藥學(xué)微生物 項(xiàng)目三 鏡檢技術(shù)2

1、鏡檢技術(shù)鏡檢技術(shù)光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡一、顯微鏡顯微鏡顯微鏡光學(xué)顯微鏡：可見光作為光源電子顯微鏡：電子束作為光源顯微鏡是由一個(gè)透鏡或幾個(gè)透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器，是人類進(jìn)入原子時(shí)代的標(biāo)志。根據(jù)光源不同，顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡暗視野顯微鏡相位差顯微鏡視頻顯微鏡熒光顯微鏡體式顯微鏡倒置顯微鏡等投射電子顯微鏡掃描電子顯微鏡放大及分辨本領(lǐng)高于光學(xué)顯微鏡房間里的灰塵蝴蝶的翅膀香煙過濾嘴纖維表面的煙霧粒子打結(jié)的頭發(fā)伽利略改良了詹森父子的顯微鏡英國(guó)科學(xué)家胡克自制顯微鏡觀察細(xì)小物體，1665年出版顯微圖譜 引入“細(xì)胞”第一架顯微鏡是荷蘭眼鏡工匠詹森父子在1590年前后制成的顯微鏡發(fā)展過程顯微鏡發(fā)展過

2、程1878年 德國(guó)物理學(xué)家阿貝現(xiàn)代光學(xué)顯微鏡，放大2000倍左右20世紀(jì)30年代第一架電子顯微鏡放大200萬倍左右。一、光學(xué)顯微鏡構(gòu)造顯微鏡顯微鏡機(jī)械部分光學(xué)部分目鏡物鏡聚光器反光鏡鏡臂鏡筒轉(zhuǎn)換器調(diào)節(jié)器載物臺(tái)鏡座光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。1234567810111291 1、目鏡、目鏡2 2、粗準(zhǔn)焦螺旋、粗準(zhǔn)焦螺旋3 3、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋4 4、鏡臂、鏡臂5 5、物鏡、物鏡6 6、鏡柱、鏡柱7 7、鏡座、鏡座8 8、鏡筒、鏡筒9 9、壓片夾、壓片夾1010、載物臺(tái)、載物臺(tái)1111、遮光器、遮光器1212、反光鏡、反光

3、鏡顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)物鏡目鏡聚光器光闌1. 放大微小的物體或微細(xì)的結(jié)構(gòu)，形成倒立實(shí)像2. 把像投射到目鏡光闌處1. 放大物鏡映來的已放大的倒立實(shí)像2. 校正物鏡余留下來的像差3. 將物像投射到一定的位置上，便于放映或照相使來自光源的光線放大，聚成光束，透過載片照明樣品，射入物鏡顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)-物鏡物鏡顯微鏡的質(zhì)量主要取決于物鏡/價(jià)格昂貴物鏡的種類根據(jù)前透鏡與蓋玻片之間介質(zhì)的不同1. 干燥系物鏡2. 水浸系物鏡3. 油浸系物鏡物鏡與蓋片之間不加任何液體4，10 ，20 ，40 水浸物鏡刻有“W”或“Water”字樣水浸兩用物鏡刻有“Oil+w”字樣油浸物鏡刻有“oil 或oel或 imm

4、”和“HI”字樣甘油浸物鏡刻有“Glyc” 或 Glyz”字樣 物鏡鏡頭物鏡鏡頭低倍鏡低倍鏡1 1一般放大一般放大倍數(shù)為倍數(shù)為1010倍，空氣倍，空氣做光學(xué)介做光學(xué)介質(zhì)質(zhì)高倍鏡高倍鏡2 2一般放大一般放大倍數(shù)為倍數(shù)為100100倍，空氣倍，空氣做光學(xué)介做光學(xué)介質(zhì)質(zhì)油鏡油鏡3 3香柏油做香柏油做光學(xué)介質(zhì)，光學(xué)介質(zhì)，放大倍數(shù)放大倍數(shù)最大最大物鏡上數(shù)字和符號(hào)意義（物鏡上數(shù)字和符號(hào)意義（P25P25）S40S40：S-彈簧物鏡；40：放大倍數(shù)。40倍100倍等高倍物鏡工作距離小，成像時(shí)離物體表面近，都做成彈簧物鏡。A.0.65A.0.65或或N.A.1.65N.A.1.65：物鏡數(shù)值孔徑，孔徑越大分辨

5、率越強(qiáng)。160160：鏡筒機(jī)械長(zhǎng)度（mm）。0.170.17：所用蓋玻片最大厚度（mm）。目鏡目鏡1. 1.目鏡：目鏡：直插式：直插式：長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成 。2. 2.物鏡：物鏡：螺旋式：螺旋式：長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成長(zhǎng)度和放大倍數(shù)成 。特別說明：特別說明：放大倍數(shù)和放大倍數(shù)和物鏡物鏡與蓋玻片之間的距離與蓋玻片之間的距離成成 。反比反比正比正比反比反比目鏡與物鏡的比較鏡頭鏡頭鏡頭長(zhǎng)短鏡頭長(zhǎng)短視野亮度視野亮度物像大小物像大小細(xì)胞數(shù)細(xì)胞數(shù)目目鏡鏡低低倍倍高高倍倍物物鏡鏡低低倍倍高高倍倍長(zhǎng)長(zhǎng)亮亮小小多多短短暗暗大大少少短短亮亮小小多多長(zhǎng)長(zhǎng)暗暗大大少少如圖如圖6-46-4中、表示物鏡長(zhǎng)度，、表

6、示目鏡長(zhǎng)度，、中、表示物鏡長(zhǎng)度，、表示目鏡長(zhǎng)度，、表示物鏡與玻片的距離，獲得最大物像時(shí)正確的組合為表示物鏡與玻片的距離，獲得最大物像時(shí)正確的組合為( )( )A A、 B B、 C C、 D D、D二、工作原理二、工作原理1.幾個(gè)重要的分辨率人眼：0.2mm 光學(xué)顯微鏡：0.2um電子顯微鏡：0.2nm2.工作原理折射和折射率A凸透鏡的五種成象規(guī)律B顯微鏡的成像原理C油鏡工作原理D2.12.1凸透鏡的五種成象規(guī)律凸透鏡的五種成象規(guī)律 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí)，則在象方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)象； 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí)，則在象方二倍焦距上形當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦

7、距上時(shí)，則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)象；成同樣大小的倒立實(shí)象； 當(dāng)物體位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi)，焦點(diǎn)以外時(shí)，則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)象； 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí)，則象方不能成象；當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí)，則象方不能成象； 當(dāng)物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí)，則象方也無象的形成，而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛象。2.2油鏡工作原理油鏡工作原理顯微鏡使用時(shí)加入香柏油充填鏡頭和標(biāo)本之間孔隙，香柏油折射率為1.51，大于空氣折射1.0，因此使通過折射損失的光線減少，視野明亮，便于觀察。顯微鏡成上下顛倒左右相反的像。顯微鏡成上下顛倒左右相反的像。 標(biāo)本放大倍數(shù)=物

8、鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù) 低低倍鏡：放大倍數(shù)倍鏡：放大倍數(shù)小小，通光量，通光量多多，視野，視野亮亮； 高倍鏡：和低倍鏡正好相反高倍鏡：和低倍鏡正好相反2.3 放大倍數(shù)該放大倍數(shù)指的是長(zhǎng)度或?qū)挾?，而不是面積和體積。82644除以擴(kuò)大的倍數(shù)（4）除以擴(kuò)大的倍數(shù)的平方（42）細(xì)胞單行排列細(xì)胞均勻分布 放大倍數(shù)變大視野中細(xì)胞數(shù)目變少有兩種情況： ,10 x10 10 x40擴(kuò)大4倍2.4 2.4 相關(guān)概念相關(guān)概念 視野：是指一次所能觀察的被測(cè)標(biāo)本的范圍。鏡像亮度：視野里所看到的像的亮暗程度。它與放大倍數(shù)成反比，即在光源一定的情況下，放大倍數(shù)越大，視野越暗。 視野的大小與放大倍數(shù)成反比，即放大倍數(shù)越大視野

9、越小，看到的標(biāo)本范圍就越小。玻片移，污點(diǎn)玻片移，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在移，則污點(diǎn)在玻片上玻片上A物鏡換，污點(diǎn)物鏡換，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在移，則污點(diǎn)在物鏡上物鏡上B目鏡轉(zhuǎn)，污點(diǎn)目鏡轉(zhuǎn)，污點(diǎn)移，則污點(diǎn)在移，則污點(diǎn)在目鏡上目鏡上C2.5 2.5 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 二、顯微鏡使用二、顯微鏡使用( (視頻視頻觀看觀看) )u 取鏡和安放u 打開電源、拿取載玻片u 觀察（從低倍鏡到高倍鏡到油鏡）u 整理與存放一、取鏡和安放一、取鏡和安放右手握住鏡臂，左手托住鏡座把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)距邊緣5厘米左右處，略偏左，安裝好目鏡、物鏡二、打開電源、放片二、打開電源、放片C1-2滴香柏油D過多會(huì)溢出弄臟載物臺(tái)E損壞鏡頭A電源和光

10、源是同一個(gè)鍵B放片時(shí)避免手指接觸中央染色處三、觀察粗調(diào)時(shí)注意調(diào)整手勢(shì)，不要碰到微調(diào)旋鈕調(diào)到最高處不要繼續(xù)旋轉(zhuǎn)、易毀壞鏡頭、且香柏油進(jìn)入鏡頭內(nèi)太多難以清洗緩慢旋轉(zhuǎn)注意事項(xiàng)用油鏡觀察后，取下玻片時(shí)，應(yīng)先使物鏡離開油鏡后再取出?？捎猛七M(jìn)器前后左右調(diào)整觀察對(duì)象位置。四、整理與存放四、整理與存放觀察完畢，先提升鏡筒，取下玻片標(biāo)本;用紗布將顯微鏡外表擦拭干凈;取下目鏡鏡頭清洗（三步：擦鏡紙擦、二甲苯清洗、擦鏡紙擦），載玻片用擦鏡紙擦拭干凈;將顯微鏡放回原處.歸納小結(jié)歸納小結(jié)：一、取鏡和安放一、取鏡和安放 右手握、左手托右手握、左手托二、對(duì)光二、對(duì)光（1 1）低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。）低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。（2

11、2）左眼看，右眼睜。）左眼看，右眼睜。（3 3）轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，看到明亮的視野。）轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，看到明亮的視野。三、觀察三、觀察（1） 標(biāo)本放在載物臺(tái)上，壓住，正對(duì)通光孔。（2） 眼看物鏡 ，鏡筒下降，直到接近標(biāo)本。（3） 左眼注視目鏡，鏡筒緩緩上升，直到看清物像.鞏固練習(xí)：1.使用顯微鏡時(shí)，取鏡要用一手_，一手_，。2.對(duì)光時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使_倍鏡對(duì)準(zhǔn)_，轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器，使一個(gè)較大的_也對(duì)準(zhǔn)_。用_眼朝_里注視， _眼睜開，然后用手調(diào)節(jié)_，直到看到明亮的視野為止。握鏡臂握鏡臂托住鏡座托住鏡座通光孔通光孔光圈光圈通光孔通光孔左左目鏡目鏡右右反光鏡反光鏡低低3、轉(zhuǎn)動(dòng)_準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒_下降，直到物鏡接近玻

12、片標(biāo)本。4、為什么此時(shí)眼睛一定要看著物鏡？因?yàn)開5、_時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)_準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)_準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。6、如果物像偏左，你應(yīng)將標(biāo)本向_移，才能使物像居中 。粗粗緩慢緩慢要防止物鏡碰到玻片標(biāo)本要防止物鏡碰到玻片標(biāo)本逆逆粗粗細(xì)細(xì)左左7.有一臺(tái)顯微鏡，它有兩個(gè)目鏡和兩個(gè)物鏡，目鏡的放大倍數(shù)分別為5和15，物鏡的放大倍數(shù)分別為10和40。請(qǐng)問，這臺(tái)顯微鏡的最大放大倍數(shù)是_，最小的放大倍數(shù)_。假如現(xiàn)在觀察一個(gè)標(biāo)本，需要放大150，應(yīng)該選用的目鏡為_，物鏡為_。8.用下列四組鏡頭看同一塊血液的玻片標(biāo)本，其中可以看到血細(xì)胞數(shù)目最多的一組為（ ）A.目鏡5，物鏡10 B.目鏡5，物鏡40C.目鏡10，物鏡10D.目鏡10，物鏡40600600505015151010A A9.在載玻片上寫下一個(gè)小小的字母“d”，用顯微鏡觀察時(shí)，會(huì)看到放大的圖像形狀是( )A. b B. d C. q D. p10.顯微鏡放大倍數(shù)的計(jì)算方法是( )A.以目鏡倍數(shù)為準(zhǔn) B.以物鏡倍數(shù)為準(zhǔn)C.目鏡與物鏡倍數(shù)的乘積 D.目鏡與物鏡倍數(shù)之和D DC C12.遮光器上光圈的作用是( )A.調(diào)節(jié)焦距 B.調(diào)節(jié)光亮度C.調(diào)節(jié)光線角度 D.調(diào)節(jié)圖像清晰度1313. 觀察同一材料的同一部位時(shí)，高倍物鏡與低倍物鏡相比，其（ ） A、物像小、視野亮，看到的細(xì)胞數(shù)目多 B