普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基使用

1、中文名稱：營養(yǎng)瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基)英譯名稱：Nutrient Agar品種編號：022020營養(yǎng)瓊脂規(guī)格：250g干粉培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂用途：用于細菌總數(shù)測定、保存菌種及純培養(yǎng)，也可用于消毒效果測定。營養(yǎng)瓊脂使用原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。微生物圖冊：營養(yǎng)瓊脂配方(每升)：蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化鈉 5g瓊脂15g最終pH 7.3±0.2營養(yǎng)瓊脂使用方法：1、稱取本品33g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121高壓滅菌15min，備用。2、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克

2、(或25mL)，放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的玻璃珠)，充分振搖，即為1：10的均勻稀釋液。依次做1：100，1：1000稀釋液。3、根據(jù)對樣品污染情況的估計，選擇23個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿。4、稀釋液移入平皿后應及時將涼至46左右的培養(yǎng)基注入平皿約15mL，并轉動平皿使混合均勻，同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后，倒置于36±1溫箱中培養(yǎng)48±2h。5、觀察結果。6、菌落計數(shù)方法：做平板菌落計數(shù)時，可用肉眼觀察，必要

3、時用放大鏡檢查，以防遺漏，在計下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。7、菌落計數(shù)的報告：選取菌落數(shù)在30-300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標準。一個稀釋度使用兩個平板，應采用兩個平板平均數(shù)，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈，則應將每條鏈視為一個菌落計。營養(yǎng)瓊脂質(zhì)量控制：本營養(yǎng)瓊脂接種下列菌株，置于36±1溫箱中培養(yǎng)48±2h，結果如下：菌 名菌 號 生長狀況 菌落特征大腸埃希氏菌ATCC25922良好白色灰白色，圓形，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。金黃色葡萄球菌ATCC6538 良好 黃色