第六講核酸化學(xué)

1、女漢紙“森蝶”繼承了爸爸的優(yōu)秀運動基因？-輔肌動蛋白分布在骨骼肌Z線,是肌動蛋白的結(jié)合蛋白,它通過與細肌絲相結(jié)合維持著肌纖維的有序排列和正常收縮。-輔肌動蛋白家族在人體中以-輔肌動蛋白-2和-輔肌動蛋白-3兩種方式存在。其中,-輔肌動蛋白-2存在于所有肌纖維類型中,而-輔肌動蛋白-3則僅存在于骨骼肌的快肌纖維中。-輔肌動蛋白-3基因ACTN3上的R577X(C1747T)位點存在單核苷酸多態(tài),該位點的C-T突變會造成577位的氨基酸由精氨酸(577R)變?yōu)榻K止蛋白(577X),由此造成-輔肌動蛋白-3的缺失。但是,該蛋白的缺失并沒有造成任何表型上的疾病。在接受調(diào)查的737名運動員中，參加奧運會

2、并取得頂級運動成績的爆發(fā)力項目，如短跑、舉重項目的運動員ACTN3基因RR基因型攜帶者比例高達95%，特別是爆發(fā)力項目的女運動員中，這個比例高達100%。 基因（gene 開始、發(fā)育的意思）（古代）種質(zhì)（猜想)（十九世紀）孟德爾遺傳顆粒（推斷）（二十世紀初）摩爾根染色體是基因的載體（蛋白質(zhì)？核酸？）（1944年）DNA是基因的化學(xué)載體z基因基因(Gene)即即DNA上能夠編譯一個蛋白質(zhì)或上能夠編譯一個蛋白質(zhì)或RNA的最小單位的最小單位，一個細胞內(nèi)所有基因組合在一起統(tǒng)，一個細胞內(nèi)所有基因組合在一起統(tǒng)稱為稱為“基因組基因組” 。zDNA 的所有功能的所有功能本質(zhì)上反映的是基因的功能本質(zhì)上反映的是基

3、因的功能。基因基因3假基因假基因基因間隔區(qū)基因間隔區(qū)DNA雙螺旋生老病死基因診斷基因診斷、基因治療基因治療已成為目前醫(yī)學(xué)發(fā)展的最前沿的方向已成為目前醫(yī)學(xué)發(fā)展的最前沿的方向。同時也成為新的財富源泉！同時也成為新的財富源泉！共同決定共同決定生老病死基因必須通過RNA起作用！（二）（二）RNARNA在蛋白質(zhì)合成中起著重要的輔助作用在蛋白質(zhì)合成中起著重要的輔助作用1.mRNA信使信使RNA2.rRNA 核糖體核糖體RNA3.tRNA 轉(zhuǎn)運轉(zhuǎn)運RNA 4.RNA病毒以RNA為遺傳物質(zhì)；z1869年核酸最早分離自外科繃帶膿細胞的年核酸最早分離自外科繃帶膿細胞的細胞核細胞核，當(dāng)時發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)含磷量之高超過當(dāng)

4、時發(fā)現(xiàn)的任當(dāng)時發(fā)現(xiàn)這種物質(zhì)含磷量之高超過當(dāng)時發(fā)現(xiàn)的任何一種有機物，并且何一種有機物，并且含有很強的酸性含有很強的酸性，故得名核，故得名核酸。酸。z1909年其組成被研究清楚，年其組成被研究清楚，1944年生物功能初年生物功能初步澄清，在步澄清，在X射線衍射技術(shù)支持下射線衍射技術(shù)支持下1953年結(jié)構(gòu)澄年結(jié)構(gòu)澄清。清。z核酸是脫氧核糖核酸（核酸是脫氧核糖核酸（DNA）與核糖核酸（）與核糖核酸（RNA）的通稱的通稱。染色體是DNA的載體DNADNA可通過復(fù)制遺傳給下一代可通過復(fù)制遺傳給下一代z(1)決定決定z 子代利用遺傳下來的DNA可以制造與父代相同的RNA、蛋白質(zhì)，故種瓜得瓜、種豆得豆。z 任何

5、一個多細胞生物的體細胞都含有完全相同的DNA。z答案：不同細胞不同部分答案：不同細胞不同部分DNA發(fā)揮了作用（即發(fā)揮了作用（即表表達達）,其余其余DNA休眠。休眠。z(2)RNArRNA:占細胞總RNA的80%，核糖體的組分，核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，23SRNA具有核酶活性，能催化肽鍵形成。tRNA:占細胞總RNA的15%，是轉(zhuǎn)換器，攜帶氨基酸并起解譯作用。mRNA:占細胞總RNA的35%，是信使，攜帶DNA的遺傳信息并起蛋白質(zhì)合成的模板作用。z(3)RNA其核心作用是：基因表達的信息加工和調(diào)節(jié)。核酸核酸核苷酸核苷酸磷酸磷酸核苷核苷戊糖戊糖堿基堿基水水解解核核 酸酸代表，對DNA而言為，對R

6、NA而言為； 代表 代表 z嘌呤次黃嘌呤、1-甲基次黃嘌呤、N2、N2-二甲基鳥嘌呤。z嘧啶5-甲基胞嘧啶、5-羥甲基胞嘧啶、二氫尿嘧啶、4-硫尿嘧啶z都是基本堿基的化學(xué)修飾型。zDNA的起調(diào)節(jié)和保護遺傳信息的作用核糖(in RNA)2脫氧核糖(in DNA)核苷核苷磷酸堿基戊糖NNNNNHHNHNHOOOOHOHOHOHCH2POHOOO核苷酸核苷酸堿基連接（糖苷鍵）堿基連接（糖苷鍵）鍵鍵（對（對DNA為為H）核苷酸的衍生物核苷酸的衍生物z ATPATP是生物體內(nèi)分布最廣和最重要的一種核苷酸衍生物是生物體內(nèi)分布最廣和最重要的一種核苷酸衍生物 ( (鳥嘌呤核糖核苷三磷酸鳥嘌呤核糖核苷三磷酸)

7、)環(huán)化核苷酸環(huán)化核苷酸z 核苷三磷酸在環(huán)化酶催化核苷三磷酸在環(huán)化酶催化下可以形下可以形成環(huán)化核苷酸成環(huán)化核苷酸z 最重要的環(huán)化核苷酸是最重要的環(huán)化核苷酸是cAMP cAMP 和和 cGMP cGMP ycAMP(3cAMP(3,5,5- - 環(huán)腺嘌呤核苷一磷環(huán)腺嘌呤核苷一磷酸酸) )和和 cGMP( 3cGMP( 3,5,5- -環(huán)鳥嘌呤核環(huán)鳥嘌呤核苷一磷酸苷一磷酸) )的主要功能是作為的主要功能是作為細細胞之間傳遞信息的信使胞之間傳遞信息的信使cAMP cAMP 和和cGMPcGMPz cAMP cAMP 與與cGMPcGMP對細胞的影響對細胞的影響z 腺苷酸環(huán)化酶與鳥苷酸環(huán)化酶腺苷酸環(huán)化酶

8、與鳥苷酸環(huán)化酶是一種蛋白質(zhì)的是一種蛋白質(zhì)的2 2種不同構(gòu)象種不同構(gòu)象z 當(dāng)當(dāng)受體被腎上腺素激活受體被腎上腺素激活時，腺苷酸環(huán)化酶使腺苷酸環(huán)化時，腺苷酸環(huán)化酶使腺苷酸環(huán)化， cAMPcAMP含量上升含量上升，cGMPcGMP下降，細胞內(nèi)下降，細胞內(nèi)特異性蛋白合成特異性蛋白合成，導(dǎo)，導(dǎo)致致細胞分化細胞分化z 當(dāng)當(dāng)M M受體被乙酰膽堿激活受體被乙酰膽堿激活時，鳥苷酸環(huán)化酶使鳥苷酸環(huán)化，時，鳥苷酸環(huán)化酶使鳥苷酸環(huán)化， cGMPcGMP含量上升含量上升， cAMPcAMP下降，此時細胞內(nèi)下降，此時細胞內(nèi)DNADNA合成加速合成加速，細細胞分裂胞分裂z 例如牛皮癬病人的上皮細胞中例如牛皮癬病人的上皮細胞中

9、cGMPcGMP含量高于正常人，引起上皮細胞的含量高于正常人，引起上皮細胞的異常增生異常增生z （1 1）參與參與DNADNA、RNARNA的合成、蛋白質(zhì)的合成、糖與磷脂的的合成、蛋白質(zhì)的合成、糖與磷脂的合成合成z （2 2）在能量轉(zhuǎn)化中起重要作用，）在能量轉(zhuǎn)化中起重要作用，ATPATP是生物體內(nèi)能量的是生物體內(nèi)能量的通用貨幣通用貨幣z （3 3）是構(gòu)成多種輔酶的成分是構(gòu)成多種輔酶的成分：NADNAD、NADPNADP、FADFAD和和CoACoAz （4 4）參與細胞中的代謝與調(diào)節(jié)參與細胞中的代謝與調(diào)節(jié)（例（例cAMPcAMP、cGMPcGMP）z 1 1、核酸連接方式、核酸連接方式y(tǒng)多個核

10、苷酸相連形成多聚核苷酸多個核苷酸相連形成多聚核苷酸y多聚核苷酸是多聚核苷酸是一個核苷酸的一個核苷酸的5 5- -磷酸基與其相鄰的核苷酸磷酸基與其相鄰的核苷酸的的3 3-OH-OH形成形成磷酸二酯鍵相連磷酸二酯鍵相連而成的鏈狀聚合物而成的鏈狀聚合物y由脫氧核糖核苷酸聚合而成的稱為由脫氧核糖核苷酸聚合而成的稱為DNADNA鏈鏈y由核糖核苷酸聚合而成的則稱為由核糖核苷酸聚合而成的則稱為RNARNA鏈鏈NNNNNH2 O HO CH2H HHH OPOOOHNNNNNH2 OH HO CH2H HHH -OP=OO5 3 OHOHOH5 3 RNADNA2 2、多聚核苷酸的書寫方法、多聚核苷酸的書寫方

11、法 z 一般情況下，簡寫式的一般情況下，簡寫式的從左從左右表示從右表示從5 5 3 3，特殊情況下（如兩鏈相反）要注明鏈的方向特殊情況下（如兩鏈相反）要注明鏈的方向z 方法方法1 1結(jié)構(gòu)式：同前結(jié)構(gòu)式：同前z 方法方法2 2線條式線條式戊糖P53首端首端末端末端PPPPPP z 方法方法3 3字母式字母式y(tǒng)P P表示一個磷酸基團，它寫在符號的左側(cè)表示磷酸表示一個磷酸基團，它寫在符號的左側(cè)表示磷酸與糖環(huán)的與糖環(huán)的C C5 5相連，右側(cè)表示與相連，右側(cè)表示與C C3 3相連相連y中間的中間的P P可以省略用連字符代替可以省略用連字符代替y連字符有時也可以省略連字符有時也可以省略y但兩端的但兩端的P

12、 P不能省略不能省略Pz 定義：y指DNA分子中脫氧核苷酸的排列順序。即四種堿基的排列順序yDNA的堿基順序本身就是遺傳信息存儲的分子形式z DNA的堿基組成（Chargaff定則）：y在所有的DNA中，A=T，G=C 即A+G=T+CyDNA的堿基組成具有種的特異性，不具組織器官特異性z DNA一級結(jié)構(gòu)的表示方法：略y同前“多核苷酸的連接方式”雙螺旋結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu)即即DNA分子的空間結(jié)構(gòu)分子的空間結(jié)構(gòu)1）Chargaff 堿基組成規(guī)律堿基組成規(guī)律2）分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點）分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點DNA分子模型建立分子模型建立(1) 腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩爾數(shù)相等腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩爾數(shù)相等.

13、A=T 鳥嘌呤與胞嘧啶的摩爾數(shù)相等鳥嘌呤與胞嘧啶的摩爾數(shù)相等. G=C嘌呤總數(shù)嘌呤總數(shù)=嘧啶總數(shù)嘧啶總數(shù) A+G=C+T(2) DNA的組成具有種的特異性的組成具有種的特異性 (3) DNA的堿基組成沒有組織的特異性的堿基組成沒有組織的特異性, 且較為穩(wěn)定且較為穩(wěn)定,不隨不隨年齡、營養(yǎng)狀態(tài)、環(huán)境改變的影響年齡、營養(yǎng)狀態(tài)、環(huán)境改變的影響1）Chargaff 堿基組成規(guī)律堿基組成規(guī)律2 2）分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點）分子雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點A A、由兩條反向平行的、由兩條反向平行的脫氧多核苷酸（兩條鏈的走脫氧多核苷酸（兩條鏈的走向為向為5 533和和3 355），圍），圍繞一中心軸（假想軸）構(gòu)成繞一中

14、心軸（假想軸）構(gòu)成右手雙螺旋結(jié)構(gòu)。右手雙螺旋結(jié)構(gòu)。B B、堿基在雙螺旋內(nèi)側(cè)。、堿基在雙螺旋內(nèi)側(cè)。雙鏈中相對的堿基按和雙鏈中相對的堿基按和通過氫鍵配對連接，形成互通過氫鍵配對連接，形成互補補. .5C35C35C彼此間以磷酸二酯鍵相連，彼此間以磷酸二酯鍵相連，構(gòu)成的骨架。構(gòu)成的骨架。B B、堿基在雙螺旋內(nèi)側(cè)。、堿基在雙螺旋內(nèi)側(cè)。雙鏈中相對的堿基按雙鏈中相對的堿基按和和通過氫鍵配對通過氫鍵配對連接，形成互補連接，形成互補. .磷酸基與脫氧核糖在外側(cè)，磷酸基與脫氧核糖在外側(cè)，5C35C35C 糖環(huán)平面與中心糖環(huán)平面與中心軸平行。軸平行。C C、堿基平面與中心軸垂直，、堿基平面與中心軸垂直，各相鄰平各

15、相鄰平 面部分重疊。面部分重疊。3.4nmD D、雙螺旋的直徑為、雙螺旋的直徑為2nm2nm沿軸向，每隔沿軸向，每隔0.34nm0.34nm就有一個核苷酸就有一個核苷酸每圈螺旋含有每圈螺旋含有1010個個核苷酸，其軸向距核苷酸，其軸向距為為3.4nm, 3.4nm, E.雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定因素z DNA雙螺旋在生理狀態(tài)下十分穩(wěn)定，結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化。z 起穩(wěn)定作用的有哪些力？起穩(wěn)定作用的有哪些力？ 疏水作用力疏水作用力 （又稱（又稱堿基堆積力：堿基堆積力：使堿基平面堆積的平面間使堿基平面堆積的平面間范德華力，又稱堿基堆積力范德華力，又稱堿基堆積力） 氫鍵氫鍵 范德華力范德華力 z 在 真 核 及 原

16、 核 細 胞 皆 有 證 據(jù) 顯 示 短 的 Z 型 DNA 存 在 。其他類型的DNA雙螺旋z Z 型 DNA左旋、細長 3、 DNADNA的三級結(jié)構(gòu)的三級結(jié)構(gòu)zA.真核細胞染色體的DNA念珠狀三級結(jié)構(gòu)1.基因的貯存： DNA是遺傳信息的主要載體，遺傳信息是分段分布的?；蚴荄NA大分子的功能片段。2.基因的延續(xù)：通過復(fù)制，把遺傳信息準確地傳遞至子代，以保持遺傳信息的穩(wěn)定性。3.基因的表達：通過轉(zhuǎn)錄，把遺傳信息轉(zhuǎn)抄到mRNA分子上，從而指導(dǎo)合成具有特定氨基酸排列順序的蛋白質(zhì)。DNA是遺傳信息復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的模板，是生命遺傳繁殖和個體生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ)。4.基因組：一個生物體的全部基因序列。人類基

17、因組大約由3.0109bp的DNA組成，約含3.54萬個基因RNA的種類、分布、功能的種類、分布、功能核蛋白體核蛋白體RNA信使信使RNA轉(zhuǎn)運轉(zhuǎn)運RNA核內(nèi)不均一核內(nèi)不均一RNA核內(nèi)小核內(nèi)小RNA胞漿小胞漿小RNA 細胞核和胞液細胞核和胞液線粒體線粒體功功能能rRNAmRNA mt rRNAtRNAmt mRNAmt tRNAHnRNASnRNASnoRNAscRNA/7SL-RNA 核蛋白體組分核蛋白體組分蛋白質(zhì)合成模板蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運氨基酸轉(zhuǎn)運氨基酸成熟成熟mRNA的前體的前體參與參與hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運的剪接、轉(zhuǎn)運rRNA的加工、修飾的加工、修飾蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合

18、成的信號識別體的組分的信號識別體的組分核仁小核仁小RNA核蛋白體核蛋白體RNA信使信使RNA轉(zhuǎn)運轉(zhuǎn)運RNA核內(nèi)不均一核內(nèi)不均一RNA核內(nèi)小核內(nèi)小RNA胞漿小胞漿小RNA 細胞核和胞液細胞核和胞液線粒體線粒體功功能能rRNAmRNA mt rRNAtRNAmt mRNAmt tRNAHnRNASnRNASnoRNAscRNA/7SL-RNA 核蛋白體組分核蛋白體組分蛋白質(zhì)合成模板蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運氨基酸轉(zhuǎn)運氨基酸成熟成熟mRNA的前體的前體參與參與hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運的剪接、轉(zhuǎn)運rRNA的加工、修飾的加工、修飾蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號識別體的組分的信號識別體的組分核仁小核

19、仁小RNA把把DNA所攜帶的遺傳信息，按堿基互補配對原則，所攜帶的遺傳信息，按堿基互補配對原則，抄錄并傳送至核糖體，用以決定其合成蛋白質(zhì)的氨抄錄并傳送至核糖體，用以決定其合成蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序。基酸排列順序。細胞質(zhì)細胞質(zhì)細胞核細胞核DNA內(nèi)含子內(nèi)含子外顯子外顯子轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄后剪接轉(zhuǎn)錄后剪接轉(zhuǎn)運轉(zhuǎn)運mRNAhnRNA翻譯翻譯蛋白蛋白真核細胞真核細胞 mRNAmRNA的結(jié)構(gòu)與功能的結(jié)構(gòu)與功能一一 mRNAmRNA的結(jié)構(gòu)特點的結(jié)構(gòu)特點1.1.在細胞內(nèi)含量最少在細胞內(nèi)含量最少(2%-5%),(2%-5%),更新最快更新最快, , 成熟的成熟的mRNAmRNA主要儲存于細胞質(zhì)中主要儲存于細胞質(zhì)中.

20、. 2. 2. 真核細胞真核細胞mRNAmRNA的特點的特點(1) 3(1) 3末端有多聚腺嘌呤的結(jié)構(gòu)末端有多聚腺嘌呤的結(jié)構(gòu)(polyA)(polyA)(2) 5(2) 5末端具有帽子結(jié)構(gòu)末端具有帽子結(jié)構(gòu)(m(m7 7GpppN)GpppN) (3) (3) 一種一種 mRNAmRNA只含有一條多肽鏈的信息只含有一條多肽鏈的信息二二 mRNAmRNA的功能的功能蛋白質(zhì)合成的直接模板蛋白質(zhì)合成的直接模板mRNA的結(jié)構(gòu) 在所有RNA中，對tRNA的研究最多。tRNA 約占細胞總RNA的1015左右，分子量較小。主要功能是將特異的氨基酸運送到核糖體參與蛋白質(zhì)合成，共50種左右。 因為參與蛋白質(zhì)合成的

21、氨基酸只有20多種，因此多數(shù)氨基酸都有一種以上的特異的tRNA與之對應(yīng)。轉(zhuǎn)運同一種氨基酸的tRNA稱為同功tRNA（isoacceptor tRNA）。 tRNA二級結(jié)構(gòu) 呈三葉草形。因為雙螺旋結(jié)構(gòu)所占比例甚高，tRNA的二級結(jié)構(gòu)十分穩(wěn)定。 氨基酸臂 二氫尿嘧啶環(huán)二氫尿嘧啶環(huán) 反密碼子環(huán) 額外環(huán) 假尿嘧啶核苷-胸腺嘧啶核糖核苷環(huán) 與核糖體蛋白(ribosmal protein，rp)組成核糖體，提供蛋白質(zhì)裝配的場所。snmRNAs的的種類種類核內(nèi)小核內(nèi)小RNARNA核仁小核仁小RNARNA胞質(zhì)小胞質(zhì)小RNARNA催化性小催化性小RNARNA小片段干涉小片段干涉 RNA RNA snmRNAs的

22、的功能功能參與參與hnRNA和和rRNA的加工和轉(zhuǎn)運。的加工和轉(zhuǎn)運。z一、一般性質(zhì)一、一般性質(zhì)z二、核酸的變性、復(fù)性及其分子雜交二、核酸的變性、復(fù)性及其分子雜交z1一般性質(zhì)一般性質(zhì)zA、形狀：DNA為白色纖維狀固體，RNA為白色粉末狀固體zB、酸堿性、酸堿性z兩性，偏酸兩性，偏酸zC、溶解性、溶解性z微溶于水，不溶于一般的有機溶劑微溶于水，不溶于一般的有機溶劑zD、水解性、水解性zD.紫外吸光性紫外吸光性z 堿基的嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)為堿基的嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)為共軛體系，最大吸收波長共軛體系，最大吸收波長260nm(蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)280nm)；紫外分光光度法檢測核酸的純度紫外分光光度法檢測核酸的純度通過測

23、定波長在通過測定波長在260nm260nm和和280nm280nm處吸光度的處吸光度的比值比值(A(A260260A A280280) )來估計核酸樣品的純度來估計核酸樣品的純度DNADNA溶液：溶液： A A260260A A280280=1.8 =1.8 RNARNA溶液：溶液：A A260260A A280280= 2.0= 2.0方法：方法：在波長在波長260nm260nm紫外線下，吸光度為紫外線下，吸光度為1 1時，時，紫外分光光度法估計核酸的濃度紫外分光光度法估計核酸的濃度取取5l5l雙鏈雙鏈DNADNA樣品樣品, ,加水稀釋至加水稀釋至1ml1ml。以。以1ml1ml純水作參照測

24、定純水作參照測定波長在波長在260nm260nm處的吸光度值處的吸光度值( (260260),),假如測得稀釋樣品的假如測得稀釋樣品的260260值為值為0.5000.500，相當(dāng)于相當(dāng)于50g/ml50g/ml的雙鏈的雙鏈DNA,DNA,40g/ml40g/ml的單鏈的單鏈DNADNA或或RNA, RNA, 20g/ml20g/ml的單鏈寡核苷酸的單鏈寡核苷酸問題問題1 1那么原液中那么原液中DNADNA的濃度是的濃度是？g/mlg/ml2 2、 核酸的變性、復(fù)性及其分子雜交核酸的變性、復(fù)性及其分子雜交(1) (1) 變性變性(2) (2) 復(fù)性復(fù)性(3) (3) 分子雜交分子雜交(1) 核

25、核 酸酸 的的 變變 性性A A、概念、概念核酸分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開，氫鍵斷裂（不涉及共核酸分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開，氫鍵斷裂（不涉及共價鍵的斷裂），使雙鏈分離，這種現(xiàn)象稱為核酸的價鍵的斷裂），使雙鏈分離，這種現(xiàn)象稱為核酸的變性變性B B、引起核酸變性的因素、引起核酸變性的因素如乙醇、丙酮、尿素、酰胺等如乙醇、丙酮、尿素、酰胺等加熱、加熱、介質(zhì)中的介質(zhì)中的pHpH過酸或過堿、過酸或過堿、加入有機溶劑、加入有機溶劑、C C、核酸的變性與降解的區(qū)別、核酸的變性與降解的區(qū)別 降解降解是指多核苷酸鏈中的磷酸二酯鍵斷裂，是指多核苷酸鏈中的磷酸二酯鍵斷裂，使分子量降低，其過程是不可逆的。使分子量降低，其過程是

26、不可逆的。一般是可逆的，不發(fā)生分子量的變化。一般是可逆的，不發(fā)生分子量的變化。變性變性D D、蛋白質(zhì)和核酸的變性、蛋白質(zhì)和核酸的變性兩者均不涉及共價鍵的斷裂兩者均不涉及共價鍵的斷裂一級結(jié)構(gòu)不破壞一級結(jié)構(gòu)不破壞粘度下降，生物活性喪失粘度下降，生物活性喪失 分子的熱變性分子的熱變性雙螺旋結(jié)構(gòu)即遭破壞，氫鍵雙螺旋結(jié)構(gòu)即遭破壞，氫鍵斷裂，雙鏈分離。斷裂，雙鏈分離。將的稀鹽溶液加熱至將的稀鹽溶液加熱至8095(或以上或以上)數(shù)分鐘，數(shù)分鐘，d. 喪失生物活性喪失生物活性a. 260nm處的紫外吸收值升高處的紫外吸收值升高b. 粘度下降粘度下降c. 浮力、密度升高浮力、密度升高（增色效應(yīng)）（增色效應(yīng)）變變 性性 DNA 的的 特特 點點(2) (2) 核酸的復(fù)性核酸的復(fù)性DNADNA熱變性后的復(fù)性熱變性后的復(fù)性, ,常常稱為常常稱為退火退火。變性的變性的DNADNA或或RNARNA在去除變性因素在去除變性因素并處于適當(dāng)?shù)臈l件下，并處于適當(dāng)?shù)臈l件下，又可重新結(jié)合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)又可重新結(jié)合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)這一過程稱為復(fù)性。這一過程稱為復(fù)性。A.A.概念概念