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文檔簡介

1、生物梅里埃厭氧菌生物梅里埃厭氧菌 解決方案解決方案 2定義定義 是指一大群在有氧條件下不能生長,必須在無氧條件是指一大群在有氧條件下不能生長,必須在無氧條件下才能生長的細菌。這類細菌缺乏完整的代謝酶系統(tǒng),下才能生長的細菌。這類細菌缺乏完整的代謝酶系統(tǒng),其能量代謝以無氧發(fā)酵的形式進行,不但不能利用氧其能量代謝以無氧發(fā)酵的形式進行,不但不能利用氧氣,反而被其抑制。氣,反而被其抑制。3常見厭氧菌分類常見厭氧菌分類菌類菌類屬屬常見種常見種革蘭陽性球菌革蘭陽性球菌厭氧球菌屬厭氧球菌屬厭氣葡萄球菌、厭氣鏈球菌厭氣葡萄球菌、厭氣鏈球菌消化球菌、消化鏈球菌消化球菌、消化鏈球菌革蘭陰性球菌革蘭陰性球菌厭氧球菌屬

2、厭氧球菌屬小韋榮球菌小韋榮球菌大韋榮球菌大韋榮球菌革蘭革蘭陰性桿菌陰性桿菌類桿菌屬類桿菌屬脆弱類桿菌脆弱類桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌梭形桿菌屬梭形桿菌屬二路類桿菌、二路類桿菌、普通類桿菌普通類桿菌、普雷沃桿菌屬普雷沃桿菌屬核梭桿菌、壞死梭桿菌、核梭桿菌、壞死梭桿菌、卟啉單胞菌屬卟啉單胞菌屬死亡梭桿菌、解糖普雷沃桿菌死亡梭桿菌、解糖普雷沃桿菌無芽胞革蘭陽性桿菌無芽胞革蘭陽性桿菌放線菌屬放線菌屬伊氏、納氏放線菌、伊氏、納氏放線菌、真桿菌屬真桿菌屬不介糖真桿菌、遲緩真桿菌、不介糖真桿菌、遲緩真桿菌、丙酸桿菌屬丙酸桿菌屬痤瘡顆粒丙酸桿菌、痤瘡顆粒丙酸桿菌、雙歧桿菌屬雙歧桿菌屬短雙歧桿菌、長雙

3、歧桿菌、短雙歧桿菌、長雙歧桿菌、乳酸桿菌屬乳酸桿菌屬嗜酸乳酸桿菌嗜酸乳酸桿菌產(chǎn)芽胞革蘭陽性桿菌產(chǎn)芽胞革蘭陽性桿菌梭菌屬梭菌屬產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌、難辯梭菌、難辯梭菌、破傷風(fēng)梭菌破傷風(fēng)梭菌4厭厭氧菌分離氧菌分離鑒鑒定流程定流程樣樣本本 血血瓊瓊脂脂 厭厭氧血氧血瓊瓊脂或脂或 涂片革涂片革蘭蘭染色染色 中國中國藍瓊藍瓊脂脂 選擇選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基 記錄結(jié)記錄結(jié)果果 需氧培養(yǎng)基需氧培養(yǎng)基18-24h 48h厭厭氧培養(yǎng)氧培養(yǎng) 需氧菌需氧菌鑒鑒定定報報告告 可疑菌菌落做耐氧可疑菌菌落做耐氧試驗試驗 需氧需氧24h 厭厭氧氧48h 生生長長 不生不生長長 生生長長 不生不生長長 兼性兼性厭厭氧菌或需氧菌

4、氧菌或需氧菌 作第二次耐氧作第二次耐氧試驗試驗 兼性或需氧菌兼性或需氧菌 厭厭氧氧(+) 需氧需氧(-) 涂片并與最初涂片涂片并與最初涂片 VITEK API 20A 氣相色氣相色譜譜 PCR 菌種保存菌種保存 藥藥敏敏試驗試驗:對對照有無照有無遺遺漏漏 ANI卡卡 Rapid ID 32A Etest或或 瓊瓊脂稀脂稀釋釋法法5幾種主要厭氧菌的特征幾種主要厭氧菌的特征細菌細菌血瓊脂菌落形態(tài)血瓊脂菌落形態(tài)鏡下形態(tài)鏡下形態(tài)其他特征其他特征脆弱類桿菌脆弱類桿菌突起、灰白色、透明突起、灰白色、透明G-G-桿菌、多形態(tài)、桿菌、多形態(tài)、耐卡那霉素、青耐卡那霉素、青折光微溶血折光微溶血染色不勻染色不勻霉素

5、、膽汁促生長霉素、膽汁促生長觸酶陽性觸酶陽性產(chǎn)黑色素類桿菌產(chǎn)黑色素類桿菌突起、桃紅色熒光、突起、桃紅色熒光、小、末端園型、小、末端園型、卡那:卡那:R R白光下棕黑色、溶血白光下棕黑色、溶血常呈球型常呈球型青霉素:青霉素:S S膽汁抑制生長膽汁抑制生長核梭桿菌核梭桿菌突起閃光、斑點狀、面包突起閃光、斑點狀、面包長梭狀、二頭長梭狀、二頭卡那、青霉素卡那、青霉素“S S”屑樣斑點菌落、綠色溶血屑樣斑點菌落、綠色溶血尖細、有時呈尖細、有時呈可被膽汁抑制、可被膽汁抑制、纖維狀纖維狀ind+ind+、脂酶陰性脂酶陰性消化球菌消化球菌小突起、灰白渾濁、邊緣小突起、灰白渾濁、邊緣大小不等、可成單、大小不等、

6、可成單、巨消化球菌、形態(tài)大巨消化球菌、形態(tài)大透明、可溶血或綠色溶血透明、可溶血或綠色溶血成雙、成堆成雙、成堆成堆、液化明膠。成堆、液化明膠。不介糖消化球菌不介糖消化球菌ind+ind+消化鏈球菌消化鏈球菌同上同上大小不等成對成鏈大小不等成對成鏈形態(tài)較小形態(tài)較小產(chǎn)氣莢膜桿菌產(chǎn)氣莢膜桿菌微突起、微渾濁、灰色、邊緣微突起、微渾濁、灰色、邊緣大、末端鈍大、末端鈍無動力、液化明膠、發(fā)無動力、液化明膠、發(fā)整齊或不規(guī)則。寬的雙溶血環(huán)整齊或不規(guī)則。寬的雙溶血環(huán)芽胞極難形成芽胞極難形成酵多種糖、水解七葉苷酵多種糖、水解七葉苷6厭氧培養(yǎng)方法厭氧培養(yǎng)方法一、簡易厭氧袋培養(yǎng)法一、簡易厭氧袋培養(yǎng)法 方便方便 易使用易使

7、用原理:用一種透明、不透氣的塑料袋作為厭氧容器,內(nèi)置化學(xué)吸氧裝置(如連二亞硫酸鈉和碳酸氫鈉,或產(chǎn)H2,CO2的化學(xué)時間和催化劑鈀粒,或商品化產(chǎn)氣條),厭氧指示劑二、厭氧罐二、厭氧罐(盒盒)培養(yǎng)法培養(yǎng)法 方便方便 易使用易使用三、厭氧手套箱法三、厭氧手套箱法 當(dāng)今國際公認的培養(yǎng)厭氧菌的最佳方法,但價格昂貴,而且長期維持手套保持厭氧環(huán)境需要消耗大量的混合氣體,費用很高,限制了其推廣應(yīng)用四、四、Oxyrase酶平皿培養(yǎng)系統(tǒng)酶平皿培養(yǎng)系統(tǒng)五、氣體噴射培養(yǎng)法五、氣體噴射培養(yǎng)法六、其它方法六、其它方法(一)液體培養(yǎng)法(二)高層瓊脂培養(yǎng)法7生物梅里埃的厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)生物梅里埃的厭氧培養(yǎng)系統(tǒng) 簡易厭氧袋(盒)培

8、養(yǎng)簡易厭氧袋(盒)培養(yǎng)8特殊氣體發(fā)生劑特殊氣體發(fā)生劑 活性碳 抗壞血酸鈉 有機和無機成份最終氣體環(huán)境與以上各化學(xué)成份量多少有關(guān)最終氣體環(huán)境與以上各化學(xué)成份量多少有關(guān)F不需水不需水 F不需催化劑不需催化劑 F 不產(chǎn)熱不產(chǎn)熱9特殊氣體發(fā)生劑特殊氣體發(fā)生劑高性能:能在1小時內(nèi)達到所需要的氣體環(huán)境10厭氧指示劑厭氧指示劑 在無氧環(huán)境無色在無氧環(huán)境無色 有氧環(huán)境為蘭色有氧環(huán)境為蘭色 在反應(yīng)區(qū)加在反應(yīng)區(qū)加1 1滴水滴水 并放進厭氧缸或厭氧袋內(nèi)并放進厭氧缸或厭氧袋內(nèi) 4-64-6小時后變成無色小時后變成無色 每次用新指示條貨號:96118規(guī)格:50條11GENbag 需培養(yǎng)的平板數(shù)量少時需培養(yǎng)的平板數(shù)量少時

9、 GENboxGENbox已經(jīng)關(guān)閉時已經(jīng)關(guān)閉時 急診標(biāo)本急診標(biāo)本 小型實驗室小型實驗室 APIAPI試劑條試劑條 適合于單個使用適合于單個使用最多放最多放5 5個平板個平板+1+1個厭氧指示劑個厭氧指示劑最多放最多放2 2個平板個平板最多放最多放2 2個平板個平板 1 1個個GENbagGENbag和產(chǎn)氣袋可供和產(chǎn)氣袋可供1 1個個API API 試劑條或試劑條或2 2個個ATBATB試劑條培養(yǎng)用試劑條培養(yǎng)用. .12GENbag45 53445 53445 53345 53345 53245 5322020202020202020個袋個袋2020個袋個袋2020個袋個袋2020個產(chǎn)氣包個產(chǎn)氣

10、包 20 20個產(chǎn)氣包個產(chǎn)氣包 20 20個產(chǎn)氣包個產(chǎn)氣包 2 - 25 2 - 25 C C干燥環(huán)境干燥環(huán)境2個密封夾最多可反復(fù)用個密封夾最多可反復(fù)用10次次貨號貨號. 45 511. 45 511含含1010個密封夾個密封夾13GENbox 體積大,可放置平板多 經(jīng)常用于特殊氣體環(huán)境 適合每天使用 產(chǎn)氣袋使用數(shù)量需根據(jù)GENbox容積確定 2.5L GENbox可放12個平板+ 1個產(chǎn)氣袋 7L GENbox可放42個平板+ 3個產(chǎn)氣袋 使用使用APIAPI厭氧鑒定條,先在試條的盤中加水,再厭氧鑒定條,先在試條的盤中加水,再把把APIAPI試條放進盤,然后放入缸內(nèi)試條放進盤,然后放入缸內(nèi),

11、 , 放厭氧指示劑放厭氧指示劑. .1496 12496 12696 12510個產(chǎn)氣袋 10個產(chǎn)氣袋 10個產(chǎn)氣袋 2 25 干燥環(huán)境GENbox15GENbox Jars96 12796 1282.5 L7 LGENbox聚碳酸酯缸硅酮蓋密封16GENbag/GENbox使用方法:1.把平板放進培養(yǎng)袋/缸內(nèi)2.從鋁箔袋內(nèi)取出產(chǎn)氣條3.放進塑料培養(yǎng)袋/缸內(nèi)4.立刻用密封夾密封培養(yǎng)袋/蓋嚴培養(yǎng)缸17不要往產(chǎn)氣包內(nèi)加水:滅活反應(yīng)培養(yǎng)過程中不能打開產(chǎn)氣袋/缸如果厭氧袋/缸打開并需進行再培養(yǎng): 用一個新的產(chǎn)氣包由于Genbox/bag氣體容積經(jīng)過校正,所以必須使用同系統(tǒng)產(chǎn)氣包應(yīng)快速將產(chǎn)氣袋放入Gen

12、box/bag.不要遲疑! GENbag - -30秒; GENbox - -1分鐘 GENbag/box anaer : 確認厭氧指示條顏色變化 Genbag CO2 - microaer : 如果只有1個平板培養(yǎng),需再放1個空平板GENbag/GENbox注意注意18可培養(yǎng)厭氧菌、微需氧菌、嗜二氧化碳菌可培養(yǎng)厭氧菌、微需氧菌、嗜二氧化碳菌快速產(chǎn)生最佳培養(yǎng)環(huán)境快速產(chǎn)生最佳培養(yǎng)環(huán)境不需要缸不需要缸, , 水水, ,觸酶和不產(chǎn)熱觸酶和不產(chǎn)熱培養(yǎng)盒種類齊全,長方形設(shè)計,節(jié)省空間培養(yǎng)盒種類齊全,長方形設(shè)計,節(jié)省空間操作過程簡單操作過程簡單可通過透明容器觀察是否有菌落生長,不需要打開容器可通過透明容器

13、觀察是否有菌落生長,不需要打開容器標(biāo)準(zhǔn)組件系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)組件系統(tǒng) : :相同系統(tǒng)可用于平板相同系統(tǒng)可用于平板, API, API試劑條試劑條, ., .GENbag/GENbox19厭氧培養(yǎng)用培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)用培養(yǎng)基 斯氏瓊脂斯氏瓊脂+5%+5%羊血:適用所有厭氧菌生長羊血:適用所有厭氧菌生長 貨號:貨號:43401 2043401 2090mm 43279 10090mm 43279 100* *90mm90mm 斯氏萬古霉素斯氏萬古霉素+5%+5%羊血:適用革蘭陰性厭氧菌的分離(羊血:適用革蘭陰性厭氧菌的分離(主要為類擬桿菌和普雷沃菌屬)主要為類擬桿菌和普雷沃菌屬) 貨號:貨號:43223 104

14、3223 1090mm90mm 產(chǎn)氣莢膜梭菌選擇培養(yǎng)基產(chǎn)氣莢膜梭菌選擇培養(yǎng)基 貨號:貨號:43603 643603 6200ml200ml亞硫酸鐵瓊脂亞硫酸鐵瓊脂 計數(shù)食品中的亞硫酸鹽還原厭氧菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌計數(shù)食品中的亞硫酸鹽還原厭氧菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌 貨號:貨號:51048 TSN51048 TSN瓊脂瓊脂 500g 500g 分離產(chǎn)氣莢膜梭菌分離產(chǎn)氣莢膜梭菌20常用厭氧菌鑒定方法常用厭氧菌鑒定方法 常常規(guī)規(guī)生化生化鑒鑒定法定法1、手工生化鑒定方法2、生化鑒定條鑒定法 預(yù)預(yù)成成酶鑒酶鑒定法定法 厭氧菌菌體內(nèi)含有的各種酶,在菌體暴露空氣死亡后仍能較長時間地保留其活性。利用這一特性,采用特定的底物和指示劑,測定代檢厭氧菌預(yù)成酶的種類和活性,從而鑒定出厭氧菌的種屬21生物梅里埃鑒定產(chǎn)品生物梅里埃鑒定產(chǎn)品手工手工 半自動半自動 全自動全自動ANC卡片貨號:21347Rapid

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