幫助確定病原學(xué)診斷。 一.細(xì)菌感染免疫檢測(cè)1.抗鏈球菌溶血素 “ O”測(cè)定 病人感染A群溶血性鏈球菌一周后ASO開(kāi)始升高，4-6周達(dá)高峰，可持續(xù)幾個(gè)月或幾年，見(jiàn)于活動(dòng)性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、急性腎小球腎炎、急性上呼吸道感染、皮膚軟組織感染。 抗體滴度逐步下降提示疾病緩解。 2.肥達(dá)氏(Widal)反應(yīng) ：協(xié)助傷寒與副傷寒的診斷。參考值： O凝集價(jià)1：80 傷寒H凝集價(jià)1：160副傷寒A、B、C凝集價(jià)1：40為

13、陽(yáng)性。最多見(jiàn)于未治療的SLE，活動(dòng)期SLE幾乎100%陽(yáng)性。也可見(jiàn)于其他自身免疫性疾病?？购丝贵w共有4種熒光核型：均質(zhì)型，見(jiàn)于SLE、SS、PSS、MCTD；邊緣型，見(jiàn)于SLE、SS；顆粒型，見(jiàn)于SLE、RA；核仁型，見(jiàn)于PSS、Crest征。 抗脫氧核糖核酸測(cè)定：分為抗雙鏈 DNA抗體（ds-DNA）、抗單鏈DNA抗體（ss-DNA）、抗Z-DNA抗體?？闺p鏈DNA抗體的檢測(cè)有重要的臨床意義，它見(jiàn)于活動(dòng)期的SLE，陽(yáng)性率70%-90%。 組織和細(xì)胞抗體的檢測(cè)： 抗線(xiàn)粒體抗體（AMA）：正常人群陽(yáng)性率低于10%。許多肝臟疾病可檢出AMA，原發(fā)性膽汁性肝硬化無(wú)癥狀患者為90.5%，有癥狀患者為9

14、2.5%；慢性活動(dòng)性肝炎可達(dá)90%以上；但膽總管和肝外膽管阻塞為陰性。 抗甲狀腺球蛋白抗體（抗-TG）：陽(yáng)性見(jiàn)于90%-95%的橋本甲狀腺炎，52%-58%的甲亢和35%的甲癌。此外，40歲以上的健康婦女檢出率為18%。 抗甲狀腺微粒體抗體（抗-TM）：抗-TM陽(yáng)性檢出率：橋本甲狀腺炎為50%-100%，甲減為88.9%，甲狀腺腫瘤為13.1%，單純性甲狀腺腫為8.6%，亞甲炎為17.2%-25%。 抗乙酰膽堿受體抗體：對(duì)診斷重癥肌無(wú)力有意義，敏感性和特異性高，大約 90%患者陽(yáng)性，其他眼肌障礙者全部陰性。可作為重癥肌無(wú)力療效的觀察指標(biāo)。 抗平滑肌抗體：狼瘡性肝炎患者陽(yáng)性率高達(dá) 80%，急性肝

15、炎患者的陽(yáng)性率70%，但在發(fā)病一周時(shí)出現(xiàn)，3個(gè)月后消逝失。 其它自身免疫抗體檢測(cè)其它自身免疫抗體檢測(cè) 類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）：正常為陰性。類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）的陽(yáng)性率為70%，RF為RA病情活動(dòng)程度的判斷指標(biāo)之一。其他自身免疫性疾病，如多肌炎、SLE、硬皮病、干燥綜合征等可見(jiàn)陽(yáng)性。，某些感染性疾病如傳單、結(jié)核、感染性心內(nèi)膜炎等多呈陽(yáng)性。 ACA檢測(cè)：陽(yáng)性見(jiàn)于SLE，PLT減少癥，習(xí)慣性流產(chǎn)等 ANCA檢測(cè)：用于診斷血管炎 狼瘡細(xì)胞(LE)檢測(cè) 第八節(jié) 細(xì)胞因子的檢測(cè) 白細(xì)胞介素 2（IL-2）活性和白細(xì)胞介素2受體（IL-2R）測(cè)定： IL-2隨著年齡的增長(zhǎng)有降低趨勢(shì)。增高見(jiàn)于自身免疫性疾病、再生障礙性貧血、多發(fā)性骨