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文檔簡介
1、WORD完美整理版生化考研重點知識總結第一章單糖多糖與碘顯色,至少需要的葡萄糖殘基數(shù):6唾液淀粉酶激活劑:Cl-幾個典型非還原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成N-糖肽鍵的單糖或衍生物是:第二章油脂幾個非飽和脂肪酸雙鍵數(shù):油酸:1亞油酸:2亞麻酸:3人不能自身合成的必須脂肪酸:亞油酸、亞麻酸四種脂類轉運脂蛋白:CM乳糜微粒,轉運外源性三酰甘油酯VLDL:極低密度脂蛋白,轉運內源性三酰甘油酯LDL:低密度脂蛋白,轉運內源性膽固醇HDL高密度脂蛋白,轉運外源性膽固醇第三章 氨基酸與蛋白質幾種主要氨基酸及三字母縮寫兩特殊:Pro、Gly芳香:酪(Tyr)色(Trp/Try ,吸光最強)苯(Phe)八種必需氨基
2、酸:甲攜來一本亮色書,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr側鏈為羥基氨基酸:蘇(Thr)絲(Ser)酪(Tyr)酸性氨基酸: 天(Asp)谷(Glu)對應兩酰胺:Asn、Gln堿性氨基酸:賴(Lys)精(Arg)組(His)其它:丙氨酸(Ala)PIPI 的計算:PI= (PK1+PK2 /2=(PK1+PKRooH/2=(PK2+PKRnh/2PH的計算:PH=PK1+Lg(R/R+) =PK2+Lg (R/R)PH =7的水中溶蛋白,PH=6則該蛋白PI<6:蛋白溶后PH下降為6,表明蛋白的COOH 電離出H+,則產生了 R, PH=6>PI時有R蛋白
3、二級結構“螺旋:Sn=3.6i3,存在Pro時不形成a螺旋,右手螺旋3折疊:同/反向,肽鍵中H與O成氫鍵,軸距0.35nm3轉角:轉角處為Gly超二級結構:無規(guī)卷曲、結構域三級結構:作用力(二硫鍵、疏水作用力、氫鍵、靜電離子鍵、范德華力)蛋白結構分析N端分析法:FDNB (Sanger)、PITC ( Edman、DNS-Cl (丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法:竣肽酶法、無水腫解法竣肽酶A:不能水解C端為Lys、Arg、Pro的肽鍵;竣肽酶B:能水解C端為Lys、Arg的肽 鍵;C端倒數(shù)第二位是 Pro時,A B都不能水 解打開二硫鍵:還原法(疏基化合物,碘乙酸保護)、氧化法(過甲酸)專一切斷
4、:胰蛋白酶(Lys、Arg-COOH太鍵);CNBr ( Met-COOH太鍵);胰凝乳蛋白酶 ();顯色反應Follin 酚:藍色,酚基(Tyr)、口引喋基(Trp),組分(CuSO+磷鋁酸)Millon :紅色,酚基(Tyr),組分(HgNO+Hg (NO) 2)坂口反應:紅色,月瓜基(Arg),組分(a蔡酚,NaClO)黃色反應:黃色,芳香氨基酸,組分(濃HNO)雙縮月尿反應: 紫紅色,肽鍵,多肽,組分( NaOH+CuSO乙醛酸反應: 紫色,口引喋基(Trp)幾種重要氨基酸提供活性甲基的:S-腺昔Met形成N-糖肽鍵的:Asp膠原蛋白中含量高的氨基酸:Gly、Ala、Pro、HO-Pr
5、o、HO-Lys蛋白分離純化技術:透析、超濾;密度梯度離心;凝膠過濾;PI法、鹽析、有機溶劑法;電泳、離子交換;吸附層析;親和層析凝膠過濾大分子先出,凝膠電泳相反:機理分子運動速度決定因素:大小、電荷量、形狀蛋白離子交換層析與洗脫:凝膠電泳三效應:電荷、分子篩、濃度效應蛋白含量測定測N:凱氏定氮、紫外吸光、雙縮月尿吸光、福林酚顯色吸光測M 沉降離心、凝膠過濾(凝膠排阻層析)、SDS-PAGE凱氏定氮:HNO反應,生成的N2中氨基酸占1/2(11)其它分離二硫基的肽段可用:SDS-PAGE幾個主要氨基酸的 PI值:幾種重要蛋白:鐮刀貧血?。?Glu 一 Val,第6位與烷化劑(碘乙酸)反應的氨基
6、酸:Cys (半胱氨酸)第四章酶學酶活化中心組成: 結合部位、催化部位計算:活力單位(IU、Kat)、比活力(IU/mg)、轉化數(shù)/轉化周期、米氏方程各可逆抑制作用的動力學特點:Km Vmax幾個抑制作用:競爭抑制(丙二酸對琥珀酸脫氫酶);有有機磷(與絲氨酸羥基共價不可逆);CO CN (作用于Cytaa3);不可逆抑制(重金屬、有機神、 CN 化物、硫化物、CO酶促反應初速度與E、T有關以“三點結合”模型作用的酶:甘油激酶酶的專一性專一水解葡萄糖形成的二酯鍵的酶:以O2為直接氫受體的氧化酶:VC氧化酶、細胞色素氧化酶別構酶兩獨立功能部位:活性中心、變構中心動力學曲線:S型,其它為雙曲線具有效
7、應:協(xié)同效應、變構效應典型代表一血紅蛋白:協(xié)同效應、波爾效應、變構效應酶分離純化要求:純化倍數(shù)高、回收率高純化倍數(shù)=比活力/純化前總比活力回收率=活力單位數(shù)/純化前活力單位數(shù)方法:同蛋白質競爭性抑制劑: 增S可減弱抑制作用患尿黑酸癥的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遺傳缺陷)第五章核酸反向互補配對: ACG-CGT( U)N-昔鍵:W (C1 '-C5),喋吟(N9-C1 '),喀咤(N1-C1')SnRNA核仁不均一 RNA功能(促進轉錄、)核酸分離技術 凝膠電泳:三效應、分子運動速度決定因素見蛋白質離子交換層析: 陽離子交換層析,核甘酸脫下順序:U98 8
8、 A陰離子交換層析,核甘酸脫下順序:C-Z Uf G 親和層析:可用親和層析法分離的核酸:mRNA(PolyA尾)Sanger、DNA測序三法: 加減法(Sanger、1975),化學斷裂法,雙脫氧終止法(1977、原理)不能形成兩性離子的核甘酸是UMP原因 cNMP最重要的 cNMP cAMP cGMPcAMP第二信使(4) cAMP分子內有:環(huán)化的磷酸二酯鍵cAMP與cGMP生物作用并不是完全相反第六章分子生物學與基因工程基因組學啟動子組成 3部分:識別部位(-35、CG/CAAT ,結合部位(-10、TATQ ,轉錄起始點高度重復序列: 衛(wèi)星DNA小衛(wèi)星DNA微衛(wèi)星DNA原核生物基因重疊
9、類型:基因家族按特點分三類:簡單多基因家族、復雜多基因家族、發(fā)育調控的復雜多基因家族基因家族按組成分三類:DNAM制DNAM制方式:線性(眼型),環(huán)狀(大腸桿菌)、滾環(huán)(病毒質粒)、D型(線粒體、葉綠體)】DNA復制需引物:轉錄不需引物原核DNA聚合酶功能:損傷修復、校正、合成 DNA基因工程酶RNase:RNaseA(喀咤 3' -5' )、RNaseTI (G的 3' -5' )、RNaseT2 (A 的 3' -5')DNA1接酶所需能量: 原核ATR真核NAD+轉移水解 DNA-RNA白RNA勺酶:RNaseH逆轉錄酶(有 RNaseHM
10、生)牛脾磷酸二酯酶水解 RN麗得產物:5'磷酸切開,產生 3'單磷酸核昔蛇毒磷酸二酯酶水解 RN麗得產物:3' -OH切開,產生5'單磷酸核昔核酸合成酶: DDDP(依賴 DNA的DNA聚合酶)、RDDP(依賴 RNA的DNA聚合酶)、DDRP (依賴DNA的RN咪合酶)RNAPol2: RNAPolR 合成hnRNA 分布在核質中RNAffi強堿水解產生:2'-核甘酸、3'-核甘酸混合物限制內切酶切割特點:4-8bp、6bp主要,成黏性、平齊末端,成回文序列,甲基化難切tRNA結構含稀有堿基最多:D (二氫尿喀咤)、少(假尿喀咤)、I (次黃喋
11、吟)四環(huán)四臂五區(qū):D臂、TW C臂、氨基酸臂(受體臂)、反密碼子臂二級:三葉草三級:倒L基因表達DNA重組過程中DNA連接四方式:粘性末端連接、同聚物加尾法、加銜接物連接法、加DNAg頭連接法轉位:三類轉位因子【(插入序列IS)、轉座子(Tn)、可轉座噬菌體】,轉位后遺傳效應(突變、產生新基因、染色體畸變)轉錄:轉錄5'端常見起始核甘酸是 G A,原核終止子在終止位點前有PolyU翻譯:參與肽鏈延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子),肽基轉移酶催化組分 (23SrRNA),蛋白合成時生成肽鍵的能量來自高能酯鍵水解轉錄抑制劑:利福平、利迪鏈霉素、放線素 D “ -鵝膏蕈堿翻
12、譯抑制劑: 抗生素(氯霉素、鏈霉素、卡那霉素、新霉素、四環(huán)素、土霉素 )機理 干擾素(使起始因子eIF2磷酸化失活),毒素(抑制真核肽鏈延長)基因工程基因工程載體: 必備條件(自主復制、有標志基因便于篩選、易引入受體細胞、酶切位點少、M大可攜帶大片基因)常用載體(質粒、病毒、噬菌體、人工大染色體改造而來)DNA文庫:含某種生物體全部被轉錄成 mRNA勺所有基因序列密碼子起始密碼子: 原核(AUG GUG UUG對應fMet)真核(AUG對應Met)起始 tRNA: tRNAT、tRNAT終止密碼子:UAA UAG UGA無義密碼子:UAA UAG UGA線粒體中三種特殊密碼子:UGA色氨酸原核
13、RF1識別的密碼子: UAA UAX XRF2識別的密碼子: UAA UGA密碼子性質:不重疊、特殊性、通用性、簡并性、連續(xù)性、擺動性擺動性:A-UI,U-A、G,C-G,G-CU,I-A、J C其它SnRNAJ能:RN頌熟加工、與染色質結合、調節(jié)基因活性多拷貝基因有:組蛋白基因、3種印跡法對應檢測對象:S-DNA N-RNA W-ProTm的影響三因素:C三G鹽濃度(Na+)、DNA均一性(均一一窄)Tm=(C+G %< 0.41+69.3第七章維生素與激素幾種重要酶的輔酶脫竣酶:a酮酸脫竣酶(TPP/VB1)、氨基酸脫竣酶(磷酸口比哆醛(VB6)磷酸口比哆醛: 氨基酸脫竣酶、轉氨酶
14、的輔酶以FAD為輔酶的酶:二氫硫辛酰胺脫氫酶、脂酰輔酶A脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、線粒體a磷酸甘油脫氫酶竣化酶的輔酶: 生物素(VB7)VB12:鉆胺素(參與甲基轉移)氧化還原酶的輔酶:NAD+以NAD斯輔酶的酶:蘋果酸酶、6-p-G脫氫酶以FAK為輔酶的酶:脂酰輔酶A脫氫酶幾種特定功能的維生素凝血維生素:VK,脂溶抗血維生素:VC,水溶含A的維生素:NAD+ NADP FAD CoASHXVD:體內活性最高的 VD是:1,25-二羥基膽鈣化醇1,25- (OH 2D3兩種VD原:VD3 (7-脫氫膽固醇),VD2(麥角固醇)VD的形成:膽固醇一 7-脫氫膽固醇一 VD3胰島素等激素的受體是:含N
15、激素受體在激素作用下與腺甘酸環(huán)化酶的耦聯(lián)是由G蛋白介導實現(xiàn)的蛋白質類激素受體位于:細胞質膜上類固醇激素受體位于:細胞內第八章生物氧化肌肉或神經細胞儲存能量的高能化合物是:磷酸肌酸(IP3)高能化合物有: 磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、生物合成中主要的還原劑;NADPH來源于HMS(磷酸戊糖途徑/磷酸己糖旁路)生物氧化過程中,ATP生成方式:底物水平磷酸化、氧化磷酸化線粒體的崎:外表面與基質接觸,含有氧化磷酸化組分ATP合成酶F0F1-ATPase是:催化ATP合成的酶形式,一種膜結合復合物,單獨存在時沒ATP酶活性F0:含H+通道ATP合成機理細胞質脫下的一對氫進
16、入線粒體的三方式:異檸檬酸穿梭、蘋果酸穿梭、甘油磷酸穿梭丙氨酸脫氫酶系的輔因子:TPP (VB1)、CoASH FAQ NAD+硫辛酸、Mg2+丙氨酸脫氫酶系的酶:丙酮酸脫竣酶、硫辛酸乙酰轉移酶、二氫硫辛酸脫氫酶醛縮酶的底物是:F-1,6-2P(11)在TCA有氧呼吸鏈中產生的 ATP最多的是:“-酮戊二酸一琥珀酸第九章糖代謝糖酵解部位:胞液過程:葡萄糖、糖元轉變?yōu)楸崛P鍵酶:己糖激酶:包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受ATP/AMP勺調節(jié)磷酸果糖激酶:限速,主要激活劑(2,6-二磷酸果糖),抑制劑(ATP檸檬酸)丙酮酸激酶:受ATP/AMP勺抑制產能:2ATP醛縮酶的底物:F-1 , 6
17、-P2 (1, 6-二磷酸果糖)糖代謝中既催化脫氫又催化脫竣的兩種酶:異檸檬酸月氫酶、6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶糖的有氧氧化丙酮酸一乙酰輔酶 A:部位:線粒體內膜丙酮酸脫氫酶系:3酶(丙酮酸脫竣酶、硫辛酸乙酰轉移酶、二氫硫辛酸脫氫酶)5 輔(TPP (VB1) 、 CoASH FAD NAD+ 硫辛酸、 Mg2+TCA循環(huán):檸檬酸循環(huán)、Krebs循環(huán)調節(jié)TCA循環(huán)運轉最主要的酶:異檸檬酸脫氫酶(限速)、a-酮戊二酸脫氫酶系部位:線粒體基質、內膜酶:檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶(限速)、a-酮戊二酸脫氫酶系1分子葡萄糖有氧氧化產生 ATP數(shù):36 (38) =2+6 (4) +6+24草酰乙酸來源三途
18、徑:蘋果酸酶和蘋果酸脫氫酶、丙酮酸脫竣酶、磷酸丙酮酸脫竣酶磷酸戊糖途徑、磷酸己糖旁路HMS核糖的分解途徑是:HMS生物合成中除ATP供能外合成糖還需:UTP合成脂肪還需:GTP生物合成的還原力是 NADPH來源是HMS反應部位總結糖酵解(EMP :胞質TCA線粒體基質、內膜氧化磷酸化:線粒體內膜糖元代謝合成糖元時,葡萄糖先活化成:UDPG植物合成淀粉時需:ADPG合成蔗糖需:UDPG 6-P-G糖異生第十章脂代謝三酰甘油代謝分解代謝3 -氧化:反應部位:線粒體基質產物:偶數(shù)碳(乙酰CoA)、奇數(shù)碳(幾個乙酰CoA+1個丙酰CoA)反應過程:二步脫氫(生成1FADH+1NADH、產ATP (5個)飽和脂肪酸分解酮體生成部位:肝內成分:乙酰乙酸、3 -羥丁酸、丙酮利用部位:肝外,腦、肌不飽和脂肪酸氧化分解:兩特殊酶:順-反烯酯酰CoA異構酶、順-反-3羥酯酰CoA異構酶1分子軟脂酸(16C)徹底氧化分解成 CO、H2O生成ATP數(shù):脂肪酸合成脂肪酸合成代謝還原力是NADPH來源是HMS催化胞液脂肪酸合成的限速反應由乙酰CoA竣化酶催化?;d體為 ACP 3 -氧化中酰基載體是 乙酰CoA磷脂代謝合成磷脂所需能量來自:CTP膽固醇代謝在體內可直接合成膽固醇的化合物是:脂酰CoA第十一章 氨基酸與蛋白質代謝幾種氨基酸生酮氨基酸:Leu、
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