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1、第第6 6章章 發(fā)發(fā) 酵酵 豆豆 奶奶大豆大豆 大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子發(fā)酵豆奶發(fā)酵豆奶( (酸豆奶酸豆奶) ) 工藝流程 1 工藝流程 2 工藝流程 3:雙歧桿菌保健酸豆奶的生產(chǎn)工藝n大豆是我國(guó)的傳統(tǒng)食品, 蛋白質(zhì)含量達(dá)45% 左右,為一般食物含量的35 倍。n現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)認(rèn)為, 蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值主要決定于它的氨基酸組成。如果各種氨基酸比例接近人體的氨基酸模式, 也即符合FAO/WHO 建議的氨基酸模式, 則該種食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。大豆大豆n表數(shù)據(jù)顯示, 大豆中蛋白質(zhì)的必需氨基酸模式接近FAO/WHO 建議模式與動(dòng)物蛋白質(zhì)的氨基酸模式相近, 是一種完全蛋白質(zhì), 且大豆蛋白質(zhì)與奶類(lèi)或谷類(lèi)食物搭配, 具
2、有蛋白質(zhì)互補(bǔ)作用。 幾種食物粗蛋白的必需氨基酸含量幾種食物粗蛋白的必需氨基酸含量(mg/g) 及其相互比值及其相互比值必需氨基酸氨基酸記分模式大豆蛋白質(zhì)牛奶蛋白質(zhì)花生蛋白質(zhì)面粉蛋白質(zhì)雞蛋蛋白質(zhì)mg/g 比值mg/g 比值mg/g 比值mg/g 比值mg/g 比值mg/g 比值色氨酸10 1 12.2 114.5 110 111.4 116.1 1苯丙氨酸60 6.0 47.5 3.9 51.7 3.6 51 5.1 45.5 4.056.3 3.5賴(lài)氨酸55 5.5 60.5 5.0 81.7 5.6 30 3.0 25.5 2.2 56.2 3.5蘇氨酸40 4.0 43.4 3.6 49.
3、0 3.4 16 1.6 30.7 2.7 52.3 3.2蛋氨酸35 3.5 10.8 0.9 30.3 2.110 1.0 14.1 1.2 34.1 2.1亮氨酸70 7.0 95.8 7.9 105.2 7.367 6.7 71.3 6.392.5 5.7異亮氨酸40 4.0 42.4 3.5 50 3.4 46 4.6 35.9 3.1 50.3 3.1纈氨酸50 5.0 47.5 3.9 74.1 5.144 4.4 42.4 3.7 68.2 4.2總量(mg/g) 360 360.1 456.5 274 276.8 426大豆n大豆中脂肪含量占20% 左右, 其中人體所必需的亞
4、油酸含量占50% 左右; 大豆中不含膽固醇, 故有降血脂的作用。此外大豆中含有的維生素, 無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 又使大豆具有治療糖尿病、缺鐵性貧血、防止動(dòng)脈硬化和防治腫瘤等醫(yī)療功能。n 世界各國(guó)的科學(xué)家正致力于發(fā)展纖維化大豆蛋白, 目的是促進(jìn)人體腸道蠕動(dòng), 減少肛腸類(lèi)疾病。n 大豆尤其在發(fā)展中國(guó)家被譽(yù)為質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的“營(yíng)養(yǎng)肉”食品。n大豆中除含有豐富的蛋白質(zhì)、油脂和碳水化合物三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還含有多種功能性成分如磷脂、生育酚、低肽、甾醇、皂甙、類(lèi)黃酮、低聚糖和膳食纖維等。n但是大豆中也含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,如果加工或利用不當(dāng),不僅會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低而且還會(huì)危害人體或動(dòng)物的生長(zhǎng)和健康。1 蛋白酶抑制劑蛋
5、白酶抑制劑n大豆中普遍存在的為胰蛋白酶抑制劑胰蛋白酶抑制劑和糜蛋白酶抑制糜蛋白酶抑制劑劑 ,前者起主要作用。大豆中的胰蛋白酶抑制劑約有710 種,能抑制人體血清及血漿中胰蛋白酶的活性,但胰臟中的胰蛋白酶則不受抑制。n胰蛋白酶抑制劑對(duì)動(dòng)物的危害危害主要是抑制其生長(zhǎng)和引起胰腺肥大。n原因原因是腸道中蛋白水解酶的作用受到抑制,從而阻礙動(dòng)物對(duì)飼料蛋白質(zhì)的消化吸收,同時(shí)還作用胰腺本身發(fā)生補(bǔ)償性反應(yīng),造成機(jī)能亢進(jìn),胰腺分泌過(guò)多,引起必需氨基酸(特別是含硫氨基酸) 的內(nèi)源性損失,這表明生長(zhǎng)停滯的原因既有蛋白質(zhì)外源性損失的影響,也有內(nèi)源性損失的影響。大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子2 植物紅細(xì)胞凝集素
6、植物紅細(xì)胞凝集素n大豆中存在的凝集素稱(chēng)為大豆血球凝集素大豆血球凝集素SBA 。是一種蛋白質(zhì),大多為糖蛋白,對(duì)糖分子具有高度的親和性。n生大豆中SBA 的活性高達(dá)1600 3200 單位/ mg。n大豆粉中含有大約3 %的血球凝聚素,這種大豆抽出物能凝聚許多動(dòng)物的血細(xì)胞,雖在低溫下也能凝聚人的血細(xì)胞。nSBA 在動(dòng)物腸道中不被蛋白酶水解,它可以和小腸壁上皮細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合,從而損壞小腸壁刷狀緣粘膜結(jié)構(gòu),干擾消化酶的分泌,抑制腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收,使蛋白質(zhì)利用率下降,動(dòng)物生長(zhǎng)受阻甚至停滯。 大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子3 植酸植酸n植酸即環(huán)己六醇磷酸酯,是一種弱酸性的淡黃色或淡
7、褐色的粘稠液體,大豆中80 %的磷都是以植酸狀態(tài)存在。n植酸本身的毒性較小,它除能降低微量元素(如Cu、Zn、Mn、Fe 、Mg) 的生物利用率外,還能影響鈣、磷的利用率。n大豆蛋白質(zhì)與植酸形成植酸蛋白質(zhì)復(fù)合物,對(duì)金屬離子有特別的親合力,同時(shí)影響蛋白質(zhì)的生理功能;或與酶相結(jié)合,抑制其活性,這些酶包括-淀粉酶、胰酶和胃蛋白酶。大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子4 致過(guò)敏因子致過(guò)敏因子n大豆中存在的過(guò)敏原為4 種球蛋白,即大豆球蛋白 和3 種伴大豆球蛋白(分別為、) 。n國(guó)內(nèi)外大量研究結(jié)果表明,大豆及豆餅中的蛋白質(zhì)抗原物質(zhì)可引起早期斷奶仔豬的消化道過(guò)敏反應(yīng),表現(xiàn)為腸絨毛萎縮,腺窩細(xì)胞增生,粘
8、膜雙糖分解酶的數(shù)量及活性下降,木糖吸收率降低,從而導(dǎo)致仔豬腹瀉和生長(zhǎng)受阻。大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子5 抗維生素因子抗維生素因子n大豆中存在的抗維生素因子有維生素A、D、E和B12 。n目前還不清楚它們的化學(xué)結(jié)構(gòu),但引起相應(yīng)的維生素缺乏癥已被證實(shí)。n具有抗維生素作用的化合物可以分為3 種: 與維生素具有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu),在動(dòng)物代謝過(guò)程中能與該種維生素競(jìng)爭(zhēng)并取代之; 能與維生素結(jié)合或改變其結(jié)構(gòu)而破壞其生化活性; 能破壞維生素的酶類(lèi)。 大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子6 致甲狀腺腫因子致甲狀腺腫因子n據(jù)報(bào)道,用未加熱的大豆飼喂大鼠和小雞可引起甲狀腺腫大。nKonijin 等提出
9、甲狀腺腫因子的成分可能是由23 個(gè)氨基酸組成的低聚肽,或是由12 個(gè)氨基酸與1 個(gè)糖分子組成的糖肽。該成分的抗甲狀腺作用機(jī)制尚不清楚。 大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子7 賴(lài)丙氨酸賴(lài)丙氨酸LALn大豆蛋白質(zhì)在堿性條件下處理時(shí)可形成賴(lài)丙氨酸。它是賴(lài)氨酸與丙氨酸發(fā)生加成反應(yīng),其側(cè)鏈以C2N 鍵聯(lián)接而成。LAL 不耐熱,其水溶液容易分解。LAL 對(duì)動(dòng)物有較強(qiáng)的腎臟毒性。 大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子8 脲酶脲酶n一般脲酶本身并沒(méi)有毒性作用,但在一定溫度和pH 值條件下,生大豆中的脲酶遇水迅速將含氮化合物分解生成氨從而引起氨中毒。n由于大豆及其制品中脲酶含量與胰蛋白酶抑脲酶含量與胰
10、蛋白酶抑制劑含量呈正相關(guān)關(guān)系制劑含量呈正相關(guān)關(guān)系,因此常以脲酶活性用來(lái)判斷大豆的受熱程度和估計(jì)胰蛋白酶抑制劑的活性。大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子大豆中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子發(fā)酵豆奶發(fā)酵豆奶( (酸豆奶酸豆奶) )n發(fā)酵豆奶(酸豆奶) 是大豆制漿后,加入少量奶粉或某些可供乳酸菌等利用的糖類(lèi)作為發(fā)酵促進(jìn)劑,經(jīng)乳酸菌等發(fā)酵而成的一種飲料。n它既保留了豆奶的營(yíng)養(yǎng)成分,又利用了乳酸菌等菌作用,使豆奶有醇香,清香的酸香味,也增加了其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。n由于微生物和酶的作用,大豆蛋白被降解成易吸收的小分子肽和氨基酸。 工藝流程工藝流程 1 1工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n(1) 發(fā)芽處理: 大豆用溫水浸泡膨脹,放入發(fā)芽裝置里發(fā)芽, 溫
11、度25左右, 發(fā)芽二天, 取出放入pH7.5- 7.8 的弱堿液內(nèi)浸泡2h。n脂肪氧化酶是大豆產(chǎn)生腥味的主要原因, 大豆經(jīng)發(fā)芽處理后其自身含有的脂肪氧化酶受到一定程度地鈍化, 因而部分去除了大豆乳的豆腥味。n發(fā)芽后發(fā)芽后大豆蛋白質(zhì)中使人產(chǎn)生脹腹感的棉子糖等物質(zhì)消失, 植酸降解, 更多的磷、鐵等無(wú)機(jī)鹽釋放出來(lái), 維生素含量增加, 其中核黃素增加23 倍、硫胺素增加34 倍。工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n(2) 磨漿: 用磨漿機(jī)將發(fā)芽的大豆磨成漿體, 在進(jìn)料的同時(shí)添加5倍水, 二次磨漿分離, 漿液經(jīng)過(guò)120 目篩過(guò)濾, 去除豆渣。n(3) 煮沸: 進(jìn)一步去除豆乳中揮發(fā)性豆腥味, 使抗胰蛋白酶和大豆凝血
12、因子變性失活, 同時(shí)達(dá)到殺死雜菌的目的, 冷卻后即成純豆乳。工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n(4) 混合發(fā)酵菌劑制備方法n培養(yǎng)基制備: 檢驗(yàn)合格的脫脂乳, 分裝在試管里, 置于高壓滅菌鍋中, 120滅菌1520min。n菌種選擇與活化: 選擇產(chǎn)酸能力強(qiáng), 發(fā)酵風(fēng)味好的嗜熱鏈球菌(S. t) 和保加利亞乳桿菌(L. b), 混合比例11 為佳。將乳酸菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行34 次接種純培養(yǎng)。n發(fā)酵菌劑制備: 取脫脂乳100m l 于三角瓶中,120滅菌1520min, 冷卻至40左右時(shí), 接種上述已活化的S. 和L. 菌種進(jìn)行純培養(yǎng), 43溫箱培養(yǎng)48h, 取出置45溫度下保存待用。工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)
13、n(5) 接種與發(fā)酵: 為防止發(fā)酵豆奶產(chǎn)生“餿味”(含雙乙酰) , 經(jīng)研究, 接種量在45% 為宜。 發(fā)酵溫度43, 發(fā)酵時(shí)間7h。為了改善發(fā)酵豆乳的口感, 接種時(shí)加入5% 的蔗糖。工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n(6) 調(diào)配:調(diào)配口感 因發(fā)酵豆奶飲料在貯存期間, 蛋白質(zhì)容易發(fā)生絮凝作用而產(chǎn)生沉淀; 且發(fā)酵豆奶所含脂肪易發(fā)生上浮現(xiàn)象, 影響產(chǎn)品質(zhì)量和外觀, 故需加入適量的穩(wěn)定劑和乳化劑。n隨著純豆乳所占比例上升(純豆乳鮮奶) , 發(fā)酵豆乳中蛋白質(zhì)沉淀程度加大, 口感漸次, 但香味逐漸突出。純豆乳占調(diào)配奶的比例控制在60% 左右為佳。工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n穩(wěn)定劑的選擇: 海藻酸丙二醇酯(PGA )
14、、羧甲基纖維素鈉(CMC2N a) , 添加量分別為0.2% 和0.1% , 混合使用, 產(chǎn)品三個(gè)月不發(fā)生沉淀現(xiàn)象。n乳化劑的選擇: 大豆中脂肪含量為20% , 由于單靠油和水是不易得到穩(wěn)定的大豆乳, 必須加入乳化劑, 使互不相溶的大豆脂肪均勻分散于水中, 成為穩(wěn)定的乳狀液, 從而阻止脂肪上浮。 經(jīng)研究, 使用如下乳化劑效果明顯:單甘酯0.050.1% + 脂肪酸蔗糖酯0.1% 工藝操作要點(diǎn)工藝操作要點(diǎn)n(7) 均質(zhì): 調(diào)配后的發(fā)酵豆奶進(jìn)行二次高壓均質(zhì), 使飲料保持較好的均勻穩(wěn)定性, 均質(zhì)后經(jīng)過(guò)脫氣機(jī)脫氣。 第一次均質(zhì)時(shí)要求溫度較高, 所得制品口感非常好。但要注意溫度不可過(guò)高, 否則易殺死全部
15、乳酸菌。經(jīng)研究62較適宜, 只能使部分S.菌種失活,L. 菌種則能抵抗75、2030min 的加熱 采用2530M Pa 的高壓處理, 所得制品細(xì)膩爽口 n(8) 熱處理: 發(fā)酵豆奶飲料經(jīng)過(guò)熱處理后, 部分嗜熱鏈球菌失活 在酸性條件下(PH45) 雜菌對(duì)熱的抵抗性明顯減弱 熱處理溫度為62, 時(shí)間為20min純豆乳與發(fā)酵豆奶營(yíng)養(yǎng)成分分析與比較純豆乳與發(fā)酵豆奶營(yíng)養(yǎng)成分分析與比較 n發(fā)酵后的豆奶VB1和VB2含量提高了2- 3 倍, Ca、P、Fe 含量也有所增加, 且含有一定量的蛋白質(zhì)、脂肪和糖類(lèi), 對(duì)促進(jìn)兒童生長(zhǎng)發(fā)育、防治小兒佝僂病和缺鐵性貧血具有良好的功效。n乳酸菌可以在人體腸道內(nèi)定植, 產(chǎn)
16、生的乳酸對(duì)腸道內(nèi)腐生性細(xì)菌和病原菌有抑制作用, 對(duì)治療腸道疾病具有良好的醫(yī)療效果, 使發(fā)酵豆奶飲料具有營(yíng)養(yǎng)保健特征。 純豆乳與發(fā)酵豆奶飲料一般營(yíng)養(yǎng)成分比較(100g)熱能(Kcal)水分(g)脂肪(g)蛋白質(zhì)(g)糖類(lèi)(g)鈣(mg)磷(mg)鐵(mg)B1(mg)B2(mg)純豆乳4290.83.62.02.915491.20.030.01發(fā)酵豆奶6285.61.91.210.133701.650.120.04發(fā)酵豆奶飲料氨基酸營(yíng)養(yǎng)成分分析發(fā)酵豆奶飲料氨基酸營(yíng)養(yǎng)成分分析 n發(fā)酵豆奶飲料氨基酸種類(lèi)齊全, 人體必需氨基酸賴(lài)氨酸和亮氨酸含量較高。賴(lài)氨酸是許多其它物質(zhì)提供蛋白質(zhì)時(shí)的限制性氨基酸, 能
17、促進(jìn)鐵在腸道內(nèi)吸收, 增加了高鐵離子的吸收作用, 對(duì)防治缺鐵性貧血具有特殊療效, 亮氨酸能刺激人體胰島素分泌, 抑制糖轉(zhuǎn)變成脂肪, 因而具有減肥作用。 發(fā)酵豆奶質(zhì)量指標(biāo)發(fā)酵豆奶質(zhì)量指標(biāo)n1感官指標(biāo)感官指標(biāo) 呈均勻的乳狀液, 具有清香純凈的乳酸味, 不得有豆腥味和雜質(zhì)。n2理化指標(biāo)理化指標(biāo) 可溶性固形物(% ) 10 (以折光計(jì)) ; 總酸(% ) 0.75- 0. 9 (以乳酸計(jì)) ; 總糖(% ) 5; 蛋白質(zhì)(% ) 1. 5;脂肪(% ) 1; 砷(mg/kg) 0. 5; 鉛(mg/kg) 1; 銅(mg/kg) 10。n3微生物指標(biāo)微生物指標(biāo) 細(xì)菌總數(shù): (個(gè)/m l) 100; 大
18、腸菌群: (個(gè)/100m l)3; 致病菌不得檢出。 工藝流程工藝流程 2 2操作要點(diǎn)操作要點(diǎn) n挑選清洗:選擇無(wú)霉變,無(wú)蟲(chóng)害,雜質(zhì)少,顆粒均勻的優(yōu)質(zhì)無(wú)腥大豆,然后清洗。n浸泡:清洗后的大豆浸泡于3 倍的水中1215h ,使大豆軟化,表皮膨脹至平滑,手搓能去皮為好。n浸泡的目的是為了軟化細(xì)胞結(jié)構(gòu),降低磨漿時(shí)能耗與磨損,提高膠體分散程度 ,有利于蛋白質(zhì)的萃取,增大蛋白回收率。n磨漿:將加熱70 的所需水,全部均勻加入??芍貜?fù)磨漿一次,以提高細(xì)度,利于蛋白質(zhì)溶出。操作要點(diǎn) n均質(zhì):將豆?jié){加熱至60 進(jìn)行均質(zhì)。n殺菌:豆奶由于富含蛋白質(zhì),脂肪和糖,是細(xì)菌的良好的培養(yǎng)基. 將脫渣后的豆奶煮沸5min。
19、再冷卻至43 。n發(fā)酵:將活化好的菌種,加入豆奶中。放入恒定培養(yǎng)箱培養(yǎng)。n冷藏:發(fā)酵好的豆奶應(yīng)及時(shí)移入14 冰箱中保存。在冷藏期間,酸度會(huì)有所上升,同時(shí)風(fēng)味成分含量增加。最佳工藝條件最佳工藝條件n無(wú)腥味大豆與水的比為110 ,加入乳酸菌16 104 個(gè)/ mL ,添加葡萄糖5 % ,蔗糖4 % ,牛奶30 %和復(fù)合穩(wěn)定劑0. 2 % ,在40 發(fā)酵5h。n在添加蔗糖發(fā)酵的同時(shí),添加少量的葡萄糖能促進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng)并最終導(dǎo)致乳酸的明顯提高,有利于制品風(fēng)味的改善。菌種比例n乳酸飲料的基本風(fēng)味物質(zhì)為乙醛、丁二酮、丙酮和丁酮,乙醛主要由保加利亞乳桿菌發(fā)酵生成,若保加利亞乳桿菌中混入嗜熱鏈球菌,則會(huì)使乙醛
20、的產(chǎn)率大幅提高。n保加利亞乳桿菌對(duì)蛋白質(zhì)的分解能力強(qiáng),而利用蔗糖的能力很小;嗜熱鏈球菌對(duì)蛋白質(zhì)的分解較弱,對(duì)蔗糖的發(fā)酵能力較強(qiáng),而保加利亞乳桿菌分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生的氨基酸可促進(jìn)后者的生長(zhǎng)。n選用嗜熱鏈球菌(S. t) 和保加利亞乳桿菌(L. b) 混合作為發(fā)酵劑,對(duì)酸豆奶的產(chǎn)酸及風(fēng)味都有利, 兩者配比為S. tL. b = 11 為最佳。 工藝流程工藝流程 3: 3: 雙歧桿菌保健酸豆奶的生產(chǎn)工藝雙歧桿菌保健酸豆奶的生產(chǎn)工藝n研究認(rèn)為:雙歧桿菌對(duì)人體具有極強(qiáng)的保健功能,對(duì)預(yù)防細(xì)胞癌變,增強(qiáng)免疫力,保證健康具有積極的作用。1 原料原料n新鮮全脂生牛乳,符合GB 6914 - 86 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),在原料奶
21、中不得有抗生素存在。n純豆奶,符合QB/ T2132- 95 國(guó)家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。n綿白糖,符合GB1445 - 78 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求。2 菌類(lèi)菌類(lèi)n乳酸菌,n嗜熱鏈球菌( Strepmtococcus thermophilus) ,n保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus) ,n嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus) , n長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacterium Length) 。3 培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備n1) 脫脂乳培養(yǎng)基:鮮乳煮沸后裝入三角燒杯中,100 ,30min ,然后自然冷卻。待出現(xiàn)脂肪層后,取下層乳液分裝于試管中,加量于試管的
22、1/ 3 處,包裝好,利用間歇滅菌法(106 ,30min 滅菌,每d一次,連續(xù)3d)滅菌,冷卻,低溫保存,備用。n2) 雙歧桿菌活化培養(yǎng)基:脫脂乳7 份+ 豆奶3份混均,加2 %的酵母浸出液,2 %的酪蛋白胨,0.1 %的抗壞血酸,葡萄糖2 % ,完全混溶后分裝于試管,加量至試管的1/ 3 處,包裝好,利用間歇滅菌法(同上) 滅菌,冷卻,低溫保存,備用。4 工藝過(guò)程工藝過(guò)程菌種活化菌種活化生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備發(fā)酵發(fā)酵混合、調(diào)配混合、調(diào)配冷藏冷藏成品成品分裝分裝豆奶混合原料豆奶混合原料1) 菌種活化菌種活化n嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌和嗜酸乳桿菌的活嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌和嗜酸
23、乳桿菌的活化化。在無(wú)菌條件下,打開(kāi)凍干菌種,分別用吊菌環(huán)取一環(huán)菌接種入10ml 脫脂乳培養(yǎng)基中,37 1 恒溫培養(yǎng)12h ,分別向下傳至第4 代。n雙歧桿菌的活化雙歧桿菌的活化。雙歧桿菌為厭氧菌,采用充入二氧化碳?xì)怏w來(lái)造成無(wú)氧條件,進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。n在無(wú)氧條件下,打開(kāi)干燥菌種菌管,用吊菌環(huán)取凍干菌種于雙歧桿菌活化培養(yǎng)基內(nèi),置于干燥皿內(nèi)密封,38 1.恒溫厭氧培養(yǎng)24h ,取深層活化菌種傳入下一代培養(yǎng)基中深層培養(yǎng),反復(fù)活化傳至第5 代,每代均為38 及24h。 2) 生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備n混合發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備混合發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備。取活化好的嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌和嗜酸乳桿菌三種菌,分別以211 的比例接入滅菌處理后冷卻至44 的脫脂乳中,接種量為1 % ,于40 恒溫培養(yǎng)215h ,迅速置于5 冰箱中保存待用(12d 必須用掉) ,即為母發(fā)酵劑。n在使用前2.5h 取出母發(fā)酵劑,以2 %的接種量接入到滅菌器冷卻至42 的脫脂乳培養(yǎng)劑中, (脫脂乳培養(yǎng)基用量為生產(chǎn)量的2 %3 %) 恒溫40 培養(yǎng)2.5h。n雙歧桿菌生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備雙歧桿菌生產(chǎn)發(fā)酵劑的制備。取活化好的雙歧桿菌菌種,以10 %的接種量接入到滅菌器冷卻至40 的
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