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文檔簡介

1、分子生物學(xué)與的基因工程試題庫(8)一、選擇題(多選或單選) (每題2分,共計20分)1非復(fù)制轉(zhuǎn)座: ( ) (a)復(fù)制轉(zhuǎn)座子,即在原位點上留有一個拷貝 (b)移動元件到一個新的位點,在原位點上不留元件 (c)要求有轉(zhuǎn)座酶 (d)要求解離酶(e)涉及保守的復(fù)制,在這個過程中轉(zhuǎn)座子序列不發(fā)生改變 2. 下面敘述哪些是正確的?( ) (a)C值與生物體的形態(tài)復(fù)雜性呈正相關(guān) (b)C值與生物體的形態(tài)復(fù)雜性呈負相關(guān)(c)每個門的最小C值與生物體形態(tài)復(fù)雜性是大致相關(guān)的 3. HO基因是交配型轉(zhuǎn)換所必需的,它:( ) (a)編碼一個位點特異的DNA內(nèi)切核酸酶 (b)它的啟動子中含有許多不同的功能元件 (c)

2、任何時候在任何酵母細胞中都表達(d)編碼可以切割沉默基因座,而對MAT沒作用的蛋白 4. 糖皮質(zhì)激素類的甾醇受體( ) (a)是同源二聚體 (b)所結(jié)合的DNA回文序列都不相同 (c)結(jié)合的回文序列相同,但組成回文序列兩段DNA間的序列不同 (d)RXR受體通過形成異源二聚體后與同向重復(fù)序列結(jié)合(e)這類受體存在于細胞核中 5. 在阿黑皮素原中被識別和切割的氨基酸殘基是( ) (a)賴氨酸和精氨酸 (b)谷氨酰胺和甘氨酸 (c)賴氨酸和天冬酰胺 (d) a和b,其中a是丙氨酸,天冬氨酸或甘氨酸,b是丙氨酸或脯氨酸(e)天冬酰胺和賴氨酸 6. 下面關(guān)于真核生物翻譯的敘述中,哪一個(哪些)是正確的

3、?( ) (a)起始因子eIF只有同GTP形成復(fù)合物才起作用 (b)終止密碼子與細菌的不同 (c)白喉毒素使EF1ADP-核糖?;?(d)真核生物蛋白質(zhì)的第一個氨基酸是修飾過的甲硫氨酸,在蛋白質(zhì)合成完成之后,它馬上被切除(e)真核生物的核糖體含有兩個tRNA分子的結(jié)合位點 7. P.Berg構(gòu)建SV40二聚體時用了幾種不同的酶,其中( )的作用是制造隱蔽的5'端。(a)末端轉(zhuǎn)移酶 (b)外切核酸酶 (c)外切酶 (d)DNA連接酶 8. 型限制性內(nèi)切核酸酶: ( ) (a)由兩個亞基組成,僅識別半甲基化位點。甲基化位點相對于限制位點的位置(上游或下游)決定了DNA是被甲基化還是被限制

4、(b)不同亞基的識別位點甲基化和限制活性相互排斥:MS亞基促使甲基化,R亞基促使限制 (c)由兩個亞基組成,在識別位點附近識別并進行甲基化或限制 (d)在錯配修復(fù)中起關(guān)鍵作用,因為酶結(jié)合到DNA上是以結(jié)構(gòu)扭曲為基礎(chǔ)而不是序列錯誤識別 (e)是光依賴型酶,是嘧啶二聚體進行“光反應(yīng)”的關(guān)鍵酶,它們能使胸腺嘧啶二聚體間的共價鍵斷裂 9. 末端轉(zhuǎn)移酶是合成酶類,( ) (a)作用時不需要模板 (b)在Co2+的存在下,可以在突出的3末端延長DNA鏈 (c)在C02+的存在下,可以在隱蔽的3末端延長DNA鏈(d)上述說法有兩種是正確的 10.下列哪種克隆載體對外源DNA的容載量最大?( ) (a)質(zhì)粒

5、(b)黏粒 (c)酵母人工染色體(YAC) (d)噬菌體(e)cDNA表達載體 二、判斷題(每題1分,共計10分)1 基因組DNA文庫是含有某一生物中全部DNA序列隨機克隆的克隆群,而cDNA文庫是含有某一生物中所有表達基因隨機克隆的克隆群。 ( )2 脈沖凝膠電泳采用一個很強的電場來分離非常長的DNA分子,其原理在于迫使DNA分子根據(jù)長度的不同而具有不同的速度,并按大小順序通過凝膠. ( )3 噬菌粒(phagemid)pUCll8pUCll9載體是集質(zhì)粒和絲狀噬菌體有利特征于一身的載體,既能合成單鏈DNA,又能合成雙鏈DNA。 ( )4 有a、b、c三個質(zhì)粒,因為a和b能夠共存于一個細胞,

6、a和c也可共存于同一個細胞,所以b和c一定能夠共存于同一個細胞。 ( ) 5反轉(zhuǎn)錄酶能夠以單鏈RNA或單鏈DNA為模板,在引物的引發(fā)下合成一條互補的DNA鏈。以RNA為模板合成的DNA是互補DNA(complementary DNA,cDNA)。若是以DNA模板合成DNA,dNTP的摻人速度很低(約5個核苷酸秒),比T7DNA聚合酶的合成速度差不多低100倍。 ( )6. DNA的復(fù)制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。 ( )7. DNA中四個常用堿基自發(fā)脫氨基的產(chǎn)物,都能被識別出來。 ( )8. 因為類病毒不編碼任何蛋白但又能夠復(fù)制并在植物中造成嚴重的疾病,所以非常特殊。9.糾正下列一段話中的

7、錯誤: ( ) 在E.coli中,通過RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點堿基互補的dNTP同亞基結(jié)合,然后是第二個dNTP通過與第一個dNTP形成2'5'磷酸二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個核苷酸長度時,'亞基脫離DNA聚合酶,RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng)DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼子時,轉(zhuǎn)錄作用停止。( )10. G-U堿基負責(zé)fMet-tRNA對GUG的識別。 ( )三、填空1 無義突變是將一種氨基酸的-轉(zhuǎn)變成-密碼子,結(jié)果使蛋白質(zhì)鏈-。一個堿基的插入或-叫-突變。由于三聯(lián)-的移動,突變位置-的整個氨基酸序列都會被改變。上述兩

8、種類型的突變(插入和缺失)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)同-的不同,通常是完全-。 2酵母的Ty1元件是一種-,它的轉(zhuǎn)座需一段完整RNA轉(zhuǎn)錄物的合成,這個轉(zhuǎn)錄物又被復(fù)制成一個雙螺旋DNA,隨后被整合到一個新的染色體位置。 3.黑皮素原是-被切割以后可以產(chǎn)生很多活性蛋白質(zhì)的一個例子。如-之類的RNA病毒也能合成類似的結(jié)構(gòu)物。蛋白水解過程也涉及細胞外毒素的活性,如蜜蜂的-和動物激素的活性,如-和-。4-催化肽鍵的形成,一般認為這個催化反應(yīng)是由核糖體大亞基上的-分子介導(dǎo)的。 5 Cohen等在-年構(gòu)建了第一個有功能的重組DNA分子。 6.按照人們的意愿,改變基因中堿基的組成,以達到-的技術(shù)稱為-。 四、簡答題(每題

9、3分,共計30分)1.PCR的基本原理是什么?用PCR擴增某一基因,必須預(yù)先得到什么樣的信息? 2.下面幾種序列中你認為哪一個(哪些)最有可能是類酶的識別序列:GAATCG,AAATTT, GATATC, ACGGCA?為什么? 3. 為什么說翻譯后氨基酸的化學(xué)修飾與蛋白質(zhì)總體構(gòu)象的形成有關(guān)? 4. 哪一種真核生物RNA不需要加工? 5. MyoD是一種bHLH蛋白,對肌肉細胞的發(fā)育很重要,它的活性是如何被調(diào)控的?6. 酵母mRNA的大小一般與基因的大小相一致。而哺乳動物mRNA比對應(yīng)的基因明顯小。為什么? 7. 在原核生物中,核心酶與DNA的松散結(jié)合和緊密結(jié)合之間存在一種平衡,為什么這比核心

10、多聚酶自身形成游離與結(jié)合平衡更有利? 8. 羥胺對游離噬菌體和轉(zhuǎn)化DNA都是高度特異的致變劑。它只與DNA中的C反應(yīng),使之轉(zhuǎn)變成偶爾可與A錯配的形式。 (1)羥胺誘導(dǎo)的堿基替代是什么? (2)推測羥胺是否可回復(fù)自身誘導(dǎo)的突變? (3)羥胺可以回復(fù)5溴尿嘧啶誘導(dǎo)的突變嗎?(4)5溴尿嘧啶可以回復(fù)羥胺誘導(dǎo)的突變嗎? 9. 為什么一些細菌完成分裂的時間比細菌基因組的復(fù)制所需的時間要少?為什么在選擇營養(yǎng)條件下,E.coli中可以存在多叉的染色體或多達4個以上的開環(huán)染色體拷貝,而正常情況下染色體是單拷貝的? 10.氨基酸分子如何與正確的tRNA分子連接? 五、設(shè)計分析題(每題5分,共計10分)1.除了u

11、vrABC內(nèi)切核酸酶修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù),細菌還具備一種對嘧啶二聚體更有效的修復(fù)系統(tǒng)。這個現(xiàn)象是在一個關(guān)于紫外線對細菌影響的調(diào)查中為了確定一個失控的數(shù)量而發(fā)現(xiàn)的。發(fā)現(xiàn)過程可以假設(shè)為:你與你的同事正試圖利用紫外線作為誘變劑來分離大腸桿菌中的突變體,為得到足夠的突變子,你覺得有必要使用對細菌殺傷率為9999的輻射劑量。比起你的同事你已經(jīng)獲得了更可靠的結(jié)果,而他要用10倍至100倍的輻射劑量才能獲得同樣的殺傷率。因為你常在晚上他離開后才做實驗,所以他有點懷疑你結(jié)果的可靠性,他堅持你早上來做一個平行實驗。當(dāng)你們都得到同一結(jié)論時你們兩人都感到驚奇,你有些懊惱,因為結(jié)果更接近你同事的結(jié)論;當(dāng)你在晚上

12、重復(fù)平行實驗時,你的同事對結(jié)果感到很驚奇,結(jié)果正如你以前所描述的一樣。你發(fā)現(xiàn)在下午要取得同樣的殺傷率需要用比早上更高的輻射劑量,晴天比陰天需要的劑量高,你的實驗室朝西,是什么因素影響著你的實驗? 2.蛋白質(zhì)合成的整體準(zhǔn)確性是很難衡量的,一方面,因為極端的準(zhǔn)確和錯誤是罕見的,而 且細胞似乎能很快地消滅它仃丁的錯誤;另一方面,技術(shù)上也有困難。比如,能夠確切鑒定一種蛋白質(zhì)到哪種程度,從概念上說,這和知道怎樣提純,鑒定是兩碼事。解決這個問題的一個聰明的方法是利用細菌鞭毛蟲惟一蛋白:鞭毛蛋白(分子量為40000)。 鞭毛蛋白有兩個優(yōu)點: 首先,鞭毛(即鞭毛蛋白)能被從細菌上切下并用差速離心純化,另外,鞭

13、毛蛋白中不含Cys,因此允許利用Cys錯誤加入肽鏈進行靈敏的檢測。為了放射性標(biāo)記Cys,細菌在含35S042-(放射活性為5.0× 103 cpmpmol)和過量的未標(biāo)記Met的生長培養(yǎng)基中恰好生長一個世代(這種情況下無可測出的放射性進入Met), 把所得的鞭毛蛋白純化并在SDS-聚丙酰胺凝膠電泳,發(fā)現(xiàn)從凝膠上回收的8g鞭毛蛋白中含有35S帶來的放射性為300cpm。請問: (1)在放射標(biāo)記時期內(nèi)合成的鞭毛蛋白分子中有百分之幾含有Cys?假設(shè)在標(biāo)記期間,鞭毛蛋白的總量加倍且鞭毛蛋白中Cys的特異活性與用來標(biāo)記細胞的35SO42-了的特異活性是一樣的。 (2)在鞭毛蛋白中,Cys在Arg密碼子CGU和CGC的位置錯誤

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