實(shí)驗(yàn)五農(nóng)藥污染對(duì)植物微核產(chǎn)生的誘變效應(yīng)完整

1、1實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 農(nóng)藥污染對(duì)植物微核農(nóng)藥污染對(duì)植物微核（MCN）產(chǎn)生的誘變效應(yīng)）產(chǎn)生的誘變效應(yīng) 2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理三、器材與材料四、操作步驟五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果六、思考題3一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握環(huán)境優(yōu)先污染物的概念；2.了解“三致”物質(zhì)的潛在危害；3.掌握微核觀察和計(jì)數(shù)的方法。4二、實(shí)驗(yàn)原理 微核，是真核生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu)，往往是細(xì)胞經(jīng)輻射或化學(xué)藥物的作用而產(chǎn)生的。在細(xì)胞間期微核呈圓形或橢圓形，游離于主核之外，大小在主核1/4以下。5三、器材、試劑與材料1器材器材光照培養(yǎng)箱、瓷盤、紗布、水浴鍋、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、計(jì)數(shù)器。62試劑試劑（1）卡諾氏液：由三

2、份純酒精和一份冰醋酸混合而成（現(xiàn)用現(xiàn)配）；（2）1.0 molL-1鹽酸；（3）70%酒精；（4）1醋酸洋紅：將50mL45的醋酸水溶液放人150mL錐形瓶中，文火煮沸，然后徐徐投入0.5g洋紅粉末，再煮12h，在此溶液中懸一個(gè)鐵釘，1分鐘后取出，使染色劑中略具鐵離子(或在溶液冷卻后加入12滴醋酸鐵溶液)以便增加染色效果。將溶液過濾后，置于具玻璃塞的棕色玻璃瓶中備用。7（5）用農(nóng)藥磷胺（phosphamidon）與水配置系列溶液：0（對(duì)照）和 20。3.材料材料吞豆根尖（初生根或次生根）8實(shí)驗(yàn)材料9四、方法與步驟四、方法與步驟實(shí)驗(yàn)流程如圖所示：101材料準(zhǔn)備材料準(zhǔn)備 取蠶豆種子，在蒸餾水中浸泡

3、24h，使種子充分吸脹，置于鋪有濾紙的瓷盤中并蓋上濕紗布，在231的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12d，使其長出1.5-3.0cm長的初生根，此時(shí)切除初生根以保證側(cè)根的生長發(fā)育。112染毒處理染毒處理 待側(cè)根露白后，隨機(jī)分組。每組選擇10粒種子用配制好的農(nóng)藥溶液染毒處理6h，取出后用蒸餾水沖洗，并移至蒸餾水中修復(fù)培養(yǎng)2226h（兩個(gè)細(xì)胞周期）。123材料固定材料固定 取修復(fù)培養(yǎng)結(jié)束的蠶豆根尖0.5-1cm于卡諾氏固定液中固定1214h。如需長時(shí)間保存，則將樣品置于70%酒精中，4保存。134材料解離材料解離 將固定后的根尖材料用1molL-1的鹽酸在60恒溫水浴中解離1520 min。5制片制片 將解離后

4、的根尖材料用蒸餾水漂洗數(shù)次，取出置于載片上，從根冠起切取根尖11.5mm，用解剖針搗碎，加12滴染液，染色10-15min。蓋上蓋片輕壓。14156鏡檢鏡檢 在4010倍顯微鏡下，凡小于主核1/4以下的，同主核有相同染色效果的，圓形、橢圓形或其他類似的形狀的染色物質(zhì)都可以算作微核。1617有絲分裂18前期前期中期中期后期后期19微核自動(dòng)識(shí)別系統(tǒng)20五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 通常每一處理組至少觀察5張較好的片子，每張片子至少觀察1000個(gè)以上細(xì)胞。 結(jié)果有兩種表示方法：微核率 = 微核數(shù)/觀察統(tǒng)計(jì)的總細(xì)胞數(shù)1000微核細(xì)胞率 = 具有微核的細(xì)胞數(shù)/觀察統(tǒng)計(jì)的總細(xì)胞數(shù)1000。21污染指數(shù)（pollution index, PI)PI=處理的微核千分率平均值/對(duì)照組的微核千分率平均值基本無污染：0PI1.5；輕度污染：1.5PI2.0；中度污染：2.0PI3.522六、思考題一、實(shí)驗(yàn)中農(nóng)藥引起微核產(chǎn)生的原因是什么？二、磷胺屬于哪種類型的農(nóng)藥，該種農(nóng)藥對(duì)生物的影響以及在環(huán)境中的行為有何特點(diǎn)？注：注：文檔資料素材和資料部分文檔資料素材和資料部分來自網(wǎng)絡(luò)，如不慎侵犯