生物毒性測(cè)試儀說(shuō)明書

1、生物毒性測(cè)試儀說(shuō)明書DXY-3型 智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀使用說(shuō)明書 一、儀器特點(diǎn) DXY-3型 智能化生物毒性(污染)測(cè)試儀是在DXY-2型 生物毒性(污染)測(cè)試儀基礎(chǔ)上改進(jìn)，并加人智能化功能的新型號(hào)機(jī)，與國(guó)際上同類產(chǎn)品相當(dāng)，但是，價(jià)格低廉，發(fā)光菌能保證供應(yīng)。 該儀器是基于毒性物質(zhì)對(duì)特殊的發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光度的抑制作用而設(shè)計(jì)的，它通過(guò)測(cè)定發(fā)光細(xì)菌發(fā)光度的變化，量度被測(cè)環(huán)境樣品中由重金屬和其它有機(jī)污染物所造成 的急性生物毒性。與傳統(tǒng)的魚、蚤和其它水生生物作為生物檢測(cè)方法相比，發(fā)光細(xì)菌法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、適應(yīng)性強(qiáng)、重復(fù)性好、精度高、費(fèi)用低、用途廣，凡有毒 化合物、廢水、廢棄物的生物毒性均可測(cè)定。

2、因此，它是對(duì)受污染環(huán)境的生物毒性檢測(cè)進(jìn)行初篩、監(jiān)測(cè)較為理想的工具，也是其他領(lǐng)域開拓新的實(shí)驗(yàn)測(cè)試方法的新工 具。 該儀器可測(cè)量和顯示待測(cè)液的毒性含量，測(cè)量所得數(shù)據(jù)可存儲(chǔ)，可一次存儲(chǔ)10組數(shù)據(jù)，每組數(shù)據(jù)包含3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)量值和3個(gè)待檢溶液的測(cè)量值，以便查看；同時(shí)，可以上傳到計(jì)算機(jī)，以便分析和長(zhǎng)期保存。儀器顯示界面由液晶顯示屏提供，儀器的控制輸入由按鍵實(shí)現(xiàn)。 該儀器2型機(jī)為中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)總站監(jiān)制產(chǎn)品。 該儀器測(cè)定方法為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：“GB/T15441-1995水質(zhì) 急性毒性的測(cè)定 發(fā)光細(xì)菌法”由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出標(biāo)準(zhǔn)文版。儀器標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：寧/KTS 01-93。經(jīng)過(guò)近三十年的不斷開發(fā)，已經(jīng)在環(huán)境科學(xué)、微

3、生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)菌學(xué)、生物化學(xué)和臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。 二、儀器用途 測(cè)定純化合物(包括有機(jī)分子、無(wú)機(jī)金屬離子)的急性毒性。 測(cè)定受污染水體(包括工業(yè)排放污水、礦山采礦和冶煉廢水、河水等水系)的急性毒性。 測(cè)定受污染土壤、河流和沿海帶底泥的急性毒性。 用于研究有毒元素以及化合物相互之間的相互作用協(xié)同或拮抗效應(yīng)。 用于慢性反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光分析等。 三、測(cè)試原理 測(cè)試原理：總體急性生物毒性。 明亮發(fā)光桿菌之所以發(fā)光，是由于菌的發(fā)光系統(tǒng)發(fā)生了如下反應(yīng)：     基質(zhì)         &

4、#160;     ATP         ATP       ATP 還原型輔酶A 黃素(H2) 細(xì)胞色素 02                         載氫黃素單核苷酸

5、    熒光酶(電子)                02          RCH0  RCO0H 電子 FMNH2  電子 FMNH 光FMN電子十H2O            

6、0;                                     OOH              

7、;          黑暗              電子十黃素單核苷酸十H2O2 當(dāng)細(xì)胞活性高，處于積極分裂狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞ATP含量高，發(fā)光強(qiáng)；休眠細(xì)胞ATP含量明顯下降，發(fā)光弱；當(dāng)細(xì)胞死亡，ATP立即消失，發(fā)光停止。 處于活性期的發(fā)光菌，當(dāng)加入毒性物質(zhì)(如重金屬離子Cu2/Cd2/Se4/Zn2/As3/Pb2，農(nóng)藥五氧吩嗪、福美雙，染料對(duì)氨基苯甲醚、對(duì)硝基鄰甲苯胺

8、，酸、堿等)，菌體就會(huì)受抑甚至死亡，體內(nèi)ATP含量也會(huì)隨之降低甚至消失，發(fā)光度便下降甚至到零。由于毒物濃度與菌體發(fā)光度呈線性負(fù)相關(guān)地變化，因而可據(jù)發(fā)光度確定毒物急性生物毒性。若此毒物知其成份而不知其濃度，則可根據(jù)先前測(cè)得的發(fā)光度毒物濃度關(guān)系曲線(標(biāo)準(zhǔn)曲線)，測(cè)定濃度。 四、技術(shù)指標(biāo) 1、菌種名稱：明亮發(fā)光桿菌T3小種                       

9、60; 急性生物毒性測(cè)定靈敏度比較 化合物 濃度(毫克/升) 生物毒性測(cè)試儀EC50 魚96小時(shí)LC50 CU2   3.239   Cd2 17.19   Zn2  0.37   Pb2 82.23   Hg2   0.126 0.010.9 AS3  0.55   2、測(cè)試范圍：01999mV(發(fā)光量) 3、測(cè)試精度：樣品3次重復(fù)，相對(duì)偏差不大于15% 4、靈 敏 度：相當(dāng)或優(yōu)于魚體96小時(shí)培養(yǎng)測(cè)定急性 生物毒性試驗(yàn)法，見表(列舉幾例) 5、顯 著 性：樣品濃度與發(fā)光細(xì)菌

10、相對(duì)發(fā)光度P<0.05 工業(yè)廢水或0.01的水平(純化合物溶液) 6、測(cè)試溫度：在室溫2025范圍保持某一恒定值 7、測(cè)試時(shí)間：1020min(單個(gè)樣品) 8、結(jié)果表示：樣品EC50值(稀釋百分濃度)或相對(duì)發(fā)光 度(%)及相當(dāng)?shù)穆然瘽舛戎?mg/L) 9、供電電源：220V ±l0% 10、尺寸重量：300x240x130mm    5.5kg 該儀器外形、尺寸、重量，若有變化，恕不另行告知。 五、儀器操作 (一) 儀器樣品室：儀器樣品室為單管結(jié)構(gòu)，可放入只直徑為20毫米的測(cè)試樣品管(樣品溶液為5毫升)；也可以預(yù)先放入塑料套管，用直徑為

11、12毫米的測(cè)試樣品管(樣品溶液為2毫升)。 (二) 樣品溶液的制備、發(fā)光細(xì)菌的復(fù)蘇以及測(cè)量順序等：見附錄。 (三) 儀器預(yù)熱：在開始測(cè)試前，先確認(rèn)暗室處于關(guān)閉狀態(tài)（具體為暗室向右轉(zhuǎn)至底）再接通儀器電源(這時(shí)面板上應(yīng)是電源指示燈亮與停止指示燈亮)，讓儀器預(yù)熱刻鐘以上。 請(qǐng)注意！在接通電源前，定要蓋好樣品室的蓋子，避免光電倍增管曝光，而疲勞受損。 (四) 功能按鍵： 儀器控制由按鍵實(shí)現(xiàn)：上/左、下/右、取消/返回、測(cè)量、存儲(chǔ)、確定。 儀器開機(jī)后進(jìn)入主界面，主界面有5個(gè)功能選項(xiàng)：測(cè)量、校正、設(shè)置、查看、上傳。 通過(guò)上/左、下/右選擇要進(jìn)入的功能選項(xiàng)，選中的功能反白顯示，按確定后進(jìn)入相應(yīng)的菜單。 1、

12、測(cè)量： 進(jìn)入測(cè)量后，設(shè)置有兩個(gè)選項(xiàng)： 、使用默認(rèn)操作員編號(hào)進(jìn)入測(cè)量（編號(hào)全為1）； 、使用手動(dòng)輸入，設(shè)置操作員編號(hào)，有三組操作員，通過(guò)上/左、下/右按鍵設(shè)置，按確定進(jìn)入測(cè)量界面。 測(cè)量界面分三個(gè)部分： 、最左邊顯示項(xiàng)目號(hào)、設(shè)置好的操作員編號(hào)、時(shí)間和日期； 、上面顯示測(cè)量值，右上腳顯示溫度； 、中間顯示測(cè)量結(jié)果，每屏顯示兩組測(cè)量結(jié)果； 下面顯示菜單，共四個(gè)菜單：測(cè)量、上翻、下翻、返回主界面。 測(cè)量  菜單是用于記錄和修改已記錄的穩(wěn)定的測(cè)量值的。當(dāng)菜單處于測(cè)量時(shí)，按確定鍵，會(huì)將測(cè)量值記錄下來(lái)，并在屏幕中間顯示出來(lái)；按取消鍵，會(huì)將最后記錄的一個(gè)數(shù)據(jù)清除，重新測(cè)量；按上翻、下翻查看已記錄的數(shù)

13、據(jù)。一個(gè)項(xiàng)目包含10組數(shù)據(jù)，每屏只能顯示2組數(shù)據(jù)。 測(cè)量完畢后如果需要保存數(shù)據(jù)的話，請(qǐng)按儲(chǔ)存鍵，屏幕會(huì)給出一個(gè)界面用于選擇是否保存當(dāng)前項(xiàng)目所測(cè)數(shù)據(jù)，保存是請(qǐng)您記住系統(tǒng)自動(dòng)遞增，生成的項(xiàng)目編號(hào)，以便你查閱數(shù)據(jù)。 注意：測(cè)量時(shí)記錄的數(shù)據(jù)只是緩存，沒(méi)有存入ROM當(dāng)中，如果測(cè)量完畢后的數(shù)據(jù)需要存儲(chǔ)的話，請(qǐng)務(wù)必按存儲(chǔ)鍵將數(shù)據(jù)保存。 2、校正： 進(jìn)入校正后，有三個(gè)功能菜單：零點(diǎn)校正、時(shí)間校正、返回主界面。 通過(guò)上/左、下/右、確定、取消/返回按鍵進(jìn)行具體操作，反白顯示的為當(dāng)前選中的操作。 3、設(shè)置： 進(jìn)入設(shè)置后，有五個(gè)功能菜單：背光保持時(shí)間、聲音設(shè)置、倍率 、自動(dòng)取樣時(shí)間、返回主界面。 背光保持時(shí)間包括：

14、15S、30S、60S、常亮； 聲音設(shè)置包括：開和關(guān)提示音； 倍率包括：*1、*2、*3、*4、*5  以此放大發(fā)光菌的發(fā)光量。 自動(dòng)取樣時(shí)間包括：5S、10S、15S、手動(dòng)； 選擇自動(dòng)取樣時(shí)間后，在測(cè)量時(shí)，到達(dá)設(shè)定的時(shí)間后，會(huì)自動(dòng)記錄測(cè)量結(jié)果。 4、查看： 進(jìn)入查看后，會(huì)提示輸入項(xiàng)目號(hào)(左上腳顯示的項(xiàng)目號(hào))，輸入項(xiàng)目號(hào)后就會(huì)進(jìn)入界面，可以查看當(dāng)時(shí)測(cè)量后保存的數(shù)據(jù)，界面跟測(cè)量界面相同，顯示此項(xiàng)目測(cè)量的時(shí)間、日期、溫度、操作員編號(hào)、測(cè)量的數(shù)據(jù)，通過(guò)上/左、下/右按鍵上翻、下翻數(shù)據(jù)。按返回鍵退出查看，返回主界面。 5、上傳： 進(jìn)入上傳后，會(huì)提示單一上傳或者選擇整片上傳，將ROM里面的數(shù)據(jù)

15、全部上傳。 (五) 樣品測(cè)量： 1、向上拔出樣品室的蓋子(注意！拔出前，面板上應(yīng)是停止指示燈亮)，然后將盛有待測(cè)樣品溶液的瓶子放入樣品室，蓋好蓋子。 2、抓住蓋子，依逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)(這時(shí)面板上停止指示燈熄滅，測(cè)量指示燈亮)，約1-2秒，則可讀取樣品溶液的測(cè)定數(shù)據(jù)。 3、抓住蓋子按順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)，回到原處(面板上測(cè)量指示燈熄滅，停止指示燈亮)，這時(shí)，才可以向上拔出蓋子，取出已測(cè)過(guò)的樣品。此后，可作如下處理： 、還有待測(cè)樣品，再取一瓶放入，蓋好蓋子，然后按上述步驟進(jìn)行測(cè)量。 、因樣品需要進(jìn)一步處理，不能馬上測(cè)量，可以蓋上蓋子等待。 、整批樣品已測(cè)試完畢，蓋好蓋子，將儀器電源切斷。 (六) 有色樣品

16、液的測(cè)量： 對(duì)有色被測(cè)液，若用常規(guī)方法測(cè)會(huì)有干擾，因此需用下述方法進(jìn)行校正。具體步驟如下： 1、從儀器樣品室取出黑色塑料管套。 2、取一只2m1管(即12毫米測(cè)試樣品管)，加3% NaCI溶液2ml，將該管放進(jìn)一只裝有適量3% NaCl溶液的5ml管(即20毫米的測(cè)試樣品管)內(nèi)，并使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊，此作CK管。 3、另取一只2ml管，加3% NaCl溶液2ml，放入另一只裝有適量有色待測(cè)樣品液的5ml管內(nèi)，要使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊，此作CKc管。 4、于CK和CKc二管的內(nèi)管中同時(shí)加復(fù)蘇發(fā)光菌液10(注意：必須是本批樣品測(cè)定所用同一瓶復(fù)蘇菌液)，立即記時(shí)到

17、秒，等反應(yīng)滿15分鐘，迅即放入儀器樣品室，測(cè)定二只帶有內(nèi)管的5ml管的發(fā)光度。分別記下發(fā)光度L1(CK管)和L2(CKc管)。 5、計(jì)算因顏色引起的發(fā)光度校正值LLl-L2。 6、測(cè)試帶色樣品管及其CK管(加3% NaCl溶液)的發(fā)光量。 但是，所有CK管測(cè)得之發(fā)光度均須減去校正值L后才能作為CK發(fā)光度。 六、結(jié)果處理 數(shù)據(jù)的處理：見附一中之(五)測(cè)試數(shù)據(jù)處理 說(shuō)明：當(dāng)在一次系列樣品的測(cè)量過(guò)程中，“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置有變動(dòng)，則需換算成某檔次的值，然后才進(jìn)行數(shù)據(jù)處理?！癤l”檔與其它檔(“XN”檔)的關(guān)系如下：       &

18、#160;         XN           Xl  - 或 XN  Xl·N                N 式中：N-為“輸出幅度選擇”開關(guān)所處的位置；    

19、60;      X1 ，XN -為“輸出幅度選擇”開關(guān)處于“Xl”，“XN”檔時(shí)，數(shù)字表上的讀數(shù)。 七、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)國(guó)外有關(guān)資料及國(guó)內(nèi)的一些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，擬定如下水質(zhì)急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，供參考。 水質(zhì)急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 毒性等級(jí) 相對(duì)抑光率% Hg（毫克/升） 毒性級(jí)別 I < 30 < 0.07 低毒 II 30-50 0.07-0.09 中毒 III 50-70 0.09-0.12 重毒 IV 70-100 0.12-0.16 高毒 V 100 > 0.16 劇毒 注：相對(duì)抑光率%  100%  相對(duì)發(fā)光度% 八、注意事項(xiàng) (一) 儀器要水平放置于工作臺(tái)上，并注意，千萬(wàn)不要放置在溫度高、濕度大及電磁干擾大的地方。 (二) 當(dāng)儀器不進(jìn)行測(cè)試時(shí)，定要蓋上樣品室的蓋子，防止灰塵進(jìn)入及光電倍增管曝光；在測(cè)量時(shí)，要避免以強(qiáng)光照射光電倍增管，而產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象。 (三) 在給各測(cè)試管加復(fù)蘇菌液后，蓋上瓶塞，用手顛倒5次；但是