兩種滅菌方法對(duì)番茄種子滅菌效果的評(píng)價(jià).docxVIP

1、研究報(bào)告唐琳等:兩種滅菌方法對(duì)番茄種子滅菌效果的評(píng)價(jià)兩種滅菌方法對(duì)番茄種子滅菌效果的評(píng)價(jià)唐琳I,劉建國(guó)2,馬欣榮3（1.溫州醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，浙江溫州325027；2.遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院，貴州遵義563003；3.中國(guó)科學(xué)院成都分院生物研究所，四川成都610041）摘要:評(píng)價(jià)備茄種子經(jīng)0.1%升汞和3%4%次氧酸鈉溶液天菌的效果。方法:將番茄種子浸于3%4%次氯放鈉溶液中充分振蕩20min,以滅菌水充分漂洗種子34次。另將番茄種子浸于75%酒精12min,棄酒精后加入足量的0.1%升汞溶液充分振蕩10-15min,再以滅菌水充分漂洗種子4-5次。將種子點(diǎn)播于TMTI固體培養(yǎng)基中。觀(guān)察記錄

2、種子經(jīng)兩種滅菌法后的最早出芽時(shí)間、子葉形成時(shí)間和全部出芽時(shí)間。結(jié)果：經(jīng)兩種滅茵劑消毒后的畚茄種子的最先出芽時(shí)間、子葉形成時(shí)間及全部出芽時(shí)間均有極顯若性差異（p0.01）o結(jié)論:番茄種子消毒以3%4%次氯酸鈉溶液為佳。關(guān)鍵詞：番茄種子；滅菌；次氯酸納；升汞中圖分類(lèi)號(hào)：S641.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：10014705（2008）0990174）2EvaluationtheEfficiencyofSterilizingTomatoSeedswithTwoSterilantsTANGlin1,LIUJian-guo2,MAXin-rong(1.School&HospitalofStomatolog

3、y,WhenzhouMedicalCollege,Whenzhou325027,China；2.AffiliatedStomatologicalHospital,ZunyiMedicalCollege,Zunyi563003,China)Abstract:Objective:Toevaluatetheefficiencyofsterilizingtomatoseedswith0.1%mercuricchlorideand3%-4%sodiumhypochloritesolution.Methods：Tomatoseedswerefirstlyimmersedin3%-4%sodiumhypoc

4、hloritesolutionfor20minwithshakingandthenrinsedthreeorfourtimeswithsteriledistilledwater.Tomatoseedswerefirstlyimmersedin0.1%mercuricchloridefbr10to15minwithshakingandthenrinsedfourorfivetimeswithsteriledistilledwater.GerminatedtheseedsonTMT1medium.Observedthefbrmostgerminatingtime,thecotyledonsemer

5、gingtimeandthewholegerminatingtimeofsterilizationoftomatoseedswithtwosterilantsrespectively.Results：Theformostgerminatingtime,thecotyledonsemergingtimeandthewholegenninatingtimeoftomatoseedswithtwosterilantsrespectivelyhavesignificantdifference(p9011L40478510015T33948059014L53585812017t3353794120132

6、.2統(tǒng)計(jì)分析圖1反映了經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析以0.1%升汞溶液和3%4%次氯酸鈉溶液消毒的番茄種子在TMT1培養(yǎng)基中光照培養(yǎng)后的最早出芽時(shí)間、子葉形成時(shí)間和全部出芽時(shí)間，均有顯著性差異(P0.01)o圖1兩種滅菌法統(tǒng)計(jì)分析圖(po.o5*,po.or,)3討論植物組織培養(yǎng)是離體無(wú)菌培養(yǎng)，因而必須對(duì)來(lái)自有菌空間的外植體進(jìn)行消毒滅菌，此時(shí)必須做到既要把外植體表面的微生物徹底殺死，又不傷害其組織和表層細(xì)胞，以獲得不污染且存活的外植體。種苗污染大體上有四方面的原因:(1)種子本身滅菌效果不好；(2)培養(yǎng)基滅菌不徹底;(3)空氣帶菌;(4)實(shí)驗(yàn)操作不當(dāng)。其中最重要的是種子滅菌效果。由于作物種子在其生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中易受

7、自然界各種細(xì)菌和真菌的浸染，種子不僅表面帶菌，而且內(nèi)部也可能被感染，所以對(duì)種子進(jìn)行徹底的滅菌就非常重要，而且也比較困難。迄今各種滅菌方法已有不少報(bào)道5O一般常用的滅菌劑有：75%酒精、0.1%升汞、3%4%次氯酸鈉等，其它抗菌素、雙氧水、硝酸銀、漠水等亦可采用。升汞被用作消毒劑已有百年歷史(1881年Koch首先發(fā)現(xiàn)其殺菌效力),1:(500-2000)的升汞溶液對(duì)多數(shù)細(xì)菌有滅菌作用。它殺菌力強(qiáng),但剌激性和腐蝕性大，毒性也大，對(duì)細(xì)菌的滲透性小，遇有機(jī)物效果降低。升汞對(duì)金屬器皿有腐蝕作用，對(duì)人畜有劇毒。次氯酸鈉滅菌的原理是水解形成次氯酸，次氯酸再進(jìn)一步分解形成新生態(tài)氧,新生態(tài)氧的極強(qiáng)氧化性使菌體

8、和病毒上的蛋白質(zhì)等物質(zhì)變性，從而使病源微生物致死。不同植物種子對(duì)不同消毒劑有不同的耐受能力，種子消毒時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，雖然滅菌效果好，但種子發(fā)芽率會(huì)下降。本試驗(yàn)對(duì)比了使用0.1%升汞溶液和3%4%次氯酸鈉溶液消毒番茄種子的效果。結(jié)果表明:兩種滅菌劑在最先出芽時(shí)間、子葉形成時(shí)間及全部出芽時(shí)間上均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。分析其原因可能為番茄種皮較薄，而升汞毒性較大,從而破壞番茄種的萌芽活性，致使其最先出芽時(shí)間長(zhǎng)且全部出芽時(shí)間不同步。在播種數(shù)量不大的情況下,影響后續(xù)試驗(yàn)的進(jìn)行。相較于0.1%升汞溶液，番茄種子滅菌以3%4%次氯酸鈉溶液為佳。參考文獻(xiàn)：1PierikRLM.Invitroculture

9、ofhigherplantsM.DordrechtBostonLancaster:MartinusPublishers,1987；89-94.2 吳良?xì)g，陶勤南.水稻有機(jī)營(yíng)養(yǎng)試驗(yàn)供試無(wú)菌苗的篩選和培育方法J.浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1997,23(6):711-715.3 吳良?xì)g，陶勤南.植物有機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)方法的研究與應(yīng)用J.土壤學(xué)報(bào),1999,36(4)：551-558.4 DoddsJH,RobertsLW.Experimentsinplanttissueculture(2nd)M.London,NewYork,NewRocbelleMelbourneSydney:CambridgeUniversityRress