南醫(yī)大藥物第13章__莨菪烷類抗膽堿藥物的2

1、藥物分析藥物分析第十三章莨菪烷類抗膽堿藥第十三章莨菪烷類抗膽堿藥物的分析物的分析教學(xué)目的與要求教學(xué)目的與要求 v 掌握莨菪烷類抗膽堿藥物的鑒別試驗(yàn)和含量測(cè)定方法。v 熟悉莨菪烷類抗膽堿藥物的基本結(jié)構(gòu)和主要性質(zhì)。v 了解莨菪烷類抗膽堿藥物的雜質(zhì)檢查。莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)莨菪烷類莨菪烷類抗膽堿藥抗膽堿藥物物莨菪烷衍莨菪烷衍生的氨基生的氨基醇醇與各種不同與各種不同有機(jī)酸縮合有機(jī)酸縮合酯酯+生物堿生物堿莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷莨菪烷NH3C含氮的生物堿含氮的生物堿(氨基氨基)12345678N莨菪烷(Tropane)莨菪烷類抗膽堿藥物的

2、分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪醇莨菪醇含氮的醇含氮的醇(莨菪醇莨菪醇)NH3COH12345678NOHH莨菪醇(Tropine)莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物硫酸硫酸阿托品阿托品H2SO4OOHOHNH3CH2H2O莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物硫酸硫酸莨菪堿莨菪堿H2SO4NH3CH22H2OOHOOH莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析H2SO4NH3CH22H2OOHOOH結(jié)構(gòu)區(qū)別結(jié)構(gòu)區(qū)別硫酸硫酸莨菪堿莨菪堿H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸硫酸阿托品阿托品莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥

3、物的分析H2SO4NH3CH22H2OOHOOH性質(zhì)區(qū)別性質(zhì)區(qū)別硫酸硫酸莨菪堿莨菪堿H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸硫酸阿托品阿托品熔點(diǎn)、溶解度、熔點(diǎn)、溶解度、旋光度、分子旋光度、分子量量莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物氫溴酸氫溴酸后后馬托品馬托品HBrNH3CHOOOH莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物氫溴酸氫溴酸山山莨菪堿莨菪堿莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物氫溴酸氫溴酸東東莨菪堿莨菪堿3H2OHBrNH3CHOOHOHO莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物甲

4、溴酸甲溴酸東東莨菪堿莨菪堿BrNH3CHOOHOHOH3C莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析典型藥物典型藥物丁溴酸丁溴酸東東莨菪堿莨菪堿BrNH3CHOOHOHOH3C1.水解性（酯水解生成醇和酸）OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.堿性 與生物堿沉淀劑產(chǎn)生有色沉淀阿托品和東莨菪堿結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)含有叔胺氮原子，較強(qiáng)的堿性，易與酸成鹽，如阿托品pKb1為4.35.一、托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)(Vitaili反應(yīng))原理：莨菪烷類生物堿結(jié)構(gòu)中的酯鍵水解后生成莨菪酸，經(jīng)發(fā)煙硝酸加熱處理，轉(zhuǎn)變?yōu)槿趸苌?，再與氫氧化鉀的醇溶液和固體氫氧化鉀作用脫羧，轉(zhuǎn)

5、化成具有共軛結(jié)構(gòu)的陰離子而顯深紫色。托烷生物堿類的特征反應(yīng)，鑒別阿托品和莨菪堿類一、托烷生物堿一般鑒別試驗(yàn)(Vitaili反應(yīng))HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOHNO2O2NNOKO取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)爬?，加乙?3滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。莨菪酸莨菪酸硝基化硝基化脫羧化脫羧化共軛結(jié)構(gòu)共軛結(jié)構(gòu)深紫深紫二、氧化反應(yīng)二、氧化反應(yīng)(與硫酸與硫酸-重鉻酸鉀的反應(yīng)）重鉻酸鉀的反應(yīng)）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2O三、沉

6、淀反應(yīng)三、沉淀反應(yīng)生物堿在酸性溶液中與重金屬鹽或大分生物堿在酸性溶液中與重金屬鹽或大分子酸生成難溶性鹽、復(fù)鹽或配合物沉淀子酸生成難溶性鹽、復(fù)鹽或配合物沉淀生物堿沉淀試劑生物堿沉淀試劑反應(yīng)條件及結(jié)果反應(yīng)條件及結(jié)果碘化鉍鉀試液碘化鉍鉀試液橙紅或棕紅色沉淀橙紅或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液碘化鉀碘試液棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液碘化汞鉀試液在酸性或堿性溶劑中生成白在酸性或堿性溶劑中生成白色或淡黃色沉淀色或淡黃色沉淀三硝基苯酚試液三硝基苯酚試液結(jié)晶性沉淀并有特定熔點(diǎn)結(jié)晶性沉淀并有特定熔點(diǎn)硅鎢酸試液硅鎢酸試液白色、淡黃色或黃棕色沉淀白色、淡黃色或黃棕色沉淀磷鎢酸試液磷鎢酸試液酸性或中性溶液中，

7、淡黃色酸性或中性溶液中，淡黃色沉淀沉淀三、沉淀反應(yīng)三、沉淀反應(yīng)四四、光譜鑒別法、光譜鑒別法紫外光譜法紫外光譜法一般通過(guò)比較藥物的一般通過(guò)比較藥物的 或吸收光譜的一致性或吸收光譜的一致性來(lái)進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)來(lái)進(jìn)行鑒別以及吸光系數(shù)minmax、四、光譜鑒別法紅外光譜法紅外光譜法CHP收載的原料藥一般都收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進(jìn)行鑒別采用紅外光譜法進(jìn)行鑒別五、色譜鑒別法色譜法色譜法一般用于已知生物堿的鑒一般用于已知生物堿的鑒別，主要有別，主要有TLC、HPLC、GC、PC等等六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)藥物大都以硫酸鹽或藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在溴化物的形式存在

8、通過(guò)加沉淀試劑如硝酸銀通過(guò)加沉淀試劑如硝酸銀等生成溴化銀沉淀或加入等生成溴化銀沉淀或加入氯試劑生成溴溶于三氯甲氯試劑生成溴溶于三氯甲烷而顯色烷而顯色vChp氫溴酸東莨菪堿的鑒別：六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)六、硫酸鹽和溴化物的反應(yīng)一、氫溴酸東莨菪堿制備工藝洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/ /滲漉滲漉滲漉液滲漉液減壓蒸餾減壓蒸餾浸膏浸膏H H2 2SOSO4 4/ /提取提取酸性提取液酸性提取液NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /提取提取總生物堿總生物堿NaNa2 2COCO3 3, CHCl, CHCl3 3/ /分離分離東莨菪堿東莨菪堿HBr/HBr/成鹽成鹽氫溴酸東莨

9、菪堿（粗品）氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C75% C2 2H H5 5OH/OH/精制精制成品成品根據(jù)其制備工藝，本品可通根據(jù)其制備工藝，本品可通過(guò)酸度、其它生物堿、和易過(guò)酸度、其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進(jìn)行控制氧化物質(zhì)檢查進(jìn)行控制一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查酸度酸度東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試東莨菪堿堿性很弱，對(duì)石蕊試紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。紙幾乎不顯堿性反應(yīng)。如氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿如氫溴酸東莨菪堿為強(qiáng)酸弱堿鹽、通過(guò)其鹽、通過(guò)其5%的水溶液的水溶液pH為為4.05.5，可控制酸性雜質(zhì)，可控制酸性雜質(zhì)一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查易氧化物易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及

10、其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色可使高錳酸鉀溶液褪色NH3CHOOCH2(雜質(zhì))NH3CHOOOCH2(雜質(zhì))一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查易氧化物易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，其它含有不飽和雙鍵的有機(jī)物，他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、他們的紫外吸收波長(zhǎng)會(huì)紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色可使高錳酸鉀溶液褪色一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查其它生物堿其它生物堿本品水溶液加入氨水試液不得本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當(dāng)有其它生物堿存發(fā)

11、生混濁。當(dāng)有其它生物堿存在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。在時(shí)，則易產(chǎn)生混濁。v本品水溶液一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查一、氫溴酸東莨菪堿雜質(zhì)檢查v檢查方法：其他生物堿其他生物堿ab二、硫酸阿托品硫酸阿托品為硫酸阿托品為消旋體消旋體，無(wú)旋光性，無(wú)旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查光性對(duì)莨菪堿雜質(zhì)進(jìn)行檢查CHP用用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過(guò)峰面積的比值及保留時(shí)間來(lái)通過(guò)峰面積的比值及保留時(shí)間來(lái)控制雜質(zhì)限度控制雜質(zhì)限度莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測(cè)強(qiáng)、臨床使用劑量較少，因此測(cè)定方法要專

12、屬、靈敏定方法要專屬、靈敏: 酸性染料酸性染料比色法比色法非水溶液非水溶液滴定法滴定法高效液相高效液相色譜法色譜法有機(jī)相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 酸性染料酸性染料比色法比色法在一定的在一定的pH條件下，某些生物堿條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進(jìn)而可用分光光度法進(jìn)行測(cè)量進(jìn)而可用分光光度法進(jìn)行測(cè)量酸性染料酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠、溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等溴甲酚紫、溴酚藍(lán)等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜其與酸性離子

13、定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對(duì)，且可以被有機(jī)溶劑明顯紅移的有色離子對(duì)，且可以被有機(jī)溶劑定量萃取，通過(guò)測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)的定量萃取，通過(guò)測(cè)定有機(jī)相中有色離子對(duì)的特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)行含量測(cè)定特征波長(zhǎng)處的吸光度，即可進(jìn)行含量測(cè)定酸性染料比色法酸性染料比色法影響因素影響因素u 水相最佳pH值：使得BH+和In-最多影響因素影響因素u 水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH過(guò)低抑制酸性染料的解離、使酸性陰離子濃過(guò)低抑制酸性染料的解離、使酸性陰離子濃度過(guò)低影響離子對(duì)的形成；度過(guò)低影響離子對(duì)的形成；pH過(guò)高，有機(jī)藥物過(guò)高，有機(jī)藥物呈游離態(tài)，也抑制離子對(duì)的形成，因此須有一呈游離

14、態(tài)，也抑制離子對(duì)的形成，因此須有一個(gè)最佳個(gè)最佳pH值存在，使離子對(duì)生成最有利。其選值存在，使離子對(duì)生成最有利。其選擇方法一般根據(jù)藥物與染料的擇方法一般根據(jù)藥物與染料的pK值及水相與有值及水相與有機(jī)相的分配系數(shù)而定機(jī)相的分配系數(shù)而定水相最佳水相最佳pHpH影響因素影響因素 酸性染料及其濃度：定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過(guò)量一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大一般認(rèn)為對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以。但濃度過(guò)高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化就可以。但濃度過(guò)高的話就會(huì)形成嚴(yán)重的乳化層，且不易于除去，往往影響測(cè)定結(jié)果。層，且不易于除去，往往影響測(cè)定結(jié)果。影響因素影響因素有機(jī)溶劑的選擇：提取效率高，氯

15、仿最理想一般應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子一般應(yīng)選擇對(duì)有機(jī)堿藥物與酸性染料形成離子對(duì)萃取效率高、能與離子對(duì)形成氫鍵、不與或?qū)腿⌒矢?、能與離子對(duì)形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。極少與水混溶的有機(jī)溶劑作為萃取溶劑。影響因素影響因素水分的影響：影響因素影響因素酸性染料里面的有色雜質(zhì)影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去應(yīng)用示例應(yīng)用示例氫溴酸東莨菪堿片的含量測(cè)定精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2ml，分別置預(yù)先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液4ml，振搖提取后，靜置使分層；分取三氯甲烷液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在420nm波長(zhǎng)

16、處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得。本法主要適用于紫外吸收弱、標(biāo)示量低的有機(jī)堿性藥物（生物堿）制劑的含量或含量均勻度的測(cè)定。 應(yīng)用示例應(yīng)用示例 硫酸阿托品片的含量測(cè)定硫酸阿托品片的含量測(cè)定應(yīng)用示例應(yīng)用示例 硫酸阿托品片的含量測(cè)定硫酸阿托品片的含量測(cè)定應(yīng)用示例應(yīng)用示例 硫酸阿托品片的含量測(cè)定硫酸阿托品片的含量測(cè)定應(yīng)用示例應(yīng)用示例 硫酸阿托品片的含量測(cè)定硫酸阿托品片的含量測(cè)定二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法二、非水溶液滴定法三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法應(yīng)用示例應(yīng)用示例練習(xí)與思考v1、莨菪烷類生物堿的特征反應(yīng)是vA、與三氯化鐵反應(yīng)vB、與生物堿沉淀劑反應(yīng)vC、重氮化-偶合反應(yīng)

17、vD、丙二酰脲反應(yīng)vE、Vitali反應(yīng)練習(xí)與思考v 2、藥物水解后，與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，生成苯甲醛，而逸出類似苦杏仁的臭味的藥物是v A、氫溴酸山莨菪堿v B、異煙肼v C、硫酸奎寧v D、鹽酸氯丙嗪v E、地西泮練習(xí)與思考v3、影響酸性染料比色法的最主要因素是vA、水相pHvB、酸性染料的種類vC、有機(jī)溶劑的種類vD、酸性染料的濃度vE、水分的影響練習(xí)與思考v 4、采用酸性染料比色法測(cè)定藥物含量，如果溶液pH過(guò)低對(duì)測(cè)定造成的影響是v A、使In-濃度太低，而影響離子對(duì)的形成v B、有機(jī)堿藥物呈游離狀態(tài)v C、使In-濃度太高v D、沒(méi)有影響v E、有利于離子對(duì)的形成練習(xí)與思考v

18、 5、離子對(duì)HPLC要在流動(dòng)相中加入與呈解離狀態(tài)的待測(cè)組分離子電荷相反的離子對(duì)試劑，分析堿性物質(zhì)時(shí)常用的離子對(duì)試劑有v A、戊烷磺酸鈉v B、庚烷磺酸鈉v C、十二烷基磺酸鈉v D、四丁基溴化銨v E、四丁基氫氧化銨練習(xí)與思考v 6、離子對(duì)HPLC要在流動(dòng)相中加入與呈解離狀態(tài)的待測(cè)組分離子電荷相反的離子對(duì)試劑，分析酸性物質(zhì)時(shí)常用的離子對(duì)試劑有v A、戊烷磺酸鈉v B、庚烷磺酸鈉v C、十二烷基磺酸鈉v D、四丁基溴化銨v E、四丁基氫氧化銨練習(xí)與思考v 7、氫溴酸東莨菪堿中其他生物堿的檢查方法是v A、水溶液加入氨試液產(chǎn)生渾濁v B、水溶液加入氨試液不得發(fā)生渾濁v C、加入氫氧化鉀試液則有渾濁

19、v D、加氫氧化鉀試液無(wú)渾濁v E、加氫氧化鉀試液數(shù)滴，只發(fā)生瞬即消失的類白色渾濁練習(xí)與思考v 8、ChP2010硫酸阿托品含量測(cè)定：取本品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸與醋酐各10mL溶解后，加結(jié)晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍(lán)色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。v 已知：取樣量為0.5009g，高氯酸滴定液濃度C=0.1028mol/L，V空=0.04mL；V樣=7.05mL；v (C17H23NO3)2H2SO4H2O 分子量 694.83思考題v簡(jiǎn)述酸性染料比色法的原理和影響因素。習(xí)題習(xí)題1藥品臨床試驗(yàn)管理規(guī)范的英文縮寫(xiě)是（ ）A.GAP B.GCP

20、C.GLP D.GMP E.GSP習(xí)題習(xí)題2關(guān)于中國(guó)藥典最恰當(dāng)?shù)恼f(shuō)法是（ ）A.關(guān)于藥物分析的書(shū) B.收載我國(guó)生產(chǎn)的所有藥物的書(shū) C.關(guān)于藥物的詞典 D.國(guó)家監(jiān)督管理藥品質(zhì)量的法定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn) E關(guān)于中草藥和中成藥的技術(shù)規(guī)范習(xí)題習(xí)題3. 藥品質(zhì)量的全面控制是( )A. 藥品研究、生產(chǎn)、供應(yīng)、臨床使用和有關(guān)技術(shù)的管理規(guī)范、條例的制度與實(shí)施B. 藥品生產(chǎn)和供應(yīng)的質(zhì)量控制C. 真正做到把準(zhǔn)確、可靠的藥品檢驗(yàn)數(shù)據(jù)作為產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)、科研成果鑒定的基礎(chǔ)和依據(jù)D. 幫助藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)提高工作質(zhì)量和信譽(yù)E. 樹(shù)立全國(guó)自上而下的藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的技術(shù)權(quán)威性和合法地位習(xí)題習(xí)題6日本藥局方的英文縮寫(xiě)是（日本藥局方的英文縮寫(xiě)是

21、（ ）A.BP B.JPC.USP D.CHP E.以上都不是以上都不是 習(xí)題習(xí)題7GLP的中文全稱是（的中文全稱是（ ） A.藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范 B.藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 C.藥品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理規(guī)范藥品經(jīng)營(yíng)質(zhì)量管理規(guī)范 D.藥品臨床試驗(yàn)管理規(guī)范藥品臨床試驗(yàn)管理規(guī)范E.分析質(zhì)量管理規(guī)范分析質(zhì)量管理規(guī)范習(xí)題習(xí)題8中國(guó)藥典中既對(duì)藥品具有鑒別意義，又能反映中國(guó)藥典中既對(duì)藥品具有鑒別意義，又能反映藥品的純雜程度的項(xiàng)目是（藥品的純雜程度的項(xiàng)目是（ ）A.外觀形狀外觀形狀 B.物理常數(shù)物理常數(shù) C.鑒別鑒別 D.檢查檢查 E.含量測(cè)定含量測(cè)定習(xí)題習(xí)題9中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（2010年版）規(guī)定的年版）規(guī)定的“溶解溶解”系系指指1g或或1ml溶質(zhì)能溶解在（溶質(zhì)能溶解在（ ）A.1ml溶液中溶液中 B.110ml溶液中溶液中 C 1030ml溶液中溶液中 D.30100ml溶液中溶液中 E.1001000ml溶液中溶液中習(xí)題習(xí)題11中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（2010年版）規(guī)定，年版）規(guī)定，“精密稱定精密稱定”時(shí)，系指稱取重