生物技術(shù)實踐專題2--微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用??贾R點整理及(練習(xí)無答案)_第1頁
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生物技術(shù)實踐專題2--微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用常考知識點整理及(練習(xí)無答案)_第3頁
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文檔簡介

1、考點圖微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1 .培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)分為液體培養(yǎng)基常應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)、固體培養(yǎng)基常應(yīng)用于微生物的別離和鑒定和半固體培養(yǎng)基常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等.2 .根據(jù)成分培養(yǎng)基分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基.合成培養(yǎng)基是用成分的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的別離鑒定.天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實際工業(yè)生產(chǎn).3 .根據(jù)培養(yǎng)基的用途可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基.選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中參加某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進所需要的微生物的生長.鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點,在培養(yǎng)基中參加某種指示劑或化學(xué)藥品配制而

2、成的,用以鑒別不同類別的微生物.4 .微生物的實驗室培養(yǎng)常用瓊脂是從紅藻中提取的一種多糖作凝固劑.5 .培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等.碳源是能為微生物的代謝提供碳元素白物質(zhì),如CO、NaHC以無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源.異養(yǎng)微生物只能利用有機碳源.單質(zhì)碳不能作為碳源.氮源是能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì),如Nt、NH、NO-、NH+無機氮源蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白月東有機氮源等.只有固氮微生物才能利用N2.培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求.例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性

3、,培養(yǎng)細菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是那么需要提供無氧的條件6 .無菌技術(shù)包括消毒和滅菌.對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和消毒.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌.為預(yù)防周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行.實驗操作時應(yīng)預(yù)防已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸.無菌技術(shù)還能有效預(yù)防操作者自身被微生物感染.7 .消毒與滅菌的區(qū)別:消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物不包括芽胞和抱子.消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法對于一些不耐高溫的液體還有化學(xué)藥劑如酒精、氯氣、石炭酸等消毒、紫

4、外線消毒;滅菌那么是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子.滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌.比擬項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽抱和抱子能否被消滅較為溫和局部生活狀態(tài)的微生物不能火菌強烈全部微生物能8 .接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌邕.外表滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈.9 .制作牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板.10 .倒平板操作的步驟:將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右

5、手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞.右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰.用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基約1020mD倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋.等待平板冷卻凝固,大約需510min.然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上.11 .純化大腸桿菌意思是別離提純大腸桿菌.12 .微生物接種的方法最常用的是平板劃線法使聚集在一起的微生物分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基外表形成單個的菌落,以便于純化菌種.和稀釋涂布平板法分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步.13 .涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行保證無菌操作.應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌.

6、例如酒精燈與培養(yǎng)皿的距離適宜、吸管頭不要接觸其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍.14 .菌種的保存:臨時保藏方法頻繁使用的菌種,甘油管藏的方法長期保存的菌種.臨時保藏方法,將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在適宜的溫度下培養(yǎng).當菌落長成后,將試管放入4c的冰箱中保藏.以后每36個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上.該法的缺點:這種方法保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異.甘油管藏的方法,在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌.將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20c的冷凍箱中保存.15 .別離土壤中分解尿素的細菌含月尿酶的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基以尿素

7、為唯一氮源.16 .影響微生物生長的因子:營養(yǎng)、溫度、pH等.17 .參加高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等.18 .測定微生物數(shù)量的常用方法:稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù).19 .稀釋涂布平板法一般選取菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù),本法限于形成了菌落的微生物.20 .微生物的“天然培養(yǎng)基是土壤.21 .每克樣品中的菌落數(shù)=C/VMC代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積ml,M代表稀釋倍數(shù)22 .纖維素,一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì).23 .纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認為它至少包括三種組分,即Ci酶、Cx

8、酶和葡萄糖昔酶.前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖.纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng).24 .別離土壤中分解纖維素的細菌含纖維素酶的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基以纖維素為碳源.25 .篩選纖維素分解菌方法:剛果紅染色法.能夠通過顏色反響直接對微生物進行篩選.剛果紅是一種染料,它與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生反應(yīng).當在含有纖維素的培養(yǎng)基中參加剛果紅時,剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物.當纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中央的透明圈.這樣就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維

9、素分解菌.26 .纖維素分解菌的帥選流程:土壤取樣一選擇培養(yǎng)此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定一梯度稀釋一將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落27 .參加剛果紅的順序:一種是先培養(yǎng)微生物,再參加剛果紅進行顏色反響,另一種是在倒平板時就參加剛果紅.補充知識點:為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮的作用.【典例1】某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗.實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù).請答復(fù)

10、與此實驗相關(guān)的問題:(1)培養(yǎng)基中含有蛋白月東、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了氮源和.除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的根本成分是和.(2)對培養(yǎng)基進行滅菌,應(yīng)該采用的方法是.(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果,應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37Co要使該實驗所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時在另一平板上接種作為對照進行實驗.(4)培養(yǎng)20小時后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有種細菌.一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細菌污染的程度越.(5)如果提升培養(yǎng)基中NaCl的濃度,可以用于篩選耐細菌,這種培養(yǎng)基(按功能分)被稱為.【典例2】某化工廠的污水池中,含有一種有害的、

11、難以降解的有機化合物A,研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(“目的菌).請分析答復(fù)以下問題:(1)配制該培養(yǎng)基時確定各成分用量的原那么.培養(yǎng)基配制好后,分裝前應(yīng);接種前要進行,采用的方法是.將配制好的培養(yǎng)基分裝到容器中,放入中滅菌,壓力kPa,溫度,時間.滅菌完畢后拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力自然降到0時,將容器取出.如果棉塞上沾有培養(yǎng)基,此試管應(yīng).使用高壓蒸汽滅菌鍋時注意,先向鍋內(nèi)倒入,把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉.從配制培養(yǎng)基到培養(yǎng)完成,所采用的預(yù)防雜菌感染的方法是.(2) “目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基

12、中的,假設(shè)實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌的代謝類型是.假設(shè)要配制觀察細菌菌落狀況的培養(yǎng)基,還需添加的成分是.凝固前要擱置斜面,其目的是c成分含量蛋白月東10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0g“HPO2.0g顯色劑0.2g瓊脂12.0g(3)培養(yǎng)假設(shè)干天后,應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌的數(shù)量.為了使該實驗所得結(jié)果可靠,應(yīng)該同時在另一平板上接種作為對照進行實驗.在整個微生物的培養(yǎng)中,一定要注意在條件下進行.(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選.(5)假設(shè)要研究“目的菌的生長規(guī)律,可將單個菌落進行液體培養(yǎng),采用的方法進行計數(shù),以時間

13、為橫坐標,以為縱坐標,繪制生長曲線.(6)實驗結(jié)束時,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行處理后才能倒掉,以預(yù)防培養(yǎng)物的擴散.(7)如果要檢測水中是否含有大腸桿菌,培養(yǎng)基中還應(yīng)參加染料,下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方.將上述物質(zhì)溶解后,用蒸儲水定容到1000mL,根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基(選擇、鑒別).該培養(yǎng)基中的碳源是.在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件.由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、等優(yōu)點,因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料.在在微生物培養(yǎng)操作過程中,為預(yù)防雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進行清洗和;

14、靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能.假設(shè)用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應(yīng)嚴格操作、屢次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測樣品稀釋的.通常,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的.培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染.對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用白檢測方法是.測定的大腸桿菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果,正確可信的是A.一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是23B.兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是22和26,取平均值24C.三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52,取平均值26D.四個平板,統(tǒng)計

15、的菌落數(shù)分別是21、30、24和25,取平均值25(8)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL).用這種方法測定密度,實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù),由于.(9)利用培養(yǎng)基不僅可以別離培養(yǎng)微生物,也可以進行植物組織培養(yǎng).與微生物培養(yǎng)明顯不同的是,用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還需要參加.【(2021年新課標卷)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同學(xué)欲從土壤中篩選出高效降解原油的菌株.答復(fù)以下問題:(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源

16、的固體培養(yǎng)基土,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基.(2)純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即和.(3)為了篩選出高效菌株,可比擬單菌落周圍分解圈的大小,分解圈說明該菌株的降解水平.(4)通常在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和.無菌技術(shù)要求試驗操作應(yīng)在酒精燈附近進行,以預(yù)防周圍環(huán)境中微生物的污染.【(2021年上海高考)生物一一選修1:生物技術(shù)實踐】(15分)答復(fù)以下關(guān)于微生物和酶的問題.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性.研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖.晴熱撕不亂(1)過程稱為,過程是為了.(2)I號培養(yǎng)基稱為(按功能

17、分);該培養(yǎng)基中除了參加淀粉外,還需參加另一種重要的營養(yǎng)成分.A.瓊脂B.葡萄糖C.硝酸俊D.碳酸氫鈉(3)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌,其中“高壓是為了.在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前,需對該酶的最正確溫度范圍進行測定.以下圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比.將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其剩余酶活性,由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),即圖中的曲線,據(jù)圖答復(fù):熱虞門下(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù),判斷該酶使用的最正確溫度范圍是.A.40c50CB.50c60CC.60c70CD.70C-80C(5)據(jù)圖判斷以下表達錯誤的選項是.A.該酶只能在最正確溫

18、度范圍內(nèi)測出活性B.曲線35c數(shù)據(jù)點是在80c時測得的C.曲線說明80c是該酶活性最高的溫度D.曲線說明該酶的熱穩(wěn)定性在70c之后急劇下降補充知識點:(1)生物的營養(yǎng):營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程.營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機體生命活動,保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì).人及動物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類.植物的營養(yǎng)物質(zhì)有礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類.微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類.(2)為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的

19、幾率要高于普通環(huán)境.(3)將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認為濾紙應(yīng)該埋進土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集,實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境.一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中.【(山東濟南一模)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)下表為某微生物培養(yǎng)基的配方,請答復(fù)相關(guān)問題:成分含量成分含量Na2HPO43gwr1.0gK2HPO41gC6H12O630gMgSO47H2O0.5g瓊脂15gFeSO40.01gH2O1000mlNH4NO30.3g(1)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分屬于培養(yǎng)基,無論配制何種培養(yǎng)基,在原料稱量、溶解之后要,然后分裝、包扎并滅菌,常用的滅菌

20、方法是.(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷,該培養(yǎng)基能否用于別離土壤中分解尿素的細菌?,原因是.(3)為檢測尿素分解菌是否存在,還應(yīng)參加,如果存在,將出現(xiàn)反響.(4)微生物常用的接種方法有.【(山東高考生物模擬試卷)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)有些微生物能合成纖維素酶,通過對這些微生物的研究,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精,用纖維素酶處理服裝面料等.研究人員用化合物A、硝酸鹽、磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物.(1)培養(yǎng)基中加人的化合物A是,目的是為微生物的生長提供:這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基.(2)為了篩選出能產(chǎn)生纖維索酶的微生物,可向培養(yǎng)基中參加.(3)在

21、篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前,可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),增加微生物的濃度.假設(shè)要獲得純潔的菌株,常采用平板劃線的方法進行接種,此過程所用的接種工具是:操作時采用滅菌的方法,還可用法操作來獲得純潔的菌株.(4)實驗結(jié)束后,需要對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理過才能倒掉,這樣做的目的【(2021屆云師大聯(lián)考3)生物選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)研究發(fā)現(xiàn)乳酸菌素和香茅油均有抑菌作用,請答復(fù)以下問題:(1)實驗室為獲得純潔的乳酸菌菌種,常用的方法有稀釋涂布平板法和.某同學(xué)在采用稀釋涂布平板法別離乳酸菌時,其實驗操作標準,結(jié)果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片,請?zhí)岢龊侠淼母牧寂e措.(2)現(xiàn)要通過培養(yǎng)乳酸菌獲得乳酸

22、菌素,那么發(fā)酵前要對發(fā)酵裝置和培養(yǎng)基進行處理,在發(fā)酵過程中要保證的環(huán)境.(3)香茅油難溶于水,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,現(xiàn)要從驅(qū)蚊草中提取香茅油,可用法,利用該方法提取香茅油的過程需要參加NaCl的作用是,參加無水Na2SO4的作用是.(4)在培養(yǎng)大腸桿菌的平板上參加香茅油或乳酸菌素,會出現(xiàn)抑制細菌物質(zhì)為中央的透明圈,可通過來比擬香茅油和乳酸菌素的抑制效果.【(2021年寧夏卷)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮、和滲透壓等條件.由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、等優(yōu)點,因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料.(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,

23、為預(yù)防雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進行清洗和;靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能.(3)假設(shè)用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應(yīng)嚴格操作、屢次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測樣品稀釋的.(4)通常來說,對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的.(5)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染.對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是.(6)假設(shè)用大腸桿菌進行實驗,使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過處理后才能丟棄,以預(yù)防培養(yǎng)物的擴散.【(山東濱州一模)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(

24、15分)下表是用于從土壤中別離純化土壤細菌的牛肉膏、蛋白月東培養(yǎng)基的配方.試劑用量試劑用量牛肉膏5g瓊脂20g蛋白月東10g水1000mLNaCl5g(1)培養(yǎng)基的類型很多,但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、和無機鹽.上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是.(2)別離純化微生物最常使用的接種方法是和兩種.在接種過程中,接種針或涂布器的滅菌方法是.(3)某同學(xué)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細菌數(shù)目過多連成一片,原因解決舉措.(4)如果將別離得到的土壤細菌轉(zhuǎn)移放入大試管中進一步培養(yǎng),那么大腸桿菌的增長規(guī)律呈現(xiàn)型曲線增長.(5)該培養(yǎng)基能否用于篩選土壤中的纖維素分解菌?.在篩選纖維素分解菌時,常參加的一種染料是,該染料可以與

25、纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反響,所以可以通過是否產(chǎn)生來篩選纖維素分解酶.乙醇等“綠色能源的開發(fā)備受世界關(guān)注.利用玉米秸桿生產(chǎn)燃料酒精的大致流程為:(1)玉米秸桿經(jīng)預(yù)處理后,應(yīng)該選用酶進行水解,使之轉(zhuǎn)化為發(fā)酵所需的葡萄糖.從以下哪些微生物中可以提取上述酶?A.釀制果醋的醋酸菌B.C.制作酸奶的乳酸菌D.(3)假設(shè)從土壤中別離產(chǎn)生這種酶的微生物,培養(yǎng)基中的碳源為.(多項選擇)(3分)生長在腐木上的霉菌生產(chǎn)味精的谷氨酸棒狀桿菌所需要的培養(yǎng)基為(按功能分),(4)從生物體提取出的酶首先要檢測酶的活力(活性),以便更好地將酶用于生產(chǎn)實踐.技術(shù).在生產(chǎn)糖液

26、的過程中,為了使酶能夠被反復(fù)利用,可采用(5)發(fā)酵階段需要的菌種是,在產(chǎn)生酒精時要限制的必要條件是【(2021屆玉溪一中期中)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染.某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株.答復(fù)以下問題:(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基(2)純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即和.(3)為了篩選出高效菌株,可比擬單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解水平.(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、

27、和.無菌技術(shù)要求試驗操作應(yīng)在酒精燈附近進行,以預(yù)防周圍環(huán)境中微生物的污染.【(2021屆昆一中開學(xué)測試)生物選彳11生物技術(shù)實踐】(15分)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白.中接種等量金黃色葡萄球菌,培養(yǎng)一定時間后,白質(zhì)的抗菌效果.分別在參加和未參加該抗菌蛋白的培養(yǎng)基比擬兩種培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量,可確定該蛋(1)抗菌實驗所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白臍主要為細菌生長提供.滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是.抗菌蛋白需在滅菌(填“前或“后)參加.(2)對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是.實驗前需對超凈工作臺進行處理.(3)該實驗接種金黃色葡萄球菌的方法是.(4)實驗中的自變量是,因變量是.(5)有人認為

28、抗菌蛋白本身具有極強的抗菌水平,因此,該實驗操作不需要在無菌條件下進行.請你談?wù)勛约旱挠^點,并簡要說明理由【(2021屆昆一中雙基檢測2)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)在實驗室中,經(jīng)稀釋后用平板別離純化微生物的方法有稀釋涂布平板法和稀釋倒平板法.兩種方法的主要區(qū)別在于:前者是取一定稀釋度的樣品,用無菌涂布器將其均勻涂布于預(yù)先制備好的瓊脂平板上;后者那么是取一定稀釋度的樣品與熔化的瓊脂培養(yǎng)基混合均勻后,倒入無菌培養(yǎng)皿中.請答復(fù)以下相關(guān)問題:(1)在進行稀釋倒平板時,已熔化并用(填實驗儀器)滅菌的瓊脂培養(yǎng)基,需要冷卻到左右才能與樣品稀釋液混合并倒平板.(2)假設(shè)要從某土壤中別離數(shù)量極少的、

29、能降解對羥基苯甲酸(一種含碳化合物)的微生物,在樣品稀釋之前,最好先用液體培養(yǎng)基進行,該培養(yǎng)基中除了含有對羥基苯甲酸以外,還應(yīng)參加等主要營養(yǎng)物質(zhì).(3)假設(shè)稀釋得當,兩種方法均可得到菌落,上述兩種方法都只能初步別離純化菌種.假設(shè)要保證得到的是纖維素分解菌,還需要通過來確定.(4)有同學(xué)在對某種霉菌接種培養(yǎng)的24h之內(nèi),每隔8h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,然后進行了樣品中菌落數(shù)量的計算:他的計算結(jié)果(填“大于、“小于或“等于")活菌的真實值,這是因為.【(2021屆寧夏一中模擬2)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)人和哺乳動物的尿中含有尿素,大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染.土壤中有些細菌含有

30、月尿酶,可通過降解尿素作為其生長的氮源.現(xiàn)對土壤中的這類細菌進行別離實驗,請答復(fù)以下問題:(1)別離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作,包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的,常用的滅菌方法有、和.(2)將樣液進行一系列的梯度稀釋,然后接種培養(yǎng).在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在旁進行操作.接種后的培養(yǎng)皿于37c的中培養(yǎng).(3)用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌月尿酶的細菌,從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基.假設(shè)培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細菌,其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶,這是由于尿素被分解產(chǎn)生的使pH升高,酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化,從而證實這一菌株可以尿素為氮源.變色區(qū)域越大,說明該菌株利用尿素的水平.(4)與

31、全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比,以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)().A.多B.少C.相等D.幾乎為零【(2021屆黑龍江最新模擬)某班同學(xué)用新鮮蘋果榨取果汁并制作果酒,其簡要流程如下:新鮮蘋果一清洗干凈一去掉果核一榨汁機榨汁一果汁一固定化酵母菌細胞一擴大培養(yǎng)一從成品果酒中別離酵母菌一->發(fā)酵一果酒(1)實驗過程中,該小組同學(xué)發(fā)現(xiàn)榨取的果汁非常渾濁,解決的方法是.(2)別離酵母菌應(yīng)使用培養(yǎng)基.(3)在酸性條件下,可用來檢測發(fā)酵產(chǎn)物中是否有酒精產(chǎn)生.假設(shè)想進一步檢測所得果酒中酵母菌的密度,可采用法.(4)發(fā)酵完成后,該班同學(xué)制作的果酒品質(zhì)非常好,為方便后續(xù)年級使用,可將菌液保存.(5)另一個班的同學(xué)

32、用葡萄制做的果酒酒味醇正,放置一段時間后,發(fā)現(xiàn)果酒帶有明顯的酸味,請分析出現(xiàn)酸味的原因.【(2021河南焦作一模)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】(15分)急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌、病毒通過消化道進入人體導(dǎo)致的.因此檢驗飲用水的細菌、病毒的含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要舉措.請答復(fù)以下有關(guān)的問題:(1)檢驗大腸桿菌的含量時,通常將水樣進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表進行培養(yǎng),記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為.以下圖所示的四種菌落分布圖中,不可能由該方法得到的是.A.B,C.D,(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是(是或否).原因(3)有三種材料或用具需

33、要消毒或滅菌:培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;玻棒、試管、燒瓶和吸管;實驗操作者的雙手.其中需要消毒的是,需要滅菌的是(2021名校最新模擬)生物一一選彳1生物技術(shù)實踐】富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強有力的技術(shù)手段之一.主要是利用不同微生物生命活動特點的不同,制定環(huán)境條件,使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長,從而使其數(shù)量大大增加.如圖描述了采用富集方法從土壤中別離能降解酚類化合物一一對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程.請分析答復(fù):假設(shè)與壤樣曲接弦烈中將的菌落接種到液體赭落在平板上生長培養(yǎng)笈如整患委雷的液涂布到含有讀物質(zhì)培養(yǎng)基并進行培養(yǎng)體褚集培養(yǎng)送中_的培養(yǎng)平板外表在沒有謨底物的培養(yǎng)基中不能生長在含有讀底物的培養(yǎng)基中表現(xiàn)為生長®(1)一重復(fù)培養(yǎng)的目的是.(2)的菌落中大局部是能降解的微生物.設(shè)置的目的是.(3)一采用單細胞挑取法,將所選菌種接種到的培養(yǎng)基中,在操作過程中為預(yù)防污染應(yīng)注意的事項是:接種環(huán)要滅菌,待其后,再挑取菌落接種到試管中,并塞好棉塞,操作完成后需將接種環(huán)在火焰上灼燒,目的是.(4)如果用這種方法別離土壤中的纖維素分解菌,經(jīng)常用參加了的鑒別培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基

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