黃連飲片分級(jí)方法研究劉承凱

1、分類 炮制 年 級(jí) 2010級(jí) 成 都 中 醫(yī) 藥 大 學(xué)藥學(xué)院學(xué)士學(xué)位論文黃連飲片分級(jí)方法研究 劉承愷指 導(dǎo) 教 師： 黃勤挽（副教授） 申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別： 學(xué) 士 專業(yè)名稱： 中藥資源2010級(jí) 論文提交時(shí)間：2014 年 5 月 論文答辯時(shí)間：2014 年 6 月 學(xué)位授予單位：成都中醫(yī)藥大學(xué) 答辯委員會(huì)主席： 評(píng)閱人： 成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院2014年 5 月目錄摘要IIIABSTRACTIV前言1一、材料11.黃連飲片的收集12.儀器2二、試驗(yàn)方法和結(jié)果21.黃連飲片外觀物性特征-大小測(cè)量22.黃連飲片外觀物性特征-顏色測(cè)量33.黃連飲片外觀物性特征-藥屑雜質(zhì)測(cè)定54.黃連飲片內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)

2、75.黃連飲片分等研究13綜述：中藥黃連綜合利用概況14 1.中藥黃連的研究概述14 2.黃連須研究概述15 3.黃連葉研究概述15 4.黃連渣的研究概述16參考文獻(xiàn)16致 謝17 黃連飲片分級(jí)方法研究 劉成愷摘要目的：研究黃連飲片等級(jí)劃分的方法。方法：采用外觀物性特征量化和內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)的綜合方法研究18批黃連飲片的質(zhì)量。其中外觀物性特征量化研究黃連飲片的大小、顏色、藥屑雜質(zhì)；內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)對(duì)黃連飲片的水分、總灰分、浸出物、薄層鑒別、含量測(cè)定進(jìn)行了研究。結(jié)果：18批飲片長(zhǎng)度為18.3739.22mm，寬度為5.267.35mm，厚度為1.963.46mm，重量為0.140.47g；其外部顏色和內(nèi)

3、部顏色可計(jì)算出總色值；藥屑雜質(zhì)為0.43%3.23%，水分為7.34%10.51%，總灰分為1.70%2.82%，浸出物為24.43%32.59%，其中長(zhǎng)度、寬度、厚度、重量、藥屑雜質(zhì)、總灰分、浸出物可作為分級(jí)依據(jù)；黃連飲片供試品色譜中，在與黃連對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯4個(gè)以上相同顏色的熒光斑點(diǎn)（Rf由大到小分別是黃連堿、表小檗堿、小檗堿、巴馬汀和藥根堿），18批黃連飲片薄層色譜指紋信息一致，不作為分級(jí)依據(jù)；按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿計(jì)，18批黃連飲片含小檗堿為4.40%6.33%，含表小檗堿、黃連堿和巴馬汀的總量為2.89%4.18%，其中4批樣品不合格，通過聚類分析可分為2類，可作為黃

4、連飲片分級(jí)依據(jù)。結(jié)論：黃連飲片可以劃分為2種等級(jí)，其中一級(jí)飲片呈不規(guī)則的薄片（片長(zhǎng)不得少于2.0cm、片寬不得少于0.5cm、片厚0.10.3cm），外表皮灰黃色或黃褐色，切面或碎斷面鮮黃色或紅黃色，藥屑雜質(zhì)不得過1.0%，水分不得過12.0%，總灰分不得過2.5%，浸出物不得少于25.0%，在紫外光燈（365nm）下檢視，在與黃連對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯4個(gè)以上相同顏色的熒光斑點(diǎn)，與鹽酸小檗堿對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿計(jì)，含小檗堿不得少于6.5%，含表小檗堿、黃連堿和巴馬汀的總量不得少于4.0%；二級(jí)飲片呈不規(guī)則的片或碎塊（對(duì)長(zhǎng)、寬、片厚不做

5、規(guī)定），外表皮灰黃色或黃褐色，切面或碎斷面鮮黃色或紅黃色，藥屑雜質(zhì)不得過4.0%，水分不得過12.0%，總灰分不得過3.5%，浸出物不得少于15.0%，在紫外光燈（365nm）下檢視，在與黃連對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯4個(gè)以上相同顏色的熒光斑點(diǎn)，與鹽酸小檗堿對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿計(jì)，含小檗堿不得少于5.0%，含表小檗堿、黃連堿和巴馬汀的總量不得少于3.3%。 關(guān)鍵詞：黃連飲片 等級(jí) 一級(jí)飲片 二級(jí)飲片Research classification method berberine PiecesLiuChengkai ABSTRACTObjec

6、tive: Research berberine Pieces grading method.Methods: And integrated approach to the evaluation of the intrinsic quality of the quality of research grant berberine 18 Pieces quantified using physical characteristic appearance. Physical appearance characteristics which quantitative research berberi

7、ne Pieces size, color, drug crumbs impurities; intrinsic quality evaluation of water berberine Pieces, total ash, extract, TLC, assay studied.Results: 18 Pieces batch length 18.3739.22mm, width of 5.267.35mm, thickness 1.963.46mm, weighs 0.140.47g; its exterior color and interior color color calcula

8、te the total value; drug crumbs impurities 0.43%3.23%, a water content of 7.34%10.51%, total ash 1.70%2.82%, extract of 32.59%24.43%, wherein the length, width, thickness, weight, drug debris impurities, total ash extract as classification based; berberine tablets test products for chromatography, c

9、hromatography with the reference drug berberine corresponding position, which was four more of the same color fluorescent spots (Rf descending coptisine respectively, table berberine, berberine , THP and jatrorrhizine), 18 batches berberine tablets TLC fingerprint information is consistent, not as a

10、 basis for classification; calculated on dry goods, berberine meter, 18 batches berberine tablets containing 4.40% berberine 6.33%, with the total amount of berberine table, coptisine and THP is 2.89%4.18%, of which four batches of samples failed, cluster analysis can be divided into two categories,

11、 as berberine Pieces graded basis. Conclusion: Berberine Pieces can be divided into two kinds of levels, including an irregular flakes Pieces ( Duration of not less than 2.0cm, sheet width of not less than 0.5cm, slice thickness 0.1 0.3cm), pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of

12、bright yellow or red and yellow , medicine crumbs impurities not more than 1.0 %, moisture not more than 12.0% of the total ash content not more than 2.5% extract of not less than 25.0% , in UV light (365nm) , under review berberine reference drug chromatography with the corresponding position , whi

13、ch was four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference chromatogram corresponding position was the same color fluorescent spots , dry goods , hydrochloric acid Berberis meter base , containing not less than 6.5% berberine , berberine -containing sheet total THP

14、coptisine and not less than 4.0% ; secondary pieces irregular pieces or fragments ( of length, width , slice thickness makes provisions ) , pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of bright yellow or red and yellow , the drug should not exceed 4.0% of impurities crumbs , water not mo

15、re than 12.0% , not more than 3.5% total ash , extract not less than 15.0% , in UV light (365nm) , under review , the reference drug chromatography with berberine corresponding position , which was four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference substance corres

16、ponding position on the chromatogram , which was the same color fluorescent spots, dry goods , berberine dollars, with not less than 5.0% berberine , berberine -containing sheet total coptisine and THP shall not be less than 3.3%.Keywords: Berberine Pieces；Grade；A pieces；Two pieces前言自古以來，中藥材有商品等級(jí)劃分，

17、而中藥飲片規(guī)格缺乏科學(xué)合理的分類分級(jí)方法及其質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本課題來源于國(guó)家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥科研行業(yè)專項(xiàng)，以黃連飲片為研究對(duì)象，擬采用外觀物性特征量化和內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)結(jié)合的方法綜合評(píng)價(jià)，結(jié)合聚類分析建模，開展黃連飲片分級(jí)的探索性研究。在飲片傳統(tǒng)分級(jí)方法（片形大小、水分和雜質(zhì)的含量）的基礎(chǔ)上，分類對(duì)飲片進(jìn)行規(guī)格分級(jí)研究，并在各級(jí)飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)中充實(shí)現(xiàn)代科學(xué)評(píng)價(jià)內(nèi)容（有效成分含量、浸出物重量及TLC特征圖譜等），使飲片分級(jí)方法更為科學(xué)、實(shí)用。一、材料1.黃連飲片的收集黃連飲片收集由課題組前期完成，共制備和收集18批，每批次25kg，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥標(biāo)本中心盧先明教授鑒定為毛茛科植物黃連Cop

18、tis chinensis Franch 的干燥根莖加工品（切片）。飲片廠主要分布在四川省、安徽省、北京市、廣東省，兼顧黃連的道地產(chǎn)區(qū)和非道地主產(chǎn)區(qū)，詳見表1。表1 黃連飲片一覽表飲片編號(hào)等級(jí)生產(chǎn)廠家批號(hào)樣品量(kg)YP-1統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）重慶市石柱縣黃水鎮(zhèn)楓木鄉(xiāng)石印組（A級(jí)）藥材加工120111017.24YP-2統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）重慶市石柱縣黃水鎮(zhèn)楓木鄉(xiāng)石印組（B級(jí)）藥材加工120111028.35YP-3統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）重慶市石柱縣冷水鄉(xiāng)八龍村雙壩組（A級(jí)）藥材加工120111037.39YP-4統(tǒng)

19、貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）重慶市石柱縣冷水鄉(xiāng)八龍村雙壩組（B級(jí)）藥材加工120111047.74YP-5統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）湖北省利川市汪營(yíng)鎮(zhèn)王家寨村八組藥材加工120111056.46YP-6統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司（委托加工）四川省彭州市白鹿鎮(zhèn)紅花村十組藥材加工120111066.98YP-7統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司11051145YP-8統(tǒng)貨四川新荷花中藥飲片股份有限公司11060675YP-9統(tǒng)貨四川省中藥飲片有限責(zé)任公司1106215YP-10統(tǒng)貨成都真龍百信堂藥業(yè)有限公司1110012YP-11統(tǒng)貨洪雅縣瓦屋山藥業(yè)有限

20、公司1205012YP-12統(tǒng)貨廣安福鼎中藥飲片有限公司1207012YP-13統(tǒng)貨成都中醫(yī)大惠康藥業(yè)有限公司1207012YP-14統(tǒng)貨康美藥業(yè)股份有限公司1206022212YP-15統(tǒng)貨北京盛世龍藥業(yè)有限公司12070742YP-16統(tǒng)貨亳州市老益堂中藥材銷售有限公司/2YP-17統(tǒng)貨北京同仁堂（亳州）飲片有限責(zé)任公司2010091022YP-18統(tǒng)貨成都中醫(yī)大惠康藥業(yè)有限公司1211012注：YP-1YP-6系委托加工飲片；YP-7YP-18系購(gòu)買飲片。2.儀器游標(biāo)卡尺（量程0150 mm，精度0.02 mm）（成都成量工具有限公司），BS200S型精密電子天平（北京賽多利斯天平有限公

21、司，d=0.001g，max 200g），CR-410色彩色差計(jì)（日本柯尼卡美能達(dá)有限公司），F(xiàn)W135型中草藥粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司），DRZ-4型電阻爐溫度控制器（沈陽(yáng)市電爐廠），DZKW-4型水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司），ZF-90型紫外分析儀（溫州奧利生物醫(yī)學(xué)儀器廠），Agilent 1200高效液相色譜儀（含四元泵、DAD檢測(cè)器、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器），PHS-3C型酸度計(jì)（上海日島科學(xué)儀器有限公司），UPH-10T超純水器（成都超純科技有限公司）。二、試驗(yàn)方法和結(jié)果1.黃連飲片外觀物性特征-大小測(cè)量1.1試驗(yàn)方法 從每批黃連飲片中，隨機(jī)抽取50個(gè)樣本，用游標(biāo)卡尺測(cè)量樣

22、本的總長(zhǎng)度、總寬度（樣本平放投影至平面最寬處）、片厚（飲片最厚處），并稱取每1片片重。對(duì)總長(zhǎng)度、總寬度、片厚數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理后聚類分析。1.2試驗(yàn)結(jié)果 計(jì)算平均值，數(shù)據(jù)用±s形式表示，結(jié)果見表2和圖1。表2 黃連飲片外觀物性特征-大小測(cè)量(±s，n=50)飲片編號(hào)大小長(zhǎng)度（mm）寬度（mm）厚度（mm）重量（g）YP-123.90±7.476.54±1.412.37±0.550.23±0.12YP-221.86±8.115.87±1.302.57±0.680.18±0.09YP-324.86&

23、#177;8.335.52±1.242.87±0.750.25±0.12YP-420.84±6.455.26±0.762.85±0.900.19±0.11YP-523.77±7.125.90±1.153.46±0.810.30±0.15YP-624.21±7.707.13±1.242.24±0.780.24±0.12YP-734.87±10.376.88±1.592.74±0.730.39±0.23YP-8

24、27.62±7.476.41±2.462.62±0.890.29±0.22YP-925.61±8.056.76±1.973.19±0.780.35±0.22YP-1039.22±14.616.56±1.732.29±0.490.47±0.30YP-1119.36±6.695.98±1.992.69±0.610.19±0.08YP-1235.93±11.686.85±1.853.19±0.760.35

25、7;0.22YP-1328.25±10.437.35±2.682.64±0.710.30±0.23YP-1421.79±6.855.81±1.291.96±0.380.21±0.09YP-1524.75±6.496.54±1.442.13±0.330.24±0.11YP-1628.56±8.306.46±1.402.38±0.410.34±0.21YP-1718.37±4.495.52±1.322.38±0

26、.550.14±0.06YP-1830.06±9.777.15±1.952.45±0.660.32±0.17圖1 黃連飲片長(zhǎng)、寬、厚數(shù)據(jù)聚類分析圖由圖1可見，若將18批黃連飲片按大小聚類成2類，則YP-2、YP-11、YP-17、YP-3、YP-4、YP-14、YP-5、YP-9是第1類；YP-13、YP-18、YP-8、YP-16、YP-1、YP-15、YP-6、YP-7、YP-12、YP-10是第2類。結(jié)合聚類分析數(shù)據(jù)和生產(chǎn)實(shí)際，黃連飲片片厚、片型的均勻性是影響外觀物性特征的最大因素，暫定如下：【黃連一級(jí)飲片】 本品呈不規(guī)則的薄片（片長(zhǎng)不得

27、少于2.0cm、片寬不得少于0.5cm、片厚0.10.3cm）?！军S連二級(jí)飲片】 本品呈不規(guī)則的片或碎塊（對(duì)長(zhǎng)、寬、片厚不做規(guī)定）。2.黃連飲片外觀物性特征-顏色測(cè)量2.1試驗(yàn)方法 從每批黃連飲片中，隨機(jī)抽取干燥樣品數(shù)個(gè)，直接測(cè)定外部的色度值；內(nèi)部顏色是粉碎后90%以上過30目篩，未過篩的與已過篩的粉末合并，混合均勻，測(cè)定。儀器參數(shù)：光源D65，標(biāo)準(zhǔn)觀察角度2°，照明口徑Ø50 mm；大于光源口徑的燒杯裝盛樣品，樣品裝盛厚度不低于2cm，室溫下測(cè)定。數(shù)據(jù)用L*a*b*色空間法表示，其中L*為亮度值，a* 紅綠色度坐標(biāo)，b*為黃藍(lán)色度坐標(biāo)，E*ab為總色值，計(jì)算。以a*值為X

28、軸、b*值為Y軸、L*值為Z軸，進(jìn)行Lab色空間三維投影；并對(duì)L*a*b*值進(jìn)行聚類分析。2.2試驗(yàn)結(jié)果 結(jié)果見表3和圖2。表3 黃連飲片外觀物性特征-顏色測(cè)量飲片編號(hào)外部顏色內(nèi)部顏色L*a*b*總色值（E*ab）L*a*b*總色值（E*ab）YP-140.4511.0932.5553.091450.159.5832.3960.4641YP-248.6513.1336.1962.039850.659.3632.9561.1452YP-349.6413.4238.9364.496348.579.7929.1857.5010YP-444.0515.1335.0958.314949.90 10.07

29、31.9860.1177YP-544.1711.5534.2857.092153.619.6138.1966.5196YP-641.9810.7432.8054.346252.449.7635.9264.3075YP-741.419.9233.1453.957949.209.5429.9558.3837YP-843.679.3431.3754.574548.347.4227.8456.2750YP-935.746.8322.6742.871046.446.6724.4452.9006YP-1048.4710.3737.8562.365949.609.0130.7659.0552YP-1147.

30、799.9532.0158.374047.106.6625.2753.8641YP-1233.057.3122.4940.639148.099.1028.9856.8797YP-1335.718.1826.6645.308652.129.8335.1363.6179YP-1460.9216.5957.3385.283150.6310.0633.3761.4667YP-1535.798.4326.4245.277052.129.8335.1363.6179YP-1661.9513.4052.2182.117349.519.3831.8159.5911YP-1741.1510.7529.1451.

31、556044.888.5423.5751.4071YP-1838.5110.1430.5750.203247.889.2328.3656.4090圖2 黃連飲片外部、內(nèi)部顏色總色值數(shù)據(jù)聚類分析圖由圖2可見，若將18批黃連飲片按顏色聚類成2類，則YP-14、YP-16是第1類；YP-8、YP-9、YP-11、YP-12、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-5、YP-6、YP-7、YP-10、YP-13、YP-15是第2類。結(jié)合聚類分析數(shù)據(jù)和黃連飲片飲片生產(chǎn)實(shí)際，黃連飲片的顏色有一定的差異，主要集中在飲片的干燥環(huán)節(jié)，如果干燥時(shí)間過長(zhǎng)，則顏色加深偏于棕褐色，總色值數(shù)

32、值將減少。因顏色大多仍是以描述性語(yǔ)言為主，本身存在一定的差異，故暫不從顏色上對(duì)黃連飲片2個(gè)等級(jí)進(jìn)行區(qū)別：【黃連一級(jí)飲片】【黃連二級(jí)飲片】外表皮灰黃色或黃褐色；切面或碎斷面鮮黃色或紅黃色。3.黃連飲片外觀物性特征-藥屑雜質(zhì)測(cè)定黃連飲片雜質(zhì)的主要有4種類型：外源性雜質(zhì)：泥沙、異物等；非藥用部位：脫落的殘留須根；加工過程產(chǎn)生：碎屑（藥材粉末）；存貯過程產(chǎn)生：霉?fàn)€品、蟲蛀品。必須對(duì)其飲片中混有的灰屑、藥渣及可見異物進(jìn)行測(cè)定。3.1試驗(yàn)方法 每批次黃連飲片均勻取樣，每次取樣100g，測(cè)定6次。通過撿選、過二號(hào)篩后雜質(zhì)稱重方法，測(cè)定其中所含雜質(zhì)量，進(jìn)行聚類分析。3.2試驗(yàn)結(jié)果 結(jié)果見表4和圖3。表4 黃連

33、飲片外觀物性特征-灰屑、藥渣及可見異物測(cè)定飲片編號(hào)藥屑雜質(zhì)(%)(n=6)YP-10.47YP-20.43YP-30.59YP-42.26YP-53.23YP-60.39YP-70.53YP-81.47YP-91.97YP-101.20YP-111.24YP-121.50YP-130.84YP-140.68YP-150.45YP-161.39YP-171.06YP-180.51由表4可見，黃連飲片中藥屑雜質(zhì)（可見異物+通過一號(hào)篩灰屑）量在0.43%3.23%。圖3 黃連飲片藥屑雜質(zhì)量聚類分析圖由圖3可見，若將18批黃連飲片按藥屑雜質(zhì)量聚類成2類，則YP-4、YP-5、YP-9是第1類；YP-1

34、、YP-2、YP-3、YP-6、YP-7、YP-13、YP-14、YP-15、YP-18、YP-8、YP-10、YP-11、YP-12、YP-16、YP-17是第2類。結(jié)合聚類分析數(shù)據(jù)和生產(chǎn)實(shí)際，制定如下：【黃連一級(jí)飲片】取樣100g揀出雜質(zhì)，過一號(hào)篩篩出藥屑，合并稱重計(jì)算。不得過1.0%?！军S連二級(jí)飲片】取樣100g揀出雜質(zhì)，過一號(hào)篩篩出藥屑，合并稱重計(jì)算。不得過4.0%。4.黃連飲片內(nèi)在品質(zhì)評(píng)價(jià)4.1水分測(cè)定4.1.1試驗(yàn)方法 參照2010版中國(guó)藥典一部附錄 H第一法的測(cè)定方法：取供試品3g；將扁形稱瓶干燥至恒重。厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在105干燥5

35、小時(shí)，將瓶蓋蓋好,移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量。再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱重。至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量。4.1.2試驗(yàn)結(jié)果 數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，結(jié)果見表5和圖4。4.2總灰分測(cè)定4.2.1試驗(yàn)方法 參照2010版中國(guó)藥典一部附錄 K項(xiàng)下總灰分的測(cè)定方法：測(cè)定用的供試品需粉碎，使能通過二號(hào)篩，混合均勻后， 取供試品3g，置恒重坩堝中，稱定重量（精確至0.01g）， 緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至580，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中總灰分含量。4.2.2試驗(yàn)結(jié)果 數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，結(jié)果

36、見表5和圖5。4.3浸出物測(cè)定4.3.1試驗(yàn)方法 參照2010版中國(guó)藥典一部附錄A項(xiàng)下醇溶性浸出物的熱浸法測(cè)定方法：供試品需粉碎，使能通過二號(hào)篩，并混合均勻。取供試品約3g，精密稱定，置250ml的錐形瓶中，精密加稀乙醇100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時(shí)后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時(shí)。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，冷浸，用干燥濾器迅速濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105干燥3h后，置于干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算浸出物的含量。4.3.2試驗(yàn)結(jié)果 數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，結(jié)果見表5和圖6。

37、表5 黃連飲片水分、總灰分、浸出物的測(cè)定(，n=3)飲片編號(hào)水分（%）總灰分（%）浸出物（%）YP-18.712.2729.14YP-29.412.1228.77YP-38.962.2030.94YP-49.411.9728.71YP-59.512.3732.02YP-610.151.7727.27YP-79.462.3728.53YP-89.252.3024.43YP-99.262.5327.33YP-1010.342.5729.56YP-117.342.8232.59YP-1210.542.5024.59YP-1310.122.5725.70YP-149.682.2028.66YP-151

38、0.292.4027.90YP-168.872.3026.26YP-1710.511.7028.33YP-1810.282.4229.59從表5可知，18批黃連飲片水分為7.34%10.51%，總灰分為1.70%2.82%，浸出物為24.43%32.59%。均符合中國(guó)藥典2010年版一部增補(bǔ)版對(duì)黃連飲片的規(guī)定。圖4 黃連飲片水分含量聚類分析圖由圖4可見，若將6批黃連飲片按水分含量聚類成2類，則YP-11是第1類；YP-6、YP-10、YP-12、YP-13、YP-15、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-14、YP-16

39、是第2類。圖5 黃連飲片總灰分聚類分析圖由圖5可見，若將18批黃連飲片按總灰分聚類成2類，則YP-6、YP-4、YP-17是第1類；YP-1、YP-11、YP-2、YP-3、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-10、YP-12、YP-13、YP-14、YP-15、YP-16、YP-18是第2類。圖6 黃連飲片浸出物聚類分析圖由圖6可見，若將18批黃連飲片按浸出物聚類成2類，則YP-3、YP-5、YP-11是第1類；YP-8、YP-12、YP-13、YP-16、YP-1、YP-2、YP-4、YP-6、YP-7、YP-9、YP-10、YP-14、YP-15、YP-17、YP-18是第2類

40、。結(jié)合聚類分析數(shù)據(jù)和生產(chǎn)實(shí)際，考慮到水分能通過干燥而控制，總灰分、浸出物可反映黃連飲片內(nèi)在性質(zhì)，對(duì)2個(gè)等級(jí)區(qū)別如下：【黃連一級(jí)飲片】水分不得過12.0%；總灰分不得過3.5%；用稀乙醇作溶劑，熱浸法測(cè)定醇溶性浸出物不得少于25.0%。【黃連二級(jí)飲片】水分不得過12.0%；總灰分不得過3.5%；用稀乙醇作溶劑，熱浸法測(cè)定醇溶性浸出物不得少于15.0%。4.4薄層色譜鑒別參考中國(guó)藥典2010年版一部增補(bǔ)版黃連飲片項(xiàng)下規(guī)定，進(jìn)行供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液的制備。4.4.1供試品溶液制備 取黃連飲片粉末（過二號(hào)篩）0.25g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。4.

41、4.2對(duì)照藥材溶液配制 取黃連對(duì)照藥材0.25g，同供試品溶液制備方法制成對(duì)照藥材溶液。4.4.3對(duì)照品溶液配制 取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。4.4.4固定相 高效硅膠G薄層板。4.4.5展開溶劑系統(tǒng)的選擇 展開系統(tǒng)（中國(guó)藥典2010年版）：環(huán)己烷-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水-三乙胺（3:3.5:1:1.5:0.5:1) (對(duì)槽加等量氨水，預(yù)飽和20min)。展開系統(tǒng)（參考文獻(xiàn)）：甲苯醋酸乙酯異丙醇甲醇水(631.51.50.3) (對(duì)槽加等量氨水，預(yù)飽和20min)。4.4.6黃連飲片薄層色譜鑒別 結(jié)果見圖7。展開系統(tǒng) 118.黃連飲片YP-1Y

42、P-1819.黃連對(duì)照藥材20.鹽酸小檗堿對(duì)照品展開系統(tǒng) 118.黃連飲片YP-1YP-1819.黃連對(duì)照藥材20.鹽酸小檗堿對(duì)照品圖7 18批黃連飲片薄層色譜圖由圖7可知，在紫外光燈（365nm）下檢視，18批黃連飲片供試品色譜中，在與黃連對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯4個(gè)以上相同顏色的熒光斑點(diǎn)（Rf由大到小分別是a.黃連堿、b.表小檗堿、c.小檗堿、d.巴馬汀、e.藥根堿，其中藥根堿由于含量低，斑點(diǎn)e非常模糊）；與鹽酸小檗堿對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。說明18批黃連飲片薄層色譜指紋信息一致。4.5含量測(cè)定參考中國(guó)藥典2010年版一部增補(bǔ)版黃連項(xiàng)下規(guī)定，采用一測(cè)多評(píng)法測(cè)定各批

43、次藥材中表小檗堿、黃連堿、巴馬汀和小檗堿的含量。4.5.1色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（50:50）（每100ml中加十二烷基硫酸鈉0.4g，再以磷酸調(diào)節(jié)pH值為4.0）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為345nm。理論板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。結(jié)果見圖8圖11。圖8 鹽酸小檗堿對(duì)照品紫外吸收光譜圖圖9 鹽酸小檗堿對(duì)照品液相色譜圖圖10 陰性樣品液相色譜圖圖11 黃連飲片液相色譜圖4.5.2對(duì)照品溶液的制備 取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含125g的溶液，即得。4.5.3供試品溶液的制備 精密稱定黃連飲

44、片的粉末（過二號(hào)篩），置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇-鹽酸（100:1）的混合溶液50ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，即得。黃連飲片含量測(cè)定 取18批黃連飲片粉末（過二號(hào)篩），照4.5.3供試品溶液制備項(xiàng)下制備，精密吸取供試品溶液10l，注入液相色譜儀，測(cè)定，并進(jìn)行聚類分析，結(jié)果見表6和圖12。表6 黃連飲片含量測(cè)定結(jié)果(，n=3)飲片編號(hào)含量(%)表小檗堿黃連堿巴馬汀前三者總量小檗堿YP-10.861.531.493.885.88

45、YP-20.861.541.493.895.79YP-30.721.341.523.575.70YP-40.871.531.403.805.89YP-50.871.541.423.836.07YP-60.851.461.403.725.57YP-70.831.401.473.705.92YP-80.711.411.313.435.16YP-90.651.291.413.355.10YP-100.971.481.604.066.15YP-110.901.711.574.186.33YP-120.761.171.313.244.83YP-130.611.111.172.894.74YP-140.8

46、01.261.383.445.13YP-150.961.571.484.015.83YP-160.691.161.142.994.40YP-170.801.261.343.405.20YP-180.851.201.313.154.65從表6可見，按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿（C20H18ClNO4）計(jì)，18批黃連飲片含小檗堿（C20H17NO4）為4.40%6.33%，含表小檗堿（C20H17NO4）、黃連堿（C19H13NO4）和巴馬汀的總量為2.89%4.18%。其中YP-12、YP-13、YP-16、YP-18為不合格樣品。圖12 黃連飲片中小檗堿及三種生物堿含量聚類分析圖由圖34可見，若

47、將18批黃連飲片按小檗堿及三種生物堿含量聚類成2類，則YP-5、YP-10、YP-11、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-6、YP-7、YP-15是第1類；YP-8、YP-9、YP-12、YP-13、YP-14、YP-16、YP-17、YP-18是第2類。結(jié)合聚類分析數(shù)據(jù)和生產(chǎn)實(shí)際，考慮到生物堿含量是反映黃連飲片內(nèi)在性質(zhì)的重要指標(biāo)，對(duì)2個(gè)等級(jí)區(qū)別如下：【黃連一級(jí)飲片】按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿計(jì)，含小檗堿不得少于5.5%，含表小檗堿、黃連堿和巴馬汀的總量不得少于3.6%?！军S連二級(jí)飲片】按干燥品計(jì)算，以鹽酸小檗堿計(jì)，含小檗堿不得少于5.0%，含表小檗堿、黃連堿和巴馬汀的總量不得少于

48、3.3%。5.黃連飲片分等研究將黃連飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中所有數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總，按照定性、定量描述指標(biāo)歸類，按照等級(jí)劃分指標(biāo)逐個(gè)分類，將具有等級(jí)區(qū)分度的定量描述指標(biāo)列表，詳見表7。表7 黃連飲片具有等級(jí)區(qū)分度的定量描述指標(biāo)飲片編號(hào)長(zhǎng)度（mm）(n=50)寬度（mm）(n=50)厚度（mm）(n=50)藥屑雜質(zhì)(%)(n=6)總灰分（%）(n=3)浸出物（%）(n=3)表+黃+巴總量(%)(n=3)小檗堿含量(%)(n=3)確定等級(jí)YP-123.906.542.370.472.2729.143.885.88一級(jí)YP-221.865.872.570.432.1228.773.895.79一級(jí)YP-324.

49、865.522.870.592.2030.943.575.70二級(jí)YP-420.845.262.852.261.9728.713.805.89二級(jí)YP-523.775.903.463.232.3732.023.836.07二級(jí)YP-624.217.132.240.391.7727.273.725.57一級(jí)YP-734.876.882.740.532.3728.533.705.92一級(jí)YP-827.626.412.621.472.3024.433.435.16二級(jí)YP-925.616.763.191.972.5327.333.355.10二級(jí)YP-1039.226.562.291.202.572

50、9.564.066.15二級(jí)YP-1119.365.982.691.242.8232.594.186.33二級(jí)YP-1235.936.853.191.502.5024.593.244.83不合格YP-1328.257.352.640.842.5725.702.894.74不合格YP-1421.795.811.960.682.2028.663.445.13二級(jí)YP-1524.756.542.130.452.4027.904.015.83一級(jí)YP-1628.566.462.381.392.3026.262.994.40不合格YP-1718.375.522.381.061.7028.333.405.

51、20二級(jí)YP-1830.067.152.450.512.4229.593.154.65不合格 一級(jí)飲片：YP-1、YP-2、YP-6、YP-7、YP-15 二級(jí)飲片：YP-3YP-5、YP-8YP-11、YP-14、YP-17 不合格飲片：YP-12、YP-13、YP-16、YP-18 一級(jí)飲片與道地藥材、精湛的加工技術(shù)兩者密不可分；YP-16、YP-18等外觀好、片型大，但成分含量低，屬于“先天不足”；YP-5、YP-11等外觀差、片型較小、雜屑多，成分含量很高，屬于“后天不足”。綜述：中藥黃連綜合利用概況1.中藥黃連的研究概述黃連為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franc

52、h.、三角葉黃連Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云連Coptis teeta wall.的干燥根莖，分別習(xí)稱“味連”、“雅連”和“云連”1。 多年生草本，喜生長(zhǎng)在高山陰濕冷涼的山區(qū)，在海拔1000至1800m之間，主要為栽培品，主要分布于我國(guó)的四川、重慶、湖北、陜西、云南、貴州等省。崔學(xué)軍2綜述了黃連的有效化學(xué)成分，表明黃連根莖均含多種異喹啉類生物堿，小檗堿為黃連的主要成分，含量約為5%8%。不同的黃連的有效成分也不同，迄今已得數(shù)十種生物堿類成分。黃連根莖含小檗堿，表小檗堿，黃連堿，甲基黃連堿，小檗紅堿，掌葉防己堿，非洲防己堿，藥根堿，木蘭花堿，阿魏酸，

53、黃柏酮、黃柏內(nèi)酯；三角葉黃連根莖含小檗堿，表小檗堿，黃連堿，甲基小檗堿，藥根堿，木蘭花堿；云南黃連根莖含小檗堿，掌葉防己堿，藥根堿，黃連堿，甲基黃連堿，木蘭花堿。徐錦堂等3綜述了黃連的藥理作用，表明黃連具有抗菌作用、抗病毒作用、抗心律失常作用、治療充血性心力衰竭作用、對(duì)于消化系統(tǒng)具有利膽作用、抗腹瀉作用、對(duì)胃粘膜損傷和潰瘍的保護(hù)作用、降血糖的作用、抗炎與免疫調(diào)節(jié)作用、抗腫瘤作用。2.黃連須研究概述黃連為毛茛科植物，其根莖供藥用，附著于黃連上的細(xì)根，稱為黃連須。黃連須過去則多棄去不用，近代研究人員陸續(xù)開始研究。在化學(xué)成分及含量方面，趙忠敬4經(jīng)過測(cè)定其水溶性浸出物，發(fā)現(xiàn)凈黃連須與黃連僅相差25%，并同時(shí)發(fā)