兩種滅菌方法對番茄種子滅菌效果的評價.docx

1、研究報告唐琳等:兩種滅菌方法對番茄種子滅菌效果的評價兩種滅菌方法對番茄種子滅菌效果的評價唐琳I,劉建國2,馬欣榮3（1.溫州醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，浙江溫州325027；2.遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，貴州遵義563003；3.中國科學(xué)院成都分院生物研究所，四川成都610041）摘要:評價備茄種子經(jīng)0.1%升汞和3%4%次氧酸鈉溶液天菌的效果。方法:將番茄種子浸于3%4%次氯放鈉溶液中充分振蕩20min,以滅菌水充分漂洗種子34次。另將番茄種子浸于75%酒精12min,棄酒精后加入足量的0.1%升汞溶液充分振蕩10-15min,再以滅菌水充分漂洗種子4-5次。將種子點播于TMTI固體培養(yǎng)基中。觀察記錄

2、種子經(jīng)兩種滅菌法后的最早出芽時間、子葉形成時間和全部出芽時間。結(jié)果：經(jīng)兩種滅茵劑消毒后的畚茄種子的最先出芽時間、子葉形成時間及全部出芽時間均有極顯若性差異（p0.01）o結(jié)論:番茄種子消毒以3%4%次氯酸鈉溶液為佳。關(guān)鍵詞：番茄種子；滅菌；次氯酸納；升汞中圖分類號：S641.2文獻標(biāo)志碼：A文章編號：10014705（2008）0990174）2EvaluationtheEfficiencyofSterilizingTomatoSeedswithTwoSterilantsTANGlin1,LIUJian-guo2,MAXin-rong(1.School&HospitalofStomatolog

3、y,WhenzhouMedicalCollege,Whenzhou325027,China；2.AffiliatedStomatologicalHospital,ZunyiMedicalCollege,Zunyi563003,China)Abstract:Objective:Toevaluatetheefficiencyofsterilizingtomatoseedswith0.1%mercuricchlorideand3%-4%sodiumhypochloritesolution.Methods：Tomatoseedswerefirstlyimmersedin3%-4%sodiumhypoc

4、hloritesolutionfor20minwithshakingandthenrinsedthreeorfourtimeswithsteriledistilledwater.Tomatoseedswerefirstlyimmersedin0.1%mercuricchloridefbr10to15minwithshakingandthenrinsedfourorfivetimeswithsteriledistilledwater.GerminatedtheseedsonTMT1medium.Observedthefbrmostgerminatingtime,thecotyledonsemer

5、gingtimeandthewholegerminatingtimeofsterilizationoftomatoseedswithtwosterilantsrespectively.Results：Theformostgerminatingtime,thecotyledonsemergingtimeandthewholegenninatingtimeoftomatoseedswithtwosterilantsrespectivelyhavesignificantdifference(p9011L40478510015T33948059014L53585812017t3353794120132

6、.2統(tǒng)計分析圖1反映了經(jīng)統(tǒng)計分析以0.1%升汞溶液和3%4%次氯酸鈉溶液消毒的番茄種子在TMT1培養(yǎng)基中光照培養(yǎng)后的最早出芽時間、子葉形成時間和全部出芽時間，均有顯著性差異(P0.01)o圖1兩種滅菌法統(tǒng)計分析圖(po.o5*,po.or,)3討論植物組織培養(yǎng)是離體無菌培養(yǎng)，因而必須對來自有菌空間的外植體進行消毒滅菌，此時必須做到既要把外植體表面的微生物徹底殺死，又不傷害其組織和表層細(xì)胞，以獲得不污染且存活的外植體。種苗污染大體上有四方面的原因:(1)種子本身滅菌效果不好；(2)培養(yǎng)基滅菌不徹底;(3)空氣帶菌;(4)實驗操作不當(dāng)。其中最重要的是種子滅菌效果。由于作物種子在其生長發(fā)育過程中易受

7、自然界各種細(xì)菌和真菌的浸染，種子不僅表面帶菌，而且內(nèi)部也可能被感染，所以對種子進行徹底的滅菌就非常重要，而且也比較困難。迄今各種滅菌方法已有不少報道5O一般常用的滅菌劑有：75%酒精、0.1%升汞、3%4%次氯酸鈉等，其它抗菌素、雙氧水、硝酸銀、漠水等亦可采用。升汞被用作消毒劑已有百年歷史(1881年Koch首先發(fā)現(xiàn)其殺菌效力),1:(500-2000)的升汞溶液對多數(shù)細(xì)菌有滅菌作用。它殺菌力強,但剌激性和腐蝕性大，毒性也大，對細(xì)菌的滲透性小，遇有機物效果降低。升汞對金屬器皿有腐蝕作用，對人畜有劇毒。次氯酸鈉滅菌的原理是水解形成次氯酸，次氯酸再進一步分解形成新生態(tài)氧,新生態(tài)氧的極強氧化性使菌體

8、和病毒上的蛋白質(zhì)等物質(zhì)變性，從而使病源微生物致死。不同植物種子對不同消毒劑有不同的耐受能力，種子消毒時間過長，雖然滅菌效果好，但種子發(fā)芽率會下降。本試驗對比了使用0.1%升汞溶液和3%4%次氯酸鈉溶液消毒番茄種子的效果。結(jié)果表明:兩種滅菌劑在最先出芽時間、子葉形成時間及全部出芽時間上均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。分析其原因可能為番茄種皮較薄，而升汞毒性較大,從而破壞番茄種的萌芽活性，致使其最先出芽時間長且全部出芽時間不同步。在播種數(shù)量不大的情況下,影響后續(xù)試驗的進行。相較于0.1%升汞溶液，番茄種子滅菌以3%4%次氯酸鈉溶液為佳。參考文獻：1PierikRLM.Invitroculture

9、ofhigherplantsM.DordrechtBostonLancaster:MartinusPublishers,1987；89-94.2 吳良?xì)g，陶勤南.水稻有機營養(yǎng)試驗供試無菌苗的篩選和培育方法J.浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,1997,23(6):711-715.3 吳良?xì)g，陶勤南.植物有機營養(yǎng)無菌培養(yǎng)試驗方法的研究與應(yīng)用J.土壤學(xué)報,1999,36(4)：551-558.4 DoddsJH,RobertsLW.Experimentsinplanttissueculture(2nd)M.London,NewYork,NewRocbelleMelbourneSydney:CambridgeUniversityRress