葡萄中原花青素的提取

1、葡萄中原花青素的提取摘要 原花青素是抗氧化、清除自由基能力很強(qiáng)的物質(zhì)，它能有效清除人體內(nèi)多余的自由基，具有超強(qiáng)的延緩衰老和增強(qiáng)免疫力的作用。原花青素是一大類多酚化合物的總稱， 最簡單的原花青素是兒茶素、表兒茶素或兒茶素與表兒茶素形成的二聚體。本題我們通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法對葡萄中原花青素含量進(jìn)行定量分析；二我們利用超聲波破碎提取法分別得出葡萄皮和葡萄籽中原花青素的得率。切換到完整寫信模式 發(fā)送  關(guān)鍵詞 原花青素 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 定量 超聲破碎提取法 得率 前言 原花青素，是一種有著特殊分子結(jié)構(gòu)的生物類黃酮，是目前國際上公認(rèn)的清除人體內(nèi)自由基最有效的天然抗氧化劑。一般為紅棕色粉末，氣微

2、、味澀，溶于水和大多有機(jī)溶劑。 一般為葡萄籽提取物或法國海岸松樹皮 提取物。原花青素（葡萄籽提取物）是一種新型高效抗氧化劑，是目前為止所發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)效的自由基清除劑，具有非常強(qiáng)的體內(nèi)活性。實驗證明，OPC的抗自由基氧化能力是維生素E的50倍，維生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分鐘即可達(dá)到最高血液濃度，代謝半衰期達(dá)7小時之久。葡萄籽原花青素是清除自由基最強(qiáng)的抗氧化劑。在人體內(nèi)的抗氧化和清除自由基的能力是維生E的50倍，是維生素C的20倍。其作用機(jī)理主要是原花青素能夠自由基交換一個氫原子或電子，與欲清除的自由基有近似的氧化還原電位，生成的自由基通過離域化而穩(wěn)定由于原花青素分子結(jié)構(gòu)上有多個酚羥

3、基，它們可以與暫存性自由基結(jié)合，生成穩(wěn)定的自由基，螯合啟動脂質(zhì)過氧化的金屬離子，參與抗氧化的協(xié)同作用。通過終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，螯合金屬離子，清除活性氧（與封閉系統(tǒng)中的氧反應(yīng)），原花青素可以減少或消除氧自由基對機(jī)體組織和器官的損害作用。原花青素能夠通過制造彈性蛋白和膠原纖維加固毛細(xì)血管壁，從而進(jìn)一步防御自由基的侵蝕。高品質(zhì)的低聚原花青素由于在水中和醇中具有良好的溶解性，加上色澤亮麗，資源豐富，療效顯著，副作用微小的特點，被廣泛應(yīng)用到藥物、化妝品和功能性食品等領(lǐng)域。同時其既可作為營養(yǎng)強(qiáng)化劑，又可作為防腐劑替代合成防腐劑（如苯甲酸等），符合人們回歸自然的要求，提高了其應(yīng)用的安全性。原花青素類色素廣泛

4、存在于紫甘薯、葡萄、血橙、紅球甘藍(lán)、藍(lán)莓、茄子皮、櫻桃、紅橙、紅莓、草莓、桑葚、山楂皮、紫蘇、 黑(紅)米、牽?；ǖ戎参锏慕M織中。原花青素葡萄皮色素是開發(fā)最早且最豐富的原花青素類色素，而大量實驗研究表明，葡萄籽中同樣含有原花青素，且量比較多。所以本實驗中，我們在借鑒一些有關(guān)葡萄籽中原花青素的提取的最佳方案的基礎(chǔ)上，結(jié)合我們所學(xué)到的相關(guān)知識，設(shè)計出了能夠分析葡萄中原花青素含量的有效實驗方案，并分別得出葡萄籽和葡萄皮中原花青素的提取。1材料11 原料及主要試劑（皆為國產(chǎn)分析純）葡萄；兒茶素；香草醛；無水乙醇；濃硫酸；甲醇1.2 主要儀器 榨汁機(jī)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE-52AA-上海亞榮生化儀器廠）；超

5、聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（VH-800A-天津奧特賽斯儀器有限公司）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9070A上海精宏實驗設(shè)備有限公司）；生化培養(yǎng)箱（SPX-250-長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；電子分析天平（AR2140-梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；可見分光光度計（722N-上海精科）2方法 2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 2.1.1對照品儲備液，精密稱取兒茶素10mg，至于50ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，配成0.2mg/ml的溶液。 2.1.2對照品溶液 分別精密量取對照品儲備液 0.0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml，分別置于10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖

6、勻。分別配成0.00mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的兒茶素甲醇溶液。然后按照表一進(jìn)行操作。表一瓶號123456兒茶素濃度（mg/ml）00.010.020.030.040.05兒茶素的取量（ml）0.53%的香草醛甲醇溶液(ml)2.530%硫酸溶液(ml)2.5反應(yīng)條件30度反應(yīng)15分鐘后，在500nm處比色測定吸光值吸光值00.03350.06470.09870.13360.1668注：以兒茶素濃度為橫坐標(biāo)，比色值為縱坐標(biāo)，計算回歸方程。如圖1圖12.2 葡萄的處理 2.2.1 分別收集葡萄皮和葡萄籽，放進(jìn)恒溫

7、干燥鼓風(fēng)箱至水分完全喪失掉。2.2.2將干燥好的葡萄皮和葡萄籽分別稱取5g，然后加入90ml70%的乙醇放入榨汁機(jī)中，進(jìn)行粉碎。2.2.3將粉碎好的葡萄皮和葡萄籽依次進(jìn)行離心（4200rmp/min,10min），收集上清。2.3 超聲破碎提取 把收集好的溶液，進(jìn)行超聲波破碎30min、超聲波功率達(dá)到600w、占空比5/5，保護(hù)溫度70度，破碎完成后，放進(jìn)生化培養(yǎng)箱30度培養(yǎng)15min,然后進(jìn)行吸光度測定。2.4將測定過的溶液再次離心（4200rmp/min,5min）取上清，然后放在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀里進(jìn)行濃縮提取后，再進(jìn)行定容（加90ml70%乙醇），測吸光度。3實驗結(jié)果 根據(jù)實驗中測出的吸光值，

8、代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程可以求出原花青素的含量，最后算出提取率。如表二表二種類葡萄籽葡萄皮提取前500nm處吸光值2.7981.163含有的原花青素的量mg/ml0.83840.3486提取后500nm處吸光值0.09510.0338實際得到的原花青素量mg/ml0.02870.0103提取率%3.3992.906注：為了方便觀察，我們可以把此表格分成3部分，分別制作出柱形圖，可更加直觀的觀察出，各個組分結(jié)果。如下圖2、圖3、圖4圖2圖3圖44實驗分析與討論 4.1由表一，我們可以得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程（圖1），把所測葡萄籽和葡萄皮的吸光值帶入方程可得出原花青素的濃度，進(jìn)而求出含量。4.2由實驗結(jié)果表二，再通過對比圖2、圖3、圖4我們能夠得出葡萄籽中原花青素的含量是葡萄皮中原花青素含量的2.4倍，提取率也是葡萄籽較高。4.3 盡管葡萄籽中原花青素含量較高，但是日常生活中，我們無法直接吃葡萄籽，而葡萄皮卻是可以消化。5 實驗總結(jié) 通過實驗結(jié)果與分析，我們能夠總結(jié)出，充分利用日常生活中被人們所丟棄的葡萄籽，通過超聲破碎提取其中的原花青素，通過