當歸對血虛小鼠抗疲勞作用的研究(一)

1、當歸對血虛小鼠抗疲勞作用的研究(一)作者：龔夢鵑，劉新民，王立為【摘要】 目的研究當歸對血虛小鼠的抗疲勞作用。方法通過環(huán)磷酰胺造小鼠血虛模型，給予當歸水煎液2周后，對血虛小鼠體重、外周血象、游泳時間、運動后血乳酸（LAC）和尿素氮（BUN）的影響。結果當歸水煎液能明顯增加血虛小鼠體重、升高紅細胞總數(shù)（RBC）、白細胞總數(shù)（WBC）和血紅蛋白含量（HGB）； 6 g/（kgd）的當歸水煎液組還能顯著延長游泳時間、降低運動后的LAC及BUN。結論當歸水煎液能提高血虛小鼠的抗疲勞作用。 【關鍵詞】 當歸； 血虛； 抗疲勞Abstract:ObjectiveTo observe the anti-fa

2、tigue effect of Angelica sinensis (Oliv.) Diels on the blood-deficient model mice. MethodsAfter the blood-deficient mice model was induced by injecting cyclophosphamide，mice were given Angelica sinensis (Oliv.) Diels for two weeks, then Angelica sinensis (Oliv.) diels was established with forced swi

3、mming test and the changes of body weight, levels of RBC,WBC,HGB, exhaustive swimming time，lactic acid, urea nitrogen were observed.ResultsAngelica sinensis (Oliv.) diels could increase body weight and obviously promote the levels of RBC,WBC,HGB in blood-deficient model mice. The swimming time of mi

4、ce in 6 g/（kgd）group was significantly prolonged compared with model group. The levels of blood lactic acid and urea nitrogen were decreased. ConclusionAngelica sinensis (Oliv.) Diels has anti-fatigue effect on the blood-deficient model mice.Key words:Angelica sinensis (Oliv.); Blood-deficient; Anti

5、-fatigue疲勞屬中醫(yī)“虛損”范疇，中醫(yī)認為精（津）血為體力產(chǎn)生的物質基礎，它的生化和運行與中醫(yī)脾、腎、肝、心有密切關系，人的耐力亦由此而生。盡快消除疲勞，提高機體體質，中醫(yī)藥有很大優(yōu)勢。當歸Angelica sinensis (Oliv.) Diels的干燥根具有補血活血、調經(jīng)止痛、潤燥滑腸等功效。本文采用化學藥物損傷法造成小鼠血虛模型，研究當歸對血虛模型小鼠的影響。1 器材1.1 藥品與試劑當歸Angelica sinensis (Oliv.) Diels，生品，購于北京崇光飲片廠，產(chǎn)地甘肅，取當歸500 g，加10倍量的水，開始煎煮。第1次1 h，第2次30 min，第3次30 mi

6、n。合并煎液，過濾蒸發(fā)濃縮，然后放入烘箱烘干成粉末。 最終1 g當歸粉末相當于原藥材3.50 g。全血乳酸試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，批號20050615；尿素氮試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品，批號20050615；環(huán)磷酰胺，上海華聯(lián)制藥有限公司產(chǎn)品，批號031205。1.2 儀器SWELAB血球計數(shù)儀，Boule Medical AB 公司產(chǎn)品；瑞典stockholmUV757CRT紫外可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司產(chǎn)品。1.3 動物KM種小鼠，雌雄各半，體重（222）g，由中國醫(yī)學科學院動物中心提供，合格證號：SCXK (京) 2004-0001。2 方法小鼠自然飼養(yǎng)

7、34 d，隨機分成5組：正常對照組、血虛模型組、當歸水煎液低劑量組1.5 g/kg（按生藥量計）、當歸水煎液中劑量組3 g/kg、當歸水煎液高劑量組6 g/kg，每組12只。給藥組按給藥劑量連續(xù)灌胃14 d，1次/d，對照組和模型組則灌胃給予相等體積的生理鹽水。除正常對照組外，其余4組小鼠于第5 d開始給藥1 h后，分別經(jīng)腹腔注射環(huán)磷酰胺100 mg/kg，連續(xù)注射3 d1。正常對照組同時注射等量的生理鹽水。2.1 外周血象測定于末次給藥后30 min，眼眶取血，測定小鼠紅細胞總數(shù)（RBC）、白細胞總數(shù)（WBC）和血紅蛋白含量（HGB）。2.2 小鼠負重游泳實驗末次給藥后30 min后，鼠尾根

8、部負荷6% 體重的鉛絲，置于游泳箱中游泳（水深35 cm, 水溫25），記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間。以小鼠10 s內無法再浮出水面為依據(jù)，來判斷動物死亡2，3。2.3 血乳酸（LAC）的測定末次給藥30 min后小鼠尾部負重（體重4%）, 然后將其放入水深35 cm, 水溫(300.5)游泳箱中游泳10 min。休息15 min后，用毛細玻璃管眼球采血20 l，用全血乳酸測定試劑盒進行血乳酸測定。2.4 血尿素氮（BUN）的測定末次給藥30 min后, 將小鼠放入水深35 cm, 水溫(30.00.5)游泳箱中不負重游泳90 min，休息60 min后，拔眼球采血0.5 ml(不加抗凝劑)

9、，依照血清尿氮素試劑盒說明書操作。于520 nm下，30 min內測定各管吸收度，換算為血尿素氮含量，依照試劑盒說明書操作測定BUN含量。3 結果3.1 體征與體重造模小鼠非常行動遲緩，眼睛暗淡無光、血色暗紅。正常對照組和給藥組小鼠活動靈活, 皮毛光澤, 鼠尾粉紅。當歸水煎液對血虛小鼠體重的影響表1所示，給藥7 d后，各組間體重仍無差異。但第14天，與正常組比較，模型組小鼠體重明顯下降(P0.001)；與模型組比較，低，中，高劑量組動物的體重均有顯著性增加（P0.05，P0.01）。表1 當歸水煎液對血虛小鼠體重的影響(略)3.2 當歸水煎液對血虛小鼠RBC，WBC和HGB的影響血象的改變是血

10、虛最明顯的癥狀。當歸活血補血，能明顯改善血虛小鼠的外周血象。結果見表2。表2 當歸水煎液對血虛小鼠血象的影響(略)從表2可看出，與正常對照組比較，模型組小鼠血象顯著降低（P0.01），說明造血虛模型成功；與模型組比較，當歸水煎液低、中、高劑量組能顯著升高血虛小鼠RBC水平(P0.001)，當歸水煎液中劑量組能顯著升高血虛小鼠的WBC水平(P0.01)，低、高劑量組能明顯升高WBC水平(P0.05)；當歸水煎液低、中、高劑量組水煎液組均能顯著升高血虛小鼠HGB水平(P0.01)。3.3 當歸水煎液對血虛小鼠游泳時間的影響實驗結果如表3所示，血虛小鼠體力下降, 與正常組比較，游泳時間明顯縮短。當歸

11、水煎液高劑量組能顯著延長血虛小鼠游泳時間, 且與模型組比較, 有非常顯著性差異(P 0.01)。表3 當歸水煎液對血虛小鼠游泳時間的影響(略)3.4 當歸水煎液對血虛小鼠LAC的影響LAC是評價劇烈運動時機體疲勞程度最常用的生化指標。當歸水煎液對小鼠負重4%游泳10 min，休息15 min后LAC的影響如表4所示，與正常組對比，血虛小鼠在游泳后LAC顯著性增加(P 0.01)。與模型組比較，當歸水煎液高劑量組能明顯降低血虛小鼠運動后的LAC(P 0.05)。表4 當歸水煎液對血虛小鼠LAC的影響(略)3.5 當歸水煎液對血虛小鼠BUN的影響B(tài)UN與機體機能、疲勞程度以及負荷量的大小呈密切正相

12、關，因此可作評定運動量的指標4。當歸水煎液對小鼠不負重游泳90 min，休息60 min后BUN的影響如表5所示，與正常組對比，血虛小鼠在游泳后BUN顯著性增加(P 0.01)。與模型組比較，當歸水煎液高劑量組能明顯降低運動后的BUN (P 0.05)。表5 當歸水煎液對血虛小鼠BUN的影響(略)4 討論中醫(yī)認為，經(jīng)脈失于濡養(yǎng)，心血不足為血虛。當歸具有補血活血之功效。本研究證明當歸水煎液能明顯改善環(huán)磷酰胺所致血虛小鼠的體征，并使小鼠體重增加，同時明顯升高血虛小鼠RBC，Hb，WBC水平，即具有補血作用。血虛是慢性疲勞綜合征的病機之一。中華人民共和國保健食品檢驗和評價技術規(guī)范（試行）2004版中

13、緩解體力疲勞功能檢測方法中指出：負重游泳實驗結果陽性，且血乳酸、血尿素氮、肝糖原/肌糖元三項生化指標中任兩項指標陽性，可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。 運動耐力的提高是抗疲勞能力加強的表現(xiàn)，游泳時間的長短可以反映動物運動疲勞的程度5。在肌肉劇烈收縮時，因供氧不足單靠有氧氧化不能滿足能量的要求，必須加速糖酵解的供能過程。在無氧情況下，肌肉在通過糖酵解反應得到能量的同時，也產(chǎn)生了大量的乳酸，乳酸解離生成的氫離子占肌肉中酸性物質解離的85%以上。乳酸的增加使肌肉中氫離子濃度上升，pH下降，進而引起一系列生化變化，是導致疲勞的重要原因6，本實驗結果表明，6 g/（kgd）高劑量當歸水煎液能

14、顯著延長小鼠游泳時間和降低運動后小鼠的乳酸累積。機體在長時間運動不能通過糖、脂肪分解代謝獲得足夠的能量時，蛋白質和氨基酸代謝加強，從而產(chǎn)生血尿素氮（BUN），血清尿素氮的含量與運動呈直線關系，其在體內的蓄積是引起運動性疲勞的一個重要原因。本實驗結果表明，6 g/（kgd）高劑量當歸水煎液能顯著降低血清尿素氮含量。本實驗證實了當歸提高血虛小鼠的抗疲勞能力?！緟⒖嘉墨I】1馮海蓮，黃秀梅，王寧萍. 考察復方鎖陽膠囊的溫腎助陽作用J.中成藥, 2005, 27(1)：103.2談玲華, 徐娟華, 何金春. 女貞子和小蠟果的致適應作用J.中藥材, 1999, 22(12)：643.3莊劍青，施建蓉，曾兆麟，等. 紅景天及其復方