F5_生物標(biāo)記檢驗(yàn)試劑的制造及應(yīng)用

1、F5_生物標(biāo)記檢驗(yàn)試劑的製造及應(yīng)用1、專業(yè)領(lǐng)域課程課 程 名 稱生物標(biāo)記檢驗(yàn)試劑的製造及應(yīng)用講授課程實(shí)驗(yàn)課程開 課 教 師授課對象學(xué)分?jǐn)?shù)授課時(shí)數(shù)（h）開授系所預(yù)估修課人數(shù)葉才明、黃溫雅、張權(quán)發(fā)、張憲彰博、碩士、大學(xué)生、醫(yī)檢師136成大醫(yī)技系15必修/選修無必修課程選修課程授課進(jìn)度表日期講題時(shí)數(shù)授課老師(請?jiān)]明任職單位及職稱)(以上表格不足請自行增列)7/127/137/147/157/1610:00Lecture 1-1(A-3) (B-1)(B-1)(C-2)(B-1)(C-5)(C-7)(B-4)(B-5)11:00Lecture 1-212:00Lunch timeLunch timeL

2、unch timeLunch timeLunch time13:00Lecture 2-1Lecture 3-1(C-3)(C-8)14:00Lecture 2-2Lecture 3-2(A-5)Lecture 4-115:00(A-1)(A-4)Lecture 4-2(D)16:00(A-2)(B-2)(C-4)(B-2)(B-2)(B-3)17:0018:00(C-1)(C-6)A. HybridomaA-1 immunized and bleedingA-2 sacrificed and fusionA-3 fusion observationA-4 brief introduction

3、 of following stepA-5 antibody purificationB. Phage display- peptideB-1 Panning and amplify phageB-2 Titration and phage precipitationB-3 ELISA coatingB-4 ELISA blockingB-5 ELISA detection and color developmentC. Phage display- scFvC-1 IntroductionC-2 total RNA extraction and reverse transcriptionC-

4、3 PCR of VH and VL and Overlap PCRC-4 DNA electrophoresis and gel extractionC-5 Restriction enzyme digest and ligationC-6 TransformationC-7 Plate countingC-8 Sequence analysis (BioEdit free software and VBASE2)D. Conclusion2、課程內(nèi)容與特色在過去幾年臺灣曾經(jīng)面臨到各種不同的病毒感染及威脅，諸如: 登革病毒、腸病毒71型及SARS-CoV，很多人因此喪生，對於國家發(fā)展，經(jīng)濟(jì)成

5、長及社會安定都有很大的影響。為了有效解決這些已知及將來可能發(fā)生未知病毒的感染，我們必須發(fā)展出更有效的治療或預(yù)防的方法。噬菌體表現(xiàn)系統(tǒng)(Phage display library)是一種利用噬菌體表面蛋白表現(xiàn)出各種不同勝肽或蛋白的技術(shù)。噬菌體表現(xiàn)系統(tǒng)可以用以篩選對任何分子具有親合力及專一性的噬菌體。噬菌體表現(xiàn)系統(tǒng)的應(yīng)用將有助於研發(fā)出新的辨識分析各種傳染性生物的物質(zhì)，其應(yīng)用甚至可以遍及各種腫瘤或任何抗原甚至抗體。由於其便利性及低廉的價(jià)格，讓此系統(tǒng)不管是在基礎(chǔ)學(xué)術(shù)性的研究如蛋白質(zhì)功能及結(jié)構(gòu)的探討亦或是臨床診斷甚至於藥物開發(fā)上都提供了極有用的方法去尋找可能的結(jié)合物(ligands)。因此本課程目標(biāo)為1.使學(xué)員瞭解噬菌體表現(xiàn)系統(tǒng)的原理及操作2.使學(xué)員瞭解噬菌體表現(xiàn)系統(tǒng)在臨床及基礎(chǔ)免疫學(xué)的應(yīng)用3、課程授課大綱及內(nèi)容本課程之大綱如下：在第一年我們將以phage-displayed random peptide library 應(yīng)用於monoclonal antibody epitope selection 為主。我們將利用登革病毒的單株抗體來篩選噬菌體所表現(xiàn)之勝肽並用酵素免疫分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay，簡稱ELISA）、免