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1、實(shí)驗(yàn)一 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定教案一、實(shí)驗(yàn)原理(1)鑒定實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的理念:某些化學(xué)試劑+生物組織中有關(guān)有機(jī)化合物 一產(chǎn)生特定的顏 色反應(yīng)。(2)具體原理:可溶性還原糖+斐林試劑-磚紅色沉淀。脂肪小顆粒+蘇丹田染液-橘黃色小顆粒。蛋白質(zhì)+雙縮月尿試劑一紫色反應(yīng)。二、目標(biāo)要求初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、 脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。三、重點(diǎn)、難點(diǎn)1 .重點(diǎn)初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。通過實(shí)驗(yàn)的操作和設(shè)計(jì)培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力,掌握探索實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)技巧,從而培養(yǎng)創(chuàng)新思維能力。2 .難點(diǎn)根據(jù)此實(shí)驗(yàn)方法、原理,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來鑒定常見食物的成分。四、實(shí)驗(yàn)材料1. 可溶性
2、還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn): 選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。2. 脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn): 選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實(shí)驗(yàn)前浸泡3h4h)。3. 蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白) 。五、儀器、試劑1 . 儀器 : 剪刀 , 解剖刀 , 雙面刀片, 試管 , 試管架 , 試管夾 , 大小燒杯,小量筒 , 滴管 , 玻璃漏斗, 酒精燈 , 三腳架 , 石棉網(wǎng) , 火柴 , 研缽 , 石英砂 ,紗布 , 載玻片 , 蓋玻片 , 毛筆 , 吸水紙 , 顯微鏡。2 .試齊I:斐林試劑(0.1g/L的NaOHg液+ 0.05g/mL的CuS
3、O§液); 蘇丹田染液;雙縮月尿試劑; 體積分?jǐn)?shù)為50%勺酒精溶液;蒸 餾水。六、方法步驟( 演示教學(xué)課件)1. 制備試劑。2. 可溶性還原糖的鑒定、方法、步驟。3. 脂肪的鑒定、方法、步驟。4. 蛋白質(zhì)的鑒定、方法、步驟。七、教學(xué)過程新課引入:我們在化學(xué)中學(xué)習(xí)過物質(zhì)的鑒定,其原理是被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反應(yīng),要么產(chǎn)生沉淀,我們生物 學(xué)上也采用此原理,在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是:某些化學(xué)試劑能 夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。新課教學(xué):(具體原理)可溶性還原糖+斐林試劑-磚紅色沉淀。(水浴加熱)脂肪小顆粒+蘇丹田染液-橘黃色小顆粒。(要顯微鏡觀察)
4、蛋白質(zhì)+雙縮月尿試劑一紫色反應(yīng)。(要先加A液NaOH溶液再加B液CuSO溶液)教師提問:在我們高中生物中還學(xué)習(xí)過那些利用顏色反應(yīng)鑒定物質(zhì)的?用到了那些化學(xué)試劑?由產(chǎn)生了那些特定的顏色呢?學(xué)生回答:略。如果回答不全教師補(bǔ)充:染色(質(zhì))體+醋酸洋紅(或龍膽紫)一紅色(或紫色)淀粉+碘液一藍(lán)色DNA+1苯胺試劑 一藍(lán)色(水浴加熱)大腸桿菌+伊紅-美藍(lán)一 產(chǎn)生紫色,略帶金屬光澤今天,我們學(xué)習(xí)鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。(一)、還原糖的鑒定1、還原糖的鑒定步驟:選材:蘋果:洗凈、去皮、切塊,取 5g放如研缽中制備組織樣液研磨成漿:加石英砂,加5 ml水研磨I注入組織樣液2ml 過濾:將
5、玻璃漏斗插入試管中,漏斗上墊一I層紗布加斐林試劑:2ml (由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成,不能分別I加入)水浴加熱:煮沸2minI觀察溶液顏色變化:淺藍(lán)色-棕色一石專紅色。結(jié)論:還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過程中生成被紅色沉淀組織樣液2ml 剛配制斐.林試劑2ml31無色藍(lán)色2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇含糖品較高、 物組織,以蘋果、梨為最好。斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)配現(xiàn)用。斐林試劑的配制過程示意:斐林試劑甲液(0.1 g/ml的NaOH溶液)'斐林試劑乙液(0.05 g/ml的CuSO溶液Z >二二磚紅色加熱2min顏色為白色或近白色的植», 嚴(yán)比1
6、例混合均勻斐林試劑在鑒定尿液中是否含有葡萄糖時(shí)還能用其他那些鑒定方法?學(xué)生回答:還可以用斑氏試劑產(chǎn)生被紅色沉淀;及糖尿試紙據(jù)糖的由少到多產(chǎn)生淺藍(lán)、淺綠、棕或深棕色。(二)、脂肪的鑒定1、脂肪的鑒定步驟:取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄片,取理想薄片“在薄片上滴2-3滴蘇丹田染液制片去浮色I(xiàn)制成臨時(shí)裝片觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然后,轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察。結(jié)論:細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn):選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實(shí) 驗(yàn)前浸泡3h4h)。該試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲得只含有單層細(xì)胞理想薄片。滴蘇丹田染液染液染色2-3min,時(shí)
7、間不宜過長,以防細(xì)胞的其 他部分被染色。(三)、蛋白質(zhì)的鑒定1、 蛋白質(zhì)的鑒定步驟:肯材:卵清稀釋液或黃豆(浸泡1-2d) 豆?jié){一濾液呈組織樣液 (或蛋白稀釋液)2ml雙縮月尿試|劑A液2ml雙縮月尿試劑B液4 - 5滴無顏色變化紫色結(jié)論:蛋白質(zhì)與雙縮月尿試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。2、實(shí)驗(yàn)成功的要點(diǎn):蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn):可用浸泡1d2d的黃豆種子(或用豆?jié){、 或用雞蛋蛋白稀釋液)。雙縮月尿試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的NaOH溶 液),再加入雙縮月尿試劑B液(即0.01 g/ml的CuSO4溶液)。還可設(shè)計(jì)一只加底物的試管, 不加雙縮月尿試劑,進(jìn)行空白對照, 說明顏色反應(yīng)的引起是蛋白
8、質(zhì)的存在與雙縮月尿試劑發(fā)生反應(yīng),而不是 空氣的氧化引起。教學(xué)小結(jié):1、斐林試劑和雙縮月尿試劑的比較相同點(diǎn):都由NaOFH§a和CuSO§液構(gòu)成;斐林試劑甲液和雙縮月尿試劑 A都為0.1g/mL NaOH溶液。不同點(diǎn):CuSO§液濃度不一樣:斐林試劑乙液為 0.05 g/mLCuSO§液,雙縮月尿試劑B為0.01g/mLCuSO§液。配制比例不一樣。使用方法不一樣:斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用,雙縮月尿試劑則是先向待鑒定材料加入 A試劑搖勻后,再加入試劑B。鑒定的對象不一樣:斐林試劑鑒定的是還原糖,雙縮月尿試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。反應(yīng)本質(zhì)及顏色
9、反應(yīng)不一樣。2、還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定之比較還原糖的鑒定脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定材料的選?。焊缓?,顏色為白色或近于白色富含脂肪富含蛋白質(zhì)材料的處理:去皮、研磨浸泡試劑的使用:甲液與乙液混合均勻后使用染色和洗浮色不宜過長先加A液再滴加B液反應(yīng)的本質(zhì):新制的Cu(OH)溶液與一CHO還原糖的醛基)反應(yīng)堿性條件下CiT與肽鍵反應(yīng)3、蘇丹田染液與蘇丹IV染液的比較都是用來鑒定脂肪。蘇丹IV染液更易溶于脂肪,所以染色更深, 同時(shí)要求染色時(shí)間更短課后作業(yè):基礎(chǔ)檢測1. 可用于鑒定生物組織中還原糖的試劑是()A.斐林試劑B.雙縮月尿試劑C.蘇丹田染液 D.蘇丹IV染液2. 下列哪個(gè)實(shí)驗(yàn)用到顯微鏡()A.
10、還原糖的鑒定B. 蛋白質(zhì)的鑒定C. 脂肪的鑒定D. 淀粉的鑒定3.下列哪組試劑在使用過程中,必須經(jīng)過加熱()A. 斐林試劑鑒定還原糖的過程中B.蘇丹田和蘇丹IV染液在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí)C.雙縮月尿試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)4. 用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液顏色的變化過程為()A. 無色一磚紅色(沉淀)B. 淺藍(lán)色一磚紅色(沉淀)C. 淺藍(lán)色一藍(lán)色一磚紅色(沉淀)D. 淺藍(lán)色一棕色一磚紅色(沉淀)5、用蘇丹田染液對脂肪組織進(jìn)行染色時(shí),可用來沖洗浮色的藥品是A.吸水紙BH OC.50%的酒精D.無水酒精6.用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),必須注意以下幾點(diǎn):(1)被鑒定材料應(yīng)選擇含 較高,
11、顏色為 的植物組織,以 為最好。(2)斐林試劑很不 ,必須 時(shí)再配制并立即使用。配制的方法是將4 5滴 滴入2m1中。(3)鑒定反應(yīng)必須在 中進(jìn)行。7 .在鑒定花生種子細(xì)胞內(nèi)含脂肪的實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)先將花生子葉薄片用 染色,然后用 洗去,再制成 最后,鏡檢結(jié)果是.8 .鑒定豆?jié){中的蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)先加入 2m1,搖蕩均勻后,再 加入3-4滴,再搖蕩均勻后,顏色變化 是.能力素質(zhì)提高9 .下列物質(zhì)中,能被蘇丹IV染液染成紅色的是()A.馬鈴薯塊莖B.浸軟的甕麻種子C.蛋清液D. 蘋果10 .下列可用于鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)材料是()A.蘋果 B.梨 C.卵白D.花生種子11 . 對斐林試劑和雙縮脲試劑的配方,
12、敘述不正確的是()A.都含有NaOHm®和CuSO容液B.斐林試劑的配制是將 45滴0.05g/ml的CuSO容液7入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液中即成C.雙縮月尿試劑是將34滴0.01g/ml的CuSO§液7入2ML0.1g/ml 的NaOH容液中混合而成的D.雙縮月尿試劑含有兩種試劑:質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOHt液和質(zhì)量濃度為0.O1g/ml的CuSO容液12鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑的正確做法是( )A.先加A液,混合后再加B液搖勻觀察B.先加B液,混合后再加A液搖勻觀察C.A、B液混合后加入,搖勻后觀察D.A、B液同時(shí)加入樣液,搖勻后觀察遷移與擴(kuò)展13與硫酸銅溶液在堿性環(huán)境中反應(yīng),生成紫色物質(zhì)的是( )A. 淀粉B.脂肪C. 蛋白質(zhì)D.核酸14將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗,鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的試劑分別是( )A.碘液、蘇丹田溶液B. 雙縮月尿試劑、碘液C.亞甲基藍(lán)溶液、蘇丹m D. 碘液、斐林試劑15下列實(shí)驗(yàn)中所用試劑錯(cuò)誤 的是()A.在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中,使用醋酸洋紅溶液使染色體著色B.在提取葉綠體色素實(shí)驗(yàn)中,使用丙酮提取色素
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