生物制藥考試終審稿)

1、文稿歸稿存檔編號：KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-生物制藥試題1、簡述基因工程藥物生產的基本過程？（I）目的基因的分離和提取（2）.目的基因與載體結合構建重組體（3）重組體導入 宿主細胞（4）重組體的篩選、鑒定和分析（5）目的基因的表達上游階段：主要是分離目的基因、構建工程菌。目的基因獲得后，最主要的就是目的 基因的表達。選擇基因表達系統主要考慮的是保證表達的蛋白質功能，其次是表達的量和 分離純化的難易。此階段的工作主要在實驗室內完成。下游階段：從工程菌的大量培養(yǎng)一直到產品的分離純化和質量控制。此階段是將實驗 室的成股票產業(yè)化、商品化，主要包括工程

2、菌大規(guī)模發(fā)酵最佳參數的確立，新型生物反應 器的研制，高效分離介質及裝置的開發(fā)，分離純化的優(yōu)化控制，高純度產品的制備技術， 生物傳感器等一系列儀器表的設計和制造，電子計算機的優(yōu)化控制等。2. 現代生物技術包括哪些在生物制藥領域的主要應用是什么酶工程、發(fā)酵工程、細胞工程、基因工程、蛋白質工程1. 抗生素不僅可用于治療細菌感染而且可用于治療腫瘤以及病毒引起的疾病。一個 好的抗生素應具有較廣的抗菌譜外，還應具有較好的選擇性，不產生過敏和耐藥性，有高 度的穩(wěn)定性，收率高，成本低，適于工業(yè)生產.目前生產和應用的抗生素還不能完全滿足 以上要求 利用發(fā)酵技術生產的“抗生素”可以把微生物代謝產生有用的物質起到對

3、人類 疾病的預防和治療。還可以通過發(fā)酵工程技術生產維生素類藥物，多烯脂肪酸，醫(yī)用酶制 劑。2. 運用固定化技術制備藥物及中間體固定化技術主要指酶、完整細胞的固定化，采 用固定化技術后，酶既不會流失，也不會污染產 品質量。固定化細胞可以使酶在細胞內 環(huán)境中發(fā)揮作用，酶活力損失少，而且免除了破碎細胞提取胞內酶的手續(xù)。固定化酶在 經過濾或離心后可以長期重復使用，而且它的穩(wěn)定性也得 到提高，在實際應用中，固定 化酶可以裝在反應器中，使整個生產連續(xù)化進行，有利于生產 的自動化控制，提高生產 率。3. 利用動物、植物細胞和組織培養(yǎng)來提供藥物，通過動物細胞培養(yǎng)，已可獲得病毒 疫茵、干擾素、激素、單克隆抗體、

4、免疫制劑及特殊的酶和物質。把植物細胞或組織從植 物體內分離出來，并在比較簡單的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)可獲得藥品，具有不受氣候影響、穩(wěn) 定供應、在控制條件下生產、可采用連續(xù)方法生產等優(yōu)點。4. 基因工程技術在藥物生產過程中主要用子改良工業(yè)生產菌種、提高菌種生產能力 和性能、提高有效組分含量、簡化工藝提高收率、有利于提取精制等后處理工序，并可 大大減少 環(huán)境污染等。隨著對各種工業(yè)生產的微生物藥物生物合成途徑的深人了解以及 基因重組技術的不斷發(fā)展，應用基因工程技術定向構建高產菌株，改進藥物生產工藝。3、什么是人類基因組計劃它對生物制藥有什么意義定義：人類基因組計劃是美國科學家于1985年率先提出的，旨在闡

5、明人類基因組30 億個堿基對的序列，發(fā)現所有人類基因并搞清其在染色體上的位置，破譯人類全部遺傳信 息，使人類第一次在分子水平上全面地認識自我。意義：1.人類基因組研究為生物制藥提供了明確的目標，對人類基因組的研究最終 將闡明疾病的發(fā)生機理和遺傳基礎。而這些問題一旦明確，生物制藥就有了明確的目標， 從而極大地減少藥物研究的盲目性。2. 人類基因組研究推動了基因工程藥物的發(fā)展通過人類基因組研究，許多致病基因 將被查明。無論在疾病的診斷還是防治方面，都為基因工程藥物提供了廣闊的研究領域。 通過正?；蚝椭虏』虻谋容^，我們將能發(fā)現征服疾病的途徑，這些途徑可能相當一部 分是基因工程藥物。因此，人類基因

6、組的研究為生物制藥提供了難得的發(fā)展機遇?？梢韵?信，隨著人類基因組研究的進展，通過轉基因工程或克隆技術生產的試劑盒或治療藥品將 逐漸增多。同時，基因工程藥物的發(fā)展也使治療成本大幅降低，4、什么是分子標記？簡述分子標記在藥用植物中的應用。定義：分子標記是生物遺傳標記的一種。指受基因控制并且能夠穩(wěn)定遺傳的，能代表 個體或群體的遺傳特征,并可被用作遺傳分析的物質。廣義的分子標記是指可遺傳的并可檢測的DNA序列或蛋白質。狹義分子標記是指能反 映生物個體或種群間基因組中某種差異的特異性DNA片段。概念：是以個體間遺傳物質內核昔酸序列變異為基礎的遺傳標記，是DNA水平遺傳多 態(tài)性的直接的反映。應用：DNA

7、作為植物的遺傳物質，具有穩(wěn)定、可靠、不受外界因素影響的特點，目前 利用不同種類的分子標記開展中草藥植物的種屬分類工作取得了很大進展。采用的分子標 記多種多樣，以RAPD標記較多見。所涉及的中草藥植物總計達到近百種之多，對于不同的 中草藥的不同種的分類來講,利用分子標記技術不僅可以對分析結果進行聚類分析,而且可 以獲得與種有關的DNA帶型。1. 近緣藥用植物品種的DNA分子鑒定 近緣藥用植物品種的鑒定往往采用傳統的生藥 學方法,但近緣藥用植物品種在外觀形態(tài)、組織特征、化學成分等方面十分相似,難以準確 辨認。而DNA分子遺傳標記能夠從分子水平上檢測生物的遺傳背景差異。2. 藥用植物道地性分析 藥材

8、的“道地性”是中草藥研究的一個重要的方面。采用DNA分子診斷技術并輔以形態(tài)學分析,可以從分子水平上來揭示藥材的“道地性”。3. 分子標記輔助藥用植物育種品質選育傳統上主要是依據一些形態(tài)、生理生化性狀 選擇親本及子代。分子標記相對于形態(tài)標記具有無可比擬的優(yōu)越性。在基因定位基礎上， 借助與有利基因緊密連鎖的DNA標記,在群體中選擇具有某些理想基因型和基因型組合的 個體,結合常規(guī)手段,培育優(yōu)良品種。這種將標記基因型鑒定整合于經典育種研究中的新型 育種方法,稱為分子標記輔助選擇。利用分子標記技術在農作物中定位了大量的主效和微效基因，有關的分子標記輔助選 擇己成功展開并獲得了顯著的進展。在中草藥植物的育

9、種研究方面,可以利用分子標記在 育種過程中進行親本性狀的鑒定、檢測,輔助選擇親本及子代,加速品種的培育、縮短育種 周期。5、什么是反義RNA?與傳統藥物相比，反義RNA作為基因治療藥物的主要優(yōu)點。定義：反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子，也包括與其它RNA互補的RNA分子。 由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合，即抑制了該 m 的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式。定義：通過人工合成反義RNA的基因，并將其導入細胞內轉錄成反義RNA,即能抑制 某特定基因的表達，阻斷該基因的功能，有助于了解該基因對細胞生長和分化的作用

10、。反義RNA,根據反義RNA的作用機制可將其分為3類：I類反義RNA直接作用于靶 mRNA的SD序列和（或）部分編碼區(qū)，直接抑制翻譯，或與靶mRNA結合形成雙鏈RNA,從 而易被RNA酶III降解；Il類反義RNA與mRNA的非編碼區(qū)結合，引起mRNA構象變化，抑 制翻譯；III類反義RNA則直接抑制靶mRNA的轉錄。1. 從癌組織中分離出mRNA,合成相應的反義RNA。將反義RNA引入癌細胞阻止癌基 因的表達，抑制癌蛋白的產生，從而可控制細胞的惡性增殖。反義RNA可以特異性地抑制 癌基因的異常表達或抑制腫瘤癌細胞特異蛋白質的表達，誘導腫瘤癌細胞調亡，因而可 應用于癌癥的發(fā)病機制和治療研究。2

11、. 在治療病毒性感染疾病上，由于病毒核酸的序列比較明確，易于人工合成相應的 反義寡聚核昔酸,來抑制病毒基因的表達。反義RNA能有效地阻斷La CrOSSe病毒 (LCV ),并且來自dengne VirUSeS區(qū)的反義RNA更能有效阻止同源病毒的復制，且阻 斷時間和最小片段的反義RNA都能確定，它可以彌補接種等傳統方法存在的不易達到阻止 效果和效率較低的缺點。(1) 特異性強 反義RNA在宿主細胞內可以特異性地識別、關閉某一基因，阻斷 靶基因的表達，我至可以選擇性地抑制單一啟動子控制的多基因區(qū)內某一基因的表達，而 不影響其它基因的表達。(2) 操作簡便，靶mRNA范圍廣 可以大量地設計合成反義RNA (或反義RNA片 段)，僅需要知道病毒、基因或病變細胞的序列信息及其編碼