福建醫(yī)科大學(xué)考博分子生物學(xué)復(fù)習(xí)材料(最全)

1、一、名詞解釋1、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)：是分子生物學(xué)的重要分支，是一門新興的交叉學(xué)科。是從分子水平上研究人體和疾病相關(guān)生物在正常和疾病狀態(tài)下的生命活動(dòng)及其規(guī)律，從分子水平上開展疾病的預(yù)防、診斷和治療研究的學(xué)科。2、基因genes：基因是負(fù)責(zé)編碼RNA或一條多肽鏈DNA片段，包括編碼序列、編碼序列外的側(cè)翼序列及插入序列。是決定遺傳性狀的功能單位。3、結(jié)構(gòu)基因structure genes：基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列稱為結(jié)構(gòu)基因。4、基因組genome：一個(gè)細(xì)胞或病毒的全部遺傳信息。（細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。）真核生物基因組是指一套完整單倍體DNA（染色體DNA）和線粒體D

2、NA的全部序列，包括編碼序列和非編碼序列。5、GT-AG法則：真核生物基因的外顯子與內(nèi)含子接頭處都有一段高度保守的一致性序列，即：內(nèi)含子5端大多數(shù)是以GT開始，3端大多是以AG結(jié)束。6、端粒：以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。端粒DNA由重復(fù)序列組成，人類端粒一端是TTAGGG另一端是AATCCC.7、操縱子：是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動(dòng)子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位。一個(gè)操縱子只含一個(gè)啟動(dòng)序列和數(shù)個(gè)可轉(zhuǎn)錄的

3、結(jié)構(gòu)基因。在同一個(gè)啟動(dòng)序列控制下，操縱子可轉(zhuǎn)錄出多順反子mRNA。8、操縱元件：是一段能夠被不同基因表達(dá)調(diào)控蛋白質(zhì)識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是決定基因表達(dá)效率的關(guān)鍵元件。9、順式作用元件：是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的特異DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、反應(yīng)元件和poly(A)加尾信號(hào)。10、反式作用因子：是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。11、啟動(dòng)子：是能夠被RNA聚合酶特異性識(shí)別并與其結(jié)合并開始轉(zhuǎn)錄的核苷酸序列。（TATAbox、CAATbox、GCbox）12、增強(qiáng)子enhance

4、r：是一段短的DNA序列，其中含有多個(gè)作用元件，可以特異性地與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，增強(qiáng)基因的轉(zhuǎn)錄活性。它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠(yuǎn)。13、poly(A)加尾信號(hào)：含有類啟動(dòng)子的基因在末端還有一段特定保守序列AATAAA。此位點(diǎn)于下游有一段GT或T豐富區(qū)，與AATAAA序列共同構(gòu)成Poly(A)加尾信號(hào)。14、多順反子mRNA即每一個(gè)mRNA分子帶有幾鐘蛋白質(zhì)的遺傳信息（來自幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因），利用共同的啟動(dòng)子及終止信號(hào)，組成“操縱子”的基因表達(dá)調(diào)控單元。15、單順反子mRNA：一個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈，基本上沒有操縱子的結(jié)構(gòu)。16、逆轉(zhuǎn)錄病毒

5、：是一類特殊的單股正鏈RNA病毒，在這些病毒顆粒中帶有依賴RNA的DNA聚合酶，即逆轉(zhuǎn)錄酶，能使RNA反向轉(zhuǎn)錄生成DNA。逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組一般包括三個(gè)基本的結(jié)構(gòu)基因，即：gag，pol，env，分別編碼核心蛋白、逆轉(zhuǎn)錄酶和膜蛋白。17、轉(zhuǎn)座現(xiàn)象：轉(zhuǎn)座因子的插入，阻止了插入位點(diǎn)的基因表達(dá)的現(xiàn)象。18、轉(zhuǎn)座子（transposon,Tn）這是一類長(zhǎng)度在200020000bp之間較大的轉(zhuǎn)座因子，如Tn1681 Tn420.它們除了帶有與轉(zhuǎn)座有關(guān)的基因以外，還帶有其他基因，如Tn903 Tn5帶有卡那霉素抗藥基因等。19、質(zhì)粒plasmid:是存在于細(xì)菌 染色體外的、具有自主復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分

6、子。20、C值：?jiǎn)伪扼w基因組中的全部DNA量。21、重復(fù)序列:真核生物基因組中非編碼序列占95以上，這些非編碼序列中一部分是基因的內(nèi)含子、調(diào)控序列等，另一部分便是重復(fù)序列；重復(fù)序列中除了編碼rRNA、tRNA、組蛋白及免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)基因外，大部分是非編碼序列。其功能主要與基因組的穩(wěn)定性、組織形式以及基因的表達(dá)調(diào)控有關(guān)。22、微衛(wèi)星DNA：又稱為短串聯(lián)重復(fù)（STR），是一類更簡(jiǎn)單的寡核苷酸串聯(lián)重復(fù)序列，其重復(fù)單位為26bp，重復(fù)次數(shù)1060次左右，其總長(zhǎng)度通常小于150bp，分布在所有的染色體。微衛(wèi)星DNA由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)不同而具有高度的遺傳多態(tài)性，并且遵照孟德爾遺傳規(guī)律，可以作為很好的

7、遺傳標(biāo)記。23、衛(wèi)星DNA：是出現(xiàn)在非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列。其特點(diǎn)是具有固定的重復(fù)單位，該重復(fù)單位首尾相連形成重復(fù)序列片段，通常存在于間隔DNA和內(nèi)含子中。串聯(lián)重復(fù)序列是形成衛(wèi)星DNA的基礎(chǔ)。分類：大衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA。24、回文結(jié)構(gòu)：在DNA鏈上，兩個(gè)拷貝反向串聯(lián)在一起，中間沒有間隔序列。25、RFLP：即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性。由于堿基組成的變化而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，從而導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化，稱為RFLP。26、多基因家族multigene family：核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定

8、程度同源性的基因，其編碼產(chǎn)物常具有相似的功能。27、假基因pseudogene與某些有功能的基因結(jié)構(gòu)相似，但不能表達(dá)基因產(chǎn)物的基因。28、基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程。29、誘導(dǎo)表達(dá)：在特定的環(huán)境信號(hào)刺激下，有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為開放或增強(qiáng)，這種表達(dá)方式即30、阻遏表達(dá)：在特定的環(huán)境信號(hào)刺激下，有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降，這種表達(dá)方式即31、阻遏蛋白：是一類在轉(zhuǎn)錄水平對(duì)基因表達(dá)產(chǎn)生負(fù)調(diào)控作用的蛋白質(zhì)。32、蛋白質(zhì)編碼區(qū)（開放閱讀框ORF）:在mRNA的核苷酸序列中，有一段序列是一

9、個(gè)特定蛋白質(zhì)多肽鏈的序列信息，這一段核苷酸序列從起始密碼子開始、倒終止密碼子結(jié)束，稱為蛋白質(zhì)編碼區(qū)或開放閱讀框，此段核苷酸序列決定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。33、SD序列：mRNA起始密碼子AUG上游813個(gè)堿基處存在的一段特定的核苷酸序列，該序列稱為SD序列，是mRNA的起始密碼子之所以能與小亞基定位結(jié)合的關(guān)鍵。SD序列與小亞基中16SrRNA3端的序列互補(bǔ)，當(dāng)mRNA與小亞基結(jié)合時(shí)，SD序列與16SrRNA3端的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合，使起始密碼子定位于翻譯起始部位。34、時(shí)間特異性：在多細(xì)胞生物從受精卵到組織、器官形成的各個(gè)不同發(fā)育階段，相應(yīng)基因嚴(yán)格按照一定時(shí)間順序開啟或關(guān)閉，這就是基因表達(dá)的時(shí)間特異

10、性。35、空間特異性：在個(gè)體生長(zhǎng)全過程，某種基因產(chǎn)物在個(gè)體按不同組織空間順序出現(xiàn)。36、蛋白質(zhì)折疊：多肽鏈自我組裝成功能蛋白質(zhì)的過程。是翻譯后形成功能蛋白質(zhì)的必經(jīng)階段。從核糖體生成的所有新生多肽鏈必須經(jīng)過折疊才能形成熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定的三維空間構(gòu)象，并表達(dá)出特定的生物學(xué)功能。37、蛋白質(zhì)的組裝：寡聚體蛋白分子中的每一個(gè)亞基都具有特定的三維空間構(gòu)象，亞基之間通過非共價(jià)鍵相互裝配，形成空間構(gòu)象更復(fù)雜的寡聚蛋白，這種功能蛋白質(zhì)形成的過程即38、分子伴侶（伴侶蛋白）：是一類序列上沒有相關(guān)性但有共同功能的保守性蛋白，他們?cè)诩?xì)胞內(nèi)能協(xié)助其他多肽結(jié)構(gòu)完成正確的折疊、組裝、轉(zhuǎn)運(yùn)和降解。39、信號(hào)肽：分泌蛋白前

11、體N-末端的一段能被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)識(shí)別的保守序列。40、信號(hào)序列：靶向輸送的蛋白質(zhì)的N-末端有一些特異的氨基酸序列，亦被稱為蛋白質(zhì)的分檢信號(hào)。不同蛋白質(zhì)各有特異的分檢信號(hào)，指導(dǎo)蛋白質(zhì)的靶向輸送與細(xì)胞內(nèi)定位。41、泛素-蛋白酶體途徑：細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)經(jīng)地泛素-蛋白酶體途徑被降解，即在泛素活化酶(E1)、泛素偶聯(lián)酶(E2)和泛素連接酶(E3)連續(xù)催化下，使蛋白質(zhì)泛素化標(biāo)記，再被26S蛋白酶體識(shí)別并降解。 此途徑有多種生理調(diào)控功能：在細(xì)胞周期、抗原提呈轉(zhuǎn)錄及細(xì)胞凋亡等多種生理功能中均發(fā)揮重要調(diào)控作用。若該系統(tǒng)功能失?？梢鸲喾N病理損害。42、ERAD內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白降解途徑：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也具有蛋白質(zhì)質(zhì)量監(jiān)控功能，

12、它能區(qū)別正確折疊和錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)，并在易位子協(xié)助下，把錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)逆向轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞漿，再被泛素-蛋白酶體系降解。此途徑即為ERAD。43、管家基因：在生物體生命的全過程都是必須的，且在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因。44、嚴(yán)謹(jǐn)反應(yīng)：細(xì)菌在缺乏氨基酸的環(huán)境中，RNA聚合酶活性降低，RNA合成減少或停止。45、衰減子attenuator：細(xì)菌中的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)翻譯合成是偶聯(lián)在一起的。這一特點(diǎn)使細(xì)菌的一些操縱子中的特殊序列可以在轉(zhuǎn)錄過程中控制轉(zhuǎn)錄水平。這些特殊結(jié)構(gòu)稱為衰減子。衰減子又稱為弱化子，位于一些操縱子中第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因之前，是一段能減弱轉(zhuǎn)錄作用的順序。46、CAP：是大腸

13、桿菌分解代謝物基因活化蛋白，這種蛋白可將葡萄糖饑餓信號(hào)傳遞給許多操縱子，使細(xì)菌在缺乏葡萄糖時(shí)可以利用其他能源。由于CAP的作用依賴于cAMP，因此，CAP又稱為cAMP受體蛋白。47、基因重排：指某些基因片段改變?cè)瓉泶嬖陧樞?，通過調(diào)整有關(guān)基因片段的銜接順序，再重排成為一個(gè)完整的轉(zhuǎn)錄單位。48、重組修復(fù)：當(dāng)DNA損傷范圍較大時(shí)，應(yīng)用直接修復(fù)或切除修復(fù)方式無法修復(fù)時(shí)，就先進(jìn)行復(fù)制再進(jìn)行切除修復(fù)，這種修復(fù)方式就是49、SOS：是小分子單體G蛋白調(diào)節(jié)因子GEF家庭成員，可以促進(jìn)GTP結(jié)合于Ras，是Ras活性的正調(diào)節(jié)因子。50、SOS修復(fù)：當(dāng)DNA片斷發(fā)生高密度、大片斷損傷，原有的DNA聚合酶活性也降

14、低，此時(shí)，細(xì)胞緊急啟動(dòng)應(yīng)急修復(fù)系統(tǒng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生新的DNA聚合酶因子，又稱誘導(dǎo)修復(fù)。51、同源結(jié)構(gòu)域（homeodomain,HD）：簡(jiǎn)稱同源域，許多反式作用因子結(jié)合DNA的結(jié)構(gòu)域中具有一段相同的保守序列，是60個(gè)左右氨基酸組成的螺旋回折螺旋結(jié)構(gòu)的區(qū)域。52、信息分子：攜帶生物信息，在細(xì)胞之間進(jìn)行傳遞的小分子化學(xué)物質(zhì)53、第一信使在細(xì)胞間進(jìn)行信息傳遞的信息分子54、第二信使將第一信使的信息在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步傳遞的信息分子55、受體：靶細(xì)胞中能夠被體內(nèi)一些生物活性物質(zhì)如激素、細(xì)胞因子所識(shí)別，并與之結(jié)合將信號(hào)傳至細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生生物效應(yīng)的物質(zhì)，也即細(xì)胞接受細(xì)胞外信號(hào)的接收裝置，直接參與細(xì)胞的信息傳遞。受體的化學(xué)

15、性質(zhì)主要為蛋白質(zhì)。56、酶偶聯(lián)受體：指那些受體自身具有酶的活性，或者自身沒有酶的活性，但與酶分子結(jié)合存在的一類受體，主要是生成因子和細(xì)胞因子受體。57、細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞分泌的，能參與調(diào)控真核細(xì)胞的增殖、分化、代謝和運(yùn)動(dòng)功能等多項(xiàng)生命過程的生物活性的多肽分子。同一細(xì)胞因子作用于不同的靶細(xì)胞，可以產(chǎn)生不同的效應(yīng)。58、蛋白激酶（protein kinase）：能夠?qū)?磷酸基團(tuán)從磷酸供體分子上轉(zhuǎn)移至底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。59、蛋白磷酸酶（protein phosphatase）是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷酸化反應(yīng)的一類酶分子，與蛋白激酶相對(duì)應(yīng)存在，共同構(gòu)成磷酸

16、化與去磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開關(guān)系統(tǒng)。對(duì)蛋白激酶所引起的變化產(chǎn)生衰減信號(hào)60、接頭蛋白也稱調(diào)控結(jié)合元件(modular binding domain) 即信號(hào)分子中存在著的一些特殊的結(jié)構(gòu)域，大約50-100個(gè)氨基酸構(gòu)成，信號(hào)分子通過這些特殊結(jié)構(gòu)域相互識(shí)別和作用而有序銜接，形成不同的信號(hào)傳遞鏈61、G蛋白: GTP結(jié)合蛋白，結(jié)合GTP時(shí)為活化形式，GTP水解成GDP時(shí)回到非活性狀態(tài)，活化的G蛋白通過變構(gòu)調(diào)節(jié)作用激活下游信號(hào)分子。由亞基和亞基結(jié)合成三聚體62、周期蛋白：是一類呈細(xì)胞周期特異性或時(shí)相性表達(dá)、累積與分解的蛋白質(zhì)，它與周期素依賴性激酶共同影響細(xì)胞周期的運(yùn)行。63、細(xì)胞凋亡（apop

17、tosis)：是機(jī)體細(xì)胞在正常生理或病理狀態(tài)下發(fā)生的一種自發(fā)的程序性死亡過程，它的發(fā)生受機(jī)體的嚴(yán)密調(diào)控。細(xì)胞凋亡的形態(tài)特點(diǎn)：染色體固縮、膜起泡、核膜消失、DNA斷裂®凋亡小體形成。64、原癌基因（proto-oncogene)是一類廣泛存在生物體中，高度保守的基因，其產(chǎn)物具有調(diào)控細(xì)胞增生的重要功能，當(dāng)其受某些因素的影響，能發(fā)生突變（活化）成為癌基因，導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。65、抑癌基因（tumor suppressor gene）：指存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一大類可抑制細(xì)胞生長(zhǎng)并具有潛在抑癌作用的基因，當(dāng)這類基因發(fā)生突變、缺失或失活時(shí)，可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。66、癌基因：是細(xì)胞內(nèi)

18、控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性。當(dāng)癌基因結(jié)構(gòu)或表達(dá)發(fā)生異常時(shí)，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無限制增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。包括病毒癌基因和細(xì)胞癌基因。67、細(xì)胞癌基因：存在于正常的細(xì)胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。68、病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒）基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒無復(fù)制作用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。69、基因診斷：利用現(xiàn)代分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)和方法，直接監(jiān)測(cè)基因結(jié)構(gòu)及其表達(dá)水平是否正常，從而對(duì)疾病作出診斷的方法。70、DNA變性：在物理或

19、化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響。71、DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。72、退火：指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。73、PCR概念:PCR是近年來發(fā)展起來的一種體外擴(kuò)增特異DNA片段的技術(shù)，它根據(jù)體內(nèi)細(xì)胞分裂時(shí)DNA半保留復(fù)制機(jī)理，能快速、特異地在體外將目的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬倍。74、RT-PCR技術(shù)：以RNA為模板體外擴(kuò)增cDNA 的技術(shù)，可用于定性和相對(duì)定量（半定量）。 75、RNA酶保護(hù)試驗(yàn)（RPA）：是一種液相雜交技術(shù)，通過

20、RNase A 和RNase T1專一性降解單鏈RNA，分析受到保護(hù)的雜交雙鏈RNA，以確定RNA的剪接情況、剪接位點(diǎn)以及基因內(nèi)含子的可能位置等。76、筑巢PCR：先用一對(duì)外側(cè)引物擴(kuò)增含目的基因的大片段，再用內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴(kuò)增獲取目的基因。可以提高PCR的效率和特異性。77、原位PCR：以組織固定處理細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列，進(jìn)行PCR反應(yīng)的過程。78、定量PCR：基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對(duì)mRNA進(jìn)行定量測(cè)定，對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。79、基因打靶：是指通過DNA定點(diǎn)同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。80、Weste

21、rn blot 技術(shù)：是一種免疫印跡技術(shù)，以偶連標(biāo)記物的抗體分子作為探針，檢測(cè)轉(zhuǎn)移到固相支持物上的蛋白質(zhì)分子。81、熒光原位雜交：是一種非放射性的原位雜交方法，用特殊熒光素核酸(DNA)探針，可在染色體細(xì)胞內(nèi)和組織切片標(biāo)本上進(jìn)行DNA雜交，能夠非常有效的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)是否存在特異性的DNA或RNA序列。82、流式細(xì)胞術(shù)：用熒光標(biāo)記的抗體結(jié)合細(xì)胞表面或內(nèi)部的特定蛋白質(zhì)分子（抗原），經(jīng)過流式細(xì)胞儀分析熒光信號(hào)，從而根據(jù)細(xì)胞表達(dá)特定蛋白質(zhì)的情況對(duì)基因的表達(dá)活性作出判斷。83、轉(zhuǎn)基因：將外源基因整合到動(dòng)物基因組上84、轉(zhuǎn)基因技術(shù)：是指將外源基因?qū)胧芫鸭?xì)胞或胚胎干細(xì)胞中，通過外源基因與細(xì)胞染色體DNA間

22、隨機(jī)重組的發(fā)生而將外源基因插入到受體染色體DNA中，并隨著細(xì)胞的分裂而遺傳給后代。85、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（transgenic animal):應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育的攜帶外源基因并能穩(wěn)定遺傳的動(dòng)物。86、基因敲除（gene knockout）：指通過DNA同源重組定向地將外源基因替換宿主細(xì)胞染色體DNA中特定的基因，從而使特定的基因在細(xì)胞內(nèi)或生物體內(nèi)失活的過程87、基因敲除動(dòng)物（gene knockout animal）：采用同源重組定向剔除特定基因的技術(shù)，所制備的某特定基因喪失功能的動(dòng)物。88、基因敲除小鼠：應(yīng)用基因敲除技術(shù)，使兩條染色體上特定等位基因都喪失功能的小鼠。89、反義RNA（antise

23、nce RNA)：能與mRNA互補(bǔ)配對(duì)的RNA分子。90、RNA干涉（RNAi）是指由短雙鏈RNA誘導(dǎo)的同源mRNA的降解過程，可使基因表達(dá)受到抑制。91、DNA 重組（DNA recombination）：不同來源的DNA分子通過共價(jià)連接（磷酸二酯鍵）而組合成新的DNA分子，這一過程稱為DNA重組。重組DNA技術(shù)又稱為分子克隆技術(shù)或基因工程技術(shù)。92、分子克?。涸隗w外對(duì)DNA分子按照既定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。93、基因工程(genetic engineering)：有目的地通過分子克隆技術(shù)，利用克隆基因表達(dá)、制備特定

24、的蛋白或多肽產(chǎn)物，或定向改造基因結(jié)構(gòu)所用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為基因工程。94、粘性質(zhì)粒：是由DNA的cos區(qū)與質(zhì)粒重新構(gòu)建的載體，具有質(zhì)粒相同的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，為雙鏈環(huán)狀DNA。95、限制性核酸內(nèi)切酶：是細(xì)菌產(chǎn)生的一類能識(shí)別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶。96、載體(Vector)能在連接酶作用下和外源DNA片段連接并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子97、表達(dá)載體：是指用來在受體細(xì)胞中表達(dá)(轉(zhuǎn)錄和翻譯)外源基因的載體。這類載體除具有克隆載體所具備的性質(zhì)外，還帶有轉(zhuǎn)錄和翻譯所必需的DNA序列98、逆轉(zhuǎn)錄酶 ：依賴于RNA的DNA聚合酶，這是一種有效的轉(zhuǎn)錄RNA成為DNA的酶，

25、產(chǎn)物DNA又稱cDNA（complementary DNA）。用于mRNA為模板合成cDNA，是構(gòu)建cDNA文庫和RT-PCR技術(shù)中的關(guān)鍵工具酶。99、DNA連接酶：DNA重組技術(shù)的核心步驟是DNA片段之間的體外連接。將兩段DNA分子拼接起來的酶DNA連接酶。100、基因組文庫：是含有某種生物體全部基因的隨機(jī)片段的重組DNA克隆群體，它象一個(gè)儲(chǔ)存有基因組全部序列的信息庫，稱為基因組文庫。101、cDNA文庫：一群含重組cDNA的細(xì)菌或噬菌體克隆群體，含有某種生物的全部的mRNA的信息。102、人工接頭：是指含有某些限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)的寡核苷酸片段，在T4DNA連接酶的作用下，將接頭連接到目的

26、DNA片段的兩端，然后再用相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶切割，這樣外源DNA具有粘性末端，可以連接到同一限制性內(nèi)切酶線性化的載體上去。103、轉(zhuǎn)化：質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主菌并使其獲得新的表型的過程104、感染：以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。105、轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過程。106、轉(zhuǎn)染：指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程。107、蛋白質(zhì)組：一個(gè)基因組、一個(gè)細(xì)胞

27、或組織、或一種生物體所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)108、蛋白質(zhì)組學(xué)：研究蛋白質(zhì)組或應(yīng)用大規(guī)模蛋白質(zhì)分離和識(shí)別技術(shù)研究蛋白質(zhì)組的一們學(xué)科109、核酸分子雜交：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下按堿基互補(bǔ)原則退火形成雙鏈。實(shí)質(zhì): 核酸變性和具有同源序列的兩條單鏈的復(fù)性過程。110、探針：指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，并在相互作用之后可以檢測(cè)出來的生物大分子。111、核酸探針：指能識(shí)別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段單鏈DNA或RNA分子。112、隨機(jī)引物：是含有多種可能排列順序的寡聚核苷酸片段的混和物，因此它可以與任意核酸序列雜交，起到聚合酶反應(yīng)的引物的作用。113、DNA芯片技術(shù)：就是一種大規(guī)模的

28、集成的固相核酸分子雜交，以大量已知堿基序列的寡核苷酸片段為探針，檢測(cè)樣品中哪些核酸序列與其互補(bǔ)，然后通過定性定量分析得出待測(cè)樣品的基因序列及表達(dá)的信息。其方法包括芯片的制備、樣品的準(zhǔn)備、分子雜交和檢測(cè)分子。114、SSCP：?jiǎn)捂湗?gòu)象多態(tài)性檢測(cè)是一種基于DNA構(gòu)象差別來檢測(cè)點(diǎn)突變的方法。相同長(zhǎng)度的單鏈DNA，如果堿基序列不同，形成的構(gòu)象就不同，這樣就形成了單鏈構(gòu)象多態(tài)性。115、基因突變：在基因的特定DNA序列中，其堿基組成及排列順序可因機(jī)體內(nèi)外因素的作用而發(fā)生改變，導(dǎo)致DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)改變，改變基因結(jié)構(gòu)，形成基因突變。116、點(diǎn)突變：在基因一級(jí)結(jié)構(gòu)的某個(gè)位點(diǎn)上，一種堿基被另一種堿基取代，產(chǎn)生的D

29、NA一級(jí)結(jié)構(gòu)改變。有轉(zhuǎn)換和顛換兩種117、基因缺失：基因的一級(jí)結(jié)構(gòu)中一個(gè)核苷酸或一段核苷酸序列丟失造成的基因結(jié)構(gòu)改變。118、基因插入：在基因一級(jí)結(jié)構(gòu)的某個(gè)位置增加一個(gè)核苷酸或一段核苷酸序列形成的基因結(jié)構(gòu)改變。119、基因倒位：基因內(nèi)部DNA序列重組，合一段DNA序列的方向倒轉(zhuǎn)。120、錯(cuò)義突變：因DNA分子中堿基的取代，使經(jīng)轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的mRNA相應(yīng)的密碼子發(fā)生變化，所編碼的氨基酸也發(fā)生改變，翻譯成蛋白質(zhì)后，一種氨基酸被另一種氨基酸取代，使突變蛋白質(zhì)的氨基酸組成和排列順序都發(fā)生改變。121、無義突變：因DNA分子的堿基的取代、缺失或插入，使原來編碼某種氨基酸的密碼子變成了終止密碼子，導(dǎo)致蛋白翻

30、譯提前終止，mRNA的遺傳信息不能全部翻譯成蛋白質(zhì)。122、同義突變：因遺傳密碼具有簡(jiǎn)并性，突變后的密碼子與突變前的密碼子代表同一種氨基酸，從而不引起蛋白質(zhì)氨基酸組成和排列順序發(fā)生任何改變，即不引起蛋白質(zhì)產(chǎn)物的錯(cuò)義也不使蛋白質(zhì)的翻譯提前終止。123、移碼突變：是指基因堿基序列中發(fā)生單個(gè)、數(shù)個(gè)核苷酸或核苷酸片段的的插入或缺失，導(dǎo)致突變區(qū)域之后的三聯(lián)體密碼子閱讀框移位，突變區(qū)以后的堿基序列所編碼多肽鏈的氨基酸序列與突變前不同。124、基因治療gene therapy:一般是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的的治療方法。125、基因置換：或稱基因矯正：特定

31、的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞，通過定位重組，讓導(dǎo)入的正?；蛑脫Q基因組內(nèi)原有的缺陷基因，不涉及基因組的任何改變。126、基因添加或稱基因增補(bǔ)：通過導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因。127、基因干預(yù)：采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)，或者通過破壞某個(gè)基因而使之不能表達(dá)，以達(dá)到治療疾病的目的。128、基因標(biāo)記：基因標(biāo)記實(shí)驗(yàn)是基因治療的前奏，并不在于直接治療疾病而是期望能夠提供有關(guān)正常細(xì)胞生物學(xué)和疾病病理方面的信息。129、反義RNA：堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱為反義RNA?？梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。130、反義核酸技術(shù)：是通過合成一種短鏈且與DNA或RNA互補(bǔ)的，

32、以DNA或RNA為目標(biāo)抑制翻譯的反義分子，干擾目的基因的轉(zhuǎn)錄、剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)、翻譯等過程的技術(shù)。131、核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑。132、三鏈DNA：當(dāng)某一DNA或RNA寡核苷酸與DNA高嘌呤區(qū)可結(jié)合時(shí)可形成三鏈，能特異地結(jié)合在DNA的大溝中，并與富含嘌呤鏈上的堿基形成氫鍵，阻止基因的轉(zhuǎn)錄。1、病毒基因組的特點(diǎn)： 種類單一；形式多樣；大小不一 RNA病毒基因組有單、雙鏈和正、負(fù)鏈之分。DNA病毒基因組有環(huán)狀DNA分子和線性DNA分子。 單倍體基因組：每個(gè)基因組在病毒中只出現(xiàn)一次； 基因重疊； 動(dòng)物/細(xì)菌病毒與真核/原核基因

33、相似：內(nèi)含子； 具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因；結(jié)構(gòu)基因沒有翻譯起始序列 基因編碼區(qū)無間隔：通過宿主及病毒本身酶切； 無帽狀結(jié)構(gòu)。2、原核基因組的特點(diǎn)： 為一條環(huán)狀雙鏈DNA； 只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)； 具有操縱子結(jié)構(gòu)； 絕大部分為單拷貝； 基因密度非常高，基因組序列中編碼區(qū)所占的比例較大?；蛐蛄兄芯幋a區(qū)所占的比例大，可表達(dá)基因約50%，大于真核生物小于病毒； 基因一般是連續(xù)的，無內(nèi)含子； 重復(fù)序列很少；含有編碼同工酶的同基因； 同的原核生物基因組中的GC含量變化很大。3、真核基因組的特點(diǎn)： 真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)； 基因組由染色體DNA和染色體外DNA組

34、成。 真核基因?yàn)閱雾樂醋?，而?xì)菌和病毒的結(jié)構(gòu)基因多為多順反子； 基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)； 真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成； 存在大量的重復(fù)序列； 功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族；還存在一些假基因 存在可移動(dòng)的遺傳因素； 細(xì)胞為雙倍體，而精子和卵子為單倍體。4、轉(zhuǎn)座因子的類別和遺傳效應(yīng)：1、原核生物轉(zhuǎn)座因子可以分為：插入序列、轉(zhuǎn)座子、Mu噬菌體。2、轉(zhuǎn)座因子的幾個(gè)遺傳效應(yīng)：轉(zhuǎn)座因子的轉(zhuǎn)座不是本身的移動(dòng)，而是由轉(zhuǎn)座因子復(fù)制出一個(gè)新的拷貝轉(zhuǎn)移到基因組中的新位置上去。新的轉(zhuǎn)座因子轉(zhuǎn)到靶點(diǎn)后，靶點(diǎn)序列會(huì)倍增為兩個(gè)靶點(diǎn)序列，并分別排列在轉(zhuǎn)座因子的兩側(cè)，形成同向重復(fù)序列。在轉(zhuǎn)座過

35、程中能夠形成共同體。轉(zhuǎn)座因子轉(zhuǎn)座后能促使染色體畸變。轉(zhuǎn)座因子可以從原來的位置上切除，這個(gè)過程成為切離。轉(zhuǎn)座可引起插入突變。給受體基因組增添了新的標(biāo)志基因。5、引起DNA損傷的因素及機(jī)制：（1）紫外線引起DNA損傷：形成胸腺嘧啶二聚體引起DNA之間的交聯(lián)、DNA與蛋白質(zhì)的交聯(lián)、甚至DNA鏈的斷裂。（2）電力輻射引起DNA損傷：可導(dǎo)致堿基變化：由.OH自由基引起，包括DNA鏈上的堿基氧化修飾、過氧化物的形成、堿基環(huán)的破壞和脫落等可導(dǎo)致脫氧核糖的變化：脫氧核糖分解，最后可引起DNA鏈斷裂?？蓪?dǎo)致DNA斷裂：使脫氧核糖破壞或磷酸二酯鍵斷開。引起DNA鏈交聯(lián)：包括DNA-DNA鏈間鏈內(nèi)交聯(lián)和DNA-蛋白

36、質(zhì)交聯(lián)。（3）烷化劑引起DNA損傷：烷化劑導(dǎo)致堿基烷基化烷化劑導(dǎo)致堿基脫落烷化劑導(dǎo)致DNA斷鏈烷化劑導(dǎo)致DNA鏈交聯(lián)（4）堿基類似物、修飾劑引起堿基對(duì)的改變（5）其他因素：丫啶類化合物引起堿基插入和堿基缺失；氧自由基。（6）DNA也會(huì)產(chǎn)生自發(fā)性損傷：DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生堿基錯(cuò)配；DNA修復(fù)使產(chǎn)生堿基錯(cuò)配；堿基自發(fā)改變導(dǎo)致DNA損傷：互變異構(gòu)位導(dǎo)致DNA突變；脫氨基作用導(dǎo)致DNA突變；堿基丟失導(dǎo)致DNA突變。6、DNA損傷（突變）分類：鏈內(nèi)共價(jià)交聯(lián)鏈間共價(jià)交聯(lián)DNA鏈斷裂堿基突變（轉(zhuǎn)換和顛換）插入或缺失DNA重組等7、DNA損傷修復(fù)機(jī)制：（1）直接修復(fù)： DNA斷裂口可以直接修復(fù)； 二聚體可被光復(fù)活

37、酶直接修復(fù)； 烷基化堿基可以直接修復(fù)。（2）切除修復(fù)識(shí)別：DNA特異內(nèi)切酶或糖苷酶識(shí)別DNA損傷位點(diǎn)；切除：在損傷位點(diǎn)的5上游切斷DNA鏈，沿5-3方向逐步切除DNA損傷部分合成：DNA聚合酶在缺口處催化DNA合成并沿5-3方向延伸連接：在DNA連接酶的作用下，新合成的DNA片段與原來的DNA鏈連接。（3）重組修復(fù)是DNA損傷較多時(shí)的修復(fù)方式（4）SOS修復(fù)是DNA損傷嚴(yán)重時(shí)的應(yīng)急性修復(fù)方式。（5）細(xì)胞周期檢查點(diǎn)控制是真核生物誘導(dǎo)修復(fù)的主要機(jī)制8、因子依賴性和非依賴性兩種機(jī)制介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄的終止：（1）不依賴因子的終止子有兩個(gè)重要特征：一個(gè)反向重復(fù)序列，使RNA末端形成一個(gè)發(fā)夾結(jié)構(gòu)在信息鏈上有一連串

38、的T，因而RNA末端發(fā)夾結(jié)構(gòu)之后緊接著出現(xiàn)一串U，RNA/DNA雜交分子的rU-dA堿基對(duì)結(jié)合力較弱，當(dāng)發(fā)夾結(jié)構(gòu)形成時(shí)，RNA聚合酶停止移動(dòng)，RNA鏈從DNA上脫落。（2）有一些基因的RNA轉(zhuǎn)錄終止階段依賴因子。當(dāng)RNA聚合酶移動(dòng)至終止子部位時(shí)，因子與其結(jié)合，并發(fā)揮ATP酶和解鏈酶活性，使RNA與DNA分離，轉(zhuǎn)錄過程終止。9、原核生物的tRNA轉(zhuǎn)錄后的加工：（1）剪切作用將多順反子初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分離并切除多余序列；（2）有些tRNA分子在3端需要修復(fù)或添加CCA序列；（3）通過某些堿基的化學(xué)修飾在tRNA分子中形成稀有堿基。10、真核生物mRNA的加工：（1）甲基化鳥苷酸以5端磷酸基團(tuán)連接mRN

39、A5端形成帽子結(jié)構(gòu)。（2）多聚腺苷酸的加入形成mRNA的3尾。（3）mRNA前體經(jīng)剪接過程除去內(nèi)含子序列。（4）mRNA分子中的少數(shù)堿基可被甲基化。（5）RNA編輯：是通過對(duì)mRNA的加工使遺傳信息在mRNA水平上發(fā)生改變。11、原核生物轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：（1）啟動(dòng)子決定轉(zhuǎn)錄方向、模板鏈、轉(zhuǎn)錄效率。（2）不同的因子可以競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合RNA聚合酶，打開特定的一套基因。（3）阻遏蛋白在轉(zhuǎn)錄水平對(duì)基因表達(dá)具有負(fù)調(diào)控作用。（4）正調(diào)控蛋白結(jié)合于特異DNA序列后促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄。（5）倒位蛋白通過DNA重組倒位而調(diào)節(jié)基因表達(dá)、（6）RNA聚合酶抑制物可與RNA結(jié)合并抑制轉(zhuǎn)錄。（7）衰減子可以在轉(zhuǎn)錄過程中控制轉(zhuǎn)錄水平

40、。12、乳糖操縱子的作用機(jī)制（1）乳糖操縱子（lac operon）的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個(gè)操縱元件O，一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I（是調(diào)節(jié)基因，編碼產(chǎn)生阻遏蛋白）。（2）阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)：沒有乳糖存在時(shí)，I基因編碼的阻遏蛋白結(jié)合于操縱序列O處，抑制RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)，不能合成分解乳糖的三種酶；有乳糖存在時(shí)，乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu)，不能結(jié)合于操縱序列，乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶。所以，乳糖操縱子的這種調(diào)控機(jī)制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。（3）CAP的正性調(diào)節(jié)：lac

41、啟動(dòng)子是弱啟動(dòng)子，在啟動(dòng)子上游有CAP結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時(shí)，cAMP濃度升高，與CAP結(jié)合，使CAP發(fā)生變構(gòu)，CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動(dòng)序列附近的CAP結(jié)合位點(diǎn)，激活RNA聚合酶活性，促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操縱子后促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，對(duì)乳糖操縱子實(shí)行正調(diào)控，加速合成分解乳糖的三種酶。（4）協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機(jī)制，互相協(xié)調(diào)、互相制約。CAP結(jié)合DNA是由cAMP控制的。cAMP結(jié)合于CAP，誘導(dǎo)CAP發(fā)生構(gòu)象改變，使之能夠結(jié)合于特定的DNA序列，激活臨近基因的轉(zhuǎn)錄。cAMP水平降低時(shí)，

42、cAMP與CAP解離，CAP轉(zhuǎn)回到無活性的構(gòu)象，并與DNA解離，這將關(guān)閉葡萄糖以外的其他的與糖代謝相關(guān)的操縱子。13、原核生物翻譯水平的調(diào)控：（1）SD序列是影響翻譯的重要因素：SD序列的順序及位置影響翻譯起始效率。mRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)可以屏蔽SD序列。（2）mRNA的穩(wěn)定性（降解速度）是翻譯調(diào)控的另一重要機(jī)制。mRNA的5端與核糖體結(jié)合，可明顯提高其穩(wěn)定性。（3）翻譯產(chǎn)物也可以對(duì)相應(yīng)的mRNA翻譯進(jìn)行調(diào)控：核糖體蛋白控制其mRNA的翻譯。翻譯終止因子RF2調(diào)節(jié)自身的翻譯。（4）小分子RNA可以抑制特定mRNA的翻譯。14、真核生物在轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控：主要是通過反式作用因子、順式作用元件和RNA聚合

43、酶的相互作用來完成的，主要是反式作用因子結(jié)合順式作用元件后影響轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程。（1）轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成是轉(zhuǎn)錄的可調(diào)控環(huán)節(jié)：真核生物RNA聚合酶識(shí)別的是由通用轉(zhuǎn)錄因子與DNA形成的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，只有當(dāng)一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到DNA上，形成有功能的啟動(dòng)子，才能被RNA聚合酶所識(shí)別并結(jié)合。轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過程為：TFD結(jié)合TATA盒；RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合TFD-DNA復(fù)合物形成一個(gè)閉合的復(fù)合物；其他轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶結(jié)合形成一個(gè)開放復(fù)合物，開放轉(zhuǎn)錄。（2）反式作用因子是真核細(xì)胞內(nèi)重要的基因表達(dá)調(diào)控蛋白。在轉(zhuǎn)錄調(diào)控過程中，反式作用因子的作用：促進(jìn)或抑制TFD與TATA盒結(jié)

44、合；促進(jìn)或抑制RNA聚合酶與TFD-DNA復(fù)合物的結(jié)合；促進(jìn)或抑制轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成。（3）轉(zhuǎn)錄起始是由多種激活的反式作用因子進(jìn)行復(fù)合調(diào)控1）反式作用因子的活性調(diào)節(jié)：表達(dá)式調(diào)節(jié)反式作用因子合成出來就具有活性；共價(jià)修飾磷酸化和去磷酸化，糖基化；配體結(jié)合許多激素受體是反式作用因子；蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)復(fù)合物的解離與形成。2）反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合：反式作用因子被激活后，即可識(shí)別并結(jié)合上游啟動(dòng)子元件和增強(qiáng)子中的保守性序列，對(duì)基因轉(zhuǎn)錄起調(diào)節(jié)作用。3）反式作用因子的作用方式成環(huán)、扭曲、滑動(dòng)、Oozing。4）反式作用因子的組合式調(diào)控作用：每一種反式作用因子結(jié)合順式作用元件后雖

45、然可以發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用，但反式作用因子對(duì)基因調(diào)控不是由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。15、反式作用因子三個(gè)基本特征一般具有三個(gè)功能域：DNA識(shí)別結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄活性域和結(jié)合其他蛋白結(jié)合域；能識(shí)別并結(jié)合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件；對(duì)基因的表達(dá)有正性或負(fù)性調(diào)控作用，激活和阻遏基因的表達(dá)。16、反式作用因子結(jié)構(gòu)域具有多種結(jié)構(gòu)模式：1、DNA結(jié)合域有不同的結(jié)構(gòu)模式：鋅指結(jié)構(gòu)借助半胱氨酸和組氨酸與鋅離子結(jié)合；同源結(jié)構(gòu)域具有螺旋回折螺旋結(jié)構(gòu)：亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)使兩個(gè)單體結(jié)合并形成DNA結(jié)合域。螺旋-環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)易于形成二聚體堿性-螺旋含較多的堿性氨基酸。2、轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域是反式作用因子的轉(zhuǎn)錄激活區(qū)

46、。其模型有：酸性-螺旋結(jié)構(gòu)。帶有負(fù)電荷的-螺旋區(qū)。富含谷氨酰胺結(jié)構(gòu)域存在于多種轉(zhuǎn)錄因子中。富含脯氨酸結(jié)構(gòu)域 常與DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域相連。17、真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制mRNA的加工和運(yùn)輸可形成轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控：5端加帽和3端多聚腺苷酸化的調(diào)控意義：5端加帽和3端多聚腺苷酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個(gè)重要因素，它至少保證mRNA在轉(zhuǎn)錄過程中不被降解。mRNA選擇性剪接對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的作用mRNA運(yùn)輸?shù)目刂普{(diào)節(jié)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的mRNA量。18、受體的作用：（1）識(shí)別外源性信息分子，與受體相對(duì)應(yīng)，信息分子亦可以稱為配體；（2）將配體的信號(hào)進(jìn)行轉(zhuǎn)換，使之稱為細(xì)胞內(nèi)分子可以識(shí)別的信號(hào)，并傳遞到其他分子，引起

47、細(xì)胞的應(yīng)答。19、受體與信息分子的結(jié)合特點(diǎn)： 高度親和力 高度特異性 可逆行 可飽和性 放大效應(yīng)。 特定的作用模式20、受體的分類：（1）細(xì)胞表面受體：水溶性、表面信號(hào)分子：離子通道受體、G蛋白偶聯(lián)受體、單次跨膜受體。（2）細(xì)胞內(nèi)受體：脂溶性化學(xué)信號(hào)?？梢晕挥诩?xì)胞質(zhì)也可以位于細(xì)胞核內(nèi)。21、信息分子的化學(xué)本質(zhì)(1)蛋白質(zhì)多肽類 (2)氨基酸衍生物：如腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺等。(3)脂類化合物：固醇類化合物：糖皮質(zhì)激素、性激素等，磷脂類化合物：1磷酸神經(jīng)酰胺，溶血磷脂酸，甘油二酯(4)其他小分子：核苷酸衍生物、NO、CO等 22、信息分子的作用特點(diǎn)(1)親水性 ：不能穿過細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分

48、子層，而需要與細(xì)胞膜上的受體相結(jié)合，把信息轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞。 (2)親脂性：能穿過細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，形成信息分子-受體復(fù)合物，引起效應(yīng)。 (3)信息分子由信息細(xì)胞釋放分泌，經(jīng)運(yùn)輸系統(tǒng)，達(dá)到靶細(xì)胞，與特異性受體結(jié)合，產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)的第二信使，作用于效應(yīng)分子，產(chǎn)生效應(yīng)。23、信息分子的種類(1)激素 主要指內(nèi)分泌激素 (2)神經(jīng)遞質(zhì) (3)細(xì)胞因子24、接頭蛋白的結(jié)構(gòu)域接頭蛋白也稱調(diào)控結(jié)合元件(modular binding domain) 即信號(hào)分子中存在著的一些特殊的結(jié)構(gòu)域，大約50-100個(gè)氨基酸構(gòu)成，信號(hào)分子通過這些特殊結(jié)構(gòu)域相互識(shí)別和作用而有序銜接，形成不同的信號(hào)傳遞鏈。SH2結(jié)構(gòu)域 信號(hào)分子與

49、含磷酸酪氨酸蛋白分子SH3結(jié)構(gòu)域 信號(hào)分子與含脯氨酸蛋白分子PH結(jié)構(gòu)域 磷脂分子PIP2、PIP3PTB結(jié)構(gòu)域 同SH2 ：信號(hào)分子與含磷酸酪氨酸蛋白分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及作用機(jī)制25-3125、離子通道型受體及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 這種受體本身就是離子通道，這種通道的開放與接受信息分子（神經(jīng)介質(zhì)）的控制緊密連接，少量的神經(jīng)介質(zhì)能短暫快速的打開或關(guān)閉離子通道而改變某些離子的通透性。如骨骼肌細(xì)胞的乙酰膽堿受體 26、G蛋白的循環(huán)和活化：(1)G蛋白的組成 ：三聚體G蛋白由、三種亞基組成。亞基具有GTP水解酶活性，又有調(diào)節(jié)效應(yīng)蛋白作用，和亞基具有調(diào)節(jié)亞基作用，也有調(diào)節(jié)效應(yīng)蛋白的作用，而且亞基上有脂鏈，故具有固定作

50、用。這三個(gè)亞基可以聚合在一起形成三聚體，也可以解離為和形式。當(dāng)G蛋白與GDP相結(jié)合時(shí)無活性，而與GTP結(jié)合時(shí)則活化成激活狀態(tài)。(2)G蛋白循環(huán)：受體與信息分子結(jié)合后，受體構(gòu)象改變，并使與受體相偶聯(lián)的G蛋白構(gòu)象改變，使GTP置換了GDP。G蛋白激活后，離開受體并解離成和亞基GTP，亞基水解GTP，并調(diào)節(jié)腺苷酸環(huán)化酶的活性，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)cAMP等第二信使的濃度，從而把信息傳導(dǎo)給下游分子，同時(shí)，與亞基結(jié)合的GTP水解成GDP，然后亞基GDP復(fù)合物重新與亞基結(jié)合形成無活性的三聚體，完成一次信息傳導(dǎo)。G蛋白這種有活性和無活性狀態(tài)的轉(zhuǎn)換稱為G蛋白循環(huán)27、(G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路I)(1)cAMPPKA

51、 途徑-活化：信號(hào)分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化受體活化G蛋白（結(jié)合GTP，與解離）活化后的G蛋白激活腺苷酸環(huán)化酶（AC）AC催化ATP生成cAMPcAMP活化PKA（依賴cAMP的蛋白激酶）PKA使目標(biāo)蛋白磷酸化，調(diào)節(jié)代謝酶的活性或調(diào)節(jié)基因的表達(dá)(2)cAMPPKA途徑-失活：信息分子與受體解離，受體失活G蛋白失活（GTP被水解成GDP，亞基重新聚合）AC失活cAMP被磷酸二酯酶水解PKA失活28、(G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路II)IP3-Ca2+信號(hào)途徑：(1)信號(hào)分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化(2)受體活化G蛋白(3)活化后的G蛋白激活PLC(4)PLC水解PIP2生成IP3 和DG

52、(5)IP3 使鈣通道打開，細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高(6)Ca2+與CaM結(jié)合，激活Ca2+-CaM依賴的蛋白激酶(7)Ca2+-CaM依賴的蛋白激酶使目標(biāo)蛋白磷酸化。29、(G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路II)PKC途徑(1)信號(hào)分子與受體結(jié)合，引起受體構(gòu)象變化(2)受體活化G蛋白（結(jié)合GTP，與解離）(3)活化后的G蛋白激活PLC(4)PLC水解PIP2生成IP3 和DG(5)DG與Ca2+共同活化PKC(6)PKC使目標(biāo)蛋白磷酸化30、(酶偶聯(lián)受體)胰島素受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路（1）胰島素受體介導(dǎo)的IRS-1-Ras-MAPK信號(hào)通路：這一通路主要涉及胰島素受體的基因表達(dá)調(diào)控的信號(hào)傳導(dǎo)。步驟：受體

53、二聚體的形成及其磷酸化。募集接頭蛋白Grb2。Grb2的SH3募集SOS.Ras的活化。MAPK的級(jí)聯(lián)激活。轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。（2）胰島素受體介導(dǎo)的IRS-PI3K-PKB信號(hào)通路：此通路與胰島素對(duì)代謝的調(diào)節(jié)密切相關(guān)，與細(xì)胞存活密切相關(guān)。步驟：PI3K的p85亞單位通過SH2結(jié)構(gòu)域與發(fā)生了洛氨酸磷酸化的IRS-1結(jié)合，p110催化亞單位激活?；罨腜I3K催化PIP2磷酸化（D-3）生成PIP3。PIP3與PKB的PH（pleckstrin-homology domain）功能區(qū)結(jié)合，PKB構(gòu)象變化并轉(zhuǎn)位到胞膜，同時(shí)PIP3依賴的蛋白激酶（PDK）也與PIP3結(jié)合，使二者相互靠

54、近。PDK催化PKB發(fā)生磷酸化，激活PKB。PKB可磷酸化多種蛋白，介導(dǎo)代謝調(diào)節(jié)、細(xì)胞存活等效應(yīng)。31、表皮生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑表皮生長(zhǎng)因子受體是一個(gè)典型的蛋白酪氨酸激酶受體，這個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的主要步驟是：(1)受體二聚化的形成及其磷酸化：表皮生長(zhǎng)因子與受體的結(jié)合使受體發(fā)生二聚化，從而改變受體構(gòu)象，使蛋白酪氨酸激酶活性增強(qiáng)，受體自身的幾個(gè)蛋白酪氨酸殘基在激酶的作用下發(fā)生磷酸化。(2)募集接頭蛋白Grb2：表皮生長(zhǎng)因子受體自身被磷酸化后，不僅其激酶活性增強(qiáng)，而且其構(gòu)象發(fā)生變化，從而適合與含SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白分子相結(jié)合。Grb2是作為接頭蛋白結(jié)合到受體上。(3)調(diào)控分子SOS的活化：SOS含

55、有可與SH3結(jié)構(gòu)域相結(jié)合的富含脯氨酸基序，當(dāng)Grb2結(jié)合到磷酸化的表皮生長(zhǎng)因子受體后，它的兩個(gè)SH3結(jié)構(gòu)域即可結(jié)合SOS，使之活化。(4)低分子量G蛋白R(shí)as的活化：SOS可促進(jìn)Ras釋放GDP，結(jié)合GTP的反應(yīng)，使Ras激活?；罨腞as作用其下游分子Raf，使之活化。Raf是MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)的第一個(gè)分子，由此啟動(dòng)了MAPK的三級(jí)激活過程。(5)MAPK的級(jí)聯(lián)激活：Raf是一種MAPKKK，它作用于MEK，使之磷酸化而激活，活化的MEK在作用于MAPK家族的ERK1，使之磷酸化激活由此完成了三級(jí)激活。轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化及轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用：活化的ERK可以轉(zhuǎn)至細(xì)胞核內(nèi)，使某些轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子發(fā)生磷酸化，

56、從而影響基因的轉(zhuǎn)錄。32、與轉(zhuǎn)錄因子偶聯(lián)的受體： 多位于胞內(nèi)，與一些疏水性信息分子相識(shí)別，如類固醇激素、甲狀腺素、前列腺素、維生素A等。這種受體主要包括三個(gè)區(qū)域：羧基端為激素等信息分子的結(jié)合區(qū)域，氨基端為轉(zhuǎn)錄活化區(qū)，調(diào)控某些基因的啟動(dòng)子或上游的調(diào)控基因，中央部分為DNA的結(jié)合區(qū)，富含堿性氨基酸，平時(shí)此區(qū)與抑制蛋白結(jié)合形成復(fù)合物。受體與信息分子結(jié)合時(shí)，發(fā)生構(gòu)象變化，抑制蛋白脫落，暴露出DNA的結(jié)合區(qū)，轉(zhuǎn)入胞核內(nèi)，與特定DNA部位結(jié)合，調(diào)控轉(zhuǎn)錄活性。33、細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究方法(1)測(cè)定相應(yīng)的信息分子，尤其是第二信使如： cAMP、cGMP、IP3、DG、CaM、Ca2+等(2)測(cè)定蛋白激酶的含量：PKA、PKB、PKC、TPK等，采取RT-PCR、West-blotting、ELISA等(3)測(cè)定蛋白激酶活性：ELISA34、細(xì)胞周期中的四個(gè)checkpoint:（1）G1晚期 限制點(diǎn) 監(jiān)控G1期細(xì)胞大小及環(huán)境中是否有生長(zhǎng)因子（2）G1®S 轉(zhuǎn)折 監(jiān)控DNA是否損傷（3）G2 ®M 轉(zhuǎn)折 監(jiān)控DNA是否損傷、DNA是否已正確完整地復(fù)制。（4）有絲分裂中期關(guān)卡 監(jiān)控姐妹染色單體是否已穩(wěn)定