醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法及醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則

1、醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法：衛(wèi)生部發(fā)布部門2010194號發(fā)布文號：衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā) 則總 第一章保障臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)質(zhì)量為規(guī)范醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理，第一條醫(yī)醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例、和實(shí)驗(yàn)室生物安全，保證臨床診斷和治療科學(xué)性、合理性，根據(jù)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法和醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法，制定本辦法。進(jìn)行疾病診rna，臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室是指通過擴(kuò)增檢測特定的dna或 第二條斷、治療監(jiān)測和預(yù)后判定等的實(shí)驗(yàn)室，醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)集中設(shè)置，統(tǒng)一管理。本辦法適用于開展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)技術(shù)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。第三條各省級衛(wèi)生部負(fù)責(zé)全國醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督管理工作。第四條衛(wèi)生行政部門負(fù)

2、責(zé)所轄行政區(qū)域內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督管理工作。不得向患者收以科研為目的的基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目不得向臨床岀具檢驗(yàn)報告，第五條取任何費(fèi)用。實(shí)驗(yàn)室審核和設(shè)置第二章并提醫(yī)療機(jī)構(gòu)向省級衛(wèi)生行政部門提岀臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置申請，第六條交以下材料：責(zé)驗(yàn)收行政部門執(zhí)業(yè)許可證（一）醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證復(fù)印件；擬設(shè)置的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室平面圖以及擬開展的檢驗(yàn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本情況，（二）項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)設(shè)備、設(shè)施條件和有關(guān)技術(shù)人員資料；（三）對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的需求以及臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的預(yù)測分析。（以下簡稱省級衛(wèi)生 省級臨床檢驗(yàn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的其他機(jī)構(gòu)第七條行政部門指定機(jī)構(gòu)）負(fù)責(zé)組織

3、醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)審核工作。省級臨床檢驗(yàn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)制訂醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基第八條醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢按照因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)審核辦法，組建各相關(guān)專業(yè)專家?guī)欤?yàn)工作導(dǎo)則對醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行技術(shù)審核。技術(shù)審核辦法報請省級衛(wèi)生行政部門同意后實(shí)施。醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過省級臨床檢驗(yàn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)組織的技術(shù)第九條審核的，憑技術(shù)審核報告至省級衛(wèi)生行政部門進(jìn)行相應(yīng)診療科目項(xiàng)下的檢驗(yàn)項(xiàng)目登記備案。資料 Word第十條醫(yī)療機(jī)構(gòu)和省級衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)按照醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法 臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄開展醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目登記工作。 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置應(yīng)符合國家實(shí)驗(yàn)

4、室生物安全有關(guān)規(guī)定。第十一條實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理第三章方可開展臨 醫(yī)療機(jī)構(gòu)經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目登記后，第十二條床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)按照第十三條工作導(dǎo)則，開展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。第十四條定機(jī)構(gòu)技術(shù)工作導(dǎo)則衛(wèi)生醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級以上衛(wèi)生行政部門指 培訓(xùn)合格后，方可從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作。醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)按照第十五條 參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心或指定機(jī)構(gòu)組織的實(shí)驗(yàn)室室開展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制，部臨床檢驗(yàn)中心或指定機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)將室間質(zhì)量評價結(jié)果及時通報醫(yī)療機(jī)構(gòu)和間質(zhì)量評價

5、。相應(yīng)省 級衛(wèi)生行政部門實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督管理第四章醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因省級臨床檢驗(yàn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)按照測結(jié)擴(kuò)增檢驗(yàn)工作導(dǎo)則對醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測， 衛(wèi)生行政部門。省級以上衛(wèi)生行政部門可以委托臨床檢驗(yàn)中心或者其他指定機(jī)構(gòu)對醫(yī)療工作人員在履行職責(zé)時應(yīng)當(dāng)出示證明機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行現(xiàn)場檢查。 行現(xiàn)場檢查時，檢查人員有權(quán)調(diào)閱有關(guān)資料，被檢查醫(yī)療機(jī)構(gòu)不得拒絕或隱瞞。第十六條并將監(jiān)果報省級第十七條現(xiàn)場檢查文件。在進(jìn)省級以上衛(wèi)生行政部門指定機(jī)構(gòu)對室間質(zhì)量評價不合格的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床第十八條次發(fā)現(xiàn)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)結(jié)23次中有基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室提出警告。對于連續(xù)生行政部門應(yīng)

6、當(dāng)責(zé)令其暫停有關(guān)臨床果不合格的醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室， 束后，經(jīng)指定機(jī)構(gòu)組織的再次技術(shù)審核合格后，基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目限期整改。 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目。2次或者省級衛(wèi) 方可整改結(jié) 重新開展臨床對于擅自開展臨床基因檢驗(yàn)項(xiàng)目的醫(yī)療機(jī)構(gòu)，由省級衛(wèi)生行政部門依據(jù)第十九條醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例實(shí)施細(xì)則第八十條處罰，并予以醫(yī)療機(jī)構(gòu)管理?xiàng)l例第四十七條和公告。公告所需費(fèi)用由被公告醫(yī)療機(jī)構(gòu)支付。由省級衛(wèi)生行政醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室岀現(xiàn)以下情形之一的，第二十條公告所需費(fèi)用由被公告醫(yī)療機(jī)構(gòu)并予以公告，部門責(zé)令其停止開展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目，資料 Word支付：（一）開展的臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目超岀省級衛(wèi)生行政部門核

7、定范圍的；（二）使用未經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的臨床檢驗(yàn)試劑開展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的;（三）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中未開展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制的;（四）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中未參加實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評價的；（五）在臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)中弄虛作假的；（六）以科研為目的的基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目向患者收取費(fèi)用的；（七）使用未經(jīng)培訓(xùn)合格的專業(yè)技術(shù)人員從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作的。（八）嚴(yán)重違反國家實(shí)驗(yàn)室生物安全有關(guān)規(guī)定或不具備實(shí)驗(yàn)室生物安全保障條件的。則附 第五章本辦法自發(fā)布之日起施行。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法第二十一條號）同時廢止。10 （衛(wèi)醫(yī)發(fā)2002附件醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作導(dǎo)則一、臨床基因擴(kuò)增

8、檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計原則上臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)計原則。（一）個區(qū)域在物4置以下區(qū)域：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。這應(yīng)當(dāng) 始終處于完全理空間上必須是完全相互獨(dú)立的，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，區(qū)域可適當(dāng)合并。例如使用實(shí)的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)使用儀器的功能，儀，擴(kuò)增區(qū)、 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并；采用樣本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測為一時熒光per體的自動化分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并。各區(qū)的功能是：試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的準(zhǔn)備，以及離1.心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)

9、備。）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管。對于涉及臨床樣dna標(biāo)本制備區(qū)：核酸（rna、2.本的操作，應(yīng)符合生物安全二級實(shí)驗(yàn)室防護(hù)設(shè)備、個人防護(hù)和操作規(guī)范的要求。資料Word擴(kuò)增及檢測。edna合成、dna 3.擴(kuò)增區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分4.析、測序等。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向可按臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向。（二）防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本制備區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行，可按照從試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本制備區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。方向空氣壓力遞減的方式進(jìn)行。可通過安裝排風(fēng)扇、負(fù)壓排風(fēng)裝置

10、或其他可行的方式實(shí)現(xiàn)。（三）工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標(biāo)準(zhǔn)。試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)。1.-20 C以下冰箱。28C和（1）2）混勻器。（I）。）微量加樣器（覆蓋 0.2-1000卩 （3）可移動紫外燈（近工作臺面）。（4(5）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭）專用工作服和工作鞋（套）。（6）專用辦公用品。（7標(biāo)本制備區(qū)。2.-80 C冰箱。2-8 C冰箱、-20 C或 （1）高速離心機(jī)。2（）混勻器。（3）水浴箱或加熱模塊。（4）。卩）微量加樣器（覆蓋 0.2-1000I（5。6（）可移動紫外燈（近工作臺面）7）生物安全柜。（資料Word）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸

11、頭（帶濾芯）。（8）專用工作服和工作鞋（套）。（9）專用辦公用品。（10，應(yīng)當(dāng)具有超聲波水浴儀。）如需處理大分子 dna （113.擴(kuò)增區(qū)。1）核酸擴(kuò)增儀。 （I）,（視情況定）。）微量加樣器（覆蓋 0.2-1000卩2（3）可移動紫外燈（近工作臺面） 。（）消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾芯）。（4）專用工作服和工作鞋。（5）專用辦公用品(6擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。4.視檢驗(yàn)方法不同而定，基本配置如下：I）。1）微量加樣器（覆蓋 0.2-1000卩 （2）可移動紫外燈（近工作臺面） 。（）消耗品：一次性手套、加樣器吸頭（帶濾芯）。（3）專用工作服和工作鞋。（4）專用辦公用品。

12、（5實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)根據(jù)自己使用的擴(kuò)增檢測技術(shù)或試劑上述各區(qū)域儀器設(shè)備配備為基本配備,的特點(diǎn)，對儀器設(shè)備進(jìn)行必要的增減。二、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作基本原則即試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本制備區(qū)（一）進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行， 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。-擴(kuò)增區(qū)-（二）各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品不得混用。資料Word（三）不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出。實(shí)驗(yàn)室的清潔應(yīng)當(dāng)按試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)-標(biāo)本制備區(qū)-擴(kuò)增區(qū)-擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)（四）的方向進(jìn)行。不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。工作結(jié)束后，必須立即對

13、工作區(qū)進(jìn)行清潔。工作區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺表面應(yīng)當(dāng)可耐受諸如（五）由于紫外照射次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效。波長），在工的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵，因此可使用可移動紫外燈 （254nm對紫，（bp ） 90cm作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺上 60內(nèi)照射。由于擴(kuò)增產(chǎn)物僅幾百或幾十堿基對外線損傷不敏感，因此紫外照射擴(kuò)增片段必須延長照射時間，最好是照射過夜。實(shí)驗(yàn)室生物安全通所有操作符合（六）實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，）用要求（gb19489-2008三、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域工作注意事項(xiàng)貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至試試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)。

14、（一）試劑盒中的陽性對照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū)，劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)，不能經(jīng)過擴(kuò)增檢測區(qū)，應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。（二）標(biāo)本制備區(qū)。由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染， 為避免樣本間的交叉可通過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件， 避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。 污染， 加入待測核酸后，必須蓋好含反應(yīng)混合液的反應(yīng)管。對具有潛在傳染危險性的材料， 必須在生 物安全柜內(nèi)開蓋，并有明確的樣本處理和滅活程序。（三）擴(kuò)增區(qū)。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)當(dāng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。必須注意的 是，所有經(jīng)過檢測的反應(yīng)管不得在此區(qū)域打開。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。核酸擴(kuò)增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣，如膜上或微孔板或芯片（四） 上探針雜交方法（放射性核素標(biāo)記或非放射性核素標(biāo)記） 、直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、本區(qū) 是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)質(zhì)譜分析等。轉(zhuǎn)移、核酸測序方法、聚丙烯酰胺凝膠電泳、 southernpcr-elisa 因此