微生物作業(yè)及答案

1、微生物習題集第一章 緒論 選擇題(4個答案選1)1當今，一種新的瘟疫正在全球蔓延，它是由病毒引起的( )。 A 鼠疫 B 天花 C 艾滋病(AIDS) D 霍亂2微生物在整個生物界的分類地位，無論是五界系統(tǒng)，還是三域(domain)系統(tǒng)，微生物都占據(jù)了( )的“席位”。 A 少數(shù) B 非常少數(shù) C 不太多 D 絕大多數(shù)3微生物學的不斷發(fā)展，已形成了基礎(chǔ)微生物學和應(yīng)用微生物學，它又可分為( )的分支學科。 A 幾個不同 B 少數(shù)有差別 C許多不同 D4個不同4公元9世紀到10世紀我國已發(fā)明( )。 A曲蘗釀酒 B用鼻苗法種痘 C烘制面包 D釀制果酒5安東列文虎克制造的顯微鏡放大倍數(shù)為( )倍，利

2、用這種顯微鏡，他清楚地看見了細菌和原生動物。 A50300 B10左右 C220 D5001 0006據(jù)有關(guān)統(tǒng)計表明，20世紀諾貝爾獎的生理學或醫(yī)學獎獲得者中，從事微生物問題研究的就占了( ) 。 A110 B23 C120 D137巴斯德為了否定“自生說”，他在前人工作的基礎(chǔ)上，進行了許多試驗，其中著名的( )無可辯駁地證實：空氣中確實含有微生物，它們引起有機質(zhì)的腐敗。 A厭氧試驗 B滅菌試驗 C曲頸瓶試驗 D菌種分離試驗8柯赫提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則( )。 A巴斯德原則 B柯赫原則 C 菌種原則 D 免疫原理9微生物基因組序列分析表明，在某些微生物中存在一些與人

3、類某些遺傳疾病相類似的基因，因此可以利用這些微生物作為( )來研究這些基因的功能，為認識龐大的人類基因組及其功能做出重要貢獻。 A 模式生物 B 受體 C 供體 D 突變材料10我國學者湯飛凡教授的( )分離和確證的研究成果，是一項具有國際領(lǐng)先水平的開創(chuàng)性成果。 A 鼠疫桿菌 B 沙眼病原體 C 結(jié)核桿菌 D天花病毒習題解答1 C 2 D 3 C 4 D 5 A 6 D 7 C 8 B 9 A 10 B第二章 微生物的純培養(yǎng)和顯微鏡技術(shù)一、術(shù)語或名詞1菌落(c010ny) 單個微生物細胞在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到定程度形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體。2菌苔(la

4、wn) 固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時所形成的微生物生長群體。 3平皿(Petri dish) 由玻璃或透明塑料制成的圓形皿底和皿蓋組成，皿蓋可覆蓋于皿底之 上，防止空氣中微生物的污染。其英文名稱是為紀念其發(fā)明者Richard Petri。 4純培養(yǎng)物(pureculture) 由一種微生物組成的細胞群體，通常是由一個單細胞生長、繁殖所形成。 5培養(yǎng)基(culturemedium) 供微生物生長、繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，根據(jù)其中固化劑含量的不同可分為固體、半固體、液體3種。 6無菌技術(shù)(aseptic technique) 在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純種微生物時，防止其被環(huán)境中微生物污染或其自身污染環(huán)境的技

5、術(shù)。 7培養(yǎng)平板(cultureplate) 常簡稱為平板，指固體培養(yǎng)基倒人無菌平皿，冷卻凝固后所形成的培養(yǎng)基平面。 8稀釋倒平板法(pour plate method) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至50左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后制成可能含菌的培養(yǎng)平板，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長在固體培養(yǎng)基表面和里面。 9涂布平板法(spread plate method) 在培養(yǎng)平板表面均勻涂布經(jīng)過稀釋的微生物懸液后，保溫培養(yǎng)，在固體培養(yǎng)基表面得到生長分離的微生物菌落。 10平板劃線法(streakplatemethod) 用接種環(huán)在培養(yǎng)平板表面劃線接種微生物，使微生物細胞數(shù)量隨著劃線次數(shù)

6、的增加而減少，并逐步分開。保溫培養(yǎng)后，在固體培養(yǎng)基表面得到生長分離的微生物菌落。 11稀釋搖管法(dilutionshakeculturemethod) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至50C左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后用石蠟封蓋，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長在瓊脂柱中間。 12單細胞分離法(singlecellpickupmethod) 采用顯微操作技術(shù)直接挑取微生物的單細胞(孢子)，培養(yǎng)后獲得純培養(yǎng)物。 13富集培養(yǎng)(enrichmentculture) 利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定特定的環(huán)境條件，使僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，從自

7、然界中分離到所需的特定微生物。 14二元培養(yǎng)物(twocomponentculture) 由兩種具有特定關(guān)系(例如寄生或捕食)的微生 物組成的混合培養(yǎng)物。 15原子力顯微鏡(atomicforcemicroscope) 掃描探針顯微鏡的一種，利用細小的探針對樣品表面進行恒定高度的掃描，同時通過一個激光裝置來監(jiān)測探針隨樣品表面的升降變化來獲取樣品表面形貌的信息。 16明視野顯微鏡(brightfield microscope) 這種顯微鏡的照明方式為透射照明，即光線直接進入視野，在一個相對明亮的背景中形成一個暗的物像。 17聚焦掃描激光顯微鏡(confocal scanning laser mi

8、croscope，CSLM) 這種顯微鏡采用激光作為光源，每次僅對一個點進行照射，從而大大減少樣品其他部分發(fā)出的雜散光的干擾。觀察時通過激光器或載物臺掃描，計算機處理，最終獲得反差鮮明、高分辨率的三維立體數(shù)字圖像。 18熒光顯微鏡(fluorescence microscope) 這種顯微鏡用紫外線或藍紫光照射經(jīng)過熒光染料染色的樣品，然后觀察激發(fā)出的熒光所形成的物像。19數(shù)值孔徑(numerical aperture) 決定顯微鏡物鏡分辨率性能物理指標，取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率。20相差顯微鏡(phasecontrast microscope) 這種光學顯微鏡通過特殊的裝置

9、把樣品不同部位間折射率和細胞密度的微弱差異轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X的明暗差，可在不染色的情況下對透明的活細胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)進行直接觀察。21分辨率(resolution) 能辨析兩點之間最小距離的能力，距離越小，分辨率越高。22掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope，SEM) 這種電子顯微鏡用電子束掃描樣品表面，收集從表面發(fā)出的二次電子形成樣品的表面圖像。23掃描探針顯微鏡(scanning probe microscope) 通過在物體表面移動一種敏銳的探針來研究表面特征的顯微鏡(如掃描隧道顯微鏡)。24掃描隧道顯微鏡(scanning tunnelingmicro

10、scope) 掃描探針顯微鏡的一種，用細小的探針在樣品表面進行掃描，通過檢測針尖和樣品間隧道效應(yīng)電流的變化形成物像。25透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope) 這種顯微鏡用電子束透射樣品，用磁透鏡使散射的電子聚焦成像。26反差(contrast) 被觀察物區(qū)別于背景的程度。27暗視野顯微鏡(darkfield microscope) 這種顯微鏡利用特殊的聚光器進行斜射照明，經(jīng)樣品反射或折射的光線進入物鏡成像。28固定(fixation) 制樣過程中使整個機體及其細胞的內(nèi)、外結(jié)構(gòu)被保存并固定在適當位置的過程。29負染色(negative staining)

11、 染料使背景顏色加深而樣品沒有著色的染色法。30菌絲體(mycelium) 聚成一團的分支菌絲，見于真菌和某些細菌。31菌絲(hypha) 大多數(shù)霉菌和某些細菌的結(jié)構(gòu)單位，管形絲狀體。32雙球菌(diplococcus) 分裂后成對排列的球菌。33球菌(COCCUS) 細胞大致呈球狀的細菌。34螺菌(spirillum) 剛性的螺旋狀細菌。35螺旋體(spirochete) 柔韌的螺旋狀細菌，具有周質(zhì)鞭毛。36桿菌(rod) 細胞呈桿狀的細菌。37柄細菌(prosthecate bacteria) 細胞上有柄、菌絲、附器等細胞質(zhì)伸出物，細胞呈桿狀或梭狀，并有特征性細柄的細菌。38霉菌(mold

12、) 以多細胞絲狀群體形式生存的真菌。39真菌(fungi) 有線粒體，無葉綠體，沒有根、莖、葉分化，以無性和有性孢子進行繁殖的真核微生物。40酵母菌(yeast) 單細胞真菌。41藻類(algae) 能進行光合作用的真核微生物。42原生動物(prokaryote) 缺少真正細胞壁，具有運動能力，進行吞噬營養(yǎng)的單細胞真核微生物。二、習 題填空題1動植物的研究能以 體為單位進行，而對微生物的研究一般用 體。2在微生物學中，在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物，其中只有 3一般情況下，培養(yǎng)微生物的器具，在使用前必須先行 ，使容器中不含 。 4用培養(yǎng)平板進行微生物純培養(yǎng)分離的方法包括

13、： 、 和 。 5微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對該微生物進行 、 的重要依據(jù)。 6微生物保藏的目標就是要使所保藏菌株在一段時間不 、不 和不 。 7一般說來，采用冷凍法時，保藏溫度越 ，保藏效果越 。 8, 、 和 是影響顯微鏡觀察效果的3個重要因素。9光學顯微鏡能達到的最大有效放大倍數(shù)是 ，這時一般使用 X的目鏡，和 x的物鏡，并應(yīng)在物鏡鏡頭和玻片之間加 。10采用明視野顯微鏡觀察未經(jīng)染色的標本(如活的細胞)時， 光的 和 都沒有明顯的變化，因此，其形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)往往難以分辨。11在 的照射下，發(fā)熒光的物體會在黑暗的背景下表現(xiàn)為光亮的有色物體，這就是

14、熒光顯微技術(shù)的原理。12透射電子顯微鏡用電子作為 ，因此其分辨率較光學顯微鏡有很大提高，但鏡筒必須是 環(huán)境，形成的影像也只能通過 或 進行觀察、記錄。13在顯微鏡下不同細菌的形態(tài)可以說是千差萬別，豐富多彩，但就單個有機體而言，其基本形態(tài)可分為 、 與 3種。14霉菌菌體均由分支或不分支的菌絲構(gòu)成。許多菌絲交織在一起，稱為 。在固體培養(yǎng)基上，部分菌絲伸入培養(yǎng)基內(nèi)吸收養(yǎng)料，稱為 ；另一部分則向空中生長，稱為 。有的氣生菌絲發(fā)育到一定階段，分化成 。15 是一類缺少真正細胞壁，細胞通常無色，具有運動能力，并進行吞噬營養(yǎng)的單細胞真核生物。它們個體微小，大多數(shù)都需要顯微鏡才能看見。選擇題（4個答案選1）

15、 1培養(yǎng)微生物的常用器具中，( )是專為培養(yǎng)微生物設(shè)計的。 A平皿 B試管 C燒瓶 D燒杯 2( )可用來分離培養(yǎng)出由科學家設(shè)計的特定環(huán)境中能生長的微生物，盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長。 A選擇平板 B富集培養(yǎng) C稀釋涂布 D單細胞顯微分離 3下面哪一項不屬于稀釋倒平板法的缺點?( )A菌落有時分布不夠均勻B熱敏感菌易被燙死C嚴格好氧菌因被固定在培養(yǎng)基中生長受到影響 D環(huán)境溫度低時不易操作 4下面哪一種方法一般不被用作傳代保藏?( ) A瓊脂斜面 B半固體瓊脂柱 C培養(yǎng)平板 D搖瓶發(fā)酵 5冷凍真空干燥法可以長期保藏微生物的原因是微生物處于( )的環(huán)境，代謝水平大大降低。

16、A干燥、缺氧、寡營養(yǎng) B低溫、干燥、缺氧 C低溫、缺氧、寡營養(yǎng) D低溫、干燥、寡營養(yǎng)6對光學顯微鏡觀察效果影響最大的是( )。 A目鏡 B物鏡 C聚光器 D總放大倍數(shù)7暗視野顯微鏡和明視野顯微鏡的區(qū)別在于( )。A目鏡 B物鏡 C聚光器 D樣品制備8相差顯微鏡使人們能在不染色的情況下，比較清楚地觀察到在普通光學顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不清的活細胞及細胞內(nèi)的某些細微結(jié)構(gòu)，是因為它改變了樣品不同部位間光的( )，使人眼可以察覺。 A波長 B顏色 C相位 D振幅9( )不是鑒別染色。A抗酸性染色 B革蘭氏染色 C活菌染色 D芽孢染色10細菌的下列哪項特性一般不用作對細菌進行分類、鑒定?(

17、) A球菌的直徑 B球菌的分裂及排列 C桿菌的直徑 D桿菌的分裂及排列是非題1為了防止雜菌，特別是空氣中的雜菌污染，試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各種金屬、塑料及硅膠帽，并在使用前進行高溫干熱滅菌。2，所有的微生物都能在固體培養(yǎng)基上生長，因此，用固體培養(yǎng)基分離微生物的純培養(yǎng)是最重要的微生物學實驗技術(shù)。3所有的培養(yǎng)基都是選擇性培養(yǎng)基。4直接挑取在平板上形成的單菌落就可以獲得微生物的純培養(yǎng)。5用稀釋搖管法分離獲得的微生物均為厭氧微生物。6冷凍真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法，大多數(shù)專業(yè)的菌種保藏機構(gòu)均采用這兩種方法作為主要的微生物保存

18、手段。7光學顯微鏡的分辨率與介質(zhì)折射率有關(guān)，由于香柏油的介質(zhì)折射率(約15)高于空氣(10)， 因此，使用油鏡的觀察效果好于高倍鏡，目前科學家正在尋找折射率比香柏油更高的介質(zhì)以進一步改善光學顯微鏡的觀察效果。8與其他電子顯微鏡相比，掃描隧道顯微鏡在技術(shù)上的最大突破是能對活樣品進行觀察。9與光學顯微鏡相比，電子顯微鏡的分辨率雖然有很大的提高，但卻無法拍攝彩色照片。10和動植物一樣，細菌細胞也會經(jīng)歷由小長大的過程，因此，在相同情況下應(yīng)選擇成熟的細菌而非幼齡細菌進行顯微鏡觀察，這樣可以看得更清楚。11霉菌、酵母菌均是沒有分類學意義的普通名稱。問答題1一般說來，嚴格的無菌操作是一切微生物工作的基本要求

19、，但在分離與培養(yǎng)極端嗜鹽菌時常在沒有點酒精燈的普通實驗臺上傾倒培養(yǎng)平板、在日常環(huán)境中直接打開皿蓋觀察和挑取菌落，而其研究結(jié)果并沒有因此受到影響，你知道這是為什么嗎?2如果希望從環(huán)境中分離得到厭氧固氮菌，你該如何設(shè)計實驗?3為什么光學顯微鏡的目鏡通常都是15X?是否可以采用更大放大倍率的目鏡(如30x)來進一步提高顯微鏡的總放大倍數(shù)?4為什么透射電鏡和掃描電鏡對樣品厚度與大小的要求有如此大的差異?能否用掃描電鏡來觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，而用透射電鏡來觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)? 5試論電子顯微鏡在進行生物樣品制備與觀察時應(yīng)注意的問題。6對細菌的細胞形態(tài)進行觀察和描述時應(yīng)注意哪些方面?你是否能很快地在顯微鏡下

20、區(qū)分同為單細胞的細菌、酵母菌和原生動物?三、習題解答填空題 1個 群 2純 3。滅菌 任何生物 4稀釋倒平板法 涂布平板法 平板劃線法 5分類 鑒定 6死亡 污染 變異 7低(高) 好(差) 8放大 反差 分辨率 91 0001 500x 10或15 90或100 香柏油 10波長 振幅 11紫外線 12光源 真空 熒光屏 照片 13球狀 桿狀 螺旋狀 14菌絲體 營養(yǎng)菌絲 氣生菌絲 繁殖菌絲 15原生動物選擇題1 A 2 B 3 A 4 D 5 B 6 B 7 C 8 D 9 C 10 D是非題錯錯對錯錯 對錯對對錯 對問答題 1培養(yǎng)極端嗜鹽菌的培養(yǎng)平板需要添加很高濃度的氯化鈉(25)，實驗

21、室環(huán)境中的一般微生物都不能在這種選擇培養(yǎng)基上生長，因此在實驗過程中即使不采取無菌操作技術(shù)，實驗結(jié)果仍不會受到影響。 2（1）根據(jù)選擇分離的原理設(shè)計不含氮的培養(yǎng)基，在這種培養(yǎng)基上生長的細菌，其氮素應(yīng)來自固氮作用。（2）將環(huán)境樣品(例如土樣)稀釋涂布到選擇平板上，放置于厭氧罐中。對厭氧罐采用物理、化學方法除去氧氣，保留氮氣。培養(yǎng)后在乎板上生長出來的細菌應(yīng)是厭氧固氮菌或兼性厭氧固氮菌。（3）挑取一定數(shù)量的菌落，對應(yīng)點種到兩塊缺氮的選擇平板上，分別放置于厭氧罐內(nèi)、外保溫培養(yǎng)。在厭氧罐內(nèi)外均能生長的為兼性厭氧固氮菌，而在厭氧罐外的平板上不生長，在厭氧罐內(nèi)的平板上生長的即為可能的厭氧固氮菌。（4）對分離得

22、到的厭氧固氮菌菌落樣品進行系列稀釋，涂布于相應(yīng)的選擇平板，重復上述步驟直到獲得厭氧固氮菌的純培養(yǎng)。3光學顯微鏡的分辨率受到光源波長及物鏡性能的限制，在使用最短波長的可見光(450nnl)作為光源時在油鏡下可以達到的最大分辨率為018 m。由于肉眼的正常分辨能力一般為 025mm左右，因此光學顯微鏡有效的最高總放大倍數(shù)只能達到1 0001 500倍。油鏡的放大倍數(shù)是100x，因此顯微鏡配置的目鏡通常都是15 x，選用更大放大倍數(shù)的目鏡(如30 x)進一步提高顯微鏡的放大能力對觀察效果的改善并無幫助。 4（1）透射電子顯微鏡的成像原理類似于普通光學顯微鏡，作為光源的電子束在成像時要穿透樣品。由于電

23、子束的穿透力有限，因此在進行透射電鏡觀察時要求樣品一定要薄。而掃描電鏡的成像原理類似于電視或電傳真照片，圖像是通過收集樣品表面被激發(fā)的二次電子形成的，因此對樣品的厚度并無特別的要求。（2）掃描電鏡一般被用于觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)，但通過樣品制備過程中的冰凍蝕刻技術(shù)，用掃描電鏡也可觀察到樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，獲得立體的圖像。（3）透射電鏡一般通過超薄切片技術(shù)觀察樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，但通過樣品制備過程中的復型技術(shù)，用透射電鏡也可對樣品的表面結(jié)構(gòu)進行觀察。5（1）電子束的穿透能力：電子束的穿透能力是十分有限的，超薄切片是基本的透射電鏡實驗技術(shù)。相比之下，掃描電鏡對樣品的大小和厚度沒有嚴格的要求。（2）生物組織的特

24、點：生物組織的主要成分之一是水，若生物樣品不經(jīng)處理直接放進電鏡，鏡筒中的高真空必然會使樣品發(fā)生嚴重的脫水現(xiàn)象，失去樣品原有的空間構(gòu)型，所以一般都不能用電鏡進行生物樣品的活體觀察。而且，由于生物樣品很容易遭到破壞，在對樣品進行固定、干燥、染色及其他一些處理過程中，也必須隨時注意使樣品盡量保持生活狀態(tài)下的精細結(jié)構(gòu)，而不嚴重失真。另外，在掃描電鏡的使用中，除要求樣品干燥外，還需要樣品具一定的導電能力，以減少樣品表面電荷的堆積并得到良好的二次電子信號。而生物樣品一般都是不導電的，所以在制備掃描電鏡生物樣品時，一般需在其表面鍍上一層金屬薄膜。（3）增加樣品的反差：顯微觀察時，只有樣品具有一定的反差，才能

25、得到清晰的圖像。光學顯微鏡可以通過各種染色技術(shù)來增加樣品的反差，并得到彩色的樣品圖像。而在電鏡的使用中，彩色染料是不采用的，因為兩種不同的顏色在電鏡中是不能區(qū)別的。電鏡中生物樣品不同結(jié)構(gòu)之間反差的取得一般是用重金屬鹽染色或噴鍍，凡是嗜金屬的結(jié)構(gòu)，對電子的散射與吸收的能力增強，易于形成明暗清晰的電子圖像。而且，由于電子圖像是靠不同電子密度形成的亮度差異而構(gòu)成，所以，電鏡得到的電視或照相圖像都是黑白的。6（1）首先應(yīng)使用稀釋涂布等方法對待檢菌株的純度、群落形態(tài)、生理特性等進行檢查、確認。（2）選用正常的新鮮培養(yǎng)基和新鮮培養(yǎng)物進行培養(yǎng)和觀察，避免培養(yǎng)過程中一些物理、化學條件的改變或培養(yǎng)時間過長等因素

26、對細胞形態(tài)的影響。（3）報告細胞大小時應(yīng)選用多個細胞檢測的平均數(shù)，并記錄所用的實驗方法，包括培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時間、樣品制備方法和染色方法等。（4）可從大小和形態(tài)上對細菌、酵母菌和原生動物進行區(qū)分。酵母菌、原生動物個體較大，一般可用低倍鏡觀察，酵母菌細胞一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形，不具運動性，原生動物細胞形態(tài)多變，能夠運動。相比較而言，細菌細胞一般較小，需用高倍鏡或油鏡才能看清。附：顯微鏡種類比較顯微鏡類型基本原理及特點應(yīng) 用光學顯微鏡明視野顯微鏡光線透射照明，物像處于亮背景中。為光學顯微鏡的最基本配置，價格便宜、容易使用各種情況下染色樣品或活細胞個體形態(tài)的觀察暗視野顯微鏡通過特殊的聚光器

27、實現(xiàn)斜射照明，亮物像形成于暗背景中明視野顯微鏡下不易看清的活細胞的觀察；不易被染色或易被染色過程破壞的細胞的觀察(例如對梅毒密螺旋體的檢測)；觀察活細胞的運動性相差顯微鏡通過特殊的聚光器和物鏡提高樣品不同部位間的反差(明暗差異)活細胞及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察熒光顯微鏡經(jīng)熒光染料染色或熒光抗體處理的樣品在紫外線照射下激發(fā)出各種波長的可見光，在黑暗的背景中形成明亮的彩色物像環(huán)境微生物的直接觀察；病灶或醫(yī)學樣品中特定病原微生物的直接檢測(使用特定的熒光抗體)共聚焦顯微鏡激光作為光源，每次照明樣品的一個點，連續(xù)掃描后經(jīng)計算機處理獲得樣品的二維或三維圖像。顯微鏡價格昂貴對完整細胞的細微立體結(jié)構(gòu)進行觀察和分析電

28、子顯微鏡透射電鏡用電子束作為“光源”聚焦成像，分辨率較光學顯微鏡大大提高。儀器龐大、昂貴、對工作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求對病毒顆?；虺∑幚砗髮毎膬?nèi)部結(jié)構(gòu)進行觀察掃描電鏡電子束在樣品表面掃描，收集形成的二次電子形成物像。分辨率遠高于光學顯微鏡。儀器龐大、昂貴、對工作環(huán)境和操作技術(shù)有較高要求一般用于觀察樣品的表面立體結(jié)構(gòu)探針掃描顯微鏡隧道掃描顯微鏡用細小的探針在樣品表面進行掃描，通過檢測針尖和樣品間隧道效應(yīng)電流的變化形成物像與電子顯微鏡相比，這類顯微鏡能提供原子力顯微鏡利用細小的探針對樣品表面進行恒定高度的掃描，同時通過一個激光裝置來監(jiān)測探針隨樣品表面的升降變化來獲取樣品表面形貌的信息更高

29、的分辨率，可在生理狀態(tài)下對生物大分子或細胞結(jié)構(gòu)進行觀察。同時儀器體積較小，價格也相對便宜項目 形 態(tài) 構(gòu) 造 數(shù) 量 功 能內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔，細管形有膜。分兩種：糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有核糖體粒，光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上無核糖體粒數(shù)量少糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成、運送蛋白質(zhì)，光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成磷脂核糖體小顆粒狀無膜。表層為蛋白質(zhì)，內(nèi)芯為RNA數(shù)量極多，變化大合成蛋白質(zhì)高爾基體扁平膜囊和小囊泡有膜。由數(shù)個扁平膜囊和大小不等的囊泡組成數(shù)量少濃縮蛋白質(zhì)，合成糖蛋白和脂蛋白，協(xié)調(diào)細胞內(nèi)環(huán)境溶酶體球形小囊泡有膜。小囊泡內(nèi)含數(shù)十種酸性水解酶數(shù)量較多，但變化大執(zhí)行細胞內(nèi)的消化功能微體球形小囊泡有膜。小囊泡內(nèi)含氧化酶和過氧化氫酶等數(shù)量較多，但變

30、化大對脂肪酸進行氧化線粒體桿菌狀或囊狀有內(nèi)外兩層膜。內(nèi)膜可形成嵴，其上有大量的基粒(ATP酶復合體)?；|(zhì)內(nèi)含TCA酶系、70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA數(shù)量多，但變化大對底物進行氧化磷酸化以產(chǎn)生ATP葉綠體扁球狀或扁橢圓狀由內(nèi)、外兩層膜以及類囊體和基質(zhì)構(gòu)成?；|(zhì)內(nèi)含70 S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA等。類囊體數(shù)量多，常疊成基粒僅存在于光合生物中。不同細胞中數(shù)量變化很大利用CO：和H：O進行光合作用，以合成葡萄糖和釋放氧第三章 微生物細胞的結(jié)構(gòu)與功能一、術(shù)語或名詞1原核生物(proksryotes) 一大類細胞微小、只有稱作核區(qū)(無細胞膜包裹的裸露DNA)的原核單細胞生物。所有原核生物都是微生物，包括

31、真細菌和古生菌兩大類群。原核生物與真核生物的主要區(qū)別是：基因組由無核膜包裹的雙鏈DNA環(huán)組成。缺少單位膜分隔而成的細胞器。核糖體為70S型。2細菌細胞壁(ceUWaU ofbacteris) 位于細菌細胞最外面的一層厚實、堅韌的外被，主要由肽聚糖組成，有固定細胞外形和保護細胞免受損傷等多種功能。革蘭氏陽性細菌細胞壁的特點是厚度大(2080rim)和化學組分簡單，一般只含90肽聚糖和10磷壁酸。革蘭氏陰性細菌的細胞壁由外膜(含脂多糖、磷脂和外膜蛋白)和一薄層肽聚糖(23am)組成。3肽聚糖(peptidoglycan) 真細菌細胞壁的特有成分，由無數(shù)肽聚糖單體以網(wǎng)狀形式交聯(lián)而成。肽聚糖單體由肽與

32、聚糖兩部分構(gòu)成，其中的肽由四肽尾和肽橋構(gòu)成，聚糖則由N乙酰葡糖胺和V乙酰胞壁酸以1，4糖苷鍵相互間隔交聯(lián)而成，呈長鏈骨架狀。C細菌的四肽尾一般由LAla、DGlu、LLys和DAla 4個氨基酸構(gòu)成，肽橋則由5個Gly殘基構(gòu)成；C細菌的四肽尾一般由LAla、DGlu、mDAP和DAla構(gòu)成，且無肽橋。4磷壁酸(teichoicacid) G細菌細胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸?？煞直诹妆谒岷湍ち妆谒醿煞N，前者是與肽聚糖分子間進行共價結(jié)合的磷壁酸，后者則是跨越肽聚糖層并與細胞膜相交聯(lián)的磷壁酸。5外膜(outer membrane) 位于G細菌細胞壁最外層的一層由脂多糖(LP

33、S)、磷脂、脂蛋白和其他蛋白組成的厚膜。6脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS) 位于C細菌細胞壁最外層的一層較厚(810nm)的類脂多糖類物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O特異側(cè)鏈3部分構(gòu)成，是C細菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的成分。7外膜蛋白(outer membrane protein)嵌合在C細菌細胞壁外膜上的多種蛋白質(zhì)成分，如脂蛋白和孔蛋白等。8周質(zhì)空間(periplasmicspace) 一般指位于C細菌細胞壁外膜與細胞膜之間的狹窄空間，呈膠狀，內(nèi)含各種周質(zhì)蛋白，包括各種酶類和受體蛋白等。9假肽聚糖(pseudopeptidoglycan) 甲烷桿菌屬(Methanobacteriu

34、m)等部分古生菌細胞壁的主要成分。其多糖骨架由N乙酰葡糖胺和N乙酰塔羅糖胺糖醛酸以1，3糖苷鍵交替連接而成，連在后一氨基糖上的肽尾由LGlu、LAla和LLys 3個L型氨基酸組成，肽橋則由LGin一個氨基酸組成。10缺壁細菌(cellwalldeficientbacteria) 細胞壁缺乏或缺損的各種細菌的統(tǒng)稱，包括支原體、L型細菌、原生質(zhì)體和球狀體等。11L型細菌(1 form ofbacteria) 指在實驗室或宿主體內(nèi)通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺陷菌株。因最初發(fā)現(xiàn)的念珠狀鏈桿菌(Streptobacillus monil扣rmis)是在英國Lister研究所發(fā)現(xiàn)，故稱L型細

35、菌。12原生質(zhì)體(protoplast) 在人為條件下，用溶菌酶除盡細菌等微生物原有細胞壁或用青霉素抑制新生細胞壁合成后，所得到的僅有一層細胞膜包裹著的圓球狀細胞，一般由C細菌形成。原生質(zhì)體對滲透壓敏感，無繁殖能力，在合適條件下，細胞壁可再生，并恢復其繁殖能力。13球狀體(sphaeroplast) 又稱原生質(zhì)球，指還殘留有部分細胞壁的原生質(zhì)體。G細菌一般只形成球狀體。14細菌細胞質(zhì)膜(cytoplasmic membrane Ofbacteria) 又稱細菌細胞膜。是緊貼在細菌細胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜，厚約?8nm，由磷脂(占20-30)和蛋白質(zhì)(占50

36、70)組成。細胞質(zhì)膜的主要功能是選擇性的控制細胞內(nèi)外的物質(zhì)交流。15間體(mesosome) 細菌細胞中的一種由細胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造，其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見于G細菌。每個細胞含一至幾個。其功能與DNA的復制、分配，細胞分裂和酶的分泌有關(guān)。 16. 細菌的細胞質(zhì)(cytoplasm ofbacteria) 細菌細胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)以外的一切半透明 膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。主要成分為顆粒狀內(nèi)含物，核糖體、酶類、中間代謝物、質(zhì)粒、各種營養(yǎng)牧和大分子的單體等。17細菌的內(nèi)含物(inclusionbody ofbacteria) 細胞質(zhì)內(nèi)形狀較大的顆粒和泡囊狀構(gòu)造，包括各種貯藏物、羧酶

37、體、氣泡或磁小體等。18聚羥丁酸(poly hydroxybutyrate，PHB) 存在于某些細菌細胞質(zhì)內(nèi)的顆粒狀內(nèi)含物，由許多羥基丁酸分子聚合而成，具貯藏能量、碳源和降低細胞內(nèi)滲透壓的作用。19異染粒(metachromaticgranules) 又稱迂回體或捩轉(zhuǎn)菌素，是無機偏磷酸鹽的聚合物，具有貯藏磷元素和能量的功能。在白喉棒桿菌和結(jié)核分枝桿菌中易見到異染粒。20羧酶體(carboxysome) 存在于一些自養(yǎng)細菌細胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物，內(nèi)含1，5二磷酸核酮糖羧化酶，在自養(yǎng)細菌的CO2：固定中起著關(guān)鍵作用。21核區(qū)(nuclear region) 又稱核質(zhì)體，指原核生物所特有的無核

38、膜結(jié)構(gòu)、無固定形態(tài)的原始細胞核。其成分是一個大型環(huán)狀雙鏈DNA分子，它是細菌負載遺傳信息的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。22芽孢(endospore) 某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性(抗熱、化學藥物、輻射等)極強的休眠體。產(chǎn)芽孢的細菌主要有芽孢桿菌屬(Bacillus)和梭菌屬(Clostridium)兩屬。23滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學說(osmoregulatory expanded cortex theory) 解釋芽孢耐熱機制的一個較新的學說。它認為芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差，以及皮層的離子強度很高，從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽

39、孢核心中的水分，其結(jié)果導致皮層的充分膨脹，而作為芽孢的生命部分芽孢核心的細胞質(zhì)卻發(fā)生高度失水，并由此變得高度耐熱了。24伴孢晶體(parasporalcrystal) 蘇云金芽孢桿菌等少數(shù)芽孢桿菌在其形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體(6內(nèi)毒素)，稱為伴孢晶體。它對約200種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用，故可制成細菌殺蟲劑。25糖被(glycocalyx) 指包被于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。糖被有數(shù)種：形態(tài)固定、層次厚的為莢膜。形態(tài)固定、層次薄的為微莢膜。形態(tài)不固定、結(jié)構(gòu)松散的為黏液層。包裹在細胞群體上有一定形態(tài)的糖被稱菌膠團。糖被的主要功能是保

40、護菌體免受干旱損傷或被宿主免疫活性細胞吞噬。26細菌鞭毛(flagella ofbacteria) 生長在某些細菌體表的長絲狀、波曲、可旋轉(zhuǎn)的蛋白質(zhì)附屬物，其數(shù)目一至數(shù)十條，具有運動功能。鞭毛由基體、鉤形鞘和鞭毛絲3部分組成。鞭毛在細菌表面的著生方式有一端生、兩端生、周生和側(cè)生等數(shù)種，它是細菌鑒定中的重要指標。27菌毛(fimbriae) 一種長在細菌體表的纖細、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)附屬物，具有使菌體附著于物體表面的功能。有菌毛者多屬C致病細菌。菌毛的功能是使細菌可牢固地黏附于寄主的呼吸道、消化道或泌尿生殖道等的黏膜細胞上，以利定植和致病。 28性毛(pili，sex pili) 又稱

41、性菌毛。構(gòu)造和成分與菌毛相同，但比菌毛長、粗。每個細菌一般僅著生一至少數(shù)幾條性毛。多見于G細菌的雄性菌株上，其主要功能是向雌性菌株傳遞遺傳物質(zhì)。29真核微生物(eukaryoticmicrooganisms) 凡是細胞核具有核膜、細胞能進行有絲分裂、細胞質(zhì)中存在線粒體或同時存在葉綠體等細胞器的生物，稱真核生物。微生物中的真菌、顯微藻類、原生動物和地衣均屬于真核生物，故可稱為真核微生物。30“9+2”型鞭毛(“9+2”typeflagella) 在某些真核細胞表面長有毛發(fā)狀、具有運動功能的細胞器，稱為鞭毛。它由基體、過渡區(qū)和鞭桿3部分組成，因其鞭桿的橫切面的中央可見到兩個中央微管，其周圍則有9個

42、微管二聯(lián)體圍繞一圈，故真核生物的鞭毛又稱“9+2”型鞭毛。31細胞核(nucleus) 存在于一切真核細胞中的形態(tài)完整、有核膜包裹的細胞核，它是細胞內(nèi)遺傳信息(：DNA)的儲存、復制和轉(zhuǎn)錄的主要部位，并對細胞的生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳和變異等生命活動起著決定性的作用。細胞核由核被膜、染色質(zhì)、核仁和核基質(zhì)等構(gòu)成。32染色質(zhì)(chromatin) 真核細胞處于分裂的間期時，其細胞核內(nèi)的DNA和組蛋白等組成一種線性、可被蘇木精等堿性染料染色的復合物，稱為染色質(zhì)。染色質(zhì)的基本單位是核小體。33染色體(chromasome) 真核細胞進行有絲分裂或減數(shù)分裂時，其染色質(zhì)絲通過盤繞、折疊，由核小體經(jīng)中空螺線

43、管至超螺旋環(huán)，最后濃縮成在光學顯微鏡下可見的棒狀結(jié)構(gòu)，即稱染色體。34核小體(nucleosome) 構(gòu)成真核細胞染色質(zhì)的基本單位。其核心結(jié)構(gòu)為組蛋白八聚體，由H2A、H2B、H3和H4分子各一對組成，在八聚體外有以左手方向盤繞兩周的DNA鏈，另有一個組蛋白分子H1，與連接DNA相結(jié)合，鎖住了核小體的進出口，從而保持其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。35核仁(nucleolus) 細胞核中一個沒有膜包裹的圓形或橢圓形小體。每個核中有一至數(shù)，富含蛋白質(zhì)和RNA，是真核細胞中合成rRNA和裝配核糖體的部位。36核基質(zhì)(nuclearmatrix) 舊稱核液。一種充滿于細胞核空間由蛋白纖維組成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具有支撐細胞核和

44、為染色質(zhì)提供附著點的功能。37細胞器(organelle) 細胞質(zhì)內(nèi)具有一定形態(tài)、構(gòu)造和功能的微型器，自，一般有膜包裹，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、線粒體和葉綠體等。38細胞骨架(cytoskeleton) 一種由微管、肌動蛋白和中間絲3種蛋白質(zhì)纖維所構(gòu)成的細胞支架，具有支持、運輸和運動功能。39內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum) 細胞質(zhì)中一個與細胞基質(zhì)相隔離、但彼此相通的囊腔和細管系統(tǒng)，由脂質(zhì)雙分子層圍成。有兩類，其一因膜上附有核糖體顆粒，稱糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，具有合成和運送胞外分泌蛋白至高爾基體中去的功能；其二為膜上無核糖體的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是脂代謝、鈣代謝和合成磷脂的部位。40核糖

45、體(ribosome) 是一種無膜包裹的顆粒狀細胞器，具有合成蛋白質(zhì)的功能。外層為蛋白質(zhì)，內(nèi)層為RNA。每個細胞中有大量的核糖體。原核生物具有70 S核糖體，而真核生物則有80S核糖體。41高爾基體(Golgi apparatus) 是一種由數(shù)個平行堆疊的扁平膜囊和大小不等的囊泡所組成的膜聚合體，具有合成、分泌糖蛋白和脂蛋白，對某些蛋白質(zhì)原進行酶切加工，以及對新細胞壁和細胞膜提供合成原料等多種功能。42溶酶體(1ysosome) 一種由單層膜包裹、內(nèi)含多種酸性水解酶的囊泡狀細胞器，具有進行細胞內(nèi)消化的功能。43微體(microbody) 一種由單層膜包裹、與溶酶體相似的球狀細胞器。真核微生物的

46、微體主要含一至幾種氧化酶類，這類微體又稱過氧化物酶體。44線粒體(mitochondria) 一種由雙層膜包裹的、執(zhí)行氧化磷酸化產(chǎn)能反應(yīng)的重要細胞器，一般呈桿菌狀，數(shù)量很多。由內(nèi)外兩層膜包裹，內(nèi)膜向內(nèi)伸展，形成許多嵴，其上著生許多基粒(即為ATP合成酶復合體)以及4種脂蛋白復合物(呼吸鏈成分)。在線粒體的基質(zhì)內(nèi)含有TCA酶系、一套半自主復制的雙鏈環(huán)狀DNA以及70S核糖體。45葉綠體(chloroplast) 一種由雙層膜包裹的、能捕獲光能并把它轉(zhuǎn)化為化學能的綠色顆粒狀細胞器，只存在于藻類和綠色植物中。一般由葉綠體膜、類囊體和基質(zhì)3部分構(gòu)成?；|(zhì)內(nèi)含 有能進行半自主復制的雙鏈環(huán)狀DNA 1)及

47、70S核糖體。二、習 題 填空題 1證明細菌存在細胞壁的主要方法有 ， ， 和 等4種。 2細菌細胞壁的主要功能為 ， ， 和 等。3革蘭氏陽性細菌細胞壁的主要成分為 和 ，而革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分則是 、 、 和 。 4肽聚糖單體是由 和 以 糖苷鍵結(jié)合的 ，以及 和 3種成分組成的，其中的糖苷鍵可被 水解。 5G+細菌細胞壁上磷壁酸的主要生理功能為 、 、 和 等幾種。 6G細菌細胞外膜的構(gòu)成成分為 、 、 和 。 7脂多糖(LPS)是由3種成分組成的，即 、 和 。 8在LPS的分子中，存在有3種獨特糖，它們是 、 和 。 9用人為方法除盡細胞壁的細菌稱為 ，未除盡細胞壁的細菌稱

48、為 ，因在實驗室中發(fā)生缺壁突變的細菌稱為 ，而在自然界長期進化中形成的穩(wěn)定性缺壁細菌則稱為 。 10細胞質(zhì)膜的主要功能有 、 、 、 和 。 11在細胞質(zhì)內(nèi)貯藏有大量聚犀羥基丁酸(PHB)的細菌有 、 、 和 等。 12在芽孢核心的外面有4層結(jié)構(gòu)緊緊包裹著，它們是 、 、 和 。 13在芽孢皮層中，存在著 和 2種特有的與芽孢耐熱性有關(guān)的物質(zhì)，在芽孢核心中則存在另一種可防護DNA免受損傷的物質(zhì)，稱為 。 14芽孢的形成須經(jīng)過7個階段，它們是 、 、 、 、 、 和 。 15芽孢萌發(fā)要經(jīng)過 、 和 3個階段。 16在不同的細菌中存在著許多休眠體構(gòu)造，如 、 、 和 等。 17在細菌中，存在著4種

49、不同的糖被形式，即 、 、 和 。 18細菌糖被的主要生理功能為 、 、 、 、 和 等。 19細菌的糖被可被用于 、 、 和 等實際工作中。 20判斷某細菌是否存在鞭毛，通?？刹捎?、 、 和 等方法。 21G細菌的鞭毛是由基體以及 和 3部分構(gòu)成，在基體上著生 、 、 和 4個與鞭毛旋轉(zhuǎn)有關(guān)的環(huán)。22在G細菌鞭毛的基體附近，存在著與鞭毛運動有關(guān)的兩種蛋白，一種稱 ，位于 ，功能為 ；另一種稱 ，位于 ，功能為 。23借周生鞭毛進行運動的細菌有 和 等，借端生鞭毛運動的細菌有 和 等，而借側(cè)生鞭毛運動的細菌則有 等。24以下各類真核微生物的細胞壁主要成分分別是:酵母菌為 ，低等真菌為 ，高等

50、真菌為 ，藻類為 。25真核微生物所特有的鞭毛稱 ，其構(gòu)造由 、 和 3部分組成。26真核生物鞭毛桿的橫切面為 型，其基體橫切面則為 型，這類鞭毛的運動方式是 。27真核生物的細胞核由 、 、 和 4部分組成。28染色質(zhì)的基本單位是 ，由它進一步盤繞、折疊成 和 后，再進一步濃縮成顯微鏡可見的 。29細胞骨架是一種由 、 和 3種蛋白質(zhì)纖維構(gòu)成的細胞支架。30在真核微生物細胞質(zhì)內(nèi)存在著沉降系數(shù)為 S的核糖體，它是由 S和 S兩個小亞基組成，而其線粒體和葉綠體內(nèi)則存在著 S核糖體，它是由 S和 S兩個小亞基組成。31真核微生物包括 、 、 和 等幾個大類。32長有鞭毛的真核微生物類如 、 、和 ，長有纖毛的真核微生物如 ；長有鞭毛的原核生物如 、 和 等。選擇題（4個答案選1）1C細菌細胞壁的最內(nèi)層成分是( )。A磷脂 B肽聚糖