人粒細胞無形體病專題調(diào)查方案

1、人粒細胞無形體病專題調(diào)查方案（試行）為指導(dǎo)發(fā)生疫情的地區(qū)開展人粒細胞無形體病的調(diào)查，增進對該病病原學(xué)、傳播機制、危險因素及臨床診斷等的認識，為制訂相應(yīng)的防控策略和措施提供科學(xué)依據(jù)，特制訂本方案。一、調(diào)查目的（一）了解人粒細胞無形體病疫區(qū)人群感染狀況及抗體水平。（二）了解人粒細胞無形體病主要的潛在傳播媒介的種類、分布及帶菌狀況。（三）了解人粒細胞無形體病常見的動物宿主種類、分布及帶菌狀況。二、調(diào)查內(nèi)容與方法（一）血清流行病學(xué)調(diào)查。1. 調(diào)查對象（ 1）可能暴露者：與患者有類似暴露史的人員（暴露于有可疑野生動物或蜱的生境） 。（ 2）密切接觸者：與患者密切接觸者（參與救治的醫(yī)護人員、護理患者的家屬

2、等） 。（ 3）一般人群：與患者無密切接觸，也無可疑生境暴露者。2. 標(biāo)本采集對所有密切接觸者應(yīng)采集雙份血清，間隔3-4 周，另應(yīng)采集可能暴露者及一般人群血清各30-50 份。每次采集靜脈血 5ml，分離血清送檢。 血清標(biāo)本的包裝、 貯存及運送見 人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行） （附件 3）。3. 標(biāo)本檢測采集的標(biāo)本應(yīng)及時送有條件的省級疾病預(yù)防控制中心進行抗體檢測。如當(dāng)?shù)責(zé)o檢測條件，應(yīng)送中國疾病預(yù)防控制中心進行檢測。檢測方法及注意事項見人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行） （附件 3）。（二）宿主動物調(diào)查。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查的線索，確定是否進行宿主動物的調(diào)查。1. 調(diào)查地點和時間在病例

3、可能感染的地點，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^，選擇宿主動物調(diào)查的地點。調(diào)查時間可選擇在疫情發(fā)生后或宿主動物活動高峰季節(jié)。2. 捕獲方法（ 1）居民區(qū)采用籠夜法。在鼠類經(jīng)常出沒的場所，于2傍晚時在每15m 的房間放置鼠籠一個，并做好標(biāo)記。誘餌用花生米或油條、油餅等（同一地區(qū)應(yīng)選用同一種誘餌）。次日清晨取回鼠籠， 將捕獲鼠的鼠籠放入布鼠袋內(nèi)， 系緊袋口，做好記錄，并編號。（ 2）野外采用夾（籠）夜法。在有鼠活動的場所，于傍晚時布放鼠夾（籠） ，夾（籠）的行距應(yīng)在 30m 以上，夾（籠）間距為 5m，并做好標(biāo)記。誘餌應(yīng)統(tǒng)一。次日清晨取回夾（籠），將捕獲鼠放入布鼠袋內(nèi)，系緊袋口，做好標(biāo)記，并編號。如捕白天活動

4、的鼠，采用夾（籠）日法。（ 3）鼠類以外的其它野生宿主動物（如野兔等）可通過有關(guān)渠道獲取。3. 標(biāo)本處理（ 1）采集動物血標(biāo)本待檢。（ 2）解剖前，將所捕宿主動物（如鼠等）置于密閉容器內(nèi)，用乙醚深度麻醉。將動物（鼠）置于白瓷盤中，先用鑷子夾取盤中和動物（鼠）體表的寄生物，如蜱、螨、蚤等，寄生物按鼠只分別置入盛有 75酒精的密閉容器中， 并標(biāo)記相應(yīng)鼠只的編號；然后，采用無菌方法解剖動物（鼠） ，取其脾、肝、腎標(biāo)本，置入相應(yīng)編號的無菌凍存管內(nèi)，于液氮罐內(nèi)保存。無液氮罐保存條件的，應(yīng)置20環(huán)境保存。上述標(biāo)本送回實驗室后， 應(yīng)盡快檢測。 否則，應(yīng)置 80 超低溫、或 20低溫冰箱內(nèi)保存。4動物的分類、

5、鑒定參考醫(yī)學(xué)動物鑒定手冊等相關(guān)專業(yè)資料，鑒定宿主動物的種類、學(xué)名等。5. 核酸檢測及病原分離（ 1）采用 PCR擴增動物血液標(biāo)本的 DNA，并測定核苷酸序列。（ 2）有條件的實驗室應(yīng)對陽性標(biāo)本進行病原體分離。陽性病原分離物送中國疾病預(yù)防控制中心作進一步鑒定。方法見附件3人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）。6. 計算動物（鼠）種的構(gòu)成、密度及其帶菌率。（三）蜱的調(diào)查。1. 調(diào)查地點和時間在病例可能感染的地點，或根據(jù)當(dāng)?shù)氐牡乩砭坝^選擇媒介蜱的調(diào)查地點。調(diào)查時間可選擇在疫情發(fā)生后，或蜱活動高峰季節(jié)。2. 捕獲方法（ 1）布旗法。用約 1 平方米大小的白絨布旗，在調(diào)查地段內(nèi)定時進行拖蜱。拖蜱時，手

6、持旗桿伸向一側(cè)，使布旗平鋪于草叢上， 以等速緩步向前行走， 每步行 2 米觀察一次，將附著于旗上的蜱撿入玻管內(nèi)保存。每小時檢獲蜱數(shù)即為蜱密度，單位為只布旗人工小時，每次捕蜱時間不少于1 小時（如蜱密度單位采用只布旗人工分鐘，每次捕蜱時間一般不少于30 分鐘）。同時，檢查拖蜱者身體上是否附著有蜱，如有，將蜱撿入另一玻管內(nèi)保存，以區(qū)別于布旗法捕獲的蜱。凡拖過蜱的地方，短時間內(nèi)不應(yīng)在原地重復(fù)調(diào)查。（ 2）帶蜱指數(shù)調(diào)查法。用鼠籠在有蜱活動的地方捕捉活鼠，鼠體上蜱的采集可參照宿主動物體外寄生物采集方法進行。平均每只鼠體上的蜱數(shù)即為帶蜱指數(shù)， 單位為只鼠。家養(yǎng)動物或其它野生動物用適當(dāng)方式制動固定后，可直接

7、檢蜱，計算帶蜱指數(shù)。3. 蜱的分類、鑒定參考有關(guān)專業(yè)資料，對捕獲的蜱進行分類、鑒定、命名（學(xué)名）。若當(dāng)?shù)責(zé)o法鑒定，可將采集到的雌、雄蜱各若干只置于75%乙醇溶液中保存，送中國疾病預(yù)防控制中心傳染病所鑒定。4. 核酸檢測及病原分離（ 1）采用 PCR擴增蜱標(biāo)本的 DNA，并測定核苷酸序列。（ 2）有條件的實驗室應(yīng)對陽性蜱標(biāo)本進行病原分離。陽性病原分離物送中國疾病預(yù)防控制中心作進一步鑒定。方法見附件 3人粒細胞無形體病實驗室檢測方案（試行）。5. 計算蜱種的構(gòu)成、總帶菌率及各種蜱的帶菌率。三、資料的收集、管理和利用（一）一般背景資料的收集。收集當(dāng)?shù)氐囊话惚尘百Y料，如調(diào)查時當(dāng)?shù)氐臍庀筚Y料（氣溫、降雨

8、量、濕度、風(fēng)力、風(fēng)向等）、地理狀況（地理位置、地形、地貌、湖泊、河流、流域等）、人口統(tǒng)計學(xué)資料、生產(chǎn)及生活方式（農(nóng)、牧業(yè)、狩獵等活動） 、生活及衛(wèi)生習(xí)慣、特殊風(fēng)俗、社會經(jīng)濟狀況以及其他相關(guān)資料等。（二）專題調(diào)查相關(guān)資料的收集。收集專題調(diào)查的相關(guān)資料，包括各種采樣（人體血清、宿主動物標(biāo)本、媒介蜱）登記表、檢測登記表、檢測報告，以及各類專題調(diào)查 （血清采集、 宿主動物調(diào)查、 媒介蜱調(diào)查）統(tǒng)計表等（見附表 1-8 ）。（三）資料的管理和利用。現(xiàn)場調(diào)查結(jié)束后，應(yīng)及時撰寫專題調(diào)查報告，上報上級疾控機構(gòu)及同級衛(wèi)生行政部門，并將專題調(diào)查的原始記錄、匯總整理資料、分析數(shù)據(jù)及調(diào)查報告等及時整理、歸檔。實驗室檢測

9、工作結(jié)束后，應(yīng)及時將檢測結(jié)果反饋給當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機構(gòu)，由當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制機構(gòu)告知相關(guān)單位及被調(diào)查者。附表 1 血清標(biāo)本采集登記表采血時間：地點：編號 姓名 性別 年齡 職業(yè) 住址 蜱叮咬史發(fā)病臨床采血采集發(fā)熱史診斷日期備注日期量送檢單位：送檢人：送檢日期：附表 2血清標(biāo)本嗜吞噬細胞無形體抗體檢測登記表編號姓名采集時間檢測時間檢測方法檢測項目及結(jié)果備注送檢單位：送檢人：送檢日期：附表 3嗜吞噬細胞無形體宿主動物標(biāo)本采集登記表體外寄生蟲編號地點鼠種雌/雄標(biāo)本種類備注蜱蚤螨捕鼠日期：送檢單位：送檢人：送檢日期：附表 4嗜吞噬細胞無形體宿主動物標(biāo)本檢測登記表動物 /臟器種類檢驗項目及結(jié)果備注編號檢測時間IgG 抗體16S rRNAgroEL送檢單位：送檢人：送檢日期：附表 5嗜吞噬細胞無形體媒介蜱采集登記表（布旗法）編號捕獲日期捕獲地點來源蜱種備注送檢單位：送檢人：送檢日期：附表 6媒介蜱嗜吞噬細胞無形體檢測登記表編號捕獲日期捕獲數(shù)量檢驗項目及結(jié)果備 注捕獲地點16S rRNAgroEL送檢單位：送檢人：送檢日期：