蟲草多糖復(fù)合物口服液的開發(fā)

1、蟲草多糖復(fù)合物口服液的開發(fā)基于食品劑型表達(dá)的保健食品加工技術(shù)進(jìn)展及產(chǎn)品質(zhì)量評價(jià)王偉14163070022022-4-12目錄概述1研究方法2研究進(jìn)展3總結(jié)42022-4-12概述冬蟲夏草(Cordyceps sinensis Berk.Sacc)，子囊菌亞門(Ascomyxotina)麥角菌科(Clavicipitaceae)蟲草屬(Cordyceps)，其為寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體，屬于我國傳統(tǒng)名貴中藥，因其性味甘平，具有補(bǔ)肺益腎、止血化痰等多種功效。現(xiàn)代科學(xué)研究證明，冬蟲夏草具有多種藥理活性。現(xiàn)在人們多用人工培養(yǎng)的方法獲得蛹蟲草。 蛹蟲草，別名北蟲草、北冬蟲夏草，與

2、冬蟲夏草同屬于子囊菌亞門麥角菌科蟲草屬?，F(xiàn)代科學(xué)研究表明蛹蟲草含有多糖類、蟲草酸(D-甘露醇) 、核苷類（主 要含腺苷、尿苷、鳥苷、有蟲草素(3-脫氧腺苷)、尿嘧啶和腺嘌呤）、甾醇類，此外還有氨基酸和微量元素等主要成分，與冬蟲夏草成份基本相同,單糖組合物通常為以不同的方式摩爾比的葡萄糖（GLU），甘露糖（MAN），和半乳糖（GAL）,此外不同品種蟲草的多糖結(jié)構(gòu)組成不同,即使同種蟲草也會因培養(yǎng)條件不同和采收時(shí)間的差異其多糖組成也不盡相同,2022-4-12蟲草多糖生物活性抗腫瘤01降血糖02降血脂03免疫調(diào)節(jié)04抗氧化05其他作用062022-4-12口服液口服液是將原材料用水或其他溶劑,采用適

3、當(dāng)?shù)姆椒ㄌ崛?經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體劑型 特點(diǎn)2022-4-122022-4-12菌種活化研究方法離心菌絲體制備發(fā)酵培養(yǎng)傳代培養(yǎng)Sevage 法HPLC凍干靈芝多糖靈芝多糖結(jié)構(gòu)研究GC-MS濃縮乙醇沉淀HIO4氧化粗多糖Smith降解甲基化IR剛果紅混合液UV-VISGCNaOH NMR 2022-4-12靈芝多糖含有三螺旋體構(gòu)型GC-MS 分析靈芝多糖的主要單糖組分為葡萄糖，還有少量的半乳糖、甘露糖、木糖和艾杜糖，IR 及1H NMR 分析多糖為 -構(gòu)型，HIO4氧化、Smith 降解和甲基化分析表明: 多糖主要為( 13) 糖苷鍵連接構(gòu)型，并伴有少量的 16 位支鏈鍵連接的結(jié)構(gòu)，靈芝多糖是由

4、 D-葡萄糖單元通過 -( 13) 糖苷鍵連接葡聚多糖，其主要構(gòu)型特征為 ( 13) -D-線性連接的骨架結(jié)構(gòu)?！啊?022-4-12口服液的制備注意點(diǎn) 蒽酮-硫酸法檢測得到多糖含量，做成多糖含量為 5mg/ml 的溶液制作的過程如封口、分裝及配液等均需在無菌條件下進(jìn)行操作低于或等于 0.3%的苯甲酸鈉作為防腐劑聚乙烯吡咯烷酮做穩(wěn)定劑PH 值的范圍為 5.0-8.0 分別加入安全性規(guī)定內(nèi)的三個(gè)梯度的苯甲酸鈉在正常溫度下考察 6 個(gè)月后，檢測其的作用效果,研究加入苯甲酸鈉對蛹蟲草多糖的影響，檢測時(shí)同樣檢測了多糖的含量。分別加入安全性規(guī)定內(nèi)的三個(gè)梯度的穩(wěn)定劑進(jìn)行考察，并檢測其對口服液的影響,同時(shí)測

5、定多糖含量。 2022-4-12口服液驗(yàn)證 靈芝口服液一定濃度口服液毒性實(shí)驗(yàn)衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)急性毒性實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性檢測功效成份檢測長期毒性實(shí)驗(yàn)血液學(xué)指標(biāo)指紋圖譜理化檢驗(yàn)微生物檢測光照射影響實(shí)驗(yàn)溫度影響實(shí)驗(yàn)加速試驗(yàn)功能學(xué)檢驗(yàn)免疫活性試驗(yàn)抗氧化試驗(yàn)抗腫瘤試驗(yàn)降血脂試驗(yàn)降血糖試驗(yàn)小白鼠口服組織形態(tài)學(xué)檢查復(fù)方血清靶成分蒽酮-硫酸法測量濃度2022-4-12急性毒性及蓄積毒性試驗(yàn) 蓄積系數(shù)法Ames 試驗(yàn)微核及精子畸形試驗(yàn) 測量致突變率 亞慢性毒性試驗(yàn)體重測量 血常規(guī)測定血清生化測定病理組織形態(tài)學(xué)檢查毒性實(shí)驗(yàn)亞急性試驗(yàn)小白鼠飼喂試驗(yàn),觀察動物的一般狀況: 體重,行為、飲食、發(fā)病及死亡,血常規(guī)測定等情況, 若有動物

6、死亡, 及時(shí)解剖作病理檢查,2022-4-12衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)理化檢驗(yàn)蒽酮-硫酸法測量多糖濃度微生物檢測細(xì)菌總數(shù)大腸菌群重金屬檢驗(yàn)農(nóng)藥殘留農(nóng)藥殘留添加劑的HPLC檢測酵母菌,霉菌感光檢驗(yàn)2022-4-12光照射影響實(shí)驗(yàn) 蛹蟲草多糖口服液：前期實(shí)驗(yàn)制備每支 50mg/10ml蛹蟲草多糖，分別標(biāo)記批號為：20150615,20150616,20150617。 用光照強(qiáng)度為 5000Lx的日光燈對供試品進(jìn)行連續(xù)照射，時(shí)間為 10 天，每隔5天觀察記錄澄明度和多糖含量等樣品性狀的改變情況溫度影響實(shí)驗(yàn) 將恒溫培養(yǎng)箱的溫度調(diào)至 70，取供試品放于其中，時(shí)間為10 天，每隔5 天觀察記錄澄明度和多糖含量等樣品性狀

7、的改變情況 加速試驗(yàn) 取供試品放在恒溫恒濕穩(wěn)定箱中，條件如下：溫度為 402，相對濕度為70%10%。分別于第 0 、1 、2 、3 、6 個(gè)月取樣，比較第 1-6 月與第 0 月的澄明度、多糖含量及微生物含量等供試品的性狀。理論上滿足加速實(shí)驗(yàn)結(jié)果，則可以確定保質(zhì)期為 2年。 穩(wěn)定性檢測2022-4-12功能學(xué)檢驗(yàn)輕基自由基的清除超氧化陰離子的清除還原力測定抗氧化試驗(yàn)抗腫瘤試驗(yàn)建立小鼠腫瘤模型 MTT測定 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測定抑制腫瘤基因P53表達(dá)的檢測降血糖試驗(yàn)誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生糖尿病模型,通過灌胃方式給藥，來考察該多糖具有降血糖的功效建立小鼠、大鼠高脂血癥模型，通過灌胃方式給藥，來考察該多糖具有降血脂的功效降血脂試驗(yàn)免疫活性試驗(yàn)巨噬細(xì)胞，激活增殖測定淋巴因子測定2022-4-12功效成份檢測小白鼠口服一定濃度的口服液藥效差色血清色譜法復(fù)方定量分析整體動物試驗(yàn)組織器官亞細(xì)胞分子生物水平復(fù)方血清靶成分配位化學(xué)代謝化學(xué)分析各種多糖之間的協(xié)同和拮抗作用復(fù)方的效應(yīng)有效部位有效成分反饋?zhàn)饔媒M織形態(tài)學(xué)檢查復(fù)方的效應(yīng)2022-4-12研究進(jìn)展近年來人們側(cè)重對靈芝的結(jié)構(gòu)分析，活性成分的作用機(jī)理的研究，結(jié)合現(xiàn)代儀器分析，藥