藥物分析第3章

1、 v如何理解如何理解“藥物的純度藥物的純度是判定藥品質(zhì)量?jī)?yōu)劣的一是判定藥品質(zhì)量?jī)?yōu)劣的一個(gè)重要指標(biāo)個(gè)重要指標(biāo)”這句話？這句話？仿制藥與被仿制藥一致性要求仿制藥與被仿制藥一致性要求藥學(xué)方面一致（含量、結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)、其它檢查項(xiàng)等）藥學(xué)方面一致（含量、結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)、其它檢查項(xiàng)等）雜質(zhì)的數(shù)量和種類(lèi)低于被仿制藥，否則需要分析雜質(zhì)的安雜質(zhì)的數(shù)量和種類(lèi)低于被仿制藥，否則需要分析雜質(zhì)的安全性并提供有關(guān)數(shù)據(jù)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的安全性試驗(yàn)全性并提供有關(guān)數(shù)據(jù)，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的安全性試驗(yàn)建立雜質(zhì)適宜的雜質(zhì)檢查方法用于判斷一致性建立雜質(zhì)適宜的雜質(zhì)檢查方法用于判斷一致性 用于工藝優(yōu)化、去除雜質(zhì)、考察穩(wěn)定性、控制藥物質(zhì)量用于工

2、藝優(yōu)化、去除雜質(zhì)、考察穩(wěn)定性、控制藥物質(zhì)量舉例：仿制藥的雜質(zhì)檢查舉例：仿制藥的雜質(zhì)檢查國(guó)內(nèi)仿制藥研究中雜質(zhì)檢查面臨的困難國(guó)內(nèi)仿制藥研究中雜質(zhì)檢查面臨的困難 -雜質(zhì)來(lái)源不清雜質(zhì)來(lái)源不清-雜質(zhì)檢查方法缺乏針對(duì)性雜質(zhì)檢查方法缺乏針對(duì)性-雜質(zhì)對(duì)照品制備困難（受限于工藝?yán)щy），方雜質(zhì)對(duì)照品制備困難（受限于工藝?yán)щy），方法驗(yàn)證不充分法驗(yàn)證不充分-雜質(zhì)檢查結(jié)果難于評(píng)價(jià)雜質(zhì)檢查結(jié)果難于評(píng)價(jià) 進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)釆用梯度洗脫，對(duì)進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)釆用梯度洗脫，對(duì)3種已知雜質(zhì)、單種已知雜質(zhì)、單個(gè)未知雜質(zhì)及總雜質(zhì)分別進(jìn)行控制個(gè)未知雜質(zhì)及總雜質(zhì)分別進(jìn)行控制 國(guó)內(nèi)仿制釆用等度洗脫，僅對(duì)未知雜質(zhì)（單個(gè)國(guó)內(nèi)仿制釆用等度洗脫，僅對(duì)未知雜質(zhì)（單個(gè)雜

3、質(zhì)和雜質(zhì)和/或總雜質(zhì)）進(jìn)行控制或總雜質(zhì)）進(jìn)行控制 國(guó)內(nèi)同品種標(biāo)準(zhǔn)對(duì)有關(guān)物質(zhì)的規(guī)定：總雜質(zhì)不國(guó)內(nèi)同品種標(biāo)準(zhǔn)對(duì)有關(guān)物質(zhì)的規(guī)定：總雜質(zhì)不得過(guò)得過(guò)1.0%。Contents概述概述一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法特殊雜質(zhì)的檢查方法藥物純度的概念與要求藥物純度的概念與要求雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)雜質(zhì)的限量檢查與計(jì)算雜質(zhì)的限量檢查與計(jì)算一、概述一、概述藥物純度的概念與要求藥物純度的概念與要求v藥物的純度藥物的純度藥物的藥物的純凈純凈程度程度v雜質(zhì)雜質(zhì)無(wú)治療作用，影響藥物穩(wěn)定性和療效，無(wú)治療作用，影響藥物穩(wěn)定性和療效， 對(duì)人體健康有害的物質(zhì)對(duì)人體健康有害的物質(zhì)v雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查

4、也稱(chēng)也稱(chēng)純度檢查純度檢查藥用純度與化學(xué)純度的區(qū)別？藥用純度與化學(xué)純度的區(qū)別？雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)雜質(zhì)的來(lái)源與種類(lèi)來(lái)源：來(lái)源：v生產(chǎn)過(guò)程中引入生產(chǎn)過(guò)程中引入v貯藏過(guò)程中引入貯藏過(guò)程中引入原料，中間體，副產(chǎn)物；原料，中間體，副產(chǎn)物；試劑，溶劑，催化劑；試劑，溶劑，催化劑；器皿、裝置、管道等影響；器皿、裝置、管道等影響；制劑過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)；制劑過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)；同分異構(gòu)及同質(zhì)異晶現(xiàn)象同分異構(gòu)及同質(zhì)異晶現(xiàn)象保管不當(dāng)、貯藏時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；保管不當(dāng)、貯藏時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；溫度、濕度、光、空氣影響；溫度、濕度、光、空氣影響；微生物作用，產(chǎn)生：微生物作用，產(chǎn)生： 降解物、水解物、聚合物、降解物、水解物、聚合物、 氧化物、異構(gòu)

5、化、霉變等氧化物、異構(gòu)化、霉變等種類(lèi)：種類(lèi)：v按來(lái)源分：按來(lái)源分：一般雜質(zhì)、特殊雜質(zhì)一般雜質(zhì)、特殊雜質(zhì)v按結(jié)構(gòu)分：按結(jié)構(gòu)分：無(wú)機(jī)、有機(jī)雜質(zhì)；殘留溶劑無(wú)機(jī)、有機(jī)雜質(zhì)；殘留溶劑v按性質(zhì)分：按性質(zhì)分：信號(hào)雜質(zhì)、有害（毒）雜質(zhì)信號(hào)雜質(zhì)、有害（毒）雜質(zhì)v無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型l光學(xué)異構(gòu)體光學(xué)異構(gòu)體（左旋體，右旋體）（左旋體，右旋體）l幾何異構(gòu)體幾何異構(gòu)體（順式體，反式體）（順式體，反式體）l多晶型多晶型（晶型不同，理化常數(shù)，溶解度，穩(wěn)定性（晶型不同，理化常數(shù)，溶解度，穩(wěn)定性，體內(nèi)吸收和療效也不同），體內(nèi)吸收和療效也不同）注意：注意： 藥典中規(guī)定的檢查項(xiàng)目，是指正常生產(chǎn)和藥典中規(guī)

6、定的檢查項(xiàng)目，是指正常生產(chǎn)和儲(chǔ)存中可能產(chǎn)生并需控制的雜質(zhì)。藥典中未規(guī)儲(chǔ)存中可能產(chǎn)生并需控制的雜質(zhì)。藥典中未規(guī)定的雜質(zhì)，一般有以下幾種情況：定的雜質(zhì)，一般有以下幾種情況：v 指正常生產(chǎn)和儲(chǔ)存中不可能引入指正常生產(chǎn)和儲(chǔ)存中不可能引入v 含量甚微，對(duì)人體和藥物質(zhì)量無(wú)不良反應(yīng)含量甚微，對(duì)人體和藥物質(zhì)量無(wú)不良反應(yīng)v 限量要求較寬，現(xiàn)有產(chǎn)品均能達(dá)到限量要求較寬，現(xiàn)有產(chǎn)品均能達(dá)到v 對(duì)雜質(zhì)認(rèn)識(shí)不足，有待于積累資料對(duì)雜質(zhì)認(rèn)識(shí)不足，有待于積累資料雜質(zhì)的限量雜質(zhì)的限量v藥物中的雜質(zhì)在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則藥物中的雜質(zhì)在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則下允許有一定量的雜質(zhì)存在。下允許有一定量的雜質(zhì)存在。v雜質(zhì)的限

7、量就是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)的限量就是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用，通常用%，百萬(wàn)分之幾（，百萬(wàn)分之幾（ppm）表示。表示。對(duì)人體有毒的雜質(zhì)控制較嚴(yán)：對(duì)人體有毒的雜質(zhì)控制較嚴(yán)： 砷砷不得過(guò)百萬(wàn)分之十不得過(guò)百萬(wàn)分之十 重金屬重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之五十不得過(guò)百萬(wàn)分之五十雜質(zhì)量的控制方法雜質(zhì)量的控制方法v限量檢查（限量檢查（Limit test） 通常不測(cè)定其準(zhǔn)確含量，只檢查雜質(zhì)的量通常不測(cè)定其準(zhǔn)確含量，只檢查雜質(zhì)的量是否超過(guò)限量，所以稱(chēng)為雜質(zhì)的限量檢查（對(duì)是否超過(guò)限量，所以稱(chēng)為雜質(zhì)的限量檢查（對(duì)照法、靈敏度法、比較法）照法、靈敏度法、比較法）對(duì)照法：對(duì)照法： 取一定量雜質(zhì)對(duì)照品與一

8、定量供試取一定量雜質(zhì)對(duì)照品與一定量供試品在相同條件下處理后，比較結(jié)果，品在相同條件下處理后，比較結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)規(guī)定量以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)規(guī)定量藥物中雜質(zhì)的限量計(jì)算藥物中雜質(zhì)的限量計(jì)算%100SL）供試品量（雜質(zhì)最大允許量）雜質(zhì)限量（標(biāo)）體積（濃度雜質(zhì)最大允許量VC%100(%)SVCL式中：SVCppmL)(或：式中標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是藥典規(guī)定的式中標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是藥典規(guī)定的固定值固定值平行操作原則例例1 對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查對(duì)乙酰氨基酚中氯化物的檢查v 取對(duì)乙酰氨基酚取對(duì)乙酰氨基酚2.0g，加水，加水100mL加熱溶解后冷卻，加熱溶解后冷卻，濾過(guò)，取濾液濾過(guò)，取濾液25mL，依

9、法檢查氯化物，發(fā)生的渾濁，依法檢查氯化物，發(fā)生的渾濁與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0mL（每（每1mL相當(dāng)于相當(dāng)于10 g的的Cl）制成的對(duì)照液比較，不得更濃。求氯化物的限量是多制成的對(duì)照液比較，不得更濃。求氯化物的限量是多少？少？0.01%1001000000100252510%100(%)SVCL例例2 谷氨酸鈉中重金屬的檢查谷氨酸鈉中重金屬的檢查v 取本品取本品1.0g，加水，加水23mL溶解后，加醋酸鹽緩沖液（溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5)2mL，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10 gPb/1mL）所呈顏色比較，不得更深，重金屬限量為百萬(wàn)分之十，所呈顏色

10、比較，不得更深，重金屬限量為百萬(wàn)分之十，求所取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少求所取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少mL？例例3卡比馬唑片中甲疏咪唑的檢查卡比馬唑片中甲疏咪唑的檢查v 供試液供試液取取20片，研細(xì)，加三氯甲烷適量研片，研細(xì)，加三氯甲烷適量研磨使溶，濾過(guò)，置磨使溶，濾過(guò)，置10mL量瓶中，加三氯甲烷置量瓶中，加三氯甲烷置刻度，搖勻（規(guī)格刻度，搖勻（規(guī)格5mg）v 對(duì)照液對(duì)照液甲疏咪唑的三氯甲烷溶液（甲疏咪唑的三氯甲烷溶液（100 g/mL）v 分別取分別取10 L點(diǎn)于同一點(diǎn)于同一薄層板薄層板上，展開(kāi)，顯色，上，展開(kāi)，顯色，供試液若顯與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得更供試液若顯與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得更深，求雜質(zhì)限量

11、？深，求雜質(zhì)限量？例例4 腎上腺素中酮體的檢查腎上腺素中酮體的檢查v取本品取本品0.10g，置，置50mL量瓶中，加鹽酸溶液量瓶中，加鹽酸溶液溶液并稀釋至刻度，搖勻，在溶液并稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測(cè)定處測(cè)定吸光度，不得超過(guò)吸光度，不得超過(guò)0.05，已知酮體的吸收系，已知酮體的吸收系數(shù)數(shù)E1%1cm=435，求酮體的限量？，求酮體的限量？比較法比較法二、一般雜質(zhì)的檢查方法二、一般雜質(zhì)的檢查方法v 在自然界分布廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)在自然界分布廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中易引入的雜質(zhì)程中易引入的雜質(zhì) 如：如：氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、

12、砷鹽、干燥失重、熾灼殘?jiān)⒂袡C(jī)溶劑殘留量干燥失重、熾灼殘?jiān)⒂袡C(jī)溶劑殘留量等等1. 氯化物檢查法氯化物檢查法v原理：在稀硝酸溶液中原理：在稀硝酸溶液中v與一定量標(biāo)準(zhǔn)與一定量標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液按同法操作結(jié)果比較溶液按同法操作結(jié)果比較v加硝酸的作用：加硝酸的作用：（1）避免）避免Ag2CO3，Ag3PO4 ，Ag2O 等的形成等的形成，消除這些陰離子的干擾，消除這些陰離子的干擾（2）加速）加速AgCl 生成，產(chǎn)生較好的乳濁生成，產(chǎn)生較好的乳濁（白色渾濁）AgClAgCl注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)vCl-的濃度：的濃度：5080 g/50mL為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液（溶液（10 g Cl/m

13、L ） 5.08.0mLv供試品供試品 不澄明不澄明過(guò)濾過(guò)濾v供試品有色供試品有色外消色法或內(nèi)消色法外消色法或內(nèi)消色法用含硝酸的水洗凈濾用含硝酸的水洗凈濾紙中紙中Cl-至洗液與至洗液與AgNO3不產(chǎn)生渾濁，不產(chǎn)生渾濁，再過(guò)濾供試液再過(guò)濾供試液例例KMnO4中中Cl-的檢查，樣品（紫的檢查，樣品（紫色）色）+乙醇，顏色消退后再檢查乙醇，顏色消退后再檢查如果供試溶液帶顏色如果供試溶液帶顏色v內(nèi)消色法內(nèi)消色法 供試液（供試液（2倍量），等分成兩等分：倍量），等分成兩等分： 量量+AgNO3過(guò)濾至澄清過(guò)濾至澄清+標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)Cl- 對(duì)照對(duì)照 量量+AgNO3 樣品樣品 比較對(duì)照與樣品的渾濁程度比較對(duì)照與樣

14、品的渾濁程度2. 硫酸鹽的檢查方法硫酸鹽的檢查方法v原理：在稀鹽酸溶液中原理：在稀鹽酸溶液中 SO42-+Ba2+BaSO4（白色渾濁）（白色渾濁）v與一定量標(biāo)準(zhǔn)與一定量標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液按同法所得結(jié)果比較溶液按同法所得結(jié)果比較v加酸的作用：加酸的作用：加稀加稀HCl使成酸性，可防止使成酸性，可防止BaCO3 , Ba3 (PO4) 2 形成形成v注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) SO42-的濃度：的濃度：0.10.5mgSO4/50mL為宜，為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（0.1mgSO4/mL）1.0 5.0mL；溶液渾濁或有色，處理方法與；溶液渾濁或有色，處理方法與Cl-檢查法檢查法相

15、似相似3. 鐵鹽檢查法鐵鹽檢查法v 原理：在鹽酸酸性溶液中原理：在鹽酸酸性溶液中 紅色紅色v 反應(yīng)在反應(yīng)在HCl酸性中進(jìn)行，可防止酸性中進(jìn)行，可防止Fe3+水解水解v Fe2+無(wú)此反應(yīng)，需加入氧化劑無(wú)此反應(yīng)，需加入氧化劑過(guò)硫酸氨過(guò)硫酸氨氧化，同時(shí)防氧化，同時(shí)防止硫氰酸鐵分解；或加止硫氰酸鐵分解；或加硝酸硝酸處理，但需加熱煮沸除去處理，但需加熱煮沸除去NOv Fe3+的濃度：的濃度：10 50 g Fe3+ /50mL為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鐵銨硫酸鐵銨FeNH4(SO4)212H2O 1.0 5.0mL(10 g Fe3+ /mL)；標(biāo)準(zhǔn)液配置時(shí)為防止水解，需加適量硫酸；標(biāo)準(zhǔn)液配置

16、時(shí)為防止水解，需加適量硫酸363)(6SCNFeSCNFe注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)v 反應(yīng)可逆反應(yīng)可逆，加過(guò)量試劑可提高反應(yīng)靈敏度，同，加過(guò)量試劑可提高反應(yīng)靈敏度，同時(shí)可消除一些陰離子（時(shí)可消除一些陰離子（ Cl- ，PO43-，SO42- ，枸，枸櫞酸根）與櫞酸根）與Fe3+形成有色配位物而引起的干擾形成有色配位物而引起的干擾v 供試品與對(duì)照品供試品與對(duì)照品色調(diào)不一致色調(diào)不一致或呈色淺；可加正或呈色淺；可加正丁醇或異戊醇提取丁醇或異戊醇提取v 環(huán)狀結(jié)構(gòu)環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物；需經(jīng)熾灼破壞后測(cè)定的有機(jī)藥物；需經(jīng)熾灼破壞后測(cè)定4. 重金屬檢查法重金屬檢查法 重金屬原義是指重金屬原義是指比重大于比重大于5的金

17、屬，包括金、銀、銅、鐵、的金屬，包括金、銀、銅、鐵、鉛等，重金屬在人體中累積達(dá)到一定程度會(huì)造成慢性中毒。鉛等，重金屬在人體中累積達(dá)到一定程度會(huì)造成慢性中毒。 密度在密度在4.5g/cm3以上的金屬，以上的金屬，稱(chēng)作重金屬。稱(chēng)作重金屬。 最終在工業(yè)上真正劃入重金屬的為最終在工業(yè)上真正劃入重金屬的為10種金屬元素：種金屬元素：銅、鉛、銅、鉛、鋅、錫、鎳、鈷、銻、汞、鎘和鉍鋅、錫、鎳、鈷、銻、汞、鎘和鉍。 重金屬系指在一定的條件下，能與硫代乙酰胺（重金屬系指在一定的條件下，能與硫代乙酰胺（CH3CSNH2）試液或）試液或Na2S試液作用而顯色的金屬雜質(zhì)。試液作用而顯色的金屬雜質(zhì)。（一）第一法（硫代乙

18、酰胺法）（一）第一法（硫代乙酰胺法） 本法適用于無(wú)需有機(jī)破壞，在酸性條件下可溶解的、無(wú)本法適用于無(wú)需有機(jī)破壞，在酸性條件下可溶解的、無(wú)色的藥物的重金屬檢查。色的藥物的重金屬檢查。1原理原理 SHCONHCHOHCSNHCHPH2235 . 3223HPbSPbSHPH25 . 3222. 操作方法操作方法比色放置硫代乙酰胺水 22ml TS25ml2ml )buff(pH3.5水、醋酸鹽樣品樣品管樣品管同上標(biāo)準(zhǔn)液（一定量） 對(duì)照管對(duì)照管結(jié)果觀察結(jié)果觀察 樣品 對(duì)照生成有色的硫化物，生成有色的硫化物，觀察顏色的變化觀察顏色的變化3注意注意 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度：標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度：27ml溶液中溶液中Pb

19、2+標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液10 g/ml 12ml 溶液的溶液的pH： pH在在3.03.5時(shí)時(shí), 呈色較完全呈色較完全. 供試品溶液有顏色時(shí)的處理供試品溶液有顏色時(shí)的處理a.外消色法：外消色法：. 稀焦糖溶液調(diào)節(jié)，稀焦糖溶液調(diào)節(jié)， . 指示劑調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié)b.內(nèi)消色內(nèi)消色 作樣品管硫代乙酰胺第二份作對(duì)照管溶液標(biāo)準(zhǔn)濾液硫代乙酰胺第一份，分成二等份兩倍量的供試品除去 Pb pH3.5PbS過(guò)濾v （二）第二法（熾灼破壞后檢查重金屬）（二）第二法（熾灼破壞后檢查重金屬） 本法本法適用于含芳香環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸及乙醇的適用于含芳香環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物的重金屬檢查有機(jī)藥物的重金

20、屬檢查。先熾灼破壞有機(jī)結(jié)構(gòu)，得到重金屬鹽。先熾灼破壞有機(jī)結(jié)構(gòu)，得到重金屬鹽或氧化物殘?jiān)?，然后同第一法檢查。熾灼溫度為或氧化物殘?jiān)?，然后同第一法檢查。熾灼溫度為500600。v （三）第三法（硫化鈉法）（三）第三法（硫化鈉法） 本法本法適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物物。在氫氧化鈉堿性條件下加硫化鈉試液（顯色劑），比色，。在氫氧化鈉堿性條件下加硫化鈉試液（顯色劑），比色，檢查重金屬。檢查重金屬。v （四）第四法（微孔濾膜法）（四）第四法（微孔濾膜法） 本法本法適用于含適用于含25 g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查重金屬雜質(zhì)及有色供試液的

21、檢查。因重金屬限量低，用納氏比色管難以觀察比較，改用此法，重因重金屬限量低，用納氏比色管難以觀察比較，改用此法，重金屬硫化物沉淀富集于濾膜上，比較其色斑，以提高檢測(cè)的靈金屬硫化物沉淀富集于濾膜上，比較其色斑，以提高檢測(cè)的靈敏度。敏度。5. 砷鹽檢查法砷鹽檢查法中國(guó)藥典中國(guó)藥典采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法。采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸銀法。（一）古蔡法（一）古蔡法1原理原理 利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與供試品中微量利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與供試品中微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與同

22、等條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成色至棕色的砷斑，與同等條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較，判斷供試品中的砷鹽是否超過(guò)限量。的砷斑比較，判斷供試品中的砷鹽是否超過(guò)限量。323333AsHZnHZnAs32233393AsHOHZnHZnAsO3223444114AsHOHZnHZnAsO砷化氫與溴化汞試紙反應(yīng)，生成砷斑的反應(yīng)如下：（黃色）223)(22HgBrAsHHBrHgBrAsH（棕色）323)(33HgBrAsHHBrHgBrAsH 閱讀標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備（閱讀標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備（P61），回答如下），回答如下問(wèn)題：?jiǎn)栴}： 導(dǎo)氣管中填充醋酸鉛棉花的作用是什么？導(dǎo)氣管中填充醋酸鉛棉花的作用是什么

23、？ Zn和和HCl的作用是（的作用是（ ）？）？ A.產(chǎn)生產(chǎn)生AsH3 B.調(diào)節(jié)酸度調(diào)節(jié)酸度 C.生成新生態(tài)生成新生態(tài)H2 D.使使As5+ As3+ 與溴化汞試紙生成砷斑的物質(zhì)是與溴化汞試紙生成砷斑的物質(zhì)是（）？（）？ A.HgBr2 B. AsH3 C. H2S D. SnCl2 碘化鉀和氯化亞錫的作用是（）？碘化鉀和氯化亞錫的作用是（）？ A.有利于有利于AsH3生成生成 B. 抑制抑制SbH3生成生成 C. 除去除去H2S 干擾干擾 D. 將將As5+還原成還原成 As3+ E.使氫氣均勻連續(xù)的產(chǎn)生使氫氣均勻連續(xù)的產(chǎn)生 溴化汞試紙的作用是（）？溴化汞試紙的作用是（）？ A.消除消除H2

24、S干擾干擾 B.與與SbH3形成色斑形成色斑 C.與與AsH3形成色斑形成色斑 D.消除砷化氫的干擾消除砷化氫的干擾（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法（二）二乙基二硫代氨基甲酸銀法【Ag（DDC）法）法】 1原理原理第一步：同第一步：同古蔡氏法古蔡氏法生成砷化氫生成砷化氫第二步：砷化氫還原第二步：砷化氫還原Ag-DDC溶液溶液,產(chǎn)生產(chǎn)生紅色的紅色的膠態(tài)銀膠態(tài)銀. 目視比色法目視比色法 儀器分析儀器分析 510nm，可定量可定量6. 干燥失重干燥失重藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，包括水包括水分及其他揮發(fā)性成分。分及其他揮發(fā)性成分。檢查方法檢查方法

25、v常壓恒溫干燥（烘干法）常壓恒溫干燥（烘干法）受熱較穩(wěn)定的中藥制劑受熱較穩(wěn)定的中藥制劑 恒重：連續(xù)恒重：連續(xù)2次干燥后的重量次干燥后的重量差異不超過(guò)差異不超過(guò)0.3mg，間隔，間隔1h1g1g；105105，3h-1h3h-1h注意：溫度降至注意：溫度降至70708080時(shí)取出時(shí)取出檢查方法檢查方法v干燥劑干燥干燥劑干燥 受熱易分解或揮發(fā)的供試品受熱易分解或揮發(fā)的供試品 變色硅膠，五氧化二磷，無(wú)水氯化鈣等干燥劑變色硅膠，五氧化二磷，無(wú)水氯化鈣等干燥劑v減壓干燥減壓干燥熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的供試品熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的供試品干燥器的使用干燥器的使用7. 水分測(cè)定法水分測(cè)定

26、法檢查方法檢查方法v費(fèi)休氏法費(fèi)休氏法v甲苯法甲苯法-含揮發(fā)性成分的供試品含揮發(fā)性成分的供試品v烘干法烘干法-不含或含少量揮發(fā)性成分的不含或含少量揮發(fā)性成分的供試供試v減壓干燥減壓干燥-含揮發(fā)性成分的貴重藥品含揮發(fā)性成分的貴重藥品v氣相色譜法氣相色譜法-散劑、顆粒劑、丸劑、散劑、顆粒劑、丸劑、片劑等片劑等各類(lèi)型制劑中各類(lèi)型制劑中微量水分微量水分的測(cè)定的測(cè)定 二部二部一部一部Karl Fischer滴定基本理論滴定基本理論卡爾費(fèi)休法簡(jiǎn)稱(chēng)費(fèi)休氏法，是1935年卡爾費(fèi)休(KarlFj scher)提出的測(cè)定水分的容量分析方法。費(fèi)休法是測(cè)定物質(zhì)水分的各類(lèi)化學(xué)方法中，對(duì)水最為專(zhuān)一、最為準(zhǔn)確的方法。Karl

27、 Fischer 1901 - 19581.費(fèi)休氏法化學(xué)反應(yīng)原理費(fèi)休氏法化學(xué)反應(yīng)原理化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)I 2 + SO2 +H2O 2HI+SO3吡啶存在時(shí)吡啶存在時(shí)無(wú)水吡啶能定量地吸收無(wú)水吡啶能定量地吸收HI和和SO3，生成氫碘酸吡啶和亞硫酸吡啶。生成氫碘酸吡啶和亞硫酸吡啶。C5H5NI2+ C5H5NSO2+C5H5N+ H2O 2C5H5NHI+C5H5NSO3 亞硫酸吡啶不穩(wěn)定，能與水發(fā)生副反應(yīng)，消亞硫酸吡啶不穩(wěn)定，能與水發(fā)生副反應(yīng)，消耗一部分水，因而干擾測(cè)定。如下反應(yīng)：耗一部分水，因而干擾測(cè)定。如下反應(yīng)：C5H5NSO3+ H2O C5H5NHSO4 H加入無(wú)水甲醇避免了上述副反應(yīng)的發(fā)

28、生。加入無(wú)水甲醇避免了上述副反應(yīng)的發(fā)生。 C5H5NSO3+CH3OH C5H5NHSO4CH3綜上總的反應(yīng)式綜上總的反應(yīng)式: : C5H5NI 2+C5H5NSO2 +C5H5N+CH3OH+H2O 2C5H5NHI +C5H5NHSO4CH3v終點(diǎn)指示法有兩種：終點(diǎn)指示法有兩種： 碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能與水起定量碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能與水起定量反應(yīng)，當(dāng)水完全消耗掉，稍有過(guò)量的費(fèi)休氏試劑反應(yīng)，當(dāng)水完全消耗掉，稍有過(guò)量的費(fèi)休氏試劑使溶液由淡黃色變成淺紅棕色。使溶液由淡黃色變成淺紅棕色。 永停滴定法。永停滴定法。v另作空白試驗(yàn)另作空白試驗(yàn)2.2.費(fèi)休氏水分測(cè)定電化學(xué)反應(yīng)原理費(fèi)

29、休氏水分測(cè)定電化學(xué)反應(yīng)原理 一旦所有的水都與碘進(jìn)行了反應(yīng)，滴定杯中的混和液里就會(huì)有游離態(tài)的碘，此游離碘將促使離子導(dǎo)電并且降低電壓，以使極化電流穩(wěn)定，當(dāng)電壓降至某一設(shè)定值時(shí)，滴定終止。水分測(cè)定儀的基本操作步驟水分測(cè)定儀的基本操作步驟1.1.準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作 2.2.加入試劑加入試劑 3.3.預(yù)滴定、標(biāo)定和漂移值測(cè)定預(yù)滴定、標(biāo)定和漂移值測(cè)定 4.4. 供試品水分測(cè)定供試品水分測(cè)定 5.5.關(guān)機(jī)關(guān)機(jī) 1.KF1.KF滴定的優(yōu)越性滴定的優(yōu)越性( (與其它幾種水分測(cè)定比較與其它幾種水分測(cè)定比較) )卡氏水分測(cè)定法卡氏水分測(cè)定法干燥失重（常壓、減壓）干燥失重（常壓、減壓）甲苯法（中藥）甲苯法（中藥）應(yīng)用廣

30、泛（適用于應(yīng)用廣泛（適用于多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)多種有機(jī)物和無(wú)機(jī)物，還包括遇熱易物，還包括遇熱易破壞的藥品破壞的藥品 ）烘箱干燥（對(duì)熱較穩(wěn)定藥品）烘箱干燥（對(duì)熱較穩(wěn)定藥品）減壓干燥（使用對(duì)熱較不穩(wěn)定減壓干燥（使用對(duì)熱較不穩(wěn)定或水分較難除盡的）或水分較難除盡的）含揮發(fā)性成分藥品含揮發(fā)性成分藥品適合于適合于ppm級(jí)至級(jí)至100水含量水含量100100水含量水含量100100水含量水含量檢測(cè)快速檢測(cè)快速 檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)操作簡(jiǎn)易結(jié)果準(zhǔn)操作簡(jiǎn)易結(jié)果準(zhǔn)確確操作簡(jiǎn)單，但精密度準(zhǔn)確度不操作簡(jiǎn)單，但精密度準(zhǔn)確度不夠高夠高操作存在甲苯用量操作存在甲苯用量大，毒性大大，毒性大不受地方限制不受地方

31、限制 受地方限制受地方限制受地方限制受地方限制(1)(1)試劑對(duì)水的作用靈敏性和專(zhuān)一性高，是試劑對(duì)水的作用靈敏性和專(zhuān)一性高，是較理想的水分測(cè)定方法。較理想的水分測(cè)定方法。(2)(2)適用于遇熱易分解的物質(zhì)或含有揮發(fā)性適用于遇熱易分解的物質(zhì)或含有揮發(fā)性成分的供試品的水分測(cè)定。成分的供試品的水分測(cè)定。(3)(3)費(fèi)休氏試劑本身可以作為指示劑，也可費(fèi)休氏試劑本身可以作為指示劑，也可用永停滴定法指示終點(diǎn)。用永停滴定法指示終點(diǎn)。2.KF滴定的特點(diǎn)滴定的特點(diǎn)8. 熾灼殘?jiān)鼰胱茪堅(jiān)?、定義：有機(jī)物經(jīng)高溫?zé)胱坪髿埩舻姆菗]發(fā)性物、定義：有機(jī)物經(jīng)高溫?zé)胱坪髿埩舻姆菗]發(fā)性物及雜質(zhì)，多為金屬的氧化物或無(wú)機(jī)鹽類(lèi)。及雜質(zhì)

32、，多為金屬的氧化物或無(wú)機(jī)鹽類(lèi)。2、操作：供試品操作：供試品1.02.0g 置已恒重的坩堝中置已恒重的坩堝中 精密稱(chēng)定精密稱(chēng)定 熾灼至炭化熾灼至炭化放冷放冷 硫酸硫酸0.51ml使?jié)駶?rùn)使?jié)駶?rùn) 低溫除盡硫酸蒸氣低溫除盡硫酸蒸氣700800至灰化至灰化 精密稱(chēng)定精密稱(chēng)定 恒重恒重3、注意：如需將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查，則熾灼溫度、注意：如需將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查，則熾灼溫度必須控制在必須控制在500600。 間隔間隔30min。9.灰分測(cè)定灰分測(cè)定1、總灰分：、總灰分：藥品經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一瑒t其細(xì)胞藥品經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一?，則其細(xì)胞組織及其內(nèi)含物成為灰燼而殘留，由此所得灰分為組織及其內(nèi)

33、含物成為灰燼而殘留，由此所得灰分為“生理灰生理灰分分”，即總灰分，即總灰分 2酸不溶性灰分酸不溶性灰分：藥品經(jīng)高溫?zé)胱频玫降目偦曳旨欲}酸處藥品經(jīng)高溫?zé)胱频玫降目偦曳旨欲}酸處理，得到不溶于鹽酸的灰分，成為酸不溶性灰分。理，得到不溶于鹽酸的灰分，成為酸不溶性灰分。 注意：當(dāng)灰分本身差異較大時(shí)，增加酸不溶性灰分的測(cè)定注意：當(dāng)灰分本身差異較大時(shí)，增加酸不溶性灰分的測(cè)定10. 有害元素檢查法有害元素檢查法v有害元素系指有害元素系指鉛、鎘、砷、汞、銅鉛、鎘、砷、汞、銅v藥典一部增加該法，并規(guī)定了有害元素的限度藥典一部增加該法，并規(guī)定了有害元素的限度（1）原子吸收分光光度法）原子吸收分光光度法 鉛、鎘的測(cè)定

34、鉛、鎘的測(cè)定(石墨爐法石墨爐法) 砷的測(cè)定砷的測(cè)定(氧化物法氧化物法) 采用適宜的氫化物發(fā)生裝置采用適宜的氫化物發(fā)生裝置 汞的測(cè)定汞的測(cè)定(冷吸收法冷吸收法) 采用適宜的氫化物發(fā)生裝置采用適宜的氫化物發(fā)生裝置 銅的測(cè)定銅的測(cè)定(火焰法火焰法) 空氣空氣-乙炔火焰乙炔火焰（2）電感耦合等離子體質(zhì)譜法（）電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)v 國(guó)家對(duì)外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部發(fā)部頒布國(guó)家對(duì)外貿(mào)易經(jīng)濟(jì)合作部發(fā)部頒布v重金屬總量重金屬總量200mgkg鉛（鉛（Pb）50mgkg鎘（鎘（Cd）03mgkg汞（汞（Hg）02mgkg銅（銅（Cu） 2

35、00mgkg砷（砷（As） 20mgkg 重金屬元素檢驗(yàn)不合格案例分析重金屬元素檢驗(yàn)不合格案例分析（鉛、鎘、砷、汞）（鉛、鎘、砷、汞）1、鉛、鎘不合格鉛、鎘不合格 已很少見(jiàn)，但仍然有。原料檢驗(yàn)是否做到位，已很少見(jiàn)，但仍然有。原料檢驗(yàn)是否做到位，特別是本底值含量比較高的原料更要小心！特別是本底值含量比較高的原料更要小心！ 見(jiàn)于以茶葉、海藻為原料的保健產(chǎn)品見(jiàn)于以茶葉、海藻為原料的保健產(chǎn)品 例子例子1 1：某產(chǎn)品，中藥材磨粉，鉛含量很高，浸：某產(chǎn)品，中藥材磨粉，鉛含量很高，浸泡提取則基本檢測(cè)不到鉛。泡提取則基本檢測(cè)不到鉛。例子例子2 2：本身檢驗(yàn)功夫不到家。：本身檢驗(yàn)功夫不到家。2、砷、汞不合格砷、汞不合格 對(duì)比前兩者，多見(jiàn)。對(duì)比前兩者，多見(jiàn)。 海洋，水產(chǎn)為原料產(chǎn)品海洋，水產(chǎn)為原料產(chǎn)品 海洋及水產(chǎn)品中含量很高海洋及水產(chǎn)品中含量很高 動(dòng)物性產(chǎn)品的含量難做動(dòng)物性產(chǎn)品的含量難做 三、特殊雜質(zhì)的檢查方法三、特殊雜質(zhì)的檢查方法 藥物中的特殊雜質(zhì)一般是該藥物在生產(chǎn)和儲(chǔ)藥物中的特殊雜質(zhì)一般是該藥物在生產(chǎn)和儲(chǔ)存過(guò)程中引入的原料、副產(chǎn)物、中間體、分解存過(guò)程中引入的原