實(shí)驗(yàn)三根系活力的測(cè)定

1、2022-3-191實(shí)驗(yàn)三：根系活力的測(cè)定 （一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙饬x（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙饬x （二）實(shí)驗(yàn)原理（二）實(shí)驗(yàn)原理 （三）實(shí)驗(yàn)步驟（三）實(shí)驗(yàn)步驟 （四）（四）實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告2022-3-192實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x 掌握根系活力測(cè)定的方法2022-3-193實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 氯化三苯基四氮唑（ TTC ）是標(biāo)準(zhǔn)氧化電位為 80 mV 的氧化還原色素，溶于水中成為無(wú)色溶液，但還原后即生成紅色而不溶于水的三苯甲 （ TTF ）生成的三苯甲 （ TTF ）比較穩(wěn)定，不會(huì)被空氣中的氧自動(dòng)氧化，所以 TTC 被廣泛用作酶試驗(yàn)的氫受體，植物根系中脫氫酶所引起的 TTC 還原，可因加入琥珀酸、延胡索

2、酸、蘋(píng)果酸得到增強(qiáng)，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC 還原量能表示脫氫酶活性，并作為根系活力的指標(biāo)。2022-3-194實(shí)驗(yàn)材料和器材實(shí)驗(yàn)材料和器材 試劑 乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸鈉粉末、1TTC、1/15mol/LpH7.0磷酸緩沖液、1mol/L硫酸 實(shí)驗(yàn)材料 蒜根 器材 分光光度計(jì)、分析天平、恒溫水浴鍋、研缽、漏斗個(gè)、移液管、比色管、10ml容量瓶、50ml燒杯2022-3-195實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟（ 2 ）稱(chēng)取根尖樣品 0.5 g ，放入小燒杯中，加入 0.4 TTC 溶液和磷酸緩沖液（ pH7.0 ）各 5 mL ，使根充分浸沒(méi)在溶液內(nèi)，在 37 下暗保溫 1 2 h ，此后立

3、即加入 1 mol/L 硫酸 2 mL ，以停止反應(yīng)。（與此同時(shí)做一空白實(shí)驗(yàn)，先加硫酸，再加根樣品， 37 下暗保溫后不加硫酸，其溶液濃度、操作步驟同上）。 （ 1 ） TTC 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作 取 0.4 TTC 溶液 0.2 mL 放入大試管中，加 9.8 mL 乙酸乙酯，再加少許 Na 2 S 2 O 4 粉末搖勻，則立即產(chǎn)生紅色的 TTF 。此溶液濃度為每毫升含有 TTF 80 g 。分別取此溶液 0.25 mL 、 0.50 mL 、 1.00 mL 、 1.50 mL 、 2.00 mL 置 10 mL 刻度試管中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含 TTF 20 g 、 40 g 、 80 g 、 120 g 、 160 g 的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，以乙酸乙酯作參比，在 485 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。2022-3-196實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟 （ 3 ）把根取出，用濾紙吸干水分，放入研缽中，加乙酸乙酯 3 4 mL ，充分研磨，以提出 TTF 。把紅色提取液移入刻度試管，并用少量乙酸乙酯把殘?jiān)礈?2 3 次，皆移入刻度試管，最后加乙酸乙酯使總量為 10 mL ，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng) 485 nm 下比色，以空白試驗(yàn)作參比測(cè)出