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1、經(jīng)穴部位的經(jīng)穴部位的CaCa2+2+是針刺效應(yīng)是針刺效應(yīng)產(chǎn)生的關(guān)鍵因素之一產(chǎn)生的關(guān)鍵因素之一 郭義、王秀云、張艷軍、胡利民郭義、王秀云、張艷軍、胡利民 徐湯徐湯蘋、蘋、 胡鳳慧、苗文方、李桂蘭、李建宇胡鳳慧、苗文方、李桂蘭、李建宇 天津中醫(yī)學(xué)院天津中醫(yī)學(xué)院.中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥國(guó)際學(xué)院中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥國(guó)際學(xué)院張春煦張春煦 陳進(jìn)生陳進(jìn)生 姜萍姜萍南開(kāi)大學(xué)化學(xué)系南開(kāi)大學(xué)化學(xué)系 經(jīng)脈經(jīng)脈臟腑病變的調(diào)節(jié)l1、研究依據(jù)、研究思路、研究依據(jù)、研究思路 穴位針刺 經(jīng)脈者,所以決死生、處百病、調(diào)虛實(shí)經(jīng)脈者,所以決死生、處百病、調(diào)虛實(shí) 靈樞靈樞經(jīng)脈篇經(jīng)脈篇 夫十二經(jīng)脈者、內(nèi)屬于腑臟、外絡(luò)于肢節(jié)夫十二經(jīng)脈者、內(nèi)屬于腑臟、外絡(luò)
2、于肢節(jié) 靈樞靈樞海論篇海論篇 (2)電刺激下丘腦引起的心律失常模型 動(dòng)物:家兔 方法:用腦立體定位器固定家兔頭部,打孔、參 照Sawyer圖將金屬電極插在下丘腦,給于20-30V、60Hz的電刺激 指標(biāo):觀察心電圖一定時(shí)間內(nèi)早搏收縮出現(xiàn)的次數(shù) 穴位:內(nèi)關(guān) 手法:平補(bǔ)平瀉 5分鐘 (3)實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞模型l 動(dòng)物:大鼠l 方法方法:乙醚麻醉后將大鼠固定,胸部備皮、消毒,l 切開(kāi)左胸部皮膚,從第四或第五肋間分離l 肌層,打開(kāi)胸腔、輕輕地壓迫胸廓,擠出l 心臟。從左心耳和動(dòng)脈圓錐之間的冠狀靜l 脈部位結(jié)扎冠 狀動(dòng)脈后,將心臟壓回胸l 腔,迅速縫合胸壁。l 指標(biāo):缺血部的體積(用計(jì)算機(jī)分析)l 血清酶
3、:AST、CDH、-HBOH、CK活性l 穴位:內(nèi)關(guān)l 手法:平補(bǔ)平瀉 (4)正常胃運(yùn)動(dòng)模型 動(dòng)物:家兔 方法:麻醉后切開(kāi)家兔的腹腔,取出胃, 將自制的傳感器縫合于幽門部的 漿膜層處,將腹腔縫合,將導(dǎo)線 從頸部引出 指標(biāo):用計(jì)算機(jī)處理胃運(yùn)動(dòng)的振幅和頻率 穴位:足三里 手法:平補(bǔ)平瀉 (5)實(shí)驗(yàn)性胃運(yùn)動(dòng)亢進(jìn)及抑制模型 動(dòng)物:家兔 方法:和(4)的手術(shù)方式相同,肌肉 注射新斯的明造成胃運(yùn)動(dòng)亢進(jìn) , 肌肉注射654-2(Anisodamine), 造成胃運(yùn)動(dòng)抑制,摸索引起胃運(yùn) 動(dòng)亢進(jìn)或抑制的藥物的劑量 指標(biāo):用計(jì)算機(jī)處理計(jì)算胃運(yùn)動(dòng)的振幅和頻率 穴位:足三里 手法:平補(bǔ)平瀉 (6)實(shí)驗(yàn)性胃脹痛模型 動(dòng)
4、物:大鼠 方法:用三叉管的一端連接能擴(kuò)張的小 球囊、一端連接水銀檢壓計(jì)、 一端連接注射器,乙醚麻醉下, 將小球囊從口腔緩慢插入胃內(nèi), 然后,用注射器將空氣注入小球 囊使其擴(kuò)張,造成胃脹痛。 指標(biāo):大鼠出現(xiàn)胃脹的癥狀(四肢或頭 部的扭動(dòng)等),用血壓計(jì)測(cè)定壓力 穴位:足三里 手法:平補(bǔ)平瀉 (7)實(shí)驗(yàn)性胃損傷小鼠胃排空模型 動(dòng)物:小鼠 方法:稀鹽酸(0.3mol/l、1ml)灌胃造成胃損傷。將20個(gè)直徑為0.5mm的黑色樹(shù)脂球和10%可溶性淀粉糊一同注入胃中 穴位:足三里 手法:平補(bǔ)平瀉指標(biāo):胃排出率=腸排出的樹(shù)脂球數(shù)目腸排出的樹(shù)脂球數(shù)目灌入總數(shù)灌入總數(shù) 100% 經(jīng)脈 心:手厥陰心包經(jīng)(內(nèi)關(guān))
5、胃:足陽(yáng)明胃經(jīng)(足三里) 動(dòng)物 大鼠、小鼠、大耳白家兔 穴位針刺時(shí)間 根據(jù)模型不同,一般3-5分鐘、留針 二、穴位Ca2+濃度變化以及阻斷 Ca2+活動(dòng)環(huán)節(jié)對(duì)針刺效應(yīng)的影響1、絡(luò)合穴位處、絡(luò)合穴位處Ca2+對(duì)針刺效應(yīng)的影響對(duì)針刺效應(yīng)的影響內(nèi)關(guān)、足三里心、胃病變針刺 絡(luò)合穴位處絡(luò)合穴位處Ca2+對(duì)針刺效應(yīng)的影響對(duì)針刺效應(yīng)的影響(絡(luò)合:使用EDTA溶液與Ca2+結(jié)合,使Ca2+失活)內(nèi)關(guān)、足三里心、胃病變注射EDTA針刺EDTA絡(luò)合絡(luò)合Ca2+的濃度的濃度: 10-2M 、2.5 10-3M 、 5 10-4M 、 10-4M EDTA絡(luò)合絡(luò)合Ca2+的劑量的劑量: 家兔家兔20ul、大鼠、小鼠大
6、鼠、小鼠5ul結(jié)果結(jié)果: 10-2M 、2.5 10-3M 、10-3M 的的EDTA可可以使針刺效果喪失。但是以使針刺效果喪失。但是510-4M 、 10-4M EDTA穴位注射,針刺效果仍然存在。穴位注射,針刺效果仍然存在。 證明證明10-3M 的的EDTA是使針刺效果喪失最低濃度。是使針刺效果喪失最低濃度。注射EDTA對(duì)照液內(nèi)關(guān)、足三里心、胃病變針刺針刺有效EDTA對(duì)照液 ,在體外已結(jié)合上Ca2+的EDTA溶液VOCs阻斷劑心胃的病變無(wú)效無(wú)效經(jīng)脈經(jīng)脈內(nèi) 關(guān)足三里針刺針刺2、阻斷穴位細(xì)胞細(xì)胞膜上、阻斷穴位細(xì)胞細(xì)胞膜上VOCs對(duì)針刺對(duì)針刺 效應(yīng)的影響效應(yīng)的影響 VOCs阻斷劑的種類和濃度阻斷
7、劑的種類和濃度: 10-3M Mn(NO3)2 20ul 2 10-3M 二異搏定二異搏定 20ul 5 10-4M 心痛定心痛定 20ul 給藥方法給藥方法: 1、微量注射器穴位注射、微量注射器穴位注射 2、微量蠕動(dòng)泵穴位連續(xù)灌流、微量蠕動(dòng)泵穴位連續(xù)灌流 VOCs阻斷劑阻斷劑對(duì)照液對(duì)照液心胃的病變心胃的病變有有效效經(jīng)經(jīng)脈脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺針刺 注:注:VOCs阻斷劑對(duì)照液阻斷劑對(duì)照液NaNO3溶液,劑量與溶液,劑量與 VOCs阻斷劑相同阻斷劑相同3、阻斷、阻斷CaM活性對(duì)針刺效應(yīng)的影響活性對(duì)針刺效應(yīng)的影響三氟啦嗪胃抑制模型無(wú)效經(jīng)脈足三里 三氟啦嗪劑量:三氟啦嗪劑量:10ul 濃度:
8、濃度:60um針刺針刺生理食鹽水注射胃抑制模型有效有效經(jīng)脈經(jīng)脈足三里針刺針刺CaCl2溶液穴位注射心胃病變有效有效經(jīng)脈經(jīng)脈內(nèi) 關(guān)足三里針刺 4 4、升高穴位、升高穴位CaCa2+2+濃度對(duì)針刺濃度對(duì)針刺 效能的影響效能的影響 CaCl2 溶液的濃度:溶液的濃度:10-1M、10-2M、510-3M、 10-3M升高穴位處的升高穴位處的Ca2+后針刺效能繼續(xù)存在,與單純后針刺效能繼續(xù)存在,與單純針刺相比無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,原因有待進(jìn)一步針刺相比無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,原因有待進(jìn)一步研究。上海蔡震亨聽(tīng)了我們的報(bào)告后,以油性研究。上海蔡震亨聽(tīng)了我們的報(bào)告后,以油性Ca2+穴位注射治療哮喘,取得了較好的療
9、效。穴位注射治療哮喘,取得了較好的療效。心胃病變心胃病變無(wú)效無(wú)效經(jīng)脈經(jīng)脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺針刺1、降低經(jīng)脈上幾處降低經(jīng)脈上幾處Ca2+濃度對(duì)針刺濃度對(duì)針刺效應(yīng)的影響效應(yīng)的影響表示表示EDTA注射的部位。經(jīng)脈線上的某個(gè)穴位或經(jīng)脈線上非穴位注射的部位。經(jīng)脈線上的某個(gè)穴位或經(jīng)脈線上非穴位處,每次實(shí)驗(yàn)僅在一處注射,處,每次實(shí)驗(yàn)僅在一處注射,EDTA的劑量、濃度與上述相同。的劑量、濃度與上述相同。研究表明使針刺效能消失的最小濃度為研究表明使針刺效能消失的最小濃度為103M心胃病變心胃病變有效有效經(jīng)脈經(jīng)脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺針刺(2) 表示EDTA對(duì)照液注射部位,體外EDTA絡(luò)合鈣 溶液,其
10、濃度、劑量與上述相同。心胃病變有效有效經(jīng)脈內(nèi) 關(guān)足三里針刺針刺(3) 表示表示EDTAEDTA注射的部位,經(jīng)脈線兩旁。注射劑量與注射注射的部位,經(jīng)脈線兩旁。注射劑量與注射 方法與上述實(shí)驗(yàn)相同,部位對(duì)照實(shí)驗(yàn)。方法與上述實(shí)驗(yàn)相同,部位對(duì)照實(shí)驗(yàn)。心胃病變心胃病變無(wú)效無(wú)效經(jīng)脈經(jīng)脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺針刺2、阻斷經(jīng)脈線上幾處細(xì)胞細(xì)胞膜、阻斷經(jīng)脈線上幾處細(xì)胞細(xì)胞膜 上上VOCs對(duì)針刺效果的影響對(duì)針刺效果的影響 表示阻斷部位。阻斷劑種類、劑量、濃度、給藥方法同前,阻斷部位:經(jīng)脈線上的穴位或在經(jīng)、非穴處。每次實(shí)驗(yàn)阻斷一處。心胃病變心胃病變有效經(jīng)脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺(2) 表示阻斷劑對(duì)照液注射部位
11、。藥物種類、劑量、表示阻斷劑對(duì)照液注射部位。藥物種類、劑量、濃度同二濃度同二2(2)。藥物對(duì)照實(shí)驗(yàn)。)。藥物對(duì)照實(shí)驗(yàn)。心胃病變有效經(jīng)脈內(nèi)內(nèi) 關(guān)關(guān)足三里足三里針刺(3) 表示經(jīng)脈線兩旁阻斷部位。藥物種類、劑量、表示經(jīng)脈線兩旁阻斷部位。藥物種類、劑量、濃度同三濃度同三2(1)。部位對(duì)照實(shí)驗(yàn)。)。部位對(duì)照實(shí)驗(yàn)。胃抑制模型胃抑制模型無(wú)效足三里足三里針刺 表示三氟啦泰注射部位。濃度、劑量同二3(1)胃經(jīng)3、經(jīng)脈線上、經(jīng)脈線上CaM活性阻斷對(duì)針刺效果的活性阻斷對(duì)針刺效果的影響影響胃抑制模型有效足三里針刺 表示生理鹽水注射部位。劑量10ul胃經(jīng)(2)胃抑制模型有效足三里針刺(3) 表示三氟啦泰注射部位。經(jīng)絡(luò)線兩旁表示三氟啦泰注射部位。經(jīng)絡(luò)線兩旁胃經(jīng)心胃病變有效經(jīng)脈內(nèi) 關(guān)足三里針刺 升高升高Ca2+濃度的部位。藥物
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