草珊瑚總黃酮提取及含量檢測

1、草珊瑚總黃酮提取及含量檢測【摘要】 目的 研究草珊瑚總黃酮的提取工藝。方法 以草珊瑚為原料，用乙醇為溶劑，利用超聲波輔助提取和水浴法提取草珊瑚總黃酮，利用L9（33 ）正交實驗方法優(yōu)化總黃酮提取工藝，采用單因素實驗，測定了乙醇濃度、料液比、提取時間、提取溫度等單因素實驗，考察總黃酮提取率與各因素的關系。根據(jù)單因素實驗得出的顯著條件進行正交設計，確定最佳工藝條件。結果 超聲波法的最佳工藝條件為乙醇濃度50%、料液比115、提取時間45 min，根據(jù)確定的最佳工藝條件，按實驗中的測定方法測得提取的總黃酮含量為69.25 mg/g。水浴法的最佳工藝條件為乙醇濃度50%、料液比120、提取溫度80 、

2、提取時間2 h，按實驗中的測定方法測得提取的總黃酮含量49.60 mg/g。結論 超聲波提取不僅在時間上比水浴提取大大縮短，而且實驗過程易于控制，黃酮提取率也比水浴提取提高28.38%。 【關鍵詞】 草珊瑚；總黃酮；提取工藝；含量 Abstract Objective To optimize the extraction process of the flavonoids from sarcandra glaber.Methods Used sarcandra glaber as raw materials，took ethanol extraction methods and used ul

3、trasonic water bath to extract the flavonoids，then used L9（33） orthogonal experiment to optimize the extraction process of flavonoids.One of the experiments is the single factor experiment.According to the given conditions and measured flavones，what we will do is to have single factor experiments ab

4、out different concentrations of ethanol，feed ratio，extraction time and temperature.According to the remarkable conditions from single factor experiments，we will have an orthogonal design and then select the best conditions.Results The optimum conditions of ultrasonic methods are for the concentratio

5、n of 50 percent ethanol，feed rate 115，the extracted time 45 minutes，the flavones in 69.25 mg/g.The optimum conditions of water bath for ethanol methods are for concentration of 50 percent，feed rate 120，the extracted temperature 80 and the flavones in 49.60 mg/g.Conclusion The time used in ultrasonic

6、 extraction is greatly shorter than that of water bath and the experiment is easier to control than that of water bath，and the extraction rate of flavonoids also raise 28.38% than that of water bath. Key words sarcandra glaber；flavonoids；extraction process；content 隨著草珊瑚在醫(yī)藥、獸藥、保健食品及保健用品領域中的應用越來越廣泛，對其

7、有效成分的提取分離顯得越來越重要。黃酮類化合物是草珊瑚中含量最多、最主要的活性成分之一。目前，對草珊瑚總黃酮的提取分離工藝技術研究尚未見有詳細報道，本學位論文擬對草珊瑚總黃酮提取分離工藝技術進行較系統(tǒng)的研究并篩選最佳新技術新工藝。采用正交實驗方法考察沸水提取法及乙醇提取法對草珊瑚總黃酮提取效果的影響；采用中藥高新工程技術大孔吸附樹脂對草珊瑚總黃酮進行分離純化研究，以確定草珊瑚總黃酮最佳提取分離工藝條件及方法。以確定的草珊瑚總黃酮最佳提取工藝對不同季節(jié)采收的草珊瑚中總黃酮含量的動態(tài)變化，草珊瑚自然存放時間不同對總黃酮含量的影響，貴州草珊瑚根、莖、葉中總黃酮的不同含量進行動態(tài)變化研究，以確 定草珊

8、瑚原料的最佳利用時機。從而為生產中最有效的開發(fā)利用草珊瑚，獲得草珊瑚總黃酮的最大提取率，發(fā)揮草珊瑚的最大經濟效益提供實驗依據(jù)及指導，以達到提升草珊瑚藥、食用產品的質量檔次，使其更具三效（高效、速效、長效），三小（劑量小、毒性小、不良反應?。?，三便（便于貯藏，便于攜帶，便于服用）的特點，使其產品能走出國門、出口創(chuàng)匯，有著重要的經濟和社會意義1。 1 材料與方法 1.1 實驗材料 原料：草珊瑚購于貴陽花果園藥材市場；NaNO2（固體）（重慶北碚精細化工廠）；95%的乙醇溶液（分析純） （遵義國營化學試劑廠）；Al（NO3）3（固體）（匯源化工有限公司）；NaOH（固體）（天津市化學試劑六廠三分廠）

9、。 1.2 實驗器材 HH-S2s型恒溫水浴鍋（金壇市環(huán)保儀器廠）；UV2755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；抽濾機（金宇機械有限公司）；JY88（96）-IIN型數(shù)控超聲波細胞粉碎機（寧波新芝生物科技有限公司）；FA1004型電子分析天平（上海天平儀器廠）。 1.3 實驗方法 超聲波提取過程：（1）稱取草珊瑚5 g分別裝入準備好了的燒杯中，在燒杯上填上編號，并記錄好數(shù)據(jù)。（2）用95%乙醇分別配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交實驗設計搭配裝入對應號的錐形瓶中。（3）根據(jù)以上配置好的原料，放入超聲波儀器中進行提取。（4）將以上提取物過濾，將濾液按照實驗方法測出吸光度，

10、并記錄好數(shù)據(jù)。 水浴提取的實驗過程為：（1）稱取草珊瑚5 g分別裝入準備好了的錐形瓶中，在錐形瓶上填上編號，并記錄好數(shù)據(jù)；（2）用95%乙醇分別配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交實驗設計搭配裝入對應號的錐形瓶中，并用保鮮膜密封好；（3）把錐形瓶放入已準備好的一定溫度的水浴中加熱，2 h后取出抽濾液體轉入干凈的燒杯中，并用保鮮膜密封好；（4）將以上的提取物過濾，將濾液按照實驗方法測出吸光度，并記錄好數(shù)據(jù)。 2 實驗結果與討論 2.1 標準曲線的制備 見圖1。從蘆丁對照儲備液中分別吸取1 ml，放入1號、2號容量瓶中（25 ml），各加60 %乙醇至5 ml，加5%NaNO2溶液1.0 ml，搖勻放置6 min，再加10%Al（NO3）3 溶液0.5 ml（空白對照不加），搖勻再放置6 min，加4%NaOH溶液10 ml，搖勻放置15 min，從400600 nm處測吸光值：可得出蘆丁在500 nm處存在最大吸收峰。 回歸方程：A=0.0095C+0.001