HPV分型檢測的臨床應(yīng)用-基礎(chǔ)版

1、 宮頸癌宮頸癌全球聚焦v 宮頸癌成為發(fā)展中國家婦女健康和生命的“頭號殺手頭號殺手”v 宮頸癌的發(fā)病趨于年輕化，發(fā)病年齡一般在40-60歲v 2006年世界衛(wèi)生組織指出：如不采取措施，未來10年內(nèi)因子宮頸癌導(dǎo)致的死亡病例將上升25% 宮頸癌宮頸癌中國關(guān)注v 宮頸癌預(yù)防已納入國家醫(yī)改、重大公共衛(wèi)生項目和十一五國家重大支撐計劃 宮頸癌與宮頸癌與HPVHPV昨日回眸宮頸癌與宮頸癌與HPVHPV昨日回眸宮頸癌成為目前癌癥中： HPV HPV病毒學(xué) HPV HPV基因結(jié)構(gòu)HPV16早期區(qū)（早期區(qū)（E E區(qū)）區(qū)）含含6 6個基因，個基因，是維持病毒復(fù)制、是維持病毒復(fù)制、編碼病毒蛋白、編碼病毒蛋白、維持細(xì)胞內(nèi)

2、病毒維持細(xì)胞內(nèi)病毒高拷貝數(shù)的基因高拷貝數(shù)的基因晚期區(qū)（晚期區(qū)（L L區(qū)）區(qū)）含兩個結(jié)構(gòu)蛋白最保守的區(qū)域長控制區(qū)（長控制區(qū)（LCRLCR）E6E6 通過抑制p53p53而阻斷凋亡E7E7 通過抑制pRB使細(xì)胞周期失控E2E2：負(fù)性調(diào)節(jié)E6和E7，維持凋亡和細(xì)胞周期的調(diào)控。病毒整合時會破壞E2基因的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致失活E4E4：結(jié)合并破壞中表層細(xì)胞角蛋白網(wǎng)，形成中表層細(xì)胞的挖空外觀L2:L2:次要衣殼蛋白抗體主要識別位點(diǎn)L1:L1: 主要衣殼蛋白，疫苗研發(fā)的主要成分 HPV HPV病毒分類 以病毒基因組中L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性同源性作為分類依據(jù)：n 屬：L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性在同源性在6

3、0%60%以下以下L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性介于同源性介于60%60%70%70%L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性介于同源性介于7171% %89%89%L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性介于同源性介于9090% %98%98%L1L1區(qū)區(qū)DNADNA同源性大于同源性大于98%98%HPV16HPV16型下分類型下分類v HPV16多態(tài)現(xiàn)象導(dǎo)致的變異可根據(jù)地域不同，分為歐洲型（E）、非洲型（Af）、亞洲型（As）以及亞-美型（AA）。v 不同變異可導(dǎo)致某些人群罹患宮頸疾病的風(fēng)險增加。比如 AA具有較高的致癌性，主要體現(xiàn)在從原發(fā)感染至腫瘤形成僅需要不到3年的時間。 HPV HPV HPV HPVH

4、PV分型（2009） HPV HPV型別分布 HPV HPV型別分布HPV引發(fā)的癌癥 HPV HPVHPVHPV與宮頸癌與宮頸癌感染途徑HPVHPV與宮頸癌與宮頸癌HPV的入侵病毒通過皮膚或粘膜的微創(chuàng)口進(jìn)入表層，然后感染基底層或副基底層細(xì)胞，并以附加體的形式在宿主細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制。病毒的復(fù)制依賴于上皮細(xì)胞的分化，在基底層上層細(xì)胞中開始復(fù)制，在表皮細(xì)胞中裝配，當(dāng)這些表皮細(xì)胞脫落時，在皮膚表面可發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。HPVHPV與宮頸癌與宮頸癌細(xì)胞、組織的改變一過性一過性HPV感染感染持續(xù)性持續(xù)性HPV感染感染正常宮正常宮頸頸感染感染清除清除HPV 感染感染演進(jìn)演進(jìn)消退消退癌前病癌前病變變癌癌浸浸潤潤 Tra

5、nsient infectionHPV infectionPersistent infectionLow-Grade DysplasiaCIN1High-Grade DysplasiaCIN2/3InvasiveCancer1 yearOver 2 years2-5 years4-5 years9-10 yearsHPVHPV與宮頸癌與宮頸癌影響因子n 多個性伴侶多個性伴侶n 口服避孕藥口服避孕藥n HIVHIV、STISTI感染感染n 免疫缺陷免疫缺陷n 多產(chǎn)、密產(chǎn)多產(chǎn)、密產(chǎn)n 吸煙等吸煙等宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查篩查現(xiàn)狀宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查篩查對象v 所有女性應(yīng)在有性生活所有女性應(yīng)在有

6、性生活3 3年開始做宮頸癌篩查年開始做宮頸癌篩查 （最晚不超過（最晚不超過2121歲）歲） 2009.1 NCCN子宮頸癌篩查臨床實(shí)踐指南 2003衛(wèi)生部宮頸癌篩查及早診早治指南v 高危婦女人群高危婦女人群：多個性伴侶、性生活過早、HIV/HPV感染、免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識缺乏的婦女v 決定妊娠的婦女決定妊娠的婦女案例分享案例分享女，28歲，孕前體檢，醫(yī)生建議其進(jìn)行宮頸癌的篩查，拒絕。后懷孕5個月出現(xiàn)流血癥狀，疑為先兆流產(chǎn)，進(jìn)行保胎處理；保胎至7個月大出血，后組織病理切片確診為宮頸癌。產(chǎn)后手術(shù)治療不理想，于寶寶一周歲多死亡。 廣東省婦幼保健院著名影星李媛媛，2002年因?qū)m頸癌在北

7、京病逝，撇下了她一歲的兒子和心愛的觀眾。宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查技術(shù)的發(fā)展1943年巴氏涂片應(yīng)用于宮頸癌的篩查1988年TCT應(yīng)用于宮頸癌的篩查2003年高危HPV(HC2)應(yīng)用于宮頸癌的篩查(輔助)2004年中國指南HPV+TCT為最佳宮頸癌篩查手段2007年歐洲EUROGIN 推薦HPV作為宮頸癌篩查首選手段2011年HPV分型檢測是國際公認(rèn)最重要的宮頸癌篩查手段2005年IARC/WHO推薦HPV檢測可以用于宮頸癌篩查2006年HPV分型檢測（凱普）應(yīng)用于宮頸癌篩查宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查巴氏涂片及TCT的應(yīng)用v 對婦女健康作出很大貢獻(xiàn)v 局限性: 取樣誤差 / 制片誤差 / 讀片誤差v

8、 敏感性差、假陰性率高（2%50%）、假陽性率高、漏診多v 可重復(fù)性差，受閱片人主觀影響正常高度病變HSIL低度病變LSIL癌變Cancer宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查v 準(zhǔn)確性97%v 敏感度低，尤其是腺體病變v 重復(fù)性差重復(fù)性差，沒有改變傳統(tǒng)的閱片方式，與人為主觀因素相關(guān)巴氏涂片及TCT的應(yīng)用宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查HPV DNA檢測細(xì)胞學(xué)檢測細(xì)胞學(xué)檢測HPV DNAHPV DNA檢測檢測對細(xì)胞形態(tài)改變的檢查手段對病原體檢查手段針對結(jié)果，評估臨床階段針對病因，評估發(fā)病風(fēng)險敏感性相對稍低敏感性高方法不易質(zhì)控方法易于質(zhì)控宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查有充足的證據(jù)表明：HPV DNA檢測可作為子宮頸癌的初

9、篩手段，并可以降低子宮頸癌的發(fā)病率和死亡率。-IARC/WHO，2005HPV檢測為首選大規(guī)模篩查手段 任何篩查項目的初篩都應(yīng)該采用 過分強(qiáng)調(diào)特異性，會使篩查工作墮入美國式的怪圈：檢查越來越多，查出得越來越少，成本卻越來越高 。Belinson-國際防癌組織主席國際防癌組織主席宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查首選HPV檢測歐洲生殖道感染和腫瘤組織（歐洲生殖道感染和腫瘤組織（EUROGIN)2007EUROGIN)2007年提出的宮頸癌篩查方案年提出的宮頸癌篩查方案宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查HPV分型的應(yīng)用專家意見2012AOGIN會議調(diào)查結(jié)果：會議調(diào)查結(jié)果：問題：對細(xì)胞學(xué)檢查陰性

10、的患者進(jìn)行基因問題：對細(xì)胞學(xué)檢查陰性的患者進(jìn)行基因分型有意義么？分型有意義么？1.錯誤錯誤-基因分型并不能帶來益處基因分型并不能帶來益處 14%2.正確正確-基因分型可以帶來益處基因分型可以帶來益處 86%Sun-Kuie Tay20122012亞太生殖道感染與腫瘤會議（亞太生殖道感染與腫瘤會議（AOGIN 2012AOGIN 2012）HPVHPV分型檢測分型檢測HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于區(qū)分一過性感染或持續(xù)性感染區(qū)分一過性感染或持續(xù)性感染n 在對丹麥2029歲婦女進(jìn)行HPV檢測時發(fā)現(xiàn)：間隔18個月2次檢測HPV，相同基因型的HSIL發(fā)病風(fēng)險明

11、顯高于不同基因型。（Susanne K Kjaer,et al. BMJ. 2001: 325: 7364.）v HPV持續(xù)性感染：如果在間隔4-6 個月或 6-12個月的相鄰2次隨訪中，同一患者的陰道宮頸檢測樣本均顯示HPV 陽性且為同種類型，則稱為此種類型 HPV 的持續(xù)性感染.Koshiol et al. Persistent Human Papillomavirus Infection and Cervical Neoplasia: A Systematic Review and Meta-Analysis。Am J Epidemiol 2008;168:123137 47 47歲，歲

12、，20102010年年8 8月病患到宮頸門診檢查，當(dāng)時的她已行子宮次全切月病患到宮頸門診檢查，當(dāng)時的她已行子宮次全切除手術(shù)后兩年，做除手術(shù)后兩年，做HPVHPV分型檢測，結(jié)果為分型檢測，結(jié)果為HPV58HPV58型陽性，細(xì)胞學(xué)檢測型陽性，細(xì)胞學(xué)檢測為陰道炎癥，陰道鏡檢測為為陰道炎癥，陰道鏡檢測為CINCIN- -。對該病患進(jìn)行隨訪觀察，一年。對該病患進(jìn)行隨訪觀察，一年后，病患做后，病患做HPVHPV分型檢測，結(jié)果仍為分型檢測，結(jié)果仍為HPV58HPV58型陽性，細(xì)胞學(xué)檢測為陰型陽性，細(xì)胞學(xué)檢測為陰道炎癥，考慮到該病患為道炎癥，考慮到該病患為HPVHPV高危陽性的持續(xù)感染，決定對其行高危陽性的持

13、續(xù)感染，決定對其行LeepLeep診斷性錐切及組織性活檢，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該病患為宮頸原位癌診斷性錐切及組織性活檢，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該病患為宮頸原位癌(CINIII)(CINIII)。上海市松江婦幼保健院上海市松江婦幼保健院 案例分享案例分享李女士，李女士，2525歲，歲，20082008年年2 2月到廣東省婦幼就診，發(fā)現(xiàn)月到廣東省婦幼就診，發(fā)現(xiàn)HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：良性反應(yīng)改變。宮頸重度糜爛。陰道鏡：良性反應(yīng)改變。宮頸重度糜爛。陰道鏡：CINCIN，病理，病理CINCIN，并，并進(jìn)行了宮頸錐切術(shù)。進(jìn)行了宮頸錐切術(shù)。20082008年年9 9月隨訪，持續(xù)月隨訪，持續(xù)HPV16HPV

14、16（+ +），），TCTTCT：HSILHSIL，陰道鏡：陰道鏡：CINCIN，病例，病例，CINCIN累腺。累腺。20082008年年11 11月隨訪，月隨訪，HPV16HPV16（+ +），），由于懷孕拒絕宮頸活檢。由于懷孕拒絕宮頸活檢。20102010年年6 6月，產(chǎn)后月，產(chǎn)后9 9個月，宮頸活檢：子宮頸鱗個月，宮頸活檢：子宮頸鱗狀細(xì)胞癌。狀細(xì)胞癌。 廣東省婦幼保健院宮頸病變中心毛玲芝教廣東省婦幼保健院宮頸病變中心毛玲芝教授授案例分享案例分享 女性，女性，2525歲，歲，20082008年年2 2月月2727日，日，HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：良性：良性反應(yīng)改變。

15、宮頸重度糜爛。陰道鏡：反應(yīng)改變。宮頸重度糜爛。陰道鏡：CINICINI，病理，病理CINIICINII，行了宮，行了宮頸錐切術(shù)。頸錐切術(shù)。20082008年年9 9月月HPV16HPV16（+ +），），TCTTCT：HSILHSIL，陰道鏡，陰道鏡CIN2CIN2，病理：，病理：CINIICINII，累腺。，累腺。20082008年年11 11月月HPV16HPV16（+ +），拒絕宮），拒絕宮頸活檢。頸活檢。20102010年年6 6月月2828日，產(chǎn)后日，產(chǎn)后9 9個月，宮頸活檢：子宮頸鱗狀個月，宮頸活檢：子宮頸鱗狀細(xì)胞癌。廣泛全子宮切除加盆腔淋巴結(jié)清掃，病理：子宮頸鱗細(xì)胞癌。廣泛全子宮

16、切除加盆腔淋巴結(jié)清掃，病理：子宮頸鱗狀細(xì)胞癌（中分化型），位于宮頸上唇（狀細(xì)胞癌（中分化型），位于宮頸上唇（12-112-1點(diǎn)），潰瘍型點(diǎn)），潰瘍型, ,癌癌組織浸潤宮頸間質(zhì)淺層組織浸潤宮頸間質(zhì)淺層, ,潰瘍處浸潤深度約潰瘍處浸潤深度約5mm5mm，寬約，寬約1cm1cm。此。此例是例是HPV16HPV16持續(xù)陽性兩年最后導(dǎo)致宮頸癌。持續(xù)陽性兩年最后導(dǎo)致宮頸癌。 廣東省婦幼保健院廣東省婦幼保健院案例分享案例分享n 早期的文獻(xiàn)報道，HPV的多重感染與宮頸癌直接相關(guān)。n 現(xiàn)在越來越多的報道發(fā)現(xiàn)，HPV的多重感染與宮頸癌之間，不存在顯著性的關(guān)系。潮州宮頸癌篩查工程潮州宮頸癌篩查工程-廣東省婦幼保健院

17、廣東省婦幼保健院 毛玲芝毛玲芝HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于區(qū)分單一感染或多重感染區(qū)分單一感染或多重感染女，女，4141歲，歲，20102010年做婦科檢查，年做婦科檢查，HPVHPV為多重感染，為多重感染，TCT(-)TCT(-)，醫(yī)生建，醫(yī)生建議半年后復(fù)查。議半年后復(fù)查。20112011年年3 3月患者進(jìn)行復(fù)查，月患者進(jìn)行復(fù)查，TCT(-)，HPVHPV感染型別比原感染型別比原來少了兩個，病人因為少了兩個型別很高興，但婦科主任很重視，建來少了兩個，病人因為少了兩個型別很高興，但婦科主任很重視，建議其進(jìn)行活檢，陰道鏡下宮頸表面光滑，無任何異樣，主任

18、還建議進(jìn)議其進(jìn)行活檢，陰道鏡下宮頸表面光滑，無任何異樣，主任還建議進(jìn)行多點(diǎn)隨機(jī)組織取樣，檢查結(jié)果為原位癌，病人隨后被送到省腫瘤醫(yī)行多點(diǎn)隨機(jī)組織取樣，檢查結(jié)果為原位癌，病人隨后被送到省腫瘤醫(yī)院，婦科主任親自手術(shù)，現(xiàn)已痊愈、恢復(fù)出院。院，婦科主任親自手術(shù)，現(xiàn)已痊愈、恢復(fù)出院。 分析：分析： 1 1、HPVHPV持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌的生物學(xué)誘因持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌的生物學(xué)誘因2 2、病人兩次都檢測出、病人兩次都檢測出HPVHPV陽性，但液基細(xì)胞檢測兩次均為陰性，陽性，但液基細(xì)胞檢測兩次均為陰性，說明說明HPVHPV檢測比細(xì)胞學(xué)檢查具有更高更明顯的敏感度。檢測比細(xì)胞學(xué)檢查具有更高更明顯的敏感度。 湖南

19、省湘潭市婦幼保健院湖南省湘潭市婦幼保健院案例分享案例分享n 不同型別的致癌風(fēng)險不同不同的高危型促進(jìn)LSIL向SCC轉(zhuǎn)變的能力有差異。 HPV16，18 的致宮頸癌風(fēng)險性大于其他高危型HPV。HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于陰道鏡適應(yīng)征陰道鏡適應(yīng)征HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于陰道鏡適應(yīng)征陰道鏡適應(yīng)征n 2009/2012年，美國年，美國ASCCP發(fā)布了發(fā)布了HPV 基因分型檢測指南，基因分型檢測指南，明確指出明確指出: 30婦女，細(xì)胞學(xué)未見上皮內(nèi)病變和惡性細(xì)胞，婦女，細(xì)胞學(xué)未見上皮內(nèi)病變和惡性細(xì)胞，;其他其他

20、HPV高危型，則在高危型，則在12個月后重個月后重復(fù)復(fù)HPV DNA檢測和細(xì)胞學(xué)檢查。檢測和細(xì)胞學(xué)檢查。（American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, 2009）n 2010年，年，楊英捷、趙健、畢蕙等人的研究數(shù)據(jù)表明，等人的研究數(shù)據(jù)表明，HPV31、33的致癌風(fēng)險也很高，建議的致癌風(fēng)險也很高，建議HPV31、33直接行陰道鏡檢測直接行陰道鏡檢測 44 44歲女性，歲女性，20082008年年1010月月2424日，婦檢宮頸光滑，滴蟲（日，婦檢宮頸光滑，滴蟲（+ +）HPV16HPV16，5252（+ +），），TCTTCT：炎

21、細(xì)胞中度。未行陰道鏡檢查，：炎細(xì)胞中度。未行陰道鏡檢查，20102010年年1010月月1818日。陰道鏡下宮頸活檢病理日。陰道鏡下宮頸活檢病理: :鱗狀細(xì)胞癌（中分化）。未鱗狀細(xì)胞癌（中分化）。未按規(guī)范篩查及隨訪，導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生。按規(guī)范篩查及隨訪，導(dǎo)致宮頸癌發(fā)生。 廣東省婦幼保健院廣東省婦幼保健院 37 37歲，細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果為非典型腺細(xì)胞（歲，細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果為非典型腺細(xì)胞（AGCAGC）并伴有陰道炎）并伴有陰道炎癥，癥，HPVHPV分型檢測為分型檢測為HPV16HPV16型陽性；醫(yī)生建議病人做陰道鏡及組型陽性；醫(yī)生建議病人做陰道鏡及組織活檢，不過，當(dāng)時病人沒有同意。該病患回去后，考慮再三，

22、織活檢，不過，當(dāng)時病人沒有同意。該病患回去后，考慮再三，兩個月后才來到醫(yī)院宮頸門診做陰道鏡檢查。對該病患做兩個月后才來到醫(yī)院宮頸門診做陰道鏡檢查。對該病患做LeepLeep診診斷性錐切及組織性活檢發(fā)現(xiàn)，該病患為宮頸原位癌斷性錐切及組織性活檢發(fā)現(xiàn)，該病患為宮頸原位癌(CINIII)(CINIII)。 上海市松江婦幼保健院上海市松江婦幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于ASCUSASCUS分層管理分層管理 NCCN 子宮頸癌篩查臨床實(shí)踐指南 (2012)指出：對發(fā)生在成年人的ASC-US&LSIL有3個可供選擇的方案，可選擇HPV-DN

23、A檢測將患者分流、6個月復(fù)查細(xì)胞學(xué)或立即陰道鏡檢查。n 陰道鏡即使按照規(guī)范流程執(zhí)行，依然有30%的漏診HSIL。n 直接陰道鏡檢查或多點(diǎn)病理活檢，引起創(chuàng)傷和過度診治（40-60%）n 重復(fù)細(xì)胞學(xué)檢查，有25%失訪率，此外復(fù)檢會增加病人經(jīng)濟(jì)及精神負(fù)擔(dān)n HPV檢測：為目前的最優(yōu)方法。HPV檢測陰性，可列入常規(guī)篩查人群；如HPV檢測陽性，則考慮配合陰道鏡檢查4141歲女性，歲女性，20102010年年1010月，主訴性交出血，婦檢；宮頸光滑。月，主訴性交出血，婦檢；宮頸光滑。HPV16HPV16（+ +），），LCT ASCUSLCT ASCUS，陰道鏡：宮頸，陰道鏡：宮頸2 2點(diǎn)點(diǎn)0.5mm0.

24、5mm潰瘍，未潰瘍，未見醋白及異型血管。因患者一直有性交出血，一個月后病理：宮見醋白及異型血管。因患者一直有性交出血，一個月后病理：宮頸鱗狀細(xì)胞癌。頸鱗狀細(xì)胞癌。分析：分析：此例此例LCTLCT及陰道鏡均漏診了宮頸癌。及陰道鏡均漏診了宮頸癌。 廣東省婦幼保健院廣東省婦幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于宮頸癌晚期治療手段的選擇宮頸癌晚期治療手段的選擇HPV18Advanced cervical cancerAdding chemo to RT:HPV18,58: improving survivalHPV16,33: minimal

25、 benefitHPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于宮頸病變的隨訪宮頸病變的隨訪n 宮頸病變治療后失敗失敗的主要原因是同一基因型同一基因型HPVHPV的持續(xù)性感染的持續(xù)性感染 據(jù)瑞典的一項研究，針對完成宮頸錐切術(shù)后，術(shù)后隨訪結(jié)果有26例CIN復(fù)發(fā)；22例未復(fù)發(fā)。術(shù)后3個月用PCR方法檢測宮頸細(xì)胞涂片HPV，其中： 26例復(fù)發(fā)者：25例為HPV陽性 22例對照組：全部為HPV陰性n 實(shí)驗說明：宮頸病變治療后檢測HPV-DNA，可預(yù)測殘余病變、估計療效。 HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于宮頸病變的隨訪宮頸病變的隨訪女；

26、年齡女；年齡5454歲。于歲。于20112011年年3 3月月1414日到廣東省婦幼保健院婦科就診，日到廣東省婦幼保健院婦科就診，臨床診斷為臨床診斷為“子宮頸炎子宮頸炎”，行，行HPVHPV分型檢查其結(jié)果為分型檢查其結(jié)果為HPVHPV高危型高危型1616陽性。病人經(jīng)手術(shù)治療后，于同年的陽性。病人經(jīng)手術(shù)治療后，于同年的7 7月月1919日再次到省婦幼婦科就診日再次到省婦幼婦科就診（看診的不是同一醫(yī)生），臨床診斷為（看診的不是同一醫(yī)生），臨床診斷為“子宮頸惡性腫瘤術(shù)后子宮頸惡性腫瘤術(shù)后”，又復(fù)查又復(fù)查HPVHPV分型項目，其結(jié)果則為高危型分型項目，其結(jié)果則為高危型6868陽性，陽性，此標(biāo)本此標(biāo)本再

27、再做做HPV13HPV13熒光檢查其結(jié)果也是陽性，熒光檢查其結(jié)果也是陽性，CTCT值是值是2828. .9 9。針對此問題進(jìn)行分析，得出以下幾點(diǎn)原因：針對此問題進(jìn)行分析，得出以下幾點(diǎn)原因：1 1）此病人重新感染了）此病人重新感染了HPVHPV病毒；病毒；2) 2) 第一次檢查中第一次檢查中HPVHPV的兩種型別產(chǎn)生了競爭性的抑制，術(shù)后優(yōu)勢的兩種型別產(chǎn)生了競爭性的抑制，術(shù)后優(yōu)勢性別性別HPV16HPV16型被去除，型被去除，HPV68HPV68型顯現(xiàn)；型顯現(xiàn)；3 3）兩次檢查醫(yī)生取樣的部位不一致。）兩次檢查醫(yī)生取樣的部位不一致。 廣東省婦幼保健院廣東省婦幼保健院案例分享案例分享 43 43歲女性

28、，于歲女性，于20092009年年4 4月到廣東省婦幼保健院婦檢，月到廣東省婦幼保健院婦檢，HPVHPV分型檢查分型檢查結(jié)果為結(jié)果為HPV16HPV16（+ +），遂行陰道鏡檢查，擬診為），遂行陰道鏡檢查，擬診為HSILHSIL，即進(jìn)行，即進(jìn)行l(wèi)eepleep術(shù)，術(shù)，術(shù)后病理檢查為術(shù)后病理檢查為CIN2CIN2；于；于20102010年年9 9月進(jìn)行復(fù)診，月進(jìn)行復(fù)診，HPVHPV分型檢查結(jié)果為分型檢查結(jié)果為HPV56HPV56（+ +），細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果為低度鱗狀上皮內(nèi)瘤樣病變，陰道鏡檢），細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果為低度鱗狀上皮內(nèi)瘤樣病變，陰道鏡檢查擬診為查擬診為LSILLSIL，病理檢查為，病理檢查為C

29、IN1CIN1，該病情有所減輕。，該病情有所減輕。 31 31歲女性，每年歲女性，每年1 1次定期體檢，于次定期體檢，于20112011年年5 5月體檢時，月體檢時，HPVHPV分型檢查分型檢查結(jié)果為結(jié)果為HPV16HPV16、3333陽性，細(xì)胞學(xué)檢查為陽性，細(xì)胞學(xué)檢查為ASC-USASC-US，行陰道鏡檢查，擬診，行陰道鏡檢查，擬診為為HSILHSIL，病理檢查為，病理檢查為CIN3CIN3，即進(jìn)行錐切；于，即進(jìn)行錐切；于20112011年年1010月進(jìn)行復(fù)診，月進(jìn)行復(fù)診，HPVHPV分型檢查結(jié)果為分型檢查結(jié)果為HPV33HPV33陽性，細(xì)胞學(xué)檢查為低度鱗狀上皮內(nèi)瘤樣陽性，細(xì)胞學(xué)檢查為低度鱗

30、狀上皮內(nèi)瘤樣病變，陰道鏡檢查擬診為病變，陰道鏡檢查擬診為LSILLSIL，病理檢查為，病理檢查為CIN1CIN1，病情減輕，繼續(xù)觀察。，病情減輕，繼續(xù)觀察。 廣東省婦幼保健院廣東省婦幼保健院案例分享案例分享HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應(yīng)用vHPVHPV分型檢測用于分型檢測用于指導(dǎo)疫苗的開發(fā)指導(dǎo)疫苗的開發(fā)n 針對針對衣殼蛋白（衣殼蛋白（L1L1）的的IgGIgG和和IgAIgA中和抗體在病毒感染的早期較為中和抗體在病毒感染的早期較為重要重要-預(yù)防性疫苗預(yù)防性疫苗 默沙東：默沙東：Gardasil（6、11、16、18） 葛蘭素史克：葛蘭素史克： Cervarix（16、18）n 針對針對早期

31、基因（早期基因（E6/E7E6/E7）的細(xì)胞免疫反應(yīng)對最終清除病毒可能更為的細(xì)胞免疫反應(yīng)對最終清除病毒可能更為重要重要-治療性疫苗治療性疫苗宮頸癌的預(yù)防宮頸癌的預(yù)防預(yù)防手段定期進(jìn)行定期進(jìn)行HPV檢測檢測51CE、SFDA認(rèn)證凱普凱普HPV21HPV21分型分型52檢測原理凱普凱普HPV21HPV21分型分型v PCRPCR，Polymerase Chain Reaction（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）v 導(dǎo)流雜交技術(shù)導(dǎo)流雜交技術(shù)（凱普自主創(chuàng)新技術(shù)） 高效、快速、靈敏、準(zhǔn)確導(dǎo)流雜交導(dǎo)流雜交VSVS傳統(tǒng)雜交傳統(tǒng)雜交導(dǎo)流雜交導(dǎo)流雜交VSVS傳統(tǒng)雜交傳統(tǒng)雜交55實(shí)驗過程凱普凱普HPV21HPV21分型分型生物素

32、點(diǎn)生物素點(diǎn)：主要監(jiān)控所采用的雜交雜交體系是否有效；IC點(diǎn)：點(diǎn)：排除由于PCR抑制抑制導(dǎo)致的假陰性實(shí)驗結(jié)果。凱普凱普HPV21HPV21分型分型n對于陰性樣本，只有生物素點(diǎn)和對于陰性樣本，只有生物素點(diǎn)和IC點(diǎn)同點(diǎn)同時顯色才是正常結(jié)果時顯色才是正常結(jié)果。n對于陽性樣本，如果生物素點(diǎn)、對于陽性樣本，如果生物素點(diǎn)、IC點(diǎn)和陽性點(diǎn)和陽性點(diǎn)都顯色，則結(jié)果正常；點(diǎn)都顯色，則結(jié)果正常；n有些陽性樣本，生物素點(diǎn)和陽性點(diǎn)顯色，但有些陽性樣本，生物素點(diǎn)和陽性點(diǎn)顯色，但I(xiàn)C點(diǎn)不顯色，結(jié)果也是正常。點(diǎn)不顯色，結(jié)果也是正常。凱普凱普HPV21HPV21分型分型58產(chǎn)品優(yōu)勢凱普凱普HPV21HPV21分型分型一次可同時得到

33、單一感染或多重感染的豐富信息在一張基因芯片上同時完成對雜交和擴(kuò)增過程的全面監(jiān)控獨(dú)特的導(dǎo)流雜交原理使得操作更便捷，節(jié)約時間在一張基因芯片上可檢出15種高危型和6種低危型分型分型檢測檢測省時省時省力省力雙重雙重對照對照信息信息豐富豐富論文論文科研項目科研項目HPVHPV數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)庫衛(wèi)生部臨檢中心衛(wèi)生部臨檢中心HPVHPV檢測行業(yè)室間評檢測行業(yè)室間評估估WHO HPVWHO HPV網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測評估網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測評估國內(nèi)外核心期刊上發(fā)表文章超過150篇，其中SCI收錄國際論文15篇。參與國家863（北京大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院）和973項目（華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院）以及省市各級地方項目研究20余項。同衛(wèi)生部合作，

34、凱普公司主導(dǎo)，北大附屬第一人民醫(yī)院、武漢同濟(jì)醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院及廣東省婦幼聯(lián)合參與。 中國臨檢中心之前一般只對HPV16和18兩種型別進(jìn)行測試。隨著凱普21基因分型的推廣，促使了中國臨檢中心從2012年5月開始對臨床機(jī)構(gòu)進(jìn)行包含HPV16和18之內(nèi)的多個HPV型別的檢測評估。凱普凱普HPV21HPV21分型分型2010,2011連續(xù)兩年參與WHO HPV網(wǎng)絡(luò)試驗評估，國際上使用凱普21基因分型檢測產(chǎn)品的實(shí)驗室（伊朗、馬來西亞、中國香港、中國上海，中國潮州）檢測結(jié)果同WHO提供的標(biāo)準(zhǔn)品檢測，對16、18檢測靈敏度高。宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查學(xué)術(shù)影響凱普凱普HPV21HPV21分型分型凱

35、普凱普HPV21HPV21分型分型國際評價62市場份額凱普凱普HPV21HPV21分型分型v HPV分型試劑盒作為國內(nèi)遠(yuǎn)銷海外的分型產(chǎn)品，已成功打入到西班牙、日本、土耳其、以色列、印度、尼日利亞、新加坡、馬來西亞等。v 已有在使用凱普HPV分型產(chǎn)品。v 檢測網(wǎng)點(diǎn)遍布，臨床檢測量已達(dá)到。v月經(jīng)期不可采集標(biāo)本。（減少給受檢者的損傷）v月經(jīng)正常婦女，在月經(jīng)來潮后1018天為最佳檢查時間v不可在碘試驗和醋酸試驗之后采集樣本。（可能會抑制PCR反應(yīng)）v檢查前48小時內(nèi)不要作陰道沖洗，不要用避孕藥膏等陰道內(nèi)用藥物。（可能會抑制PCR反應(yīng)）v檢查前48小時最好不要行性生活。（一過性假陽性） v樣本采集后，注

36、意避免交叉污染。注意事項注意事項（1）樣本的采集樣本的采集采集部位樣本的采集樣本的采集uHPV-DNA檢測樣本是子宮頸轉(zhuǎn)化帶的子宮頸轉(zhuǎn)化帶的脫落細(xì)胞脫落細(xì)胞。u妊娠取樣：妊娠取樣：與非妊娠期相比,妊娠期由于高水平性激素的作用,使宮頸鱗柱狀細(xì)胞交界線外移,柱狀上皮暴露于宮頸陰道部,易于取材,并不增加檢查的難度。u妊娠進(jìn)行取樣是安全的（NCCN.2012）v 凱普宮頸細(xì)胞采集器及細(xì)胞保存系統(tǒng)對于采集足夠的宮頸脫落細(xì)胞和長期保存細(xì)胞樣本十分必要。v 為了保證所采集細(xì)胞樣本的質(zhì)量，要求在采集細(xì)胞前先用棉拭子拭去拭去宮頸口的分泌物。宮頸口的分泌物。采集工具樣本的采集樣本的采集v 取樣管上標(biāo)簽的名稱須與患

37、者一一對應(yīng)。v 使用凱普專用取樣器及保存液，可抑制細(xì)菌生長，保持DNA完整性。v 宮頸保存系統(tǒng)包裝打開后，必須立即進(jìn)行采樣，并連同刷頭置于取樣管中。v 樣本收集中為保留足夠的宮頸細(xì)胞標(biāo)本，注意切勿將宮頸刷頭丟棄。v 宮頸刷頭折斷、試驗取樣時，請小心操作，切忌大力震蕩取樣管，造成試劑及樣本濺出影響檢測結(jié)果或造成污染。v 取樣后，切記擰緊取樣管管蓋。樣本的采集樣本的采集注意事項注意事項（2）v 樣本一經(jīng)采集，則應(yīng)盡可能快的送至檢測實(shí)驗室。v 如若不能馬上送檢樣本，請于4保存，并在2個星期之內(nèi)進(jìn)行檢測。v 長期保存請放于-20。注意事項注意事項樣本的保存樣本的保存凱普公司成立12年，致力基因分子診斷

38、研究，并且在人乳頭瘤病毒（HPV）檢測研究方面取得世界領(lǐng)先地位?；诠咀灾髦R產(chǎn)權(quán)的導(dǎo)流雜交技術(shù)平臺（美國專利號：5741647； 6020187）和通用熒光PCR技術(shù)平臺，開發(fā)出了一系列針對宮頸癌早期篩查的HPV檢測產(chǎn)品。 公司系列HPV檢測技術(shù)產(chǎn)品，可以針對臨床檢測和大規(guī)模人群篩查等不同的需求，采用單一產(chǎn)品或者不同的HPV產(chǎn)品組合，在保證靈敏度和特異性的前提下，以最合適的性價比向醫(yī)院、科研或政府部門提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，造福于廣大婦女。凱普公司介紹凱普公司介紹公司定位公司定位凱普公司介紹凱普公司介紹產(chǎn)品及服務(wù)產(chǎn)品及服務(wù)導(dǎo)流雜交導(dǎo)流雜交通用熒光通用熒光PCRPCR平臺平臺 參評產(chǎn)品：參評產(chǎn)品：凱普凱普2121分型、分型、1313熒光高危、熒光高危、1414高危熒光分型（高危熒光分型（12+212+2） 參評實(shí)驗室：參評實(shí)驗室：伊朗、馬來西亞、中國香伊朗、馬來西亞、中國香港、中國上海、中國潮州共提供港、中國上海、中國潮州共提供1010個檢測個檢測數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)。 凱普凱普2121分型分型產(chǎn)品在產(chǎn)品在5 5個實(shí)驗室參加測評個實(shí)驗室參加測評，其中對，其中對HPV16HPV16型別檢測靈敏度型別檢測靈敏度5 5個實(shí)驗室個實(shí)驗室均可達(dá)均可達(dá)5 IU /5l5 IU /5l，對，對HPV18HPV18型別檢測靈敏型別檢測靈敏度度4 4個實(shí)驗室可達(dá)個實(shí)驗室可達(dá)5 IU /5l5 IU /5