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1、(三)資金預(yù)算說明購置單項(xiàng)經(jīng)費(fèi)5萬元以上固定資產(chǎn)及設(shè)備等,須逐項(xiàng)說明與項(xiàng)目研究的直接相關(guān)性及必要性。1、設(shè)備費(fèi)由于本單位已經(jīng)具備良好的科研條件, 本課題預(yù)算內(nèi)無價(jià)值 5萬元以上的大型設(shè)備費(fèi)用, 也無需購 置價(jià)值5萬元以下小型儀器設(shè)備, 僅需要升級(jí)現(xiàn)有的顯微鏡, 增加顯微成像系統(tǒng):2.5萬元。廠家:Olympus,型號(hào):U-TOV.5XC2、材料費(fèi)主要用于購買:各類試劑盒;各種抗體;細(xì)胞培養(yǎng)耗材,常規(guī)生物化學(xué)及分子生物學(xué)試劑及耗材。共計(jì)39萬元(詳見下表)。動(dòng)物腫瘤模型的構(gòu)建與飼養(yǎng)共計(jì)8萬元??傆?jì)47萬元。(1) 各類試劑盒,如對(duì)細(xì)胞遷移侵襲能力檢測(cè)的試劑盒,檢測(cè)細(xì)胞活力的試劑盒,以及進(jìn)行DNA

2、,RNA提取和下游靶基因檢測(cè)的各種試劑盒。具體明細(xì)如下,合計(jì)約 6.67萬元。序號(hào)材料名稱fh1 單位單價(jià)(元)購置 數(shù)量金額(力兀)1反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Toyobo)盒150050.752熒光定量PCR試齊J盒(Toyobo)盒120050.63細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒(Fermentas)支140050.74RNA干擾試劑盒(Fermentas)盒260020.525質(zhì)粒小提試劑盒(Omega)盒60080.48質(zhì)粒中量提取試劑盒(GE)盒350020.756質(zhì)粒大量提取試劑盒 (10次GE)盒300010.37報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 (Promega)盒650010.658DNA純化試劑盒(Promega

3、)盒100050.59免疫靈光試劑盒(Invitrogen )盒250010.2510免疫組化試劑盒(Milipore )盒200020.411MTT活力檢測(cè)試劑盒(Sangon)盒100010.112trans-well 試劑盒(Milipore )盒320010.3213EMSA試劑盒(Milipore )盒350010.35合計(jì)6.67(2) 各種抗體,應(yīng)用于免疫印跡分析,免疫組織/細(xì)胞化學(xué)染色、免疫共沉淀等,主要為檢測(cè)蛋白表達(dá)、蛋白在組織或細(xì)胞內(nèi)的定位,及研究蛋白間相互作用。具體明細(xì)如下,合計(jì)約9.54 萬元。序號(hào)材料名稱fh1 單位單價(jià)(元)購置 數(shù)量金額(力兀)1OVOL2抗體(S

4、igma)支300041.22Smad4 抗體(Abcam)支300041.23Smad7 抗體(Up-state)支280010.284Smad2 抗體(Up-state)支280010.285Smad3 抗體(Up-state)支280010.286E-cadherin 抗體(Abcam)支280010.287Vimentin 抗體(R&D)支280010.288N-cadherin 抗體(Milipore )支280010.289Fibronectin 抗體(Milipore )支280010.2810HA 抗體(Sigma)支350020.711Flag 抗體(Sigma)支35002

5、0.712Myc 抗體(Sigma)支350020.713ZEB1 抗體(SantaCruz)支200010.214ZEB2抗體(SantaCruz)支200010.215Twist1 抗體(SantaCruz)支200010.216Twist2 抗體(SantaCruz)支200010.217Snail 抗體(SantaCruz)支200010.2Slug 抗體(SantaCruz)支200010.2P300 抗體(SantaCruz)支200010.2T 3 刖體(Milipore )支280010.28磷酸化T 3 R抗體(Milipore )支320010.32Smurf1 抗體(Mi

6、lipore )支280010.28Sactin 抗體(SantaCruz)支200020.4酶標(biāo)二抗(SantaCruz)支200010.2安光一抗(SantaCruz)支200010.2合計(jì)9.54(3) 細(xì)胞培養(yǎng)耗材,如各種細(xì)胞培養(yǎng)基、胎牛血清、特殊細(xì)胞培養(yǎng)用細(xì)胞因子及細(xì)胞培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞凍存管等。具體明細(xì)如下,合計(jì)約 11.35萬元。序號(hào)材料名稱fh1單位單價(jià)(元)購置 數(shù)量金額(力兀)RPMI1640 (Gibco)盒200200.43DMEM (Gibco)盒200300.64F12K 培養(yǎng)基(Gibco)瓶250100.255新生牛血清(國產(chǎn)-四季青)瓶150200.36

7、胎牛血清(Gibco)瓶20001027谷氨酰胺 Glutamax (Gibco)瓶300100.38青鏈霉素(Gibco)瓶200100.29非必需氨基酸(Gibco)瓶200100.210內(nèi)酮酸鈉(Gibco)瓶200100.212TGF3 1 蛋白(Gibco)支300041.21335mm細(xì)胞培養(yǎng)皿(Corning)箱100050.51560mm細(xì)胞培養(yǎng)皿(Corning)箱800100.816100mm 細(xì)胞培養(yǎng)皿(Corning)箱1000151.51796孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning)箱120050.61824孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Corning)箱1000101196孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Co

8、rning)箱800151.2202ml 凍存管(Corning)箱100010.1合計(jì)11.35(4)常規(guī)生物化學(xué)及分子生物學(xué)試劑及耗材,包括各類低值生化試劑、化學(xué)藥品和實(shí)驗(yàn)室常用耗材等。具體明細(xì)如下,合計(jì) 11.44萬元。序號(hào)材料名稱單位單價(jià)(元)購置 數(shù)量金額(力兀)胰蛋白月東(OXO。瓶28040.112酵母粉(OXOID15020.031GST凝膠 4B ( GE)瓶240020.482ProteinA/GAgarose (GE)瓶350041.43DNALadder (Fermentas)支180100.184蛋白 Marker (Fermentas)支450100.455DNA限

9、制性內(nèi)切酶(Fermentas)支120100.126高保真DNA聚合酶(Promega)支150081.27TaqDNA 聚合酶(Takara)支500160.88蛋白酶抑制齊J混合物(Roche)盒300041.29胰蛋白酶(Gibco)瓶350100.35Puromycine (Sigma)支120010.12G418 ( Milipore )支120010.1211SB431542 (sigma)支100020.2Trizol-RNA 提取試劑(200ml)瓶180020.36膠片(8x10,100 張)盒30020.06ECL化學(xué)發(fā)光試劑(50ml,GE)盒60040.24一次性濾器

10、(50個(gè))盒30040.12PCR用薄壁管(Axygen)盒230081.8412WB 用 PVDF膜(Milipore)卷200040.81315ml 離心管(500 個(gè),Corning)箱60020.121450ml 離心管(500 個(gè) Corning)箱80020.16151ml移液槍頭(500個(gè))包16200.03216200ul移液槍頭(1000個(gè))包15500.0751710ul移液槍頭(1000個(gè))包14500.07181.5mlEP 管(500 個(gè))包18500.09190.5mlEP 管( 1000 個(gè))包25500.125201mlRnasefree 移液槍頭(96 個(gè),

11、Axygen)盒30500.15200ulRnasefree 移液槍頭(96 個(gè), Axygen)盒27500.135Rnasefree1.5mlEP 管(500 個(gè),Axygen)包60100.06Rnasefree0.2mlPCR管( 1000 個(gè), Axygen)包240100.24合計(jì)11.44(5)常位移植瘤裸鼠模型、轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型的構(gòu)建與飼養(yǎng):本課題研究的一個(gè)技術(shù)手段就是在動(dòng)物水平研究乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移表型。課題研究任務(wù)中應(yīng)用了常位小鼠模型、MMTV-PyVT小鼠模型、OVOL2轉(zhuǎn)基因小鼠模型以及 MMTV-PyVT/OVOL2雙轉(zhuǎn)基因小鼠模 型等4個(gè)品系小鼠。按照經(jīng)驗(yàn),這些小鼠的

12、飼養(yǎng)、維持,每月的平均費(fèi)用約2000元,保守按照40個(gè)月的周期計(jì)算,共需要 2000x40=8 萬元,這只是保守預(yù)算,因?yàn)檫@還沒包括轉(zhuǎn)基因小鼠制作費(fèi)用,原因是小鼠模型為課題組原先擁有。3、測(cè)試化驗(yàn)加工費(fèi)大量轉(zhuǎn)基因與基因敲除小鼠標(biāo)本和大量臨床腫瘤標(biāo)本的石蠟切片與冰凍切片的制作、染色費(fèi)用,委托廈大醫(yī)學(xué)院病理科完成。 廈大生命科學(xué)院分析儀器中心獨(dú)立核算,擁有大量大型儀器,如激光共聚焦掃描顯微鏡、超速離心機(jī),并有專人操作,這些都是本實(shí)驗(yàn)所需要。 實(shí)驗(yàn)中大量引物合成以及基因序列測(cè)定等。 以上各項(xiàng)合計(jì)4萬元,詳見下表序號(hào)材料名稱fh1 單位單價(jià)(元)購置 數(shù)量金額(力兀)1激光共聚焦掃描顯微鏡小時(shí)2504

13、012超速離心機(jī)管252000.53組織切片制作與染色片204000.84siRNAoligo 合成對(duì)5002015DNA序列測(cè)定次401000.46DNA引物合成100bp150200.3合計(jì)44、燃料動(dòng)力費(fèi)本課題專用的超凈工作臺(tái)、高速低溫冷凍離心機(jī)、二氧化碳培養(yǎng)箱、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀、雜交爐、-80 度超低溫冰箱、-20度冰箱、4度冰箱、控溫?fù)u床、電熱干燥箱等,有單獨(dú)電表計(jì)量,按照經(jīng)驗(yàn)一個(gè)課題由此產(chǎn)生的能源消耗每月約625元,每年約7500元,4年共計(jì)3萬元。5、差旅費(fèi)課題研究過程中開展實(shí)驗(yàn)、考察、調(diào)研、學(xué)術(shù)交流等所發(fā)生的國內(nèi)差旅費(fèi)、市內(nèi)交通費(fèi)用等,4年需要3萬元。預(yù)計(jì)安排3人次參加國內(nèi)相關(guān)學(xué)

14、術(shù)會(huì)議,每次會(huì)議費(fèi)差旅費(fèi)約 0.50萬元,預(yù)算1.5萬元。預(yù)計(jì)安排科研合作3人次,每次差旅費(fèi) 0.50萬元,預(yù)算1.5萬元。共3.0萬元。4、 會(huì)議費(fèi)無5、 國際合作與交流費(fèi)項(xiàng)目組成員出國合作交流課題研究過程中課題組成員出國參加國際學(xué)術(shù)會(huì)議1人次、到美國歐文加州大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)習(xí)考察最新技術(shù)1人次,每次路費(fèi)住宿費(fèi)1.5萬元,共需要3萬元。國外專家來華合作交流邀請(qǐng)歐文加州大學(xué)醫(yī)學(xué)院 XingDai教授來華合作交流講學(xué)1人次,每次路費(fèi)住宿費(fèi)1.5萬元,共需要1.5萬元。共4.5萬元8、出版/文獻(xiàn)/信息彳播/知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)費(fèi)國際期刊論文版面費(fèi)和英文編輯的編輯費(fèi)用2篇,平土每篇1.50萬元。共3萬元資料費(fèi)每

15、年500 元, 4 年合計(jì) 2 千元;裝訂打印復(fù)印費(fèi)每年500 元, 4 年合計(jì) 2 千元;文獻(xiàn)檢索費(fèi)與網(wǎng)絡(luò)使用費(fèi)每年1000 元, 4 年合計(jì) 4 千元; 國內(nèi)國際專業(yè)郵寄費(fèi)每年500 元, 4 年合計(jì) 2 千元。以上各項(xiàng)合計(jì)4 萬元9 、勞務(wù)費(fèi)參加本課題的博士研究生:2 人,投入本課題全時(shí)工作時(shí)間:10 個(gè)月 /年人,專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)支付助研補(bǔ)貼為1000元/人月。4年共需助研補(bǔ)貼為:2人X 10個(gè)月/年人X 4年X 1000元/人月=80000元=8萬元。參加本課題的碩士研究生:4 人,投入本項(xiàng)目全時(shí)工作時(shí)間:10 個(gè)月 /年人,專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)支付助研補(bǔ)貼為500元/人月。3年共需助研補(bǔ)貼為:4人X 10個(gè)月/年人X 4年X

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