急性髓性白血病分化抗原表達(dá)與臨床表現(xiàn)及療效的關(guān)系

1、急性髓性白血病分化抗原表達(dá)與臨床表現(xiàn)及療效的關(guān)系         【摘要】  目的 探討急性髓性白血病(AML)分化抗原表達(dá)與臨床表現(xiàn)和療效的關(guān)系。 方法 用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)111例AML細(xì)胞的分化抗原,分析其與臨床表現(xiàn)和療效的關(guān)系。 結(jié)果 (1)髓系抗原在AML中陽(yáng)性表達(dá)率依次為89.2%(CD13),79.3%(CD33),50.5%(CD34),37.8%(CD15),36.9%(HLA-DR),21.6%(CD14),CD13及CD33在AML各亞型中均有較高的陽(yáng)性表達(dá)率。CD14在M5陽(yáng)性表達(dá)率較

2、高,HLA-DR在M3為陰性。淋系相關(guān)抗原在AML中的表達(dá)以CD7為主。(2)AML患者中CD15表達(dá)與外周血白細(xì)胞數(shù)以及血幼稚細(xì)胞百分比相關(guān);CD7+AML患者更常肝脾腫大。(3)CD34-組CR率高于CD34+組,且達(dá)完全緩解（CR）時(shí)間少于CD34+組。CD7-組CR率高于CD7+組,但達(dá)CR時(shí)間兩組間無(wú)明顯差別。CD19+組CR率高于CD19-組,而達(dá)CR時(shí)間無(wú)明顯差別。CD7+CD34+組CR率少于非CD7+CD34+組,有顯著差別。 結(jié)論 CD7，CD19及CD34表達(dá)與AML的臨床表現(xiàn)和療效有一定關(guān)系,可作為AML預(yù)后判斷的指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】  急性白血病; 抗原; 臨

3、床表現(xiàn); 預(yù)后   ABSTRACT:  Objective  To analyze expression of differentiation antigen of acute myeloid leukemia(AML) and its relationship with clinical characteristics and prognosis.  Methods  The expression of differentiation antigen of 111 cases of AML was investigated by

4、flow cytometry assay.  Results  (1)The frequency of antigen expression on blast cells in AML were 89.2%(CD13), 79.3%(CD33), 50.5%(CD34), 37.8%(CD15), 36.9%(HLA-DR) and 21.6%(CD14) respectively. HLA-DR was negative in M3 patients.  CD7, one of the lymphoid antigens, was found to be exp

5、ressed frequently in the AML blast cells.  (2)The expression of CD15+ of AML was related with the blasts count and white blood cell count.  Those patients with CD7+ usually had spleno-hepatomegaly.  (3)The CR rate in the cases with CD34+ was significantly lower than those with CD34-,

6、but the time to CR was longer.  CR rate in CD7+ cases was significantly lower than those with CD7-.  However, patients with CD19- had lower CR rate than those with CD19+.  But interestingly, CR rate in cases with CD7+CD34+ was significantly lower than those with CD7-CD34-.  Concl

7、usion  CD7, CD19 and CD34 are relating with the clinical characteristics and prognosis of AML, and could be the one of important factors in predicting prognosis.   KEY WORDS:  acute  leukemia; immunophenotype; prognosis; clinical presentations   急性髓細(xì)胞白血病(AML)是一種高度異

8、質(zhì)性的惡性血液病,臨床表現(xiàn)多種多樣,抗原表達(dá)不一,部分病例診斷分型困難,給AML臨床診治帶來(lái)一定的困難。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的進(jìn)展,越來(lái)越多單克隆抗體(McAb)應(yīng)用,新一代流式細(xì)胞儀廣泛使用,現(xiàn)已能夠區(qū)分大部分白血病細(xì)胞來(lái)源及分化階段,為臨床診斷分型提供幫助。筆者應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)111例未治療的AML成人患者進(jìn)行免疫分型,觀察AML細(xì)胞免疫表型的特點(diǎn),探討其與臨床表現(xiàn)以及治療效果的關(guān)系。1  對(duì)象與方法1.1  對(duì)象 1999年1月-2006年1月住院的初治AML患者111例,男性62例,女性49例,年齡中位數(shù)38.9歲(1483歲),根據(jù)臨床表現(xiàn)、血象、髓象及細(xì)

9、胞化學(xué)染色等確診。FAB分型:M0 1例,M1 14例,M2  16例,M3 12例,M4 2例,M5 65例,M7 1例。1.2  免疫分型 化療前取外周血或骨髓抗凝血標(biāo)本,常規(guī)方法分離與制備細(xì)胞標(biāo)本,單克隆抗體包括:髓系相關(guān)單抗CD13，CD14，CD15，MPO，CD33;T淋巴細(xì)胞相關(guān)單抗CD2，CD3，CD4，CD5，CD7，CD8，CyCD3;B淋巴細(xì)胞相關(guān)單抗CD10，CD19，CD20，CD22，CyCD22;其他單抗CD34，HAL-DR單抗,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)、流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(FAC Scan,美國(guó)Becton Dickinson公司)檢測(cè)。1.

10、3  結(jié)果判斷 淋系抗體染色陽(yáng)性率30%為陽(yáng)性診斷指標(biāo),髓系抗原、細(xì)胞質(zhì)抗原、CD34及HLA-DR抗體染色陽(yáng)性率20%為陽(yáng)性診斷指標(biāo)。1.4  化療方案 給予DA或DAH等方案化療(D:柔紅霉素,A:阿糖胞苷,H:高三尖杉酯堿)。M3采用全反式維甲酸口服等治療。療效判斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)1。1.5  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)數(shù)資料用t檢驗(yàn),計(jì)量資料用2檢驗(yàn)。         2  結(jié)  果2.1  FAB各亞

11、型分化抗原表達(dá) CD13、CD33在AML各亞型均有較高的表達(dá)。CD14在M5表達(dá)較高,而在其他各亞型CD14陽(yáng)性表達(dá)率均較低。CD15在M2，M3，M5均有所表達(dá),在M5達(dá)47.7%。CD34在M1，M2、M5也有較高表達(dá),分別為64.3%,43.8%和55.4%。HLA-DR在M3不表達(dá)。淋系相關(guān)抗原在M3不表達(dá),在其余FAB亞型中的表達(dá)介于10%20%；淋系相關(guān)抗原表達(dá)以CD7為主,在M1陽(yáng)性表達(dá)率最高,達(dá)64%(表1)。M0，M4，M7由于病例太少,需進(jìn)一步積累病歷分析。表1  AML各亞型中分化抗原表達(dá)情況（略）2.2  分化抗原表達(dá)與臨床表現(xiàn)的關(guān)系&#

12、160;CD13，CD14，CD33，CD34，HLA-DR等抗原陽(yáng)性組與陰性組就診時(shí)的臨床表現(xiàn)未見(jiàn)明顯差別。CD15+和CD15-組外周血白細(xì)胞數(shù)以及血幼稚細(xì)胞百分比有著明顯差別,初診時(shí)前者少于后者(P0.05),其余臨床表現(xiàn)的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD7+組比CD7-組更常出現(xiàn)肝和/或脾腫大,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其他臨床表現(xiàn)未見(jiàn)明顯差別(表2,3)。表2  分化抗原陽(yáng)性和陰性AML者臨床特征（略）表3  分化抗原陽(yáng)性和陰性AML者外周血象（略）2.3  分化抗原表達(dá)與治療效果的關(guān)系 111例AML經(jīng)聯(lián)合化療后達(dá)完全緩解(CR)者為66例,CR

13、率為59.5%,在各型中分布為:M0 1例,M1 3例,M2 10例,M3 12例,M4 2例,M5 37例,M7 1例。在AML中,CD13,CD14,CD15,CD33等組在達(dá)CR時(shí)間上和CR率上均未見(jiàn)明顯差別。CD34-組與CD34+組在CR率、達(dá)CR時(shí)間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),前者達(dá)CR率高于后者,而達(dá)CR時(shí)間少于后者。CD7-組CR率高于CD7+組(P0.05),而達(dá)CR時(shí)間無(wú)明顯差別。CD19+組CR率高于CD19-組(P0.05),而達(dá)CR時(shí)間無(wú)明顯差別。CD7+CD34+組CR數(shù)少于非CD7+CD34+組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),而達(dá)CR時(shí)間上未見(jiàn)明顯區(qū)別(表4

14、)。表4  AML分化抗原表達(dá)與治療效果的關(guān)系（略）3  討  論   近年來(lái),免疫分型已成為診斷AML不可缺少的重要標(biāo)準(zhǔn),但是AML免疫表型與AML臨床表現(xiàn)、預(yù)后的關(guān)系尚有爭(zhēng)議。免疫表型分析是AML分型診斷的重要手段之一。在髓系抗原標(biāo)記中,最常見(jiàn)的是CD33及CD13,其次為CD15及CD14,本研究中AML抗原的陽(yáng)性表達(dá)頻率依次為CD13CD33CD15CD14,與報(bào)道相近2。因此,AML免疫分型時(shí),單克隆抗體的選擇一般為CD33，CD15聯(lián)合CD13和/或CD14。HLA-DR多在分化較差的M0、M1及M5中表達(dá)。本組顯示,HLA-DR在

15、M1及M5中表達(dá)較高(42.9%及46.2%),在較分化的M3中未見(jiàn)表達(dá),與一般國(guó)內(nèi)外結(jié)果相近,這是確診M3的一個(gè)重要指標(biāo)3。此外,本組資料表明,淋系抗原在AML中表達(dá),以CD7(27.9%)為主,主要分布在M1、M5中,分別占64.3%及29.2%,而在M3中無(wú)分布。有研究指出,AML CD7抗原表達(dá)與FAB亞型有一定的聯(lián)系,CD7+ AML多見(jiàn)于不成熟的亞型,如M1及M5等預(yù)后較差的亞型,而預(yù)后較好的亞型如M3則較少見(jiàn),這與林慧君等報(bào)道相一致4。但也有研究表明,CD7在成人AML不同的FAB亞型中均可表達(dá)5。因此,CD7的表達(dá)與AML分型的關(guān)系仍有待進(jìn)一步研究。   筆

16、者資料表明,AML免疫表型與患者臨床表現(xiàn)及血象特點(diǎn)的關(guān)系不盡相同。CD13，CD14，CD33，CD34，HLA-DR等抗原和AML患者臨床表現(xiàn)無(wú)特殊相關(guān)性。CD15抗原表達(dá)與AML患者外周血白細(xì)胞數(shù)以及外周血幼稚細(xì)胞百分比的相關(guān)性明顯,這種相關(guān)性的臨床意義還不太清楚。CD7+組AML比CD7-組AML更易出現(xiàn)肝和/或脾腫大,可能與預(yù)后有關(guān)。筆者的資料說(shuō)明,急性髓性白血病免疫表型與臨床表現(xiàn)的關(guān)系尚不明確。因此,目前有學(xué)者提出可根據(jù)年齡、白細(xì)胞數(shù)等臨床表現(xiàn)以及多個(gè)免疫分型指標(biāo)建立一個(gè)積分系統(tǒng),以更好地判斷免疫表型和臨床表現(xiàn)之間的關(guān)系5。AML分化抗原表達(dá)與化療效果的關(guān)系也是一個(gè)有爭(zhēng)議的問(wèn)題。比較

17、免疫表型和化療效果的關(guān)系,主要觀察CR率和達(dá)CR時(shí)間。筆者資料表明,CD34，CD7，CD19可能與AML的化療效果存在一定的相關(guān)性。CD34是造血干/祖細(xì)胞的特征性標(biāo)志,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為AML中CD34表達(dá)與AML的低緩解率及短生存期有關(guān),僅少數(shù)認(rèn)為CD34+AML與CD34-AML病例的緩解率、無(wú)病生存期無(wú)差異6。本組結(jié)果表明,CD34+AML者CR率明顯低于CD34-AML者,而且達(dá)CR的時(shí)間大于CD34-AML組,是預(yù)后不良的指標(biāo)之一,和Chang等研究相符合7。CD34+AML患者預(yù)后差的原因,可能與CD34+AML細(xì)胞惡性克隆分化受阻于細(xì)胞較早期階段,對(duì)化療藥物敏感性較差,還可能與CD

18、34+AML細(xì)胞的多藥耐藥基因以及基因移位有關(guān) 8-10。CD7是低分化AML的一個(gè)常見(jiàn)淋系標(biāo)記,與預(yù)后的關(guān)系各家報(bào)道不一,本組資料顯示CD7+AML組預(yù)后較差,與國(guó)內(nèi)外報(bào)道相近11-12。本組資料還表明,CD34與CD7在AML同時(shí)表達(dá)的病例預(yù)后差,CR率下降明顯,進(jìn)一步說(shuō)明了CD34與CD7可作為預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。本組資料顯示,表達(dá)CD19的AML患者CR率較高,國(guó)外有報(bào)道,AML同時(shí)伴有CD19抗原表達(dá)者常提示存在t(8;21),是預(yù)后較好的標(biāo)志13,因此CD19也可以作為預(yù)后較好的指標(biāo)之一。   綜上所述,筆者認(rèn)為CD7，CD19，CD34表達(dá)與AML的臨床表現(xiàn)和

19、療效有一定關(guān)系,但作為AML預(yù)后判斷的明確指標(biāo)還需要進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1張之南. 血液病診斷與療效標(biāo)準(zhǔn)M2版.北京科學(xué)出版社,1998:171-218.2葉海格,沈志堅(jiān),俞 康,等. 232例急性髓細(xì)胞白血病免疫表型及與細(xì)胞遺傳學(xué)關(guān)系分析J. 實(shí)用腫瘤雜志, 2007,22(2):138-141.3張秋堂,李 濤. 201例成人急性白血病免疫分型特點(diǎn)J. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2005,20(4):373-375.4林慧君,吳建國(guó),吳茅登,等. CD7陽(yáng)性急性髓細(xì)胞白血病免疫表型及臨床特點(diǎn)分析J. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2006,10(10):1211-1212.5李耀華,徐 娟,孫雪靜,等. CD7在成人急性髓系白血病的表達(dá)及其在微小殘留病檢測(cè)中的應(yīng)用J. 首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2006,27(2):232-236.6張文藝,楊淑蓮,閆金玉,等. 急性髓細(xì)胞白血病CD7、CD34、CD56、P170的表達(dá)對(duì)完全緩解率的影響J. 中華內(nèi)科雜志, 2001,40(6):411-412.7Chang H,Salma F,Yi Q L,et al. Prognostic relevance of immunophenotyping in 379 patients with acute myeloid leuk